兽医微生物学课件- 螺旋体

苍白密螺旋体品他亚种 品他病
苍白密螺旋体极细亚种 雅司病
兔梅毒密螺旋体
兔梅毒
性传播 皮肤损伤 皮肤损伤 交配
钩端螺旋体属（Leptospira）
问号钩端螺旋体
钩端螺旋体病
接触疫水
第2节 疏螺旋体属
(Borrelia)
有3～10个不规则 的疏松螺旋，运动活泼。
对人和动物致病的 主要有伯氏疏螺旋体、 回归热螺旋体、鹅疏螺 旋体等。
（五）分子生物学检测 核酸探针/PCR
（六）血清学检查 显微凝集溶解试验（microscopic agglutination test, MAT）：用标准株或当地流行株作型特异性抗原,分 别与病人不同稀释度血清混合, 37℃孵育2h,暗视野 显微镜观察,可见钩端螺旋体凝集成小蜘蛛状,继而膨 胀并裂解。一般效价在1:800以上可判为阳性, 1:400 以上为可疑， 1:400以下需间隔两周后复检。
慢性移行性红斑
伯氏疏螺旋体
Borrelia burgdorferi FA stain (CDC)
B. burgdorferi dark field illumination (CDC)
The presentation of erythema migrans in Stage 1 (莱姆病)
宿主及传播媒介
本病原有2～4个弯曲，两端 尖锐，呈双燕翅状；革兰氏 染色阴性，用姬姆萨氏染色 和镀银染色后效果好。
培养特性
猪痢短螺旋体严格厌氧，一般厌氧环境难 以培养。
对培养基营养的要求相当苛刻，常用含 10%胎牛血清的TSB琼脂培养。
在TSB琼脂上形成扁平、半透明、针尖状、 强β溶血菌落。
抵抗力
对外界环境有较强的抵抗力，在25℃粪 便内能存活7天，5℃粪便重能存活61 天，在4℃土囊中能存活18天；对消毒 药的抵抗力不力不强，一般消毒药如过 氧乙酸、来苏儿和氢氧化钠溶液均能迅 速将其杀死。
梅毒螺旋体纤细，螺旋致密规则，两端尖 直，运动活泼，可用暗视野显微镜观察。
普通染色不易着色，常用Fontana镀银染色 法，菌体染成棕褐色且变粗。
培养特性与抵抗力
不能人工培养。 抵抗力极弱，对温度、干燥特别敏
感。对消毒剂与抗生素也敏感。
致病性
1.先天性梅毒： 亦称胎传梅毒，易致流
产、早产或死胎；也可致先天畸形，出生 后被称为梅毒儿，常呈锯齿形牙、间质性 角膜炎、神经性耳聋等症状。
兽医学有关致病螺旋体的分类
属和代表菌
引起人类疾病
传播方式或媒介
疏螺旋体属（Borrelia） 伯氏疏螺旋体 回归热疏螺旋体 鹅疏螺旋体
莱姆病
硬蜱
流行性回归热
体虱
禽类败血性疏螺旋体病 蜱、鸡螨、羽虱
螺旋体属（Brachyspira）
猪痢短螺旋体
猪痢疾
经口传播
密螺旋体属（Treponema）
苍白密螺旋体苍白亚种 梅毒
分两个种。
形态及染色特性
至少18个细密、规则的螺旋，形似细小珍珠 排列的细链；一端或两端呈钩状；运动活泼， 常使菌体呈C、S或8字型；G－，不易着染； 镀银染色法染成棕褐色。
黄疸出血热群钩端螺旋体
钩 端 螺 旋 体 镀 银 染 色
培养特性
♣ 营养要求不高，常用Korthof培养基，适
宜生长温度为28～30℃，若11～13℃能生 长的为非致病双曲钩端螺旋体。最适 pH7.2～7.6，小于6.5死亡，最高能耐8.4；
伯氏疏螺旋体
经蜱叮咬感染 人体，引莱姆病。
回归热螺旋体
以虱或软蜱为传播 媒介，引起回归热
伯氏疏螺旋体 （B. burgdorferi）
伯氏疏螺旋体是莱姆病（Lyme disease） 的主要病原体。
该病于1975年在美国Connecticut州莱姆镇 （Lyme）发现，故而得名，是一种以硬蜱为传 播媒介，以野生动物为储存宿主的自然疫源性 疾病。主要感染人、犬等多种动物，致关节炎 等多种疾病。
防控
防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理 在常年流行地区，对易感人群和与疫水
接触者宜接种包含当地流行株在内的多 价钩端螺旋体疫苗。 治疗：青霉素首选。
伯氏疏螺旋体 （革兰氏染色法）
梅毒螺旋体 （镀银染色法）
回归热螺旋体 （Giemsa或Wright 染色法）
培养特性
螺旋体的培养与细菌相似。有的较为困难，多 数需厌氧培养。但有些属种，特别是细螺旋体 (又称钩端螺旋体)的培养并不难，可需氧生长。 非致病病性螺旋体、蛇形螺旋体、钩端螺旋体 以及个别致病性密螺旋体与疏螺旋体可采用含 血液、腹水或其他特殊成分的培养基培养，其 余螺旋体迄今尚不能用人工培养基培养，但可 用易感动物来增殖培养和保种。
III期（晚期）梅毒：
感染性小，破坏性大。感染2年（亦可达10～15年） 后，可侵犯内脏器官或组织，出现慢性肉芽肿病变。 重症患者引起心血管及中枢神经系统病变，出现梅 毒瘤、动脉瘤、脊髓瘤。
微生物学检查
取硬下疳、 梅毒疹渗出 液或局部淋 巴结抽出液 ，镜检梅毒 螺旋体。
取患者血清 做非螺旋体 抗原试验或 螺旋体抗原 试验等血清 学试验。
螺旋体与螺旋菌的区别：螺旋菌较坚挺，弯 数较少，一般为1-6周；而螺旋体较柔软，弯 数较多。
螺旋体广泛分布于自然界和动物体内。大部 分营自由的腐生生活或共生，无致病性，只 有一小部分可引起人和动物的疾病。
形态与结构
螺旋体细胞呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有多 个完整的螺旋。其大小 (尤为长度)极为悬殊， 长可为5～250μm，宽可为0.1～3μm。某些螺 旋体可细到足以通过一般的细菌滤器或滤膜。
第十六章 螺旋体 （Spirochaete）
第一节 概述
螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活 泼运动的原核单细胞微生物。
螺旋体在生物学上的位置介于细菌与原虫之间。它与 细菌的相似之处是：具有与细菌相似的细胞壁，内含 脂多糖和胞壁酸，以二分裂方式繁殖，无定型核（属 原核细胞），对抗生素敏感；与原虫的相似之处有： 体态柔软，胞壁与胞膜之间绕有弹性轴丝，借助它的 屈曲和收缩能活泼运动，易被胆汁或胆盐溶解。在分 类学上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。
第3节 短螺旋体属 （Brachyspira）
有2～4个规则螺 旋弯曲，22℃下呈屈曲 和 短 运 动 ， 37-42℃ 呈 移位移动。
对人和动物致病的 有多种，其中常见的猪 痢短螺旋体。
猪痢短螺旋体 （B. hyodysenteraie）
猪痢短螺旋体曾命名为猪痢 疾密螺旋体、猪痢疾蛇形螺 旋体，存在于猪的病变肠段 粘膜、肠内容物及粪便中。
致病性
所致疾病：钩端螺旋体病，为人畜共患传染 病，多宿主（鼠和猪为主），传播途径有：
♦人与污染水或土壤接触 ♦黏膜或皮肤侵入（水浸泡或损伤） ♦消化道黏膜（污染食物/饮水） ♦胎盘垂直传播 ♦吸血昆虫
致病性
人易感。 家畜中，牛羊最易感，其次为马、猪、犬、
水牛和驴等，家禽不易感。 先形成钩体血症，损伤全身毛细血管内皮细
防治
预防：加强性卫生教育和严格社会管 理。
治疗：梅毒确诊后，宜用青霉素等药 物及早予以彻底治疗。
治疗原则：早期，足量，正规。
第5节 钩端螺旋体
（Leptospira）
钩端螺旋体属又称为细螺旋体属，是一大类 菌体纤细、螺旋致密，菌体一端或两端弯曲 呈钩状的螺旋体，因而简称钩体。
-问号状钩端螺旋体（L. interrogans） -双曲钩端螺旋体（L.biflexa）
细胞的螺旋数目、两螺旋间的距离 (即螺距)及 回旋角度 (弧幅)各不相同，在分类上可作为一 项重要指标。
形态与结构
螺旋体的细胞中心为原生质柱，外有2～100 根以上的轴丝，又称轴鞭毛或内鞭毛，现亦 简称为鞭毛，沿原生质柱的长轴缠绕其上。 原生质柱具有细胞膜，膜外还有由细胞壁和 黏液层构成的外鞘，轴丝则夹在外鞘和细胞 膜之间。
硬 蜱 （ Ixodes ） 为 传 播媒介，啮齿动物和鹿 是天然贮主。
在美国主要是肩突硬 蜱和太平洋硬蜱，在欧 洲主要是蓖子硬蜱，我 国北方林区主要是全沟 硬蜱。
微生物学检查
显微镜观察：暗视野、姬姆萨氏染色 分离培养：比较困难 血清学检测：
ELISA IFA PCR
防治原则
疫区人员加强个人防护，避免硬蜱的叮咬。 灭活疫苗于1992年获准在美国家犬中使用。 人用重组蛋白疫苗（OspA、OspC）正在临床 试验中。 早期莱姆病可口服四环素、强力霉素、阿莫 西林及红霉素等。 晚期莱姆病由于多种深部组织损害，故一般 用青霉素联合头孢三嗪等静脉滴注。
螺旋体的轴丝的超微结构和某些化学特性与 细菌鞭毛相似，不同之处在于:轴丝始终缠绕 于细胞体，而且全都位于细胞内，并被外鞘 所包围。螺旋体通过轴丝而运动。
染色特性
都是革兰氏阴性，但大多数不易着色，故很少 应用。姬姆萨氏染色效果较好，可使其染成红 色或蓝色。染成蓝色者一般多属腐生性螺旋体。 常用镀银染色法染色，染液中金属盐黏附于螺 旋体上，使之变粗而显出黑褐色。也可用印度 墨汁或刚果红与螺旋体混合负染，螺旋体透明 无色，背景衬有颜色，反差明显。以相差和暗 视野显微镜观察螺旋体效果良好，既能检查形 体又可分辨运动方式，较为常用。
1985年我国在黑龙江省林区首次发现莱姆 病，迄今已在十多个省市分布。
主要生物学特性
（一）形态染色 菌体细长，有4～20个大而宽疏的螺旋。
Giemsa或Wright染色均佳。
Wright染色
革兰氏染色
（二）培养特性
BSK培养：该培养基含长链饱和与不饱和脂 肪酸、氨基酸、牛血清白蛋白及热灭活兔血 清等丰富的营养物质。
♣ 需氧或微需氧；
♣ 在人工培养基中生长缓慢。
抵抗力
对热和偏酸偏碱环境抵抗力弱，60℃10 s即死亡。
对青霉素、金霉素、四环素等敏感。 在酸碱度中性的湿土或水中可存活数月。