溶菌分析摇瓶实验设计

溶菌分析摇瓶实验

实验一：

实验目的：氨水补加过量是否造成溶菌

出发样品：GYB08-03-037 装化后2h无菌样

实验方法：

1.用无菌空摇瓶取罐上的无菌样约50ml*10个，

2.分别加氨水（16%）：0ml（对照），50μl，100μl，200μl，400μl，共五组每

组3个摇瓶。中间过程不补料

3.0h 测样：残糖，N,PH,OD

4.8H测样：残糖，N,PH,OD .观察离心的上清是否浑浊和沉淀颜色

5.24H测样：残糖，N,PH,OD观察离心的上清是否浑浊和沉淀颜色

6.24h镜检各组试验菌体形态

实验二：

实验目的：接种量过大是否造成溶菌

发酵培养基：

总体积：80ml

水：77.9ml，Ι：2.24ml，Ⅱ：400μl，Ⅲ：240μl，LB16μl, 葡萄糖：3.5ml（700g/L）初始糖浓度约30g/l

出发菌种：GYB08-03-037 二级种子

实验方法：

A:3%接种量：接入二级种子2.4ml*3个

B:10%接种量：接入二级种子8ml *3个

C:15%接种量：接入二级种子12.0ml* 3个

D:20%接种量：接入二级种子16ml* 3个

检测与补料：

1.接种后测OD,PH，糖，N

2.8h进行转化测OD,PH，糖，N

3.13h测OD,PH，糖，N。补加碱，糖。观察离心的上清是否浑浊和沉淀颜色

4.31h，38h测OD,PH，糖，N，补碱。观察离心的上清是否浑浊和沉淀颜色

5.55h放瓶。镜检测OD,PH，糖，N。观察离心的上清是否浑浊和沉淀颜色