香草扁桃酸(VMA)介绍
临床检验技术师《专业实践能力》试题及答案解析四
临床检验技术师《专业实践能力》试题及答案解析四[单选题]1.下列哪种情况蛋白不降低？()（江南博哥）A.白蛋白分解代谢增强B.白蛋白合成减低C.严重脱水D.营养不良E.消耗性疾病参考答案：C参考解析：蛋白降低原因主要有血液稀释，蛋白摄入不足、消耗增加，合成减低、分解增强，蛋白丢失过多等。
C项，严重脱水时，血液浓缩，导致总蛋白浓度相对增高。
[单选题]2.甘油三脂与冠心病关系的叙述，错误的是()。
A.富含甘油三酯的脂蛋白在动脉粥样硬化中起重要作用B.高甘油三酯血症常伴HDL-C水平升高C.血浆甘油三酯升高是冠心病发生的一个独立危险因素D.甘油三酯以VLDL循环于血中，VLDL如转变为小而密LDL，则致动脉粥样硬化能力增加E.甘油三酯增高反映了CM和/或VLDL水平增高参考答案：B参考解析：高甘油三酯血症时，富含甘油三酯的脂蛋白水平升高，如CM、VLDL，HDL-C含量不会随甘油三酯的升高而升高。
[单选题]3.患者APTT延长，能被正常新鲜血浆纠正，常提示()。
A.口服抗凝药所致B.内源性途径有缺陷C.外源性途径有缺陷D.DIC早期E.循环抗凝物含量增高参考答案：B参考解析：APTT是反映内源性凝血途径是否正常的试验。
B项，内源性凝血途径本身异常导致的APTT延长可被富含凝血因子的正常新鲜血浆纠正。
AE项，APTT延长但不能被正常新鲜血浆纠正。
C项APTT正常。
D项，DIC早期血液处于高凝状态，APTT缩短。
[单选题]4.不属于尿蛋白定量检查的方法是()。
A.加热醋酸法B.比色法C.电泳法D.染料结合法E.比浊法参考答案：A参考解析：尿蛋白定量检测的方法有沉淀法、比色法、尿蛋白电泳法、染料结合法、比浊法等。
A项，加热醋酸法属于尿蛋白定性检测方法。
[单选题]5.下列哪种疾病状态下血清尿酸升高不常见？()A.代谢综合征B.缺铁性贫血C.痛风D.白血病E.多发性骨髓瘤参考答案：B参考解析：尿酸是嘌呤代谢的产物。
毛细管电泳电化学发光检测香草扁桃酸和高香草酸
毛细管电泳电化学发光检测香草扁桃酸和高香草酸杨洋;孙雪梅;李传龙【摘要】利用毛细管电泳电化学发光(CE-ECL)法检测了尿样中的香草扁桃酸(VMA)和高香草酸(HVA),得到了最佳的分离检测条件:50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH 8.2);分离电压16 kV;检测电势1.2 V(相对于饱和甘汞电极).在最佳条件下,VMA和HVA的浓度检测限(S/N=3)分别为5.0×10-7 mol/L和6.1×10-7 mol/L,线性回归系数分别为0.999 3和0.997 9.并以此方法将尿液中的VMA和HVA在10 min内有效地分离检测,不受其他干扰,得到加标回收率分别为98％和99％,取得了满意的结果.【期刊名称】《河北大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(036)003【总页数】7页(P257-263)【关键词】毛细管电泳;电化学发光检测;香草扁桃酸;高香草酸【作者】杨洋;孙雪梅;李传龙【作者单位】青岛科技大学化学与分子工程学院生态化工教育部重点实验室,山东青岛 266042;青岛科技大学化学与分子工程学院生态化工教育部重点实验室,山东青岛 266042;青岛科技大学化学与分子工程学院生态化工教育部重点实验室,山东青岛 266042【正文语种】中文【中图分类】O657.8香草扁桃酸(vanilla mandelic acid,VMA)和高香草酸(homovanillic acid,HVA)是人体内神经递质儿茶酚胺的主要终末代谢产物，儿茶酚胺由肾上腺髓质、交感神经、中枢神经系统内的激素通过生物合成而得，这2种产物可以作为神经母细胞瘤和嗜铬细胞瘤的肿瘤标记物，大约有90%的患者尿液中VMA和HVA的含量都会升高[1]，因此，检测尿中VMA 和HVA对2种细胞瘤早期诊断及病情监测有着重要的临床意义.对于VMA或HVA的检测前人做了大量的工作，传统的检测方法主要有重氮法[2]、微柱法[3]、层析法[4]等，但这些方法过程繁琐，易受外界干扰，所以很难用于临床检测.高效液相色谱法对于尿液中HVA和VMA 的检测具有可靠性强、特异性高、准确性好等优点，但是因为其仪器设备特殊，并且价格昂贵，所以难以广泛应用于临床[5].毛细管电泳作为一种新型的有效的分离分析技术，具有分析速度快、分辨率高、试样消耗量小等优点.电化学发光检测选择性好、灵敏度高、线性范围宽，经常与毛细管电泳技术相结合来达到更低的检测限，目前已广泛应用于医药科学、生命科学、分子生物学[6-8]等多个领域.国内虽然有关于用毛细管电泳来检测尿液中神经递质的代谢产物的报道，但是要预处理样本，操作比较麻烦[9].本文结合了毛细管电泳与电化学发光检测技术，建立了一种能够简单快速分离检测尿样中VMA和HVA的方法.1.1 仪器与试剂MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪(西安瑞迈分析仪器有限责任公司)；KQ-500B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；三电极体系由自制的碳纤维簇微盘电极(工作电极)、饱和甘汞电极(参比电极)、铂丝电极(辅助电极)组成.弹性石英毛细管(60 cm×25 μm I.D.,375 μm O.D.)(河北永年光导纤维厂)；香草扁桃酸标准品，高香草酸标准品，美国Sigma公司；磷酸二氢钠，磷酸氢二钠，市售分析纯试剂；三联吡啶钌.1.2 实验方法实验中CE分离系统和ECL检测池的俯视图同参考文献[10]，简单地说，由高压电源在毛细管两端提供高压(0～30 kV)，毛细管两端插在存有缓冲液的检测池中，在进样端施加高压，检测池采用的三电极体系为：碳纤维素微盘电极(工作电极)，其制作过程同文献[11]，饱和甘汞电极(参比电极)，铂丝电极(辅助电极).把工作电极固定在检测池上,在三维显微镜下将毛细管与工作电极间的距离调节为80～100 μm，将1.2 V作为检测电势,进样方式为12 kV下电迁移进样10 s.当毛细管内电渗流达到恒定值后开始进样并记录电泳图.2.1 香草扁桃酸和高香草酸电化学发光行为采用循环伏安法，在含有5.0×10-3 mol/L Ru(bpy)32+ 的50 mmol/L pH 为8.2的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液中进行循环伏安扫描，得到如图1a所示的电化学发光强度谱图，在上述条件下分别加入VMA和HVA，循环伏安扫描所得的相应的电化学发光谱图，如图1b、c所示.图1曲线a反应出，Ru(bpy)32+溶液本身在这种实验条件下电化学发光强度不是很明显.但随着VMA和HVA的加入，Ru(bpy)32+的电化学发光信号明显增强(图1b,c)，说明了VMA和HVA可以与Ru(bpy)32+相互作用，产生比较强的发光信号，因此，本实验可通过加入Ru(bpy)32+采用电化学发光的方法来检测VMA和HVA.2.2 VMA与HVA分离条件的选择2.2.1 缓冲溶液种类的选择缓冲溶液的成分直接影响毛细管内的电渗流和待测组分的迁移及最后的分离效果，实验考察了硼酸盐和磷酸盐缓冲体系，结果得出，在磷酸盐缓冲体系中，样品峰形好，基线平稳，因此选择磷酸盐作为电泳缓冲溶液.2.2.2 缓冲溶液pH值的选择在50 mmol/L不同pH值的NaH2PO4-Na2HPO4缓冲体系中分别检测VMA和HVA，得到2种物质电化学发光强度与pH值的关系，见图2.由图2可知，当缓冲液pH为8.2时，2物质的电化学发光强度均最大，因此选择缓冲液的pH为8.2.2.2.3 缓冲液浓度的选择在不同浓度磷酸盐(pH为8.2)的条件下分别检测了VMA和HVA，所得的电化学发光强度以及迁移时间tm随缓冲溶液浓度cB的变化曲线如图3所示.综合考虑2种物质的电化学发光强度以及背景噪音和迁移时间的因素，采用NaH2PO4-Na2HPO4的浓度为50 mmol/L做为实验条件.2.2.4 分离电压的选择在不同分离电压US下，对VMA和HVA分别进行检测，图4为电化学发光强度和迁移时间tm随分离电压US的变化曲线.综合考虑被测组分的分离度、基线噪音、分析时间等因素，选择了16 kV作为分离电压.2.2.5 检测电势的选择在不同检测电势Ed下，对VMA和HVA分别进行检测，得到检测电势与电化学发光强度关系如图5所示.由图5可看出，VMA和HVA的电化学发光强度随检测电势的增大而增强，但噪音信号也随之呈上升趋势，导致基流不稳，为保证检测的灵敏度与较好的信噪比，故选择1.2 V作为检测电势.2.2.6 Ru(bpy)32+的浓度的选择在不同浓度的Ru(bpy)32+的磷酸盐缓冲溶液中，分别检测2种物质，得到VMA 和HVA的发光强度随缓冲液中Ru(bpy)32+的浓度变化规律如图6所示.综合考虑2组分的分离度和基线噪音等因素，故选择5.0 mmol/L作为Ru(bpy)32+检测分离组分的最佳浓度.本实验确定了分离检测VMA和HVA的最佳条件为50 mmol/L pH 8.2的磷酸盐缓冲溶液、初始电位为1.2 V、16 kV下电迁移进样10 s、发光剂Ru(bpy)32+的浓度为5.0 mmol/L.在最优条件下，通过电化学发光来检测浓度均是1.0×10-5 mol/L 的2待测物的标准混合液，电化学发光强度随迁移时间变化的谱图如7所示，可以看出，VMA和HVA已经有效分离.2.3 重现性、线性范围及检测限配一系列2组分的混合标准液(浓度范围1.0×10-6～1.0×10-3 mol/L)，在上述最优条件下，测定待测物的电化学发光强度I与浓度的关系，考察了各组分的线性范围，得出2组分的线性回归方程，并以信噪比为3时得到检测下限，结果如表1. 在最优条件下，连续检测6次浓度均是1.0×10-5 mol/L的2组分的混合标准溶液，得到峰高的相对标准偏差(RSD)为2.7%(VMA)和3.1%(HVA)，以及迁移时间的RSD为1.1%(VMA)和0.9%(HVA).2.4 样品的检测及回收率实验准确取10 mL成人尿液标准样品，将浓度均为1.0×10-5 mol/L的VMA与HVA 的标准混合液用尿液标准样品稀释10倍，得到样品混合液.在以上优化条件下对样品混合液进行检测，得到电化学发光强度谱图如下，2待测物在10 min内被有效地分离与检测.在最佳条件下的回收率实验采用标准加入法，结果如表2，VMA和HVA的加标回收率分别为98%和99%，上述结果表明，本方法简单快速，灵敏度很高，给尿液中的2物质的分离与检测提供了一种可靠易行的方法.采用毛细管电泳电化学发光检测法分离并检测了尿液中的VMA和HVA，得到最佳检测条件.在此条件下，VMA与HVA的浓度检测限分别为5.0×10-7 mol/L和6.1×10-7 mol/L，其加标回收率分别为98%和99%，此方法设备简单，快速易行，2被测物在10 min内有效地分离与检测，且无干扰，结果准确可靠，笔者期望在以后的临床医学中能够得到实际应用.【相关文献】[1] SADILKOVA K，DUGAW K，BENJAMIN D，et al.Analysis of vanillylmandelic acid and homovanillic acid by UPLC-MS/MS in serum for diagnostic testing forneuroblastoma[J].Clinica Chimica Acta，2013，424：253-257.DOI：10.1016/a.2013.06.024.[2] 许育丹.重氮法和微柱比色法检测尿液香草扁桃酸的方法比较[J].实用医技杂志，2005，12(03A)：578-579.[3] 陈曼娜，廖瑛.微柱比色法检测尿液VMA含量的评价[J].现代检验医学杂志，2003，18(1)：14-15.CHEN Manna，LIAO Ying.To envalue the way of using micro-column chromatography determine VMA in the urine[J].Journal Of Modern Laboratory Medicine，2003，18(1)：14-15.[4] TOKUDA T，TOKIEDA T，ANAZAWA A，et al.Simultaneous determination of vanillylmandelic acid,homovanillic acid and creatinine in urine by reversed-phase ion-pair chromatography[J].Journal of Chromatography B：Biomedical Sciences And Applications，1990，530：418-423.DOI：10.1016/s0378-4347(00)82344-0.[5] 张华，李永兴.高效液相电化学法检测尿儿茶酚胺和VMA诊断嗜铬细胞瘤[J].现代检验医学杂志，2003，18(3)：8-9.ZHANG Hua，LI Yongxing.Urinary catecholamines and VMA measured by high performance liquid chromatography(HPLC)-electrochemical detector (ECD) for diagnosisof pheochromocytoma[J].Journal of Modern Laboratory Medicine，2003，18(3)：8-9. [6] DENG Biyang，SU Caina，KANG Yanhui.Determination of norfloxacin in human urine by capillary electrophoresis with electrochemiluminescence detection[J].Analytical And Bioanalytical Chemistry，2006，385(7)：1336-1341.DOI：10.1007/s00216-006.[7] AN Dong，CHEN Zhuqiu，ZHENG Jiachun，et al.Determination of biogenic aminesin oysters by capillary electrophoresis coupled with electrochemiluminescence[J].Food Chemistry，2015，168：1-6.DOI：10.1016/j.foodchem.2014.07.019.[8] LI Jianguo，YAN Qinyi，GAO Yunlong，et al.Electrogenerated chemiluminescence detection of amino acids based on precolumn derivatization coupled with capillary electrophoresis separation[J].Analytical Chemistry，2006，78(8)：2694-2699.DOI：10.1021/ac052092m.[9] 高萍，徐佳，孙玉倩，等.毛细管电泳检测尿儿茶酚胺代谢产物及在诊断嗜铬细胞瘤中的应用[J].哈尔滨医科大学学报，2008，42(5)：511.GAO Ping，XU Jia，SUN Yuqian，et al.Determination of urine catecholamine metabolic products by capillary electrophoresis for diagnosis of pheochromocytoma[J].Journal Of Harbin Medical University，2008，42(5)：511.[10] JIN Wenrui，WENG Qianfeng，WU Jianren.Determination of bovine serum albumin by capillary zone electrophoresis with end-column amperometric detection at the carbon fiber microdisk array electrode[J].Analytica Chimica Acta，1997，342(1)：67-74.DOI：10.1016/s0003-2670(96)00530-2.[11] JIN Wenrui，YU Daiqing，DONG Qian，et al.A new method of quantification of pipemidic acid by capillary zone electrophoresis with end-column amperometric detection[J].Electrophoresis，2000，21(5)：925-929.。
香草扁桃酸(VMA)介绍
肾上腺素+去加肾上腺素 变肾上腺素+去甲变肾上腺素 高香草酸
91% 1.1% 7.6% 少量
VMA
儿茶酚胺主要代谢物--VMA
◆ 香草扁桃酸（VMA）经代谢由尿排出，是肾上腺素与去甲肾上腺素的主要代谢产物
◆ 参考范围：≤12mg/24h尿（见VMA试剂说明书） ◆ 临床意义： VMA增高：嗜铬细胞瘤、交感神经母细胞瘤、原发性高血压和甲状腺功能减退 VMA降低：甲状腺功能亢进、原发性慢性肾上腺皮质功能减退等
4
结语
结语
尿液激素重点推荐项目——VMA检测
国外普查项目，临床意义国际认可（早发现可治愈）
• 小儿神经母细胞瘤筛查……日本、美国、印度广泛使用 • 成人嗜铬细胞瘤的筛查…… 血压高、心跳快、头痛、呼吸困难，虚汗
国内市场前景广阔
• 专家熟知、全国均有收费 • 国内没有质量过关的免疫试剂……手工法 • 博源VMA均相酶免疫试剂……全世界独家，易于推广使用
研究发现：尿VMA 检测具有操作简便、阳性率高（达99%）等优点
参考文献：甘志彪等.尿液中香草杏仁酸测定的应用探讨.临床试验杂志[J].2013,17(7):1664-1265
22
Байду номын сангаас
嗜铬细胞癌
VMA检测
6例患者，4例阳性，临床症状不明显，VMA检测辅助确诊
参考文献：刘俊宏等.儿童嗜铬细胞瘤的诊断与治疗（附6例分析及文献复习）.重庆医科大学学报[J].2014,39(8):1069-1071
75 mL
150 mL 300 mL 600 mL 400 mL 校准品 质控品
R1: 5×4×3 mL、R2: 5×1×3 mL
R1: 2×60 mL、R2: 2×15 mL R1: 4×60 mL、R2: 4×15 mL R1: 8×60 mL、R2: 8×15 mL R1: 320 mL、R2: 80 mL 1.0 ml；2.0 ml；5.0 ml；10.0 ml 2×1.0 ml；2×2.0 ml；2×5.0 ml；2×10.0 ml
1Bio-Rad质控品分类介绍_-susan解析
胆碱酯酶（Cholinesterase）（仅限2、3）
乙醇（Ethanol）(仅限1、2)
胰淀粉酶（Amylase,Pancreatic）(仅限2、3)
谷氨酸脱氢酶（GLDH）*（仅限1、3）
万古霉素（Vancomycin）(仅限1、3)
尿液定量生化控制品
▪ 可选择液体或干粉产品
▪ 人尿液基质
▪ 以376、377(Lyphochek定量尿液控制品） 为例，包括了葡萄糖（Glucose）、尿素 （Urea）、尿素氮（Urea Nitrogen）、 尿酸（Uric Acid）、肌酐（Creatinine）、 肌酸（Creatine）、微量白蛋白 （Microalbumin）、定性妊娠试验 （Pregnancy (Qualitative)）、电介质、 各种微量元素、各种激素及其代谢产物 （如醛固酮（Aldosterone）、多巴胺 （Dopamine）、肾上腺素 （Epinephrine）、香草扁桃酸（VMA）、 高香草酸（HVA）等）等50多项常见的尿 液定量生化分析项目
甲状腺结合球蛋白（TBG）（仅限3)
补体C3（Complement C3）（仅限2、3）
前列腺特异性抗原（PSA）(仅限3)
补体C4（Complement C4）（仅限2、3）
人绒毛膜促性性激素-β亚基（hCG-Beta Subunit）(仅限3)
触珠蛋白（Haptoglobin）（仅限2、3）
摩尔渗透压浓度（Osmolality）（仅限1、2）
总卟啉（Porphyrins,Total）(仅限1)
血脂控制品
▪ 641/642 ▪ 液体产品 ▪ 人血清基质 ▪ 包括了载脂蛋白A-1（Apolipoprotein A-1）、载脂
尿香草扁桃酸(VMA)
尿香草扁桃酸（VMA）
尿香草扁桃酸（VMA）介绍：
香草扁桃酸是肾上腺素与去甲肾上腺素的最终代谢产物。
尿香草扁桃酸（VMA）正常值：
正常值：10～35μmol／24h尿。
尿香草扁桃酸（VMA）临床意义：
异常结果：
增高：见于嗜铬细胞瘤、交感神经母细胞瘤、原发性高血压和甲
状腺功能减退等
减低：见于甲状腺功能亢进、原发性慢性肾上腺皮质功能减退等。
需要检查的人群：有心慌、心动过速、怕热、多汗、食欲亢进、
消瘦、体重下降、疲乏无力、头痛、恶心、呕吐、气促、烦躁不安等
症状的人群。
尿香草扁桃酸（VMA）注意事项：
检查时注意：1、做该检查时应尽量采用新鲜晨尿。
随机留取的尿
液以中段尿为宜。
2、女性留取尿标本时应避开经期，应防止阴道分泌物混入尿液中，以中段尿为宜。
3、留取尿液应使用清洁干燥的容器，以医院提供的一次性尿杯和尿试管为好。
用于常规检验的尿量应取10毫升左右，尽快送检。
尿香草扁桃酸（VMA）检查过程：
检查方法：尿检。
医学术语英文
Horner综合征：肺癌压迫经交感神经,出现孔小、球陷、同垂、无汗症状Pancoast瘤：肝上沟瘤RTE：肺血栓栓塞ARDS：急性呼吸窘迫综合征AB：实际碳酸氢盐SB：标准碳酸氢盐SIRS：系统炎症反应综合征MODS：多器官功能障碍综合征AOA：腺苷脱氢酶LDH：乳酸脱氢酶Curling：烧伤引起的胃溃疡Cushing：中枢神经系统引起的胃溃疡DU：十二指肠溃疡“杜十娘饿了更迷人”GU：胃溃疡Krubenberg瘤：胃癌种植转移到盆腔TACE：肝癌肝动脉栓塞化疗Charcot三联征：腹痛、寒战高热、黄疸PTE：经皮肝穿刺胆管造影ERCP：急性梗阻性化脓性胆管炎Reyhold五联征：痛、热、黄+休克、昏迷Grey-Turner征：两侧腰部、协腹部皮肤青紫Cullen征：脐周皮肤青紫Roving：结肠充气试验Psoas：腰大肌试验Obturator：闭孔内肌实验Miles手术：经腹会阴联合直肠癌根治术Dixon手术：经腹腔直肠癌切除术Hantmann手术：经腹直肠癌切除、人工肛门远端封闭术Trietz韧带：十二指肠悬韧带BNP：脑钠肽ANP：心钠肽Killip：急性心梗用,心功能分级湿啰音NYHA：非急性心梗用运动ZNR：凝血酶原国际化比值Vlavsva动作：吸气-屏气-呼气BMI：=体重/身高的平方PTCA：冠脉成形术CABG：冠脉搭桥术CKMB：肌酸激酶同工酶Austin-flimt杂音：主动脉瓣关闭不全,胸骨左缘第3肋间舒张期杂音,心尖区听到舒张期隆隆样杂音Janeway：手掌、脚掌出血Olser：手指指腹红色小结、出血Roth；视网膜出血Ewart：左肩胛骨下叩诊浊音,听诊支气管呼吸音Beck三联征：急性心脏压塞三联征CVP：中心静脉压PCWP：肺毛细血管契压CI：心脏指数Buerger试验：肢体抬高试验Terndelenburg试验：大隐静脉瓣膜功能试验Perthes试验：深静脉通畅试验Pratt试验：交通静脉瓣膜试验Guthrie试验：苯丙酮尿症,新生儿试验Koplik斑：见于小儿麻疹DOTS：短程督导化疗,儿科结核MCV：红细胞平均容积MCHC：红细胞平均血红蛋白浓度Brown-Sequard：半切综合征Romborg：闭目难立征Battle斑：颅后窝乳突部有出血点、瘀斑TIA：短暂性脑缺血发作Wallenberg：延髓背外侧综合征Lock-in综合征：闭锁综合征DSA：数字血管造影AD：老年痴呆VD：血管痴呆Verick脑病：喝酒出现眼球震颤,不能外展,有意识障碍SSRIS：选择性五羟色胺摄取抑制剂抗GBM：抗肾小球基底膜型ANCA抗体：抗中性粒细胞胞浆抗体CTX：环磷酰胺IVP：静脉肾盂造影IVU：静脉尿路造影KUB：尿路平片Turp：经尿道前列腺切除术GFR：肾小球滤过率EPO：促红细胞生成素PCP：卡氏肺孢子虫肺炎ELISA：酶联免疫吸附试验PCR：聚合酶链PRL瘤：泌乳素瘤Graves：弥漫性毒性甲状腺肿TRH：促甲状腺激释放激素Somgui现象：半夜低血糖,清晨高血糖Whipple三联征：1、清晨空腹发作,有神经精神症状,2、发作血糖＜,3、给予葡萄糖立即缓解PTU：丙基硫氧嘧啶Addison病：原发性慢性肾上腺皮质功能减退症VMA：香草扁桃酸OGTT：口服葡萄糖耐量试验PNH：阵发性睡眠性血红蛋白尿Coombs试验：抗人球蛋白试验Ham试验：酸溶血试验ALL：急淋ANLL：非急淋Pas：糖原染色试验NSE：非特异性酯酶染色NAP：中性粒细胞碱性磷酸酶CML：慢粒MDS：骨髓增生异常综合征MTX：甲氨蝶呤HL：霍奇金淋巴瘤NHL：非霍奇金淋巴瘤ATRA：全反式维甲酸VP方案：长春新碱+泼尼松DA方案：柔红霉素+阿糖胞苷ABVD方案：阿霉素、博来霉素、长春新碱、甲氮咪胺CHOP方案：环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、泼尼松MPT方案：美法仑、泼尼松、沙丁度胺BT：出血时间CT：凝血时间PT：凝血酶原时间APTT：部分凝血活酶时间AKP：血清碱性磷酸酶Cooper韧带：乳房悬韧带,酒窝征Paget病：湿疹样癌CAF方案：环磷酰胺、阿霉素、氟尿嘧啶CMF方案：环磷酰胺、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶CTD：弥漫性结缔组织病PSS：干燥综合征PA：类风湿性关节炎SSC：系统性硬化病AS：强直性脊柱炎OA：骨性关节炎Relter综合征：反应性关节炎Forment征：夹纸试验Monteggia骨折：孟氏骨折,尺骨上三分之一骨折,合并桡骨小头脱位Galeazzi骨折：盖氏骨折,桡骨下三分之一骨折,合并尺骨小头脱位Colles骨折：伸直型骨折Smith骨折：屈曲型骨折Chance骨折：椎体水平状撕裂骨折Jefferson骨折：第一颈椎骨折Dugas征：杜加征,搭肩试验Hippocrates法：足蹬法,肩关节复位Allis法：提拉法,髋关节脱位复位法Mills征：伸肌腱牵拉试验Finkelstein征：握拳尺偏试验Eaton征：上肢牵拉试验Spurling征：压头试验Heberden结节：见于骨关节炎CCP抗体：环瓜氨酸肽抗体Thomas征：见于髋关节结核Codman三角：见于骨肉瘤HCG：人绒毛膜促性腺激素HPL：人胎盘生乳素LH：黄体生成素FSH：卵泡刺激素BraxtionHicks收缩：妊娠12-14周,子宫第一次出现不规律、无痛收缩LOA：左枕前NST：无应激试验OCT：缩宫素激惹试验TC方案：紫杉醇+卡铂BEP方案：博来霉素+依托泊苷+顺铂Asherman综合征：人流、刮宫等导致的闭经。
尿香草扁桃酸疾病生化
尿香草扁桃酸疾病生化
尿液中的香草扁桃酸（VMA）是肾上腺髓质、交感神经节等部位的嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺类（肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺）激素的主要代谢产物。
尿液中香草扁桃酸（VMA）测定主要用于嗜铬细胞瘤的诊断和高血压的鉴别诊断。
尿VMA显著升高见于：
（1）嗜铬细胞瘤：常见于年轻的高血压病人，呈阵发性或持续性伴阵发性加剧者，伴有尿香草扁桃酸（VMA）增高（需在高血压发作日测定）。
其中肾上腺髓质肿瘤可产生去甲肾上腺素和肾上腺素，而肾上腺外的肿瘤一般只产生去甲肾上腺素而不能合成肾上腺素。
应注意的是：尿VMA 检查结果正常也不能排除嗜铬细胞瘤，其原因是：在肿瘤非发作期；尿中VMA 正常而其前身游离儿茶酚胺升高；有些患者尿中VMA 基础值低，即使发生肿瘤其值仍不超过正常范围。
（2）神经母细胞瘤、交感神经节细胞瘤。
（3）血压波动较大的原发性高血压者，儿茶酚胺及其代谢产物也可升高，应注意鉴别。
下列因素可以干扰尿VMA 测定结果对嗜铬细胞瘤的诊断：手术、创伤、低血糖、过度劳累、甲低时和胰岛细胞瘤等，尿VMA 测定结果亦可增高。
艾迪生病、甲亢、神经节药物封闭、使用利血平、杜冷丁等药物，尿液VMA 测定结果降低。
嗜铬细胞瘤和副神经节瘤的分类、诊断及治疗
嗜铬细胞瘤和副神经节瘤的分类、诊断及治疗（一）定义嗜铬细胞瘤（PCC）和副神经节瘤（PGL）合称为PPGL，是由神经嵴起源的嗜铬细胞产生的肿瘤，分布于肾上腺髓质、交感神经节或其他部位的嗜铬组织，这种肿瘤持续或间断地释放大量儿茶酚胺，引起持续性或阵发性高血压和多脏器功能异常及代谢紊乱。
PPGL中80%~85%来源于肾上腺髓质，称为嗜铬细胞瘤，其余来源于肾上腺外的交感或副交感神经，称为副神经节瘤。
PPGL中10%~17%为转移性，35%~40%为遗传性。
（二）临床表现1.高血压可为阵发性、持续性或持续性高血压基础上的阵发性加重，常规降压药物治疗效果不佳。
可因体位变换、压迫腹部、情绪激动、排尿排便等因素诱发，发作持续时间不等，发作频度不等，发作时血压可明显升高达（200~300）/（150~180）mmHg，可伴有头痛、心悸、大汗三联征，严重者可出现恶性高血压、高血压性脑病、眼底出血等严重并发症。
2.直立性低血压多数持续性高血压患者常伴有直立性低血压，少数患者有低血压甚至休克，或高血压与低血压交替出现。
3.代谢异常儿茶酚胺为升糖激素，大量释放可导致血糖升高，出现糖耐量异常或糖尿病；儿茶酚胺还能促进脂肪分解，升高血中FFA浓度，增加代谢率；少部分患者可出现发热、白细胞升高等表现。
4.其他系统异常表现（1）心血管系统：可有儿茶酚胺心肌病、心律失常、心绞痛、心梗或心衰等。
（2）消化系统：便秘、腹胀、腹痛、肠梗阻、胆石症等，如肿瘤位于盆腔或直肠附近，用力排便时因腹压升高可诱发高血压发作。
（3）泌尿系异常：病程长、病情重者因高血压可导致肾功能损害；位于膀胱的副神经节瘤可因排尿引起高血压发作。
（4）神经系统：部分患者在高血压发作时出现精神紧张、烦躁、焦虑，甚至恐怖或濒死感，部分患者出现晕厥、抽搐、症状性癫痫发作等神经精神症状。
（5）伴发其他内分泌疾病：可作为MEN的一部分，同时合并甲状腺髓样癌、甲状旁腺功能亢进等；若为Von Hippel-Lindau病或神经纤维瘤病1型的一部分，还可同时合并其他部位肿瘤的相关临床表现。
尿香草扁桃酸(VMA)测定
尿香草扁桃酸（V M A）测定分光光度法参考值：（一）原理用乙酸乙酯从酸化尿液中提取V M A 和其他酚酸，然后反提取到碳酸钾水层。
加入高碘酸钠（Na IO4），使V M A 氧化成香草醛（van i l l i n）。
用甲苯从含有酚酸杂质的溶液中选择性提取香草醛，再用碳酸盐溶液反抽提到水层，用分光光度计于波长360nm 测定水层中香草醛的浓度。
（二）病人准备与标本处理1．收集标本前1 周限制病人食用含有香草醛类的食物，如巧克力、咖啡、柠檬、香蕉以及阿司匹林和一些降压药物，这些药物中含有酚酸对该法有阳性干扰，可使结果假性升高。
2．尿量应通过饮水调控在1000～3000ml／24h 之间。
3．收集24 小时尿液加浓盐酸约10ml 或甲苯5ml 防腐。
若尿液不能及时进行测定，应置冰箱2～8℃保存，以免V M A 被破坏而使测定数值减低。
（三）试剂1．6 mo l／L H Cl。
2．NaCl （固体）。
3．乙酸乙酯。
4．1mo l／L 碳酸钾：称取138g 无水碳酸钾溶于蒸馏水中并补足至1L。
室温保存，超过一个月须重配。
5．20g／L 偏高碘酸钠：称取2g 偏高碘酸钠（NaIO4 MW 213.89），溶于蒸馏水中并补足至100 ml。
须当天新配。
6．100g／L 偏重亚硫酸钠：称取10g 偏重亚硫酸钠（M W 190.10）溶于蒸馏水中并补足至100 ml，须当天新配。
7．5mo l／L 乙酸：取286ml 冰乙酸加蒸馏水至1L 。
8．1mo l／L 磷酸盐缓冲液，PH 7.5A 液：取286g 磷酸二氢钠（Na2HPO4·7H2O），加蒸馏水至1L ，置冰箱保存。
B 液：取27.22g 磷酸二氢钾（KH2PO4），加蒸馏水至200ml，置冰箱保存。
取A 液168.2ml 与B 液31.8ml混合，用酸度计核对或调节至pH 7.5，置冰箱保存。
9．0.01mo l／L HCl。
10．标准液（1）V M A 标准贮存液（1 mg／ml，5.05m mo l／L）：精确称取100mg VMA（M W 198.17）置于100ml 容量瓶中，加0.01mo l／L H Cl 至刻度，混匀。
人VMA检测试剂盒,人垂草扁桃酸(VMA)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
人VMA检测试剂盒,人垂草扁桃酸（VMA）分析检测ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本垂草扁桃酸（VMA）含量。
试验原理：VMA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知VMA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将VMA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中VMA的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗VMA抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2024尿液中香草扁桃酸(VMA)检测的临床意义
2024尿液中香草扁桃酸(VMA)检测的临床意义儿茶酚胺是由儿茶酚(CateChO1,邻二经基苯)和乙胺衍生物相结合的一类化合物。
肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺是体内最重要的内源性儿茶酚胺，后者既是肾上腺髓质分泌的激素，又是肾上腺素能神经元释放的神经递质，所以儿茶酚胺具有特殊的生理功能和药理作用。
香草扁桃酸(VaniIIy1mande1icacid或Vani1mande1iCacid,VMA)是儿茶酚胺的主要代谢产物，VMA占体内肾上腺素和去甲肾上腺素代谢产物的60%o 测定尿液中VMA含量能够反映体内肾上腺髓质激素的水平，可用于嗜铭细胞瘤的临床诊断。
检测方法目前VMA测定方法主要分为两类,一类是分光光度法另一类是层析法。
尿液中所含有的大量化合物均可对比色法和层析法产生干扰，因此几乎所有的定量分析尿液VMA的方法，在分析前都需对尿液样本进行提取纯化,以提高检测方法的特异性和灵敏度。
由于比色法的特异性较差，人们转而采用层析法，从干扰物中分离提取VMA,再用重氮化的对硝基苯胺显色进行测定。
近年来，应用高效液相色谱技术(HP1e)测定尿液VMA的方法，由于其特异性高，极少受到干扰等特点已受到广泛的关注。
参考区间VMA测定的参考区间可因方法、仪器、试剂不同而有不同，因此，各实验室应根据试剂说明书和临床实践建立自己的参考区间。
临床意义1 .尿液VMA水平升高主要见于嗜珞细胞瘤患者，但在疾病的非发作期VMA 亦可正常或仅略高于正常。
另外，神经母细胞瘤、交感神经节细胞瘤、呼吸功能不全、休克或恶性肿瘤患者也会导致尿液VMA水平升高。
2 .患者使用某些药物时，如1-多巴也会使尿液VMA水平升高。
3 .尿液VMA水平降低见于家族性自主神经功能障碍，这种障碍被认为是儿茶酚胺代谢异常所致。
参考文献［1］尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第4版）［M］.北京：人民卫生出版社，2019.［2］尹一兵，倪培华.临床生物化学检验技术（第1版）［M］.北京：人民卫生出版社，2015.。
肿瘤标志物
24h尿香草扁桃酸（VMA）
尿VMA是儿茶酚胺(多巴胺和去甲肾上腺素)
的代谢产物，而NB具有合成、分泌儿茶酚胺 的特点，故肿瘤负荷越大，分泌越多。
尿VMA是NB较特异的肿瘤标志物，为诊断的
重要线索之一 ，24h尿VMA并可作为神经母 细胞瘤的诊断、复发监测及衡量肿瘤负荷的 一个重要指标。
血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）
β2-微球蛋白（β2-M）
β2-M是由100个氨基酸残基组成的单链多肽
低分子蛋白，它起源于人体间质，上皮细胞 和造血系统的正常细胞以及恶性肿瘤细胞均 能合成β2-M。实验研究表明淋巴细胞和肿瘤 细胞可产生大量β2-M，植物血凝素可加速这 一合成过程 。它存在于所有有核细胞的表面 ， 特别是淋巴细胞和肿瘤细胞，并由此释放入 血循环。
D-二聚体
文献报道，在恶性肿瘤的病程进展中由于化
疗药物的影响、深静脉置管以及肿瘤细胞本 身可以释放具有促凝活性的组织因子和癌促 凝物，肿瘤细胞和内皮细胞、单核巨噬细胞 等血细胞的相互作用等多种因素，逐步破坏 了机体内正常的凝血、抗凝、纤溶系统平衡， 体内可出现止血、凝血和纤溶的异常，因此 恶性肿瘤患者易合并高凝状态。
肿瘤标志物
肿瘤标志物
肿瘤标志物是细胞在癌变的发生、发展、浸
润及转移过程中所分泌、产生的一些活性物 质，存在于癌组织及宿主体液中。以往检测 肿瘤标志物只局限于ห้องสมุดไป่ตู้诊断中应用。近几年 来，随着分子生物学、免疫学以及生物化学 等相关学科的飞速发展，检测肿瘤标志物的 目的除用于诊断外，对疗效及预后评判也有 一定意义。
血清乳酸脱氢酶（LDH）
LDH是糖酵解途径中一种重要的酶，肿瘤组织的糖 酵解高于正常组织，因而参与糖酵解的重要酶类— LDH也增高。 由于肿瘤细胞坏死，代谢转换率加速，细胞膜通透 性改变等原因，致使癌组织的酶释放至血液，因此 血清LDH活性增高，可作为代表全身肿瘤细胞负荷 的一项重要指标。但LDH分布于肾、心肌、肝、肺 等多种组织、器官中，当这些组织发生病变时血清 LDH均可升高，因此对于NB其特异性不高。
人垂草扁桃酸(VMA)ELISA试剂盒使用说明书
人垂草扁桃酸（VMA）ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人垂草扁桃酸（VMA）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人垂草扁桃酸（VMA）水平。
用纯化的人垂草扁桃酸（VMA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入垂草扁桃酸（VMA），再与HRP标记的垂草扁桃酸（VMA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的垂草扁桃酸（VMA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人垂草扁桃酸（VMA）浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
尿香草扁桃酸VMA测定
尿香草扁桃酸（V M A）测定分光光度法参考值：（一）原理用乙酸乙酯从酸化尿液中提取V M A 和其他酚酸，然后反提取到碳酸钾水层。
加入高碘酸钠（Na IO4），使V M A 氧化成香草醛（van i l l i n）。
用甲苯从含有酚酸杂质的溶液中选择性提取香草醛，再用碳酸盐溶液反抽提到水层，用分光光度计于波长360nm 测定水层中香草醛的浓度。
（二）病人准备与标本处理1．收集标本前1 周限制病人食用含有香草醛类的食物，如巧克力、咖啡、柠檬、香蕉以及阿司匹林和一些降压药物，这些药物中含有酚酸对该法有阳性干扰，可使结果假性升高。
2．尿量应通过饮水调控在1000～3000ml／24h 之间。
3．收集24 小时尿液加浓盐酸约10ml 或甲苯5ml 防腐。
若尿液不能及时进行测定，应置冰箱2～8℃保存，以免V M A 被破坏而使测定数值减低。
（三）试剂1．6 mo l／L H Cl。
2．NaCl （固体）。
3．乙酸乙酯。
4．1mo l／L 碳酸钾：称取138g 无水碳酸钾溶于蒸馏水中并补足至1L。
室温保存，超过一个月须重配。
5．20g／L 偏高碘酸钠：称取2g 偏高碘酸钠（NaIO4 MW 213.89），溶于蒸馏水中并补足至100 ml。
须当天新配。
6．100g／L 偏重亚硫酸钠：称取10g 偏重亚硫酸钠（M W 190.10）溶于蒸馏水中并补足至100 ml，须当天新配。
7．5mo l／L 乙酸：取286ml 冰乙酸加蒸馏水至1L 。
8．1mo l／L 磷酸盐缓冲液，PH 7.5A 液：取286g 磷酸二氢钠（Na2HPO4·7H2O），加蒸馏水至1L ，置冰箱保存。
B 液：取27.22g 磷酸二氢钾（KH2PO4），加蒸馏水至200ml，置冰箱保存。
取A 液168.2ml 与B 液31.8ml混合，用酸度计核对或调节至pH 7.5，置冰箱保存。
9．0.01mo l／L HCl。
10．标准液（1）V M A 标准贮存液（1 mg／ml，5.05m mo l／L）：精确称取100mg VMA（M W 198.17）置于100ml 容量瓶中，加0.01mo l／L H Cl 至刻度，混匀。
香草苦杏仁酸（VMA）
香草苦杏仁酸（VMA）
香草苦杏仁酸（VMA）
香草苦杏仁酸（3-甲氧-4羟苦杏仁酸，VMA）是肾上腺素和去甲肾上腺素经单胺氧化酶（MAO）和儿茶酚胺-0-甲基转移酶（COMT）的作用下，甲基化和脱氨基而产生的降解产物。
VMA主要是从尿中排出。
能合成儿茶酚胺类的肾上腺髓质的嗜铬细胞及交感神经细胞末梢，均源于胚胎期神经嵴，这两种组织含有相同的酶。
一旦这类组织增殖，则尿中VMA就会增高，所以它常被认为是神经母细胞瘤、神经节瘤和嗜铬细胞瘤的标志物。
约有70％神经母细胞瘤的患者均有VMA增高，在IV期神经瘤患者VMA/HVA的比值可作为预后评价指标，在儿童的神经母细胞瘤患者中，VMA也是一项重要指标。
VMA又可作为嗜铬细胞瘤的诊断首选标志物，但有时增高程度不稳定，宜同时测定尿中儿茶酚胺。
香草苦杏仁酸（VMA）
香草苦杏仁酸（3-甲氧-4羟苦杏仁酸，VMA）是肾上腺素和去甲肾上腺素经单胺氧化酶（MAO）和儿茶酚胺-0-甲基转移酶（COMT）的作用下，甲基化和脱氨基而产生的降解产物。
VMA主要是从尿中排出。
能合成儿茶酚胺类的肾上腺髓质的嗜铬细胞及交感神经细胞末梢，均源于胚胎期神经嵴，这两种组织含有相同的酶。
一旦这类组织增殖，则尿中VMA就会增高，所以它常被认为是神经母细胞瘤、神经节瘤和嗜铬细胞瘤的标志物。
约有70％神经母细胞瘤的患者均有VMA增高，在IV期神经瘤患者VMA/HVA的比值可作为预后评价指标，在儿童的神经母细胞瘤患者中，VMA也是一项重要指标。
VMA又可作为嗜铬细胞瘤的诊断首选标志物，但有时增高程度不稳定，宜同时测定尿中儿茶酚胺。
尿香草扁桃酸（VMA）测定
尿香草扁桃酸（V M A）测定分光光度法参考值：（一）原理用乙酸乙酯从酸化尿液中提取V M A和其他酚酸，然后反提取到碳酸钾水层。
加入高碘酸钠（Na IO4），使V M A氧化成香草醛（van i l l i n）。
用甲苯从含有酚酸杂质的溶液中选择性提取香草醛，再用碳酸盐溶液反抽提到水层，用分光光度计于波长360nm 测定水层中香草醛的浓度。
（二）病人准备与标本处理1．收集标本前1周限制病人食用含有香草醛类的食物，如巧克力、咖啡、柠檬、香蕉以及阿司匹林和一些降压药物，这些药物中含有酚酸对该法有阳性干扰，可使结果假性升高。
2．尿量应通过饮水调控在1000～3000ml／24h 之间。
3．收集24 小时尿液加浓盐酸约10ml或甲苯5ml防腐。
若尿液不能及时进行测定，应置冰箱2～8℃保存，以免V M A被破坏而使测定数值减低。
（三）试剂1． 6 mo l／L H Cl。
2．NaCl （固体）。
3．乙酸乙酯。
4．1mo l／L 碳酸钾：称取138g无水碳酸钾溶于蒸馏水中并补足至1L。
室温保存，超过一个月须重配。
5．20g／L 偏高碘酸钠：称取2g 偏高碘酸钠（NaIO4MW 213.89），溶于蒸馏水中并补足至100 ml。
须当天新配。
6．100g／L 偏重亚硫酸钠：称取10g偏重亚硫酸钠（M W 190.10）溶于蒸馏水中并补足至100 ml，须当天新配。
7．5mo l／L 乙酸：取286ml冰乙酸加蒸馏水至1L。
8．1mo l／L 磷酸盐缓冲液，PH 7.5A液：取286g磷酸二氢钠（Na2HPO4·7H2O），加蒸馏水至1L，置冰箱保存。
B 液：取27.22g 磷酸二氢钾（KH2PO4），加蒸馏水至200ml，置冰箱保存。
取A液168.2ml 与B 液31.8ml 混合，用酸度计核对或调节至p H 7.5，置冰箱保存。
高效液相色谱法测定尿中香草扁桃酸
高效液相色谱法测定尿中香草扁桃酸
张和顺;杨金凤
【期刊名称】《天津医药》
【年(卷),期】1993(021)007
【摘要】已知香草扁桃酸(3-methoxy-4-hymedicacid,VMA)为儿茶酚胺在体内降解的主要终未产物,与硫酸或葡萄糖醛酸结合后由肾排出。
尿中VMA 测定不仅对临床诊治嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤等疾病有重要意义,而且也能对儿茶酚胺代谢异常进行监测。
目前,有多种测定方法应用于 VMA的分离鉴定。
【总页数】2页(P423-424)
【作者】张和顺;杨金凤
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R446.12
【相关文献】
1.高效液相色谱测定尿中香草扁桃酸含量 [J], 曾立明;唐银;沈阗
2.双柱双泵高效液相色谱-电化学法测定尿中香草扁桃酸 [J], 赵飞浪;袁倚盛
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75 mL
150 mL 300 mL 600 mL 400 mL 校准品 质控品
R1: 5×4×3 mL、R2: 5×1×3 mL
R1: 2×60 mL、R2: 2×15 mL R1: 4×60 mL、R2: 4×15 mL R1: 8×60 mL、R2: 8×15 mL R1: 320 mL、R2: 80 mL 1.0 ml；2.0 ml；5.0 ml；10.0 ml 2×1.0 ml；2×2.0 ml；2×5.0 ml；2×10.0 ml
试验数据
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
3、稳定性：不定标稳定性≥14天，日间CV＜4%
Days 1 3 5 7 9 11 13 15 Mean SD CV g/ml) 浓度1 (µ 6.30 6.21 6.54 6.26 6.30 6.16 6.04 5.86 6.21 0.20 3.23% g/ml) 浓度2 (µ 25.02 25.15 24.59 25.38 24.19 24.42 23.44 23.61 24.48 0.71 2.88%
2
VMA市场介绍
1 VMA市场情况
注册号 国械注进20142405473 生产厂商名称（英文） Costa Brava 30,08030 Barcelona Spain
• 收费目录：VMA各地都有收费； • 每个测试在 30-80 元；
生产国或地区（中文） 西班牙 产品名称（中文） 产品名称（英文） 规格型号 产品性能结构及组成 香草扁桃酸分析试剂盒(色谱-分光光度法) VANILMANDELIC ACID 货号：COD11003 人份：20tests 试剂1:0.6mol/L的磷酸钠缓冲溶液; 试剂2:0.2mol/L乙酸钠缓冲溶液,pH约6.1; 试剂3:2mol/L氯化钠溶液; 试剂A:3mol/L碳酸钾; 试剂B:0.12mol/L重构化焦亚硫酸-高碘酸钠粉; 试剂C:0.67mol/L重构化焦亚硫酸钠粉; 香草扁桃酸标品:20mg/L香草扁桃酸溶液; 微柱:阴离子交换树脂。 用于测定人体尿液中香草扁桃酸浓度。 重庆圣利安医疗设备有限公司 2014.11.27 2019.11.26
4
结语
结语
尿液激素重点推荐项目——VMA检测
国外普查项目，临床意义国际认可（早发现可治愈）
• 小儿神经母细胞瘤筛查……日本、美国、印度广泛使用 • 成人嗜铬细胞瘤的筛查…… 血压高、心跳快、头痛、呼吸困难，虚汗
国内市场前景广阔
• 专家熟知、全国均有收费 • 国内没有质量过关的免疫试剂……手工法 • 博源VMA均相酶免疫试剂……全世界独家，易于推广使用
2
嗜铬细胞癌
•
VMA检测
嗜铬细胞瘤来源于肾上腺髓质及交感神经系统的嗜铬细胞所形成的肿瘤。
• 恶性嗜铬细胞瘤的发生率不足10%，瘤体常巨大，并可发生转移 • 成人嗜铬细胞瘤的筛查—症状：血压高、心跳快、头痛、呼吸困难，虚汗。
• 严重病例发作时可导致死亡。
• 如能及时、早期获得诊断和治疗，又是一种可治愈的继发性高血压病。
小儿神经母细胞瘤筛查：日本、美国、印度广泛使用—早筛查早治愈
1
神经母细胞瘤
VMA检测
• NB生存率低（30%左右）——及早发现可治愈 • 北京儿童医院-----参考美国NB筛查方案+儿童临床数据→医院NB筛查方案: 提出唯一检测项目：尿VMA/HVA 检查
参考文献：李斯慧等.神经细胞瘤高危儿童筛查及其方案研究进展.中国小儿血液与肿瘤杂志[J]:2016,21(1):47-49
试验数据
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
1、定标曲线【AU480】
VMA定标曲线
0.2500 0.2000 反应度 0.1500 0.1000 0.0500 0.0000 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 浓度µ g/ml
试验数据
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
标本 编号 SP 17 SP 18 SP 19 SP 20 SP 21 SP 22 SP 23 SP 24 SP 25 SP 26 SP 27 SP 28 SP 29 SP 30 SP 31 SP 32
VMA (µ g/ml) 3.18 3.53 1.60 1.03 0.39 2.49 2.05 3.64 2.09 4.01 2.15 4.81 2.52 2.12 3.97 6.02
• 儿茶酚胺：一种含有儿茶酚和胺基的神经类物质。 • 儿茶酚胺：甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、多巴胺（DA）。 • 儿茶酚胺合成：通过交感神经节和肾上腺髓质上的L-酪氨酸酶化转变而来。 儿茶酚胺的合成代谢路线
酪氨酸
酪氨酸羟化酶
多巴
多巴脱羧酶
多巴胺（DA）
香草扁桃醛
单胺氧化酶
多巴胺羟化酶
去甲肾上腺素（NE）
• 目前主要为检验科自己用手工做
（用化学法）； • CFDA：尿VMA 1家进口注册（
西班牙）
产品适用范围 注册代理 批准日期 有效期截止日
3
苏州博源—首家自动化VMA试剂
产品特点
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
• 全国首家，国内独家均相酶免疫平台 • 自产原材料—原材料和试剂自主研发，质量可靠
VMA （mg/24h尿） 4.77 5.30 2.40 1.55 0.59 3.74 3.08 5.46 3.14 6.02 3.23 7.22 3.78 3.18 5.96 9.03
VMA 标本 VMA g/ml) （mg/24h尿） 编号 (µ SP 33 3.95 5.93 SP 34 2.03 3.05 SP 35 1.27 1.91 SP 36 2.03 3.05 SP 37 5.33 8.00 SP 38 2.80 4.20 SP 39 11.93 17.90 SP 40 3.26 4.89 SP 41 9.68 14.52 SP 42 2.11 3.17 SP 43 2.74 4.11 SP 44 2.32 3.48 SP 45 4.67 7.01 SP 46 2.09 3.14 SP 47 3.87 5.81 SP 48 1.39 2.09
1 神经母细胞瘤
VMA检测
神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)，又叫神经细胞瘤， • • • 在小于5岁儿童常见的肿瘤中居第三位 ，约75%的NB患者在5岁以下。 大约65%的肿瘤起源于腹部,15%~20%起源于胸部,其余15%起源于不同的部位例如颈部, 骨盆等（主要症状包块，易被误诊） NB产生儿茶酚胺,可测得患儿尿中儿茶酚胺分解产物（VMA）浓度升高
VMA Reference range:≤12mg/24h尿
标本总例数 64
阳性例数 3
阴性例数 61
注：24h尿计算以每人每天尿体积1.5L计算。 测定结果与临床症状诊断结果基本一致
VMA包装规格-见说明书
包装 20 mL 50 mL 75 mL 组分 R1: 16 mL、R2: 4 mL R1: 40 mL、R2: 10 mL R1: 60 mL、R2:15 mL
香草扁桃酸（VMA）
肾上腺素+去加肾上腺素 变肾上腺素+去甲变肾上腺素 高香草酸
91% 1.1% 7.6% 少量
VMA
儿茶酚胺主要代谢物MA
◆ 香草扁桃酸（VMA）经代谢由尿排出，是肾上腺素与去甲肾上腺素的主要代谢产物
◆ 参考范围：≤12mg/24h尿（见VMA试剂说明书） ◆ 临床意义： VMA增高：嗜铬细胞瘤、交感神经母细胞瘤、原发性高血压和甲状腺功能减退 VMA降低：甲状腺功能亢进、原发性慢性肾上腺皮质功能减退等
标本 编号 SP 49 SP 50 SP 51 SP 52 SP 53 SP 54 SP 55 SP 56 SP 57 SP 58 SP 59 SP 60 SP 61 SP 62 SP 63 SP 64
VMA VMA (µ g/ml) （mg/24h尿） 4.70 7.05 2.49 3.74 6.02 9.03 3.54 5.31 1.68 2.52 1.63 2.45 2.70 4.05 3.20 4.80 4.79 7.19 3.58 5.37 1.72 2.58 3.13 4.70 2.61 3.92 1.87 2.81 7.37 11.06 2.95 4.43
• 试验验证—检测数据准确、可靠、重复性好、灵敏度高
• 操作方便—相较于手工法可自动化操作，提高临床检测量
检验原理
博源VMA测定试剂盒（均相酶免疫法）
均相酶免疫法测定VMA活性检验原理
c 实际测定时 H H H H
+
VMA抗体
H
VMA
+
G6PDH 激活态
+
NAD+
G6PDH 抑制态
+
G6PDH 激活态
香草扁桃酸测定试剂盒(均相酶免疫法）
Vanilmandelic acid (VMA )Assay kit (Homogeneous Enzyme Immunoassay)
CONTENTS
1 2
儿茶酚胺及VMA简介
VMA市场介绍
3
4
苏州博源—首家自动化VMA试剂
结语
1
儿茶酚胺及VMA简介
儿茶酚胺
试验数据
4、24h尿液标准测定
标本 编号 SP 1 SP 2 SP 3 SP 4 SP 5 SP 6 SP 7 SP 8 SP 9 SP 10 SP 11 SP 12 SP 13 SP 14 SP 15 SP 16 VMA (µ g/ml) 2.52 2.44 4.48 3.23 6.88 2.99 4.54 3.93 4.34 1.53 2.00 4.18 9.76 2.64 2.57 2.03 VMA （mg/24h尿） 3.78 3.66 6.72 4.85 10.32 4.49 6.81 5.90 6.51 2.30 3.00 6.27 14.64 3.96 3.86 3.05