蔬菜中亚硝酸盐含量测定实验方案(完整资料).doc
蔬菜中硝酸盐及亚硝酸盐含量的测定
WORD格式可编辑蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
硝酸盐和亚硝酸盐在一些地区的日常食物中存在，如蔬菜和肉类。
它们也被添
加到食品中，如香肠和酱油，以改善口感和保鲜时间，可以减少有害微生物的生长。
硝酸盐和亚硝酸盐在高浓度下有毒，所以监管机构和食品安全官员必须密切监测它们在食品中的含量，以确保食物安全。
为了确定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，原理是用水解和酸解的方法，然后
用标准的分光光度法进行测定分析。
首先解冻样品，采用乙醇或其他适当的溶剂消化；消化液可以用酸浓度调节器进行调节，如HCl或NaOH；然后将消化液向容易
对比度测量物体中添加适量氧化铌，水解时加热蒸发；最后添加分光光度滴定液，如凯氏滴定液，测量出总硝酸盐摩尔浓度，并建立比例。
以上是硝酸盐和亚硝酸盐在蔬菜样品中的分析测定方法。
硝酸盐和亚硝酸盐的含量可以通过上述方法利用标准的分光光度法确定。
这一
测定方法简单容易，重点是精确度较高，可以准确检测出不同样品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，从而提高食物的安全性。
蔬菜中亚硝酸盐含量测定实验方案
蔬菜中亚硝酸盐含量测定实验方案烹饪蔬菜在不同保存条件下的亚硝酸盐含量变化一、实验原理蔬菜样品经磨碎后，样品中的亚硝酸盐可被饱和硼砂溶液提取至溶液中；弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮盐，再与盐酸萘乙二胺偶合成红色染料，于538nm处测定吸光度，亚硝酸盐含量与溶液吸光度成正比。
二、仪器和试剂仪器1、分光光度计2、分析天平3、搅拌机4、振荡机5、电热恒温水浴锅6、烧杯、移液管、容量瓶等试剂1、饱和硼砂溶液（50g/L）称取10.0g硼酸钠（Na2B4O7·10H2O），溶于200mL热水，冷却后备用；2、亚铁氰化钾溶液（0.25mol/L）称取26.5g亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O），溶于水，定容至250mL; 3、乙酸锌溶液（1mol/L）称取55.0g乙酸锌（Zn(CH3COO)2·2H2O）加7.5mL冰醋酸（CH3COOH）4、对氨基苯磺酸（0.4%）称取0.4ｇ对氨基苯磺酸（C6H7NO3S），溶于100 mL 20 %（体积比）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。
5、盐酸萘乙胺溶液（0.2%）称取0.2 g 盐酸萘乙二胺（C12H14N2·2HCl），溶于100 mL 水中, 混匀后，置棕色瓶中，避光保存。
6、亚硝酸钠标准储备液（200 μg /mL）称取0.1000ｇ于110℃～120℃干燥恒重的亚硝酸钠（预先在干燥器中放置24h以上），加水溶解移入500 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，储于棕色瓶，冰箱中保存。
7、亚硝酸钠标准使用液（10μg /mL）吸取储备液5.00mL于100mL容量瓶中，定容，临用时配制。
8、粉末状活性炭。
三、测定步骤1、样品前处理烹煮后的白菜暴露在空气中冷却30分钟，模拟一般家庭进食情况，随后把样品分成3分。
对照组暴露在空气中常温保存；实验组A 置于冰箱中4℃下保存；实验组B用保鲜膜密封于常温下保存。
蔬菜中亚硝酸盐的测定
蔬菜中亚硝酸盐的测定王豫【摘要】正亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定,蔬菜样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸的条件下亚硝酸盐与氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫色燃料,外标法测得亚硝酸盐含量。
标准加入法测得回收率在81.6%～108.0%之间。
1实验部分1.1仪器及工作条件TU-1901型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
附特制的紫外氘灯。
仪器工作条件列于表1。
1.2配制试剂1.2.1亚铁氰化钾(K4Fe(CN)6·3H20)溶液(106g/L):称取106.00g亚铁氰化钾,用水溶表1TU-1901型紫外分光光度计工作条件元素氘灯钨灯开关光谱带宽(nm)比色皿高度(cm)波长(nm)响应时间(s)亚硝酸盐开215381【期刊名称】《青海农技推广》【年(卷),期】2012(000)002【总页数】3页(P14-16)【关键词】亚硝酸盐含量;紫外分光光度法;亚硝酸钠;亚铁氰化钾;盐酸萘乙二胺法;紫外分光光度计;蔬菜样品;回收率;测定;工作条件【作者】王豫【作者单位】青海省农产品质量安全监测中心;【正文语种】中文【中图分类】TS255.7亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定，蔬菜样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸的条件下亚硝酸盐与氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫色燃料，外标法测得亚硝酸盐含量。
标准加入法测得回收率在 81.6%～108.0%之间。
1 实验部分1.1 仪器及工作条件 TU-1901型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
附特制的紫外氘灯。
仪器工作条件列于表1。
表1 TU-1901型紫外分光光度计工作条件响应时间（s）亚硝酸盐开 2 1 538 1元素氘灯钨灯开关光谱带宽（nm）比色皿高度（cm）波长（nm）1.2 配制试剂1.2.1 亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6·3H20）溶液（106g／L）：称取 106.00g 亚铁氰化钾，用水溶解，并稀释至1000ml。
酸黄瓜中的亚硝酸盐含量(实验设计)
酸黄瓜中的亚硝酸盐含量测定实验目的1.熟练掌握样品的制备、提取的基本操作。
2.掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法——盐酸萘乙二胺法。
实验原理本试验采用分光光度分析。
样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比，其最大吸收波长为538nm，可测定吸光度并与标准比较定量。
实验试剂1.20g／L氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。
2.硫酸锌溶液溶解30g硫酸锌于100mL水中。
3.对氨基苯磺酸溶液（0.4%）溶解0.4g对氨基苯磺酸于100mL20%盐酸中，避光保存。
4.盐酸奈乙二胺溶液（0.2%）溶解0.2g盐酸奈乙二胺于100mL水中，避光保存。
5.亚铁氰化钾溶液称取10.6g亚铁氰化钾于100mL容量瓶中定容。
6.亚硝酸钠标准溶液精确称取0.0500g亚硝酸钠，加水溶解后移入250mL容量瓶中，加水定容至刻度并摇匀，再从其中移去1mL，，以蒸馏水定容至100mL备用（亚硝酸盐含量2μg/mL）实验步骤1.标准曲线的绘制用移液管向25mL比色管中分别放入标准亚硝酸钠溶液0.00mL、0.05mL、0.10mL、0.15mL、0.20mL、0.25mL。
用蒸馏水稀释至15mL 后，分别加入1mL0.4%对氨基苯磺酸溶液摇匀，静置3min，再分别加入0.5mL0.2%盐酸奈乙二胺溶液，用蒸馏水定容至刻度。
静置10min，待测以1号比色管内溶液为参比，在538nm处，选用1cm比色皿，用分光光度计测定各溶液吸光度A。
以亚硝酸钠含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2.样品的处理称取样品10g左右，搅拌机切碎，置于烧杯中，加入70mL水和12mL氢氧化钠溶液，搅匀，置于70℃水浴中，10min后取出，冷却至室温。
再一边转动一边加入5mL亚铁氰化钾，摇匀，再加入4mL硫酸锌溶液使蛋白支沉淀。
腌制咸菜中亚硝酸盐含量测定
腌制咸菜中亚硝酸盐含量的测定摘要:目的：建立测定腌制蔬菜中亚硝酸盐含量的方法。
方法：在弱酸性溶液中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反响生成的重氮化合物,重氮化合物再与盐酸萘乙二胺偶联生成紫红色的偶氮染料,用分光光度法测定。
结果：经过校正,亚硝酸盐含量x (μg) 与吸光度A 之间在λmax = 533nm 处,具有良好的线性关系。
利用此方法所测定的腌制蔬菜中亚硝酸盐的含量随时间有一定变化规律。
结论：用分光光度法测定腌制咸菜中亚硝酸盐的含量,方法简单、方便、快捷、实用,可对食品中亚硝酸盐含量的测定中推广应用。
关键词:腌制咸菜；亚硝酸盐测定；分光光度法The determination of the nitrite content of pickled vegetables Rongyanjun(Major biotechnique,grade 2007,Ocean University of China)Aim To establish a method for determining the content of the nitrite in pickledvegetables .Methods Nitrite react with 4-aminobenzenesulfonic acid inweak acidic media to produce 4-sulfobenzenediazonium , which reacted with N′-( napht halen-1-yl) eth-ane-1 ,2-diamine hydrochloride to produce a red diazene pound , the red pound was detected byspect rop hotometer . Results The calibration graph for aqueous procedure was obtained by plotting ab-sorbance values at 533 nm against nit rite concent ration. The content level of nitrite in the pickled vegetables we used has some disciplines. Conclusion The met hod is accurate , rapid , simple , can be applied indetermining the nit rite content of the pickledvegetables.Keywords:pickled vegetables; nitrite determination; spect rop hotometer1引言腌制蔬菜是利用食盐的高渗透压作用、微生物的发酵作用、蛋白质的分解作用及其它一系列的生化作用，抑制有害微生物的活动和增加产品的色、香、味的加工过程。
食物中的亚硝酸盐含量测定实验
食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。
过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。
因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。
本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。
实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。
- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。
- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。
实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。
取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。
2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。
得到的溶液即为10%油酸银试剂。
3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。
4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。
5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。
6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。
数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。
标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。
通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。
实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。
2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。
3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。
结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。
这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。
同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。
蔬菜的硝酸盐亚硝酸盐分光光度法测定
蔬菜硝酸盐亚硝酸盐分光光度计测定法仪器：分光光度计、组织粉碎机（或研钵小）、水浴锅、电子天平、冷藏冰箱、烘箱器材：烧杯500mL、容量瓶1000mL（至少2个）、250mL(多个)、100mL(至少8个)、50mL （至少2）。
5mL移液枪（或小于50mL量筒）、漏斗、铁架台、滤纸药品：硝酸钾、硼砂、亚铁氰化钾、乙酸锌、冰醋酸、活性碳粉（分析纯）去离子水。
试剂：饱和硼砂溶液（50g溶于1000mL热去离子水、下同）0.25mol/L亚铁氰化钾溶液（106g定容于1000ml容量瓶）1mol/L乙酸锌溶液（220g溶于30mL乙酸水混合物，定容至1000mL）100mg/L硝酸钾标准液（110摄氏度下烘至恒重的样品取0.1631g定容至1000mL）标准曲线的绘制吸取硝酸根标准贮备液0、2、4、6、8、10、12、14mL分别于8个100mL容量瓶中去离子水定容至刻度混匀配置成：0、2、4、6、8、10、12、14mg/L在风光光度计上220nm???处比色绘标准曲线。
实验步骤：1.取待测样品洗净吸干水分称取3g磨成匀浆（5分钟以内）2.将匀浆入用约80mL热水（70~80℃，不超过100mL）洗入250mL烧杯，加5mL饱和硼砂溶液，沸水浴15min并不时搅拌。
3.冷却洗入250mL容量瓶，加入10mL亚铁氰化钾溶液和10mL乙酸锌溶液沉淀蛋白，1g 活性炭吸附有机物（每加一种均需摇匀）定容至刻度，摇匀过滤的透明待测液。
（取100mL去离子岁做空白对照3个）4.分吸取2mL待测液与对照分别220nm（石英比色杯）处比色于标准曲线上读取浓度亚硝酸盐测定取叶片约5克磨成匀浆（五分钟内）称取匀浆3克于100mL烧杯中，用量筒量取4%的乙酸锌30mL倒入搅拌均匀，用2mol/L的NaOH调节pH至7.2-7.5，加入粉状活性炭0.5克，于70度恒温水浴锅加热30min并不时搅拌，后冷却到室温，用布氏漏斗初次抽滤，（用清洗玻璃棒的烧杯的液体洗涤滤渣3-5次），将滤液倒入100mL容量瓶后用约30mL的蒸馏水分多次清洗抽滤瓶洗液倒入容量瓶定容到刻度，用注射器和0.45um滤膜再次抽滤，吸取滤液10mL入25mL比色管加入2.5mL对氨基苯磺酸，摇匀震荡，5min后加入2.5mL的N-1-萘乙基乙二胺震荡摇匀，用4%的盐酸调节pH至1.1-1.3定容到刻度，取此溶液在540nm处比色。
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烹饪蔬菜在不同保存条件下的亚硝酸盐含量变化
一、实验原理
蔬菜样品经磨碎后，样品中的亚硝酸盐可被饱和硼砂溶液提取至溶液中；弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮盐，再与盐酸萘乙二胺偶合成红色染料，于538nm处测定吸光度，亚硝酸盐含量与溶液吸光度成正比。
二、仪器和试剂
仪器
1、分光光度计
2、分析天平
3、搅拌机
4、振荡机
5、电热恒温水浴锅
6、烧杯、移液管、容量瓶等
试剂
1、饱和硼砂溶液（50g/L）
称取10.0g硼酸钠（Na2B4O7·10H2O），溶于200mL热水，冷却后备用；
2、亚铁氰化钾溶液（0.25mol/L）
称取26.5g亚铁氰化钾（K4Fe(CN)6·3H2O），溶于水，定容至250mL;
3、乙酸锌溶液（1mol/L）
称取55.0g乙酸锌（Zn(CH3COO)2·2H2O）加7.5mL冰醋酸（CH3COOH）
4、对氨基苯磺酸（0.4%）
称取0.4ｇ对氨基苯磺酸（C6H7NO3S），溶于100 mL 20 %（体积比）盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光保存。
5、盐酸萘乙胺溶液（0.2%）
称取0.2 g 盐酸萘乙二胺（C12H14N2·2HCl），溶于100 mL 水
中, 混匀后，置棕色瓶中，避光保存。
6、亚硝酸钠标准储备液（200 μg /mL）
称取0.1000ｇ于110℃～120℃干燥恒重的亚硝酸钠（预先在干燥器中放置24h以上），加水溶解移入500 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，储于棕色瓶，冰箱中保存。
7、亚硝酸钠标准使用液（10μg /mL）
吸取储备液5.00mL于100mL容量瓶中，定容，临用时配制。
8、粉末状活性炭。
三、测定步骤
1、样品前处理
烹煮后的白菜暴露在空气中冷却30分钟，模拟一般家庭进食情况，随后把样品分成3分。
对照组暴露在空气中常温保存；实验组A置于冰箱中4℃下保存；实验组B用保鲜膜密封于常温下保存。
每隔两小时取各组样品，先用滤纸尽量吸干水分，粗称约20g，切碎，用搅拌机制成匀浆备用。
2、样品中亚硝酸盐的提取
称取上述匀浆约10g，放入200ml烧杯中，加5ml饱和硼砂溶液和100ml热蒸馏水（70℃左右），在振荡机上振荡十分钟，然后置沸水浴中加热30min并不断摇动，取出冷却，加入5ml亚铁氰化钾溶液和5ml乙酸锌溶液和1.0g活性炭粉，每次加后均充分摇匀。
然后，转入250ml容量瓶中，用水定容。
放置5-10min后过滤，弃去初滤液，收集约50ml无色清亮提取液备用。
同时做空白试验。
3、标准曲线的绘制
吸取亚硝酸钠标准使用液（10μg /mL）0.00，0.20，0.50，1.0，1.5,2.0,3.0,4.0ml于100mL比色管中，各加水至30ml，然后各加入0.4%对氨苯磺酸3mL，混匀，静置3-5min后各加入0.2%盐酸萘乙二胺溶液2mL，加水至刻度线，混匀，得到亚硝基浓度梯度为0.00,0.02,0.05,0.10,0.15,0.20,0.30,0.40μg /mL的标准溶液。
静置
15min，在分光光度计上于538nm处测其吸光度并绘制出标准曲线。
4、样品测定
吸取提取液于50mL比色管中，定容至25mL，按绘制标准曲线的同样方法操作。
四、数据处理
亚硝酸盐含量（亚硝基，μg/g）=C*250/m
C:从标准曲线查得的亚硝基浓度（μg /mL）
m：精确称取的匀浆样品质量。