绵羊红细胞悬液制备方法(2%,4%)

南京森贝伽生物科技有限公司

绵羊红细胞制备方法

一、目的

规定绵羊红细胞制备方法，以及外购绵羊红细胞的管理办法，指导操作人员实验操作，保证检验结果的正确性。

二、适用范围

适用于实验使用的4%以及各浓度绵羊红细胞的制备。

三、材料和设备

3.1生理盐水：即0.85%氯化钠溶液，取氯化钠8.5g，溶解于1000ml纯化水即得。

3.21ml或2ml,5ml一次性注射器，冰箱等

3.3阿氏液：自配

四、操作流程

4.1绵羊血采集：采用颈动脉采血法。

4.1.1先将绵羊固定，剪去颈部位置的被毛。

4.1.2压迫绵羊，让其血管扩展以确定下针部位，对该部位使用75%酒精消毒。

4.1.3预先吸入约1~2ml阿氏液于5或10ml注射器中，实验者手持有针头的注射器，在血管凸起位置扎针，血液自动进入注射器。

4.1.4一般情况下，一只成年绵羊可采血250-500ml血，且注意抽血时一定要缓慢。采完后要压迫止血。

4.2绵羊血保存：外购绵羊血按照供应商推荐的保存条件及有效期。自采绵羊血与阿氏液混匀，置入15ml离心管中，在2~8℃保存，有效期二周。

4.3绵羊红细胞制备：使用前处理绵羊血，步骤如下：1500rpm离心5min，弃去上清液。加生理盐水至15ml，摇匀，1500rpm离心5min，弃去上清液，重复两次，最后一次离心10分钟。用无菌生理盐水配制成2%或实验所需绵羊红细胞悬液即得，置2~8℃备用，有效期7天。