肌酐-(肌氨酸氧化酶法)试剂盒-新word版本

肌酐测定标准操作程序

1. 摘要

肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

2. 适用范围

程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。

3. 职责

使用AU5811自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法

上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。

5. 原理

上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：

O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222

222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素

肌氨酸肌酸肌酸

肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.

6. 仪器

AU5811自动生化分析仪

7. 试剂

7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供

7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、

ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林

7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为

12个月。试剂不可冰冻。

7.4 试剂准备：试剂为即用式。

8.标准品和质量控制

8.1校准程序：使用科华公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。按照公司标准品使

用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》

8.5室间质评：分别参加河北省室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

9.标本

9.1 样本为新鲜无溶血现象的血清或24h尿液。24h尿液样本应按1：20用生理盐水进行

机外稀释；也可在仪器参数中选择尿液样本参数，让仪器自动稀释。样本于4℃保存，可稳定7天。

9.2标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请

单不符状况，一律要求重新留取标本。

9.3标本处理：收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。

10.测定程序

10.1分析参数：详见参数表。

10.2操作步骤：签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。

10.3获取结果：在AU5811仪器上或AU5811传送的中文系统电脑上查找相应结果。

10.4结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。可报告的

结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。

11.计算

标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。无需手工计算，每个标本的结果自动打印

12.废液处理

参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。

13.操作性能

13.1可报告范围：本法对CREA检测范围为0~8840μmol/L。

13.2特异性/干扰：当样品中VC≤1g /L，胆红素浓度≤684mg/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，

甘油三酯≤20mmol时对测定结果的影响可忽略。

13.3灵敏度：测定本试剂盒内所附标准液（265μmol/l）, 其吸光度应在0.050～0.20A之间。

13.4精密度:批内：CV≤6％。批间相对极差：≤6％。

14.注意事项

14.1试剂盒仅用于体外诊断。测定结果仅作为相关疾病的临床诊断依据。

14.2 血清等标本有些可能含有感染性成份，因此应以具有感染危险性而充分注意操作。

14.3 试剂盒中含有防腐剂叠氮钠，切勿吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。如不慎接触，

应用大量清水冲洗。如误服，应立即上医院诊治。

15.参考值

血清和血浆：男：70～115μmol/L (0.8～1.3mg/dl)；

女：44～80μmol/L（0.5～0.9mg/dl）；

24h尿液：男：7000～18000μmol/24h；

女：5300～16000μmol/24h；

各实验室应建立自己的参考值范围。

16.临床意义

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

人体中的肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾小管排泄，在肾脏疾病初期，血清肌酐值通常不升高，直至肾脏实质性损害，血清肌酐值才增高。所以，血肌酐测定对诊断晚期肾脏病临床意义较大。

血清肌酐水平随人的年龄，体重和性别而变化。有时它在肌肉块少，恶病质的病人，截肢者和老年人中的水平较低。血清肌酐水平正常并不排除肾功能受损。

17.支持性文件

17.1AU5811自动生化分析仪使用说明书。

17.2 AU5811自动生化分析仪分析参数。

17.3上海科华生物工程股份有限公司提供的试剂说明书。

18.参考文献