苦味酸法测定血清肌酐

九、方法学评价
1.化学法：即苦味酸法，该法成本低廉，方法简便， 但试剂具毒性和腐蚀性。
2. 酶法：准确度和灵敏度高，采用两点速率法，适 合于自动生化分析仪检测。
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2020/1/21
一、实验目的
1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。
二、实验原理
在碱性条件下，血清中的肌酐（Cre） 苦味酸反应，生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。 检测505nm波长处吸光度的变化，可知被测血 清中的肌酐的浓度。其反应式如下：
肌酐+碱性苦味酸 OH- 红色物质
混匀后，37度水浴箱放置，2分钟后，波长505nm处，空白管调零，
先读取S1、U1吸光度，5分钟后再读取S2、U2吸光度。
六、计算
血清肌酐（mmol/L）= ΔAU/ΔAS×133μmol/L
参考区间：男性：62-115μmol/L 女性：53-97μmol/L
七、注意事项
1.血标本无溶血，应及时处理。 2.工作液开盖混合后，应置2-8度避光保存，稳定期3天 。
加入物（ml） 空白管
标准管
S1
S2
测定管(U) U1 U2
血清
——
—— —— 0.15 0.15
133μ mol/L肌酐
标准应用液
——
0.15 0.15 —— ——
生理盐水
0.15
—— —— —— ——
R1
0.75
百度文库
0.75 0.75 0.75 0.75
R2
0.75
0.75 0.75 0.75 0.75
实验五 苦味酸法测定血清肌酐
肌酐（CRE）是人体内肌酸代谢的最终产物， 由肾排出，少部分来自食物，大部分在体内生成， 血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型：肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基 水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。
三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
三用水浴箱
可见分光光度计
四、试剂
1.试剂：R1：氢氧化钠

R2：苦味酸
工作液：将R1与R2按1：1的比例混合面成。
2.肌酐标准应用液(133μmol/L)
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五、操作步骤
取试管5支，按下表操作
八、临床意义
肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾 小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时，Scr才明 显上升，是反眏GFR减退的后期指标。 增高：见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退：各种 肾病，急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎 等。 降低：见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血等