脑蛋白注射液

脑蛋白水解物氯化钠注射液

Naodanbai Shuijiewu Lühuana Zhusheye

Cerebroprotein Hydrolysate and Sodium Chloride Injection

本品系猪脑蛋白水解物溶液与氯化钠的灭菌水溶液。含总氮（N）应为标示量的90.0％～110.0％，含总氨基酸（以氮计）应为总氮的85％～100％，含肽（以氮计）应不低于总氮的20％，含氯化钠（NaCl）应为标示量的95.0%~105.0%。

水

色谱条件与系统适用性试验用亲水高效体积排阻硅胶为填充剂（如：TSK GEL 2000SWxl，柱长300mm，内径7.8mm，粒径5μm；或性能相当的色谱柱）；以三氟醋酸-乙腈-水（0.05：40：60）为流动相，流速为每分钟0.7ml；检测波长为214nm。理论板数按核糖核酸酶A峰计算不得低于5000，各相邻峰之间的分离度按峰高与峰谷之比计算均不得小于3.0。

标准曲线的制备取核糖核酸酶A（分子量13700）、胰岛素（分子量5808）、胸腺肽α1（分子量3108）、生长激素释放抑制因子（分子量1638）各适量，分别用流动相溶解并定量制成每1ml中约含1mg的溶液作为分子量标准溶液。取上述标准溶液各20μl，分别注

入液相色谱仪，记录色谱图，重复进样，其保留时间的相对标准偏差不得大于2.0%。以各峰的保留时间为横坐标，分子量对数为纵坐标进行线性回归，相关系数不得小于0.99。

测定法取本品20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以面积归一化法计算，供试品溶液色谱图中分子量大于5000道尔顿的高分子杂质不得过1.0%。

重金属取本品10ml，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水适量使成25ml，依法检查（中国药典2010年版二部附录VIII H第一法），重金属不得过千万分之十五。

渗透压摩尔浓度取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录IX G），毫渗透压摩尔浓度应为280～320mOsmol/kg。

活力测定精密量取本品适量，用10%小牛血清培养液制成每1ml中含氮量为60µg的

缬氨酸(C5H11NO2) 苯丙氨酸(C9H11NO2)

甲硫氨酸(C5H11NO2S) 0.0939 脯氨酸(C5H9NO2) 0.1217

亮氨酸(C6H13NO2) 0.1068 盐酸赖氨酸(C6H14N2O2•HCl) 0.1534

异亮氨酸(C6H13NO2) 0.1068 色氨酸(C11H12N2O2) 0.1372 肽精密量取适量，加水稀释至合适浓度，作为游离氨基酸供试品溶液，用氨基酸分析仪或适宜的高效液相色谱仪进行测定。另取总氨基酸项下对照品溶液，同法测定。按外标法或以合适的氨基酸为内标以峰面积计算游离氨基酸含量（以氮计，色氨酸除外），以总氨基酸减去游离氨基酸并计算其在总氮中的含量。

氯化钠精密量取本品10ml，加水40ml，照电位滴定法（中国药典2010年版二部附录VII A），用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于5.844mg的NaCl。

【类别】同脑蛋白水解物溶液。

【规格】（1）250ml:180mg（以总氮计）与氯化钠2.25g （2）100ml:60mg（以总氮计）与氯化钠0.9g

【贮藏】密闭，在凉暗处保存。

附1：

脑蛋白水解物溶液

Naodanbai Shuijiewu Rongye

Cerebroprotein Hydrolysate

本品系自健康猪脑经酶水解得到的溶液。每1 ml中含总氮（N）不得低于5.49mg；含总氨基酸（以氮计）应为总氮的85％～100％，含肽（以氮计）应不低于总氮的20％。

【制法要求】见附2。

【性状】本品为浅黄色澄清液体。

水

钟

）为流动相，流速为每分钟0.7ml；检测波长为214nm。理论板数按核糖核酸酶A峰计算不低于5000，各相邻峰之间的分离度按峰高与峰谷之比计算均不得小于3.0。

标准曲线的制备取核糖核酸酶A（分子量13700）、胰岛素（分子量5808）、胸腺肽α1（分子量3108）、生长激素释放抑制因子（分子量1638）各适量，分别用流动相溶解并定量制成每1ml中约含1mg的溶液作为分子量标准溶液。取上述标准溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，重复进样，其保留时间的相对标准偏差不得大于2.0%。以各峰的保留时间为横坐标，分子量对数为纵坐标进行线性回归，相关系数不得小于0.99。

测定法取本品适量，加流动相稀释制成每1ml中约含总氮1mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。按面积归一化法计算，供试品溶液色谱图中分子量大于5000道

尔顿的高分子杂质的峰面积不得过1.0%。

活力测定取本品适量，加10%小牛血清培养液制成每1ml中含氮量为60µg的溶液。照活力测定法（见附3）测定，修复率不得低于100%。

细菌内毒素取本品，依法检查（中国药典2010年版二部附录Ⅺ E），每1ml中含内毒素的量应小于1.0EU。

微生物限度取本品至少200ml，采用薄膜过滤法处理后，依法检查（中国药典2010年版二部附录XI J），本品1ml中细菌总数不得过100cfu。

【含量测定】总氮取本品适量，稀释至适宜浓度，作为供试品溶液，精密量取适量，依法测定（中国药典2010年版二部附录VII D第二法）。

总氨基酸精密量取总氮项下供试品溶液适量，置消化管中，加盐酸适量，充氮封口，

活力测定法

本法系通过损伤PC12细胞后加入本品，采用MTT法测定细胞修复率作为活力测定指标。

试剂0.01mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.3）取氯化钠8.0g、氯化钾0.2g、无水磷酸氢二钠1.15g及磷酸二氢钾0.2g，加超纯水1000ml溶解后，湿热灭菌（中国药典2010年版二部附录ⅩⅦ）。

10%小牛血清培养液取RPMI-1640培养液90ml，加已灭活的新生小牛血清10ml。

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小

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