板蓝根中有效成分的提取与分离

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板蓝根中有效成分的提取与分离

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一、选材

板蓝根(常用别名:靛青根、蓝靛根、大青根)是一种中药材。中国各地均产。板蓝根分为北板蓝根和南板蓝根,北板蓝根来源为十字花科植物菘蓝(Isatis tinctoria L.)和草大青(I. indigotica Fort.)的根;南板蓝根为爵床科植物马蓝(Baphicacanthus cusia (Nees) Brem.)的根茎及根。秋季采挖,除去泥沙,晒干。呈圆柱形,稍扭曲,长10~20cm,直径0.5~1cm.表面淡灰黄色或淡棕黄色,有纵皱纹及支根痕,皮孔横长。根头略膨大,可见暗绿色或暗棕色轮状排列的叶柄残基和密集的疣状突起。体实,质略软,断面皮部黄白色,木部黄色。气微,味微甜后苦涩。具有清热解毒、凉血消肿、利咽之功效。

二、主要化学成分、结构与性质

菘蓝根含靛蓝(indigotin,indigo),靛玉红(indirubin),蒽醌类、β-谷甾醇(β-sitosterol),γ-谷甾醇(γ-sitosterol)以及多种氨基酸:精氨酸(arginine),谷氨酸(glutamic acid),酪氨酸(tyrosine),脯氨酸(proline),缬氨酸(valine),γ-氨基丁酸(γ-aminobu-tyric acid)。还含黑芥子甙(sinigrin),靛甙

(indoxyl-β-hlucoside),色胺酮(trptanthrin),表告伊春(epigoitrin),1-硫氰酸-2-羟基丁-3-烯(l-thiocyano-2-hydroxy-3-butene),腺甙(adenosine),棕榈酸(palmitic acid),蔗糖(sucrose)和含有12%氨基酸的蛋白多糖。还含有抗革兰氏阳性和阴性细菌的抑菌物质及动力精。

主要有效成分氨基酸多是无色晶体,熔点极高,一般在200℃以上。不同的氨基酸其味不同,有的无味,有的味甜,有的味苦,谷氨酸的单钠盐有鲜味,是味精的主要成分。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大,并能溶解于稀酸或稀碱中,但不能溶于有机溶剂。通常酒精能把氨基酸从其溶液中沉淀析出。

Arginine(Arg,R)Leucine(Leu,L)Tyrosine(Tyr,Y)

板蓝根中的主要化合物的结构

1.精氨酸(arginine;Arg符号R):学名:2-氨基-5-胍基-戊酸。一种脂肪族的碱性的含有胍基的极性α氨基酸,在生理条件下带正电荷。L-精氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物必需氨基酸和生糖氨基酸。分子式:C6H14N4O2;分子量:174.20;熔点244℃(分解).经水重结晶后,于105℃失去结晶水.其水溶性呈强碱性,可从空气中吸收二氧化碳。溶于水(15%,21℃),不溶于乙醚,微溶于乙醇。白色斜方晶系(二水物)晶体或白色结晶性粉末。溶于水(15%,21℃),不溶于乙醚,微溶于乙醇。

2. 亮氨酸(leucine;Leu符号L):学名:2-氨基-4-甲基戊酸。一种含有6个碳原子的脂肪族支链非极性的α氨基酸。L-亮氨酸是组成蛋白质的常见20种氨基酸之一,是哺乳动物的必需氨基酸和生酮生糖氨基酸。化学式:C6H13NO2;分子量:131.18;熔点:332℃(消旋体),293~295℃(左旋体);酸碱性:pH约为为5.5 ~6.5;在甲酸中易溶,在水中略溶,在乙醇或乙醚中极微溶解。白色结晶或结晶性粉末;无臭,味微苦。

3. 酪氨酸(tyrosine;Tyr符号Y):学名:2-氨基-3-对羟苯基丙酸。一种含有酚羟基的芳香族极性α氨基酸。L-酪氨酸是组成蛋白质的20种氨基酸中的一种,是哺乳动物的必需氨基酸,又是生酮和生糖氨基酸。分子式:C9H11NO3;分子量:181.20;熔点:342~344℃(分解);白色结晶体或结晶粉末,无味,易溶于甲酸,难溶于水,不溶于乙醇和乙醚。

三、主要化学成分的提取分离

1.提取分离流程图

板蓝根粉

2倍量水煎1~2h,煎煮3次,合并煎液,过滤

煎液药渣

减压浓缩到1:1

浓缩液

2倍量95%乙醇,放置24h,过滤

沉淀滤液

(多糖、蛋白质等)减压浓缩至无醇味,加水成0.5g药材/mL的溶液

溶液

通过Zerolie225强酸型离心交换树脂

树脂柱

水洗至中性,分别用1.7~2N氨水洗脱,分段收集,

PC检查,合并相同流份,浓缩,结晶

L-精氨酸结晶L-亮氨酸结晶

L-酪氨酸结晶

2.提取分离原理与方法

溶剂提取法:

根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性,选用对活性成分溶解度大、对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法叫溶剂提取法。常见溶剂的亲脂性的强弱顺序为(亲水性则相反):石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇。针对本品采用的是溶剂提取法中的煎煮法:

将药用植物饮片或粗粉置适当容器(避免铁器)中,加水浸过液面,加

热煮沸1小时左右,并不断搅拌,避免焦糊。一般煎煮2~3次,第二、三次,可酌情缩短时间。本法简便易行,属热浸法,提取效率比冷浸渍法高。

药用植物中大部分成分可被不同程度地提出,但含挥发性成分及有效成分遇热易破坏的药材,不宜用此法。

参考文献

[1] 李伯廷. 药物有效成分的提取与分离[M]. 山西高校联合出版社,1993;396.

[2] 林启寿. 中草药成分化学[M]. 科学出版社,1977.

[3] 江苏新医学院. 中药大辞典[M]. 上海科学技术出版社,2000.

[3] 中国医学科学院药物研究所. 中药志[M]. 人民卫生出版社,1959.

[3] 叶橘泉. 现代实用中药[M]. 上海科技出版社,1956.

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