实验十三血钙测定(偶氮胂Ⅲ络合比色法)
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佝偻病
一、目的
❖ 了解氯化物测定的原理、操作方法及临床 意义。
二、原理 ❖ 钙与偶氮胂Ⅲ反应生成复合物，在在600nm
或者650-660nm下（红外线区域）有强烈的 蓝色。 ❖ 吸光度与钙浓度成比例
❖ 而同样为二价的镁离子并不生成复合物。 ❖ 此波长下，能避免血清中的镁离子的干扰，
并且血脂或血红蛋白等有色物质也不会对测 试造成干扰。
三、试剂 ❖ 试剂I:100ml×2 ❖ 钙标准液(2.5mmol/l,10mg/dl): 2ml
四、操作
五、计算 ❖ CA=(A测定/A标准)×C标准 ❖ 单位（mmol∕L）
❖ 【正常参考范围】 正常CA 2-2.5mmol/L
❖ 【临床意义】
❖ 血清钙升高常见于：甲状旁腺机能亢进，维 生素使用过多，多发性骨髓瘤，肿瘤广泛的 骨转移，急性骨萎缩等。
❖ 有低血磷性和低血钙性两种。比较多见的是低血磷性抗维生素D佝偻病， 又称家族性低磷血症(familialhypophosphatemia)，或肾性低血磷性佝 偻病(renalhypophosphatemicrickets)。
❖ 该病主要是由于位于X染色体上的PHEX基因的突变，导致肾小管回吸 收磷减少所致，肠道吸收钙、磷不良。
❖ 血清无机磷含量与血钙有一定关系，两者浓度的乘 积为一常数（以mg/dl浓度计算，乘积等于40）。
❖ 磷参与机体糖、脂类及氨基酸的代谢，是骨盐的主 要成分，也是转运能量的物质，磷酸盐是调节酸碱 平衡的重要缓冲体系之一。
抗维生素D佝偻病
❖ 抗维生素D性佝偻病（vitaminD-resi-stantRickets）是一种肾小管遗传 缺陷性疾病，发病率约1：25，000。
❖ 血磷降低，一般在0.65－0.97/mmol/L(2－3mg/dl)之间，钙磷乘积多在 30以下，骨质不易钙化。
【目的要求】 1.掌握还原钼蓝法测血磷的原理 2.熟悉血磷测定的其他方法
【实验原理】
❖ 利用磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷 钼酸复合物，用对甲氨基酚硫酸盐还原生成 钼蓝，与同样处理的标准液进行比色，可求Fra Baidu bibliotek得血磷的含量。试剂中加入聚山梨酯-80以抑 制蛋白质干扰。
❖ 2. 高磷血症见于 甲状旁腺功能减退症、维生素D过多症、 Addison病、肢端肥大症、多发性骨髓瘤等。
【参考值】
成人0.97 ～ 1.62 mmol/L 儿童1.45 ～ 2.10 mmol/L
❖ 体重约见5%的无机盐主要有Ca、Mg、K、Na、P和Cl，这 六种无机元素约占体内无机盐总量的60%~80%，主要存在于 体液。无机离子的测定方法主要有火焰光度法、化学测定法、 离子选择电极法、代谢物酶试剂法等。
❖ 血清钙降低常见于：甲状旁腺机能减退，佝 偻病，骨软化症，慢性肾炎、尿毒症等。
六、注意事项 ❖ 所有玻璃器皿要严格消毒,避免微量Ca的污染
七、思考题 ❖ 什么是钙磷乘积?简述其生理意义。
❖ 血钙升高和降低的临床意义是什么？
❖ 血液中的磷( phosphorus )主要有两种形式：有机 磷和无机磷。
【操作步骤】
测定管（U） 标准管（S） 空白管（B）
去离子水（ml） --
--
0.1
磷标准液（ml） --
0.1
--
血清
0.1
--
--
显色液（ml） 4.0
4.0
4.0
混匀，37恒温10分钟，650nm波长，以空白管调零， 测定各管吸光度。
【计算】 ❖ 样品磷含量（mmol/L）=标 测准 定管 管吸 吸光 光度 度
❖ 其中离子选择电极法标本用量少（100μl全血）,1min出结 果，快而准确，操作简便，是目前广为临床使用的方法。
×1.29
【临床意义】
❖ 1. 低磷血症见于 ①摄入不足和吸收减少：饥饿或恶病质、 吸收不良综合征、呕吐、腹泻、长期应用含铝的制剂等；② 磷转移入细胞内：静脉注射葡萄糖、胰岛素及碱中毒、妊娠 等；③丢失过多：血液透析、肾小管酸中毒、急性痛风等； ④其他：如酒精中毒、糖尿病酮症酸中毒、维生素D缺乏症 等。
一、目的
❖ 了解氯化物测定的原理、操作方法及临床 意义。
二、原理 ❖ 钙与偶氮胂Ⅲ反应生成复合物，在在600nm
或者650-660nm下（红外线区域）有强烈的 蓝色。 ❖ 吸光度与钙浓度成比例
❖ 而同样为二价的镁离子并不生成复合物。 ❖ 此波长下，能避免血清中的镁离子的干扰，
并且血脂或血红蛋白等有色物质也不会对测 试造成干扰。
三、试剂 ❖ 试剂I:100ml×2 ❖ 钙标准液(2.5mmol/l,10mg/dl): 2ml
四、操作
五、计算 ❖ CA=(A测定/A标准)×C标准 ❖ 单位（mmol∕L）
❖ 【正常参考范围】 正常CA 2-2.5mmol/L
❖ 【临床意义】
❖ 血清钙升高常见于：甲状旁腺机能亢进，维 生素使用过多，多发性骨髓瘤，肿瘤广泛的 骨转移，急性骨萎缩等。
❖ 有低血磷性和低血钙性两种。比较多见的是低血磷性抗维生素D佝偻病， 又称家族性低磷血症(familialhypophosphatemia)，或肾性低血磷性佝 偻病(renalhypophosphatemicrickets)。
❖ 该病主要是由于位于X染色体上的PHEX基因的突变，导致肾小管回吸 收磷减少所致，肠道吸收钙、磷不良。
❖ 血清无机磷含量与血钙有一定关系，两者浓度的乘 积为一常数（以mg/dl浓度计算，乘积等于40）。
❖ 磷参与机体糖、脂类及氨基酸的代谢，是骨盐的主 要成分，也是转运能量的物质，磷酸盐是调节酸碱 平衡的重要缓冲体系之一。
抗维生素D佝偻病
❖ 抗维生素D性佝偻病（vitaminD-resi-stantRickets）是一种肾小管遗传 缺陷性疾病，发病率约1：25，000。
❖ 血磷降低，一般在0.65－0.97/mmol/L(2－3mg/dl)之间，钙磷乘积多在 30以下，骨质不易钙化。
【目的要求】 1.掌握还原钼蓝法测血磷的原理 2.熟悉血磷测定的其他方法
【实验原理】
❖ 利用磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷 钼酸复合物，用对甲氨基酚硫酸盐还原生成 钼蓝，与同样处理的标准液进行比色，可求Fra Baidu bibliotek得血磷的含量。试剂中加入聚山梨酯-80以抑 制蛋白质干扰。
❖ 2. 高磷血症见于 甲状旁腺功能减退症、维生素D过多症、 Addison病、肢端肥大症、多发性骨髓瘤等。
【参考值】
成人0.97 ～ 1.62 mmol/L 儿童1.45 ～ 2.10 mmol/L
❖ 体重约见5%的无机盐主要有Ca、Mg、K、Na、P和Cl，这 六种无机元素约占体内无机盐总量的60%~80%，主要存在于 体液。无机离子的测定方法主要有火焰光度法、化学测定法、 离子选择电极法、代谢物酶试剂法等。
❖ 血清钙降低常见于：甲状旁腺机能减退，佝 偻病，骨软化症，慢性肾炎、尿毒症等。
六、注意事项 ❖ 所有玻璃器皿要严格消毒,避免微量Ca的污染
七、思考题 ❖ 什么是钙磷乘积?简述其生理意义。
❖ 血钙升高和降低的临床意义是什么？
❖ 血液中的磷( phosphorus )主要有两种形式：有机 磷和无机磷。
【操作步骤】
测定管（U） 标准管（S） 空白管（B）
去离子水（ml） --
--
0.1
磷标准液（ml） --
0.1
--
血清
0.1
--
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显色液（ml） 4.0
4.0
4.0
混匀，37恒温10分钟，650nm波长，以空白管调零， 测定各管吸光度。
【计算】 ❖ 样品磷含量（mmol/L）=标 测准 定管 管吸 吸光 光度 度
❖ 其中离子选择电极法标本用量少（100μl全血）,1min出结 果，快而准确，操作简便，是目前广为临床使用的方法。
×1.29
【临床意义】
❖ 1. 低磷血症见于 ①摄入不足和吸收减少：饥饿或恶病质、 吸收不良综合征、呕吐、腹泻、长期应用含铝的制剂等；② 磷转移入细胞内：静脉注射葡萄糖、胰岛素及碱中毒、妊娠 等；③丢失过多：血液透析、肾小管酸中毒、急性痛风等； ④其他：如酒精中毒、糖尿病酮症酸中毒、维生素D缺乏症 等。