溶血的检验ppt课件

二、参考范围：健康人：阴性。
三、临床意义：阳性主要见于PNH，敏感度较低，有 30%以上患者呈阴性反应。自身免疫性溶血性贫血发作 严重时可呈阳性。
蔗糖溶血试验
一、原理：根据PNH患者的红细胞，在低离子强度的蔗 糖溶液中对补体敏感性增强，经孵育后可使补体与红细 胞膜结合加强，蔗糖溶液进入补体敏感的红细胞内，导 致渗透性溶血。
参考范围：健康人为阴性。
应用评价：Rous试验阳性提示慢性血管内溶血，尿中有 铁排出，无论有无血红蛋白尿，只要存在慢性血管内溶 血如PNH，本实验即成阳性，并可持续数周，但在溶血 初期，虽然有血红蛋白尿，上皮细胞内尚未形成可检出 的含铁血黄素，此时本实验可呈阴性反应。
尿卟啉检测
实验原理：尿中卟啉类物质在酸性条件下，经乙醚提取， 于405nm处显红色荧光，从而可对尿卟啉进行定性检测。
参考范围：半寿期25-32天
应用评价： 1.溶血性贫血：红细胞寿命缩短，约为14天。
2.再生障碍性贫血：红细胞寿命缩短，约为15-29天。
血浆游离血红蛋白检测
原理：血红蛋白可催化过氧化氢释放新生态氧，使邻苯 氧化为蓝紫色。根据显色深浅，与同时测定标准血红蛋 白液对照，可测出血浆游离血红蛋白的量。
参考范围：0-40mg/L
应用评价： 1.明显增高是判断血管内溶血的指征。蚕豆病、PNH、
冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、溶血性输 血反应等明显增高；自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生 成障碍性贫血可轻到中度增高。 2.血管外溶血、红细胞膜缺陷不增高。
尿含铁血黄素试验
实验原理：尿含铁血黄素试验又称Rous试验。当血红蛋 白通过肾滤过时，部分铁离子以含铁血黄素的形式沉积 于上皮细胞，并随尿液排出。尿中含铁血黄素是不稳定 的铁蛋白聚合体，其中的高铁离子与亚铁氰化钾作用， 在酸性环境下产生普鲁士蓝色的亚铁氢化铁沉淀。尿沉 渣肾小管细胞内可见直径1~3um的蓝色颗粒。
二、参考值：定性试验：正常为阴性；定量试验：正常 溶血率<5%.
三、临床意义： PNH患者为阳性或溶血率增加，可作为PNH的筛选试验。
部分自身免疫性溶血性贫血患者可为阳性，白血病、骨 髓硬化时可出现假阳性。
抗人球蛋白试验
一、原理：抗人球蛋白试验（Coombs试验）检测自身免疫性溶血 性贫血的自身抗体（IgG）。分为检测红细胞表面有无不完全抗体的 直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间 接抗人球蛋白试验（IAGT）。直接试验应用抗人球蛋白试剂（抗 IgG、IgM、IgA和（或）抗C3）与红细胞表面的IgG分子结合，如果 红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。目的是检查红细胞表面 的不完全抗体。间接试验应用Rh(D)阳性O型红细胞与受检血清混合 孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白 血清，可出现凝集。
酸化血清溶血试验
一、原理：酸化血清溶血试验，也称Hamtest。阵发性睡 眠性血红蛋白尿症（PNH）患者体内存在对补体敏感的 红细胞，即红细胞在酸性（pH6.4～6.5）的正常血清中 孵育，补体被激活，PNH红细胞破坏而产生溶血。而正 常红细胞不被溶解，无溶血现象。如血清经56℃加热30 分钟，使补体灭活，患者红细胞即不被溶解。
二、参考范围：健康人直接和间接抗人球蛋白试验均阴性。
三、临床意义：
自身免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性溶血和血型不合引起的 输血反应、药物性免疫性溶血、冷凝集素综合征、阵发性冷性血红 蛋白尿等直接抗人球蛋白试验阳性，当抗体与红细胞结合后，有过 剩抗体时直接和间接试验均阳性。
红细胞寿命测定
原理：红细胞寿命测定将标记放射性核素的红细胞注入 血循环后，逐日观察其消失率，记录成活曲线，计算出 红细胞寿命。
参考范围：健康人呈阴性。 应用评价： 1.增加 主要见于先天性红细胞生成型卟啉病、迟发性皮
肤型卟啉病、肝红细胞生成型卟啉病等。 2.卟啉类化合物检测对研究血红素代谢障碍有重要意义，
除卟啉病外，对缺铁性贫血、铅中毒、铁粒幼细胞贫血 和珠蛋白生成障