分光光度计测量误差来源浅析

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分光光度计测量误差来源浅析

于测量过程的各个方面,我认为主要来源于仪器本身性能和测量条件的选

择两个方面。

1仪器本身性能带来的误差

1.1复色光对比耳定律的偏离

比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光,但是精度再高的仪器,即

使是双单色器的分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,

它仍然含有狭窄光通带,具有复色光的性质。而复色光会导致比耳定律的正或

负偏离。固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm,可调狭缝的可以做到0.Inm;可见分光光度计带宽6nm、snm,甚至十几纳米。光谱带宽应

该是越小越好,但是随着光谱分辨率的提高,仪器的灵敏度降低,所以选择仪

器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时,可近似认

为符合比耳定律。

1.2杂散光的影响

杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的主要来源。产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处,由于单色器透

光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显著。杂散光

限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差,实际工作中,在定量分析时,一

般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度,如果在分析波长处含有杂散光,这时

样品的透光率较小,而杂散光大部分透过,使测量吸光度低于真实吸光度。

1.3仪器噪声对测t的影响

仪器噪声也是仪器的一个重要指标,它表征仪器做稀溶液的能力。是叠

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