生化检验项目校准知识分享
生化检验知识点归纳总结
生化检验知识点归纳总结一、生化检验的基本原理1. 生化检验的定义：生化检验是通过对人体的生化物质进行定量或定性的分析，以达到对体内生化状态和功能的了解的一种检验方法。
2. 生化检验的基本原理：生化检验是通过测定人体内的生化物质，如葡萄糖、蛋白质、脂类、酶等物质的含量和活性，以及相关代谢产物的浓度来反映体内生化过程的变化，为疾病的诊断、鉴别诊断和疗效监测提供重要的实验依据。
二、常用指标及其临床意义1. 血糖：血糖是人体内最主要的能量来源，其测定对糖尿病、甲状腺功能异常、妊娠、垂体功能异常等有重要的临床意义。
2. 肝功能指标：包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白、谷氨酰转肽酶等指标，可以反映肝功能的变化，对肝炎、肝硬化、药物中毒等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
3. 肾功能指标：包括肌酐、尿素氮、尿酸、血尿酸、尿蛋白、尿微量白蛋白等指标，可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能的变化，对肾炎、肾结石、肾功能衰竭等疾病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。
4. 血脂指标：包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标，可以反映血脂代谢的变化，对高血脂症、动脉粥样硬化等疾病的诊断和鉴别诊断有重要意义。
三、常见的生化检验项目1. 血清蛋白电泳：通过电泳分离血清蛋白，以及对蛋白的定量和鉴定，可以对免疫性疾病、肝病、肾病、恶性肿瘤等疾病进行诊断和鉴别诊断。
2. 血清肝功能指标：主要包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标的测定，用于评价肝细胞功能和肝细胞损伤的程度。
3. 血清肾功能指标：主要包括肌酐、尿素氮、尿酸、尿微量白蛋白等指标的测定，用于评价肾小球滤过功能和肾小管功能的变化。
4. 血清电解质及酸碱平衡指标：包括钠、钾、氯、钙、镁、磷酸盐、二氧化碳结合力等指标的测定，用于评价电解质的平衡和酸碱的调节功能。
四、生化检验的标本采集与储存1. 血液标本采集：在采集静脉血时一定要选择适当的静脉针头，遵循正确的穿刺技术和取血流程，尽量避免静脉内血栓的形成，尽量避免血细胞破裂。
生化校准方案
生化校准方案一、背景介绍在生化实验过程中，为了确保仪器的准确性和可靠性，需要进行生化校准。
本文将介绍一个生化校准方案，以保证实验结果的准确性。
二、实验材料和仪器本实验所需材料和仪器如下：1. 校准血液样本2. 动脉血气分析仪3. pH校准液4. 电解质标准液5. 血糖标准液6. 酶标仪7. 读板仪或分光光度计三、实验步骤1. 动脉血气分析仪校准a) 确保动脉血气分析仪处于正常工作状态。
b) 使用pH校准液对仪器进行初始校准，调整pH值至标准值。
c) 使用电解质标准液对仪器进行电解质校准。
2. 血糖测定仪校准a) 确保血糖测定仪处于正常工作状态。
b) 使用血糖标准液进行初始校准，调整血糖测定仪的读数。
c) 检查仪器的准确性，并对照标准曲线检测测定结果。
3. 酶标仪校准a) 确保酶标仪处于正常工作状态。
b) 使用校准曲线测定标准品，根据标准曲线调整酶标仪的读数。
c) 对未知样本进行测试，根据标准曲线计算浓度。
4. 读板仪或分光光度计校准a) 确保读板仪或分光光度计处于正常工作状态。
b) 使用校准标准溶液进行初始校准，调整读数至标准范围。
c) 对待测样本进行测试，记录读取的吸光度值。
四、数据处理与分析1. 校准数据处理在校准过程中，记录每次校准的数据，包括校准前和校准后仪器读数，校准液的浓度等信息。
2. 校准曲线绘制根据校准数据，绘制相关的校准曲线，以用于后续样本测定结果的计算。
3. 样本测定与结果分析使用校准后的仪器对待测样本进行测定，根据校准曲线计算出样本浓度或吸光度等结果。
根据实验要求进行数据分析和结果判断。
五、实验注意事项1. 严格按照实验步骤操作，确保校准过程的准确性。
2. 注意使用标准溶液和校准曲线进行仪器的校准，确保后续实验结果的可靠性。
3. 校准结果应准确记录，包括校准前后的仪器读数，校准液的浓度等信息。
4. 注意实验室安全，遵守相关实验操作规范和仪器操作说明。
六、总结生化校准方案是确保实验结果准确可靠的关键步骤。
演示文稿生化检验项目校准
logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过
，出现“校准失败”的报警。 试剂参数为：Primary wavelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
（优选）生检验项目校准
校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
生化检验之校准
生化检验之校准1、校准（Calibration）的定义在一定条件下的一系列操作来确认检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准量值之间的关系。
包括校准和校准验证两个方面。
2、校准的意义确保检测系统的检验结果在规定的报告范围内的稳定性和可靠性。
3、校准方法1)、线性（Linear）法：①、1点线性法（K系数法）：通过测定空白液（或第1标准液）的吸光度和输入的K值而得出工作曲线。
②、2点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
③、多点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准或第6标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
④、同工酶法（线性法）：检测的样本中含有两种不同的同工酶，如果含有抑制剂的试剂不能完全抑制对检测有干扰的同工酶活性。
采用同工酶法进行校准，可测定同工酶的总活性（同工酶P）和所检测同工酶的活性(同工酶Q)。
2）、非线性法：①、Logit-log3P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
“P”表示参数(parameter)之意，由3个参数（S1Abs、K、a）参与计算。
注：S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜率，a表示近似常数。
②、Logit-log4P法：对数函数法中的一种，同样适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
由4个参数（S1ABS、K、a、b）参与计算。
③、Logit-log5P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束较明显的工作曲线。
因该方法由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算，而使结果更加精确。
④、指数函数法（Exponential）：该方法的工作曲线随着浓度的升高而吸光度出现离散的趋势。
由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算。
⑤、样条函数法（Spline）：是将每一标准液测定的吸光度值连接起来（点对点），形成一个完整曲线，即为曲线拟合。
生化检验项目校准
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。 冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。 应按厂家提供说明书操作。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准后的验证
•校准后用校准品当样本进行测试，看其值与定值 之间的差异 •测定室内质控，看结果是否在控。 •参加室间质评或返测已知浓度的室间质评样本。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
•记录每次校准结果，与之前的校正结果进行比较。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
生化检验项目校准
泸州市人民医院
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准：在规定条件下，为确定测量仪器(或 测量系统)所指示的量值，或实物量具(或参考 物质)所代表的值，与对应的由标准所复现的量 值之间关系的一组操作。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
仪器的性能验证：
• • • • • • • • • 零点漂移 波长准确度及重复性 杂散光 吸光度正确度 吸光度重复性 吸光度线性误差 交叉污染率 温度正确度 比色杯间差距
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍 稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准 顺利通过，结果如下：
生化检验项目校准
0 umol/L
umol/L 33 umol/L
• 如果测量方法的反应信号与被测量浓度不成线性反应（如免 疫分析方法），则应选用非线性校准模式，需涉及3至6个校 准品，采用曲线拟合、多项式、对数等方式建立非线性函数。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试剂生产厂家给出的 k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳定性等通过校准品 校准后得到的K值。
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出样本，置室温 （18-25）℃下平衡，使之完全融化，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室温（18-25）℃下 平衡，并放置在水平桌面上，轻拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该 小瓶底部，小心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确加入 规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温下使之完全溶解，温和 混匀。 应按厂家提供说明书操作。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作范围。 • 个数要与仪器要求相匹配
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过，出现“校准失败”
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点终点法，两点速率 法，多点速率法。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线），一般只需一个 校准品进行校准。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
生化分析仪的校准
(三)、 校准方法
例如日立(Hitachi)系列您必须购买宝灵曼 (Boehringer)的试剂及其校准的说明书设置 参数，用c.f.a.s.校准血清进行校准，即可获 得各项目的校准K值，同时观察一下各项目 测定时反应进程图，检查各项目参数设置 是否在最佳位置，如不在最佳位置应予以 重新设置并测定。此时得到的K值即为准确 的校准K值.
证分析仪能够正常运行的重要手段。 分析仪要严格根据操作手册的要求 进行维护，一般包括每天维护、每 周维护、每月及不定期维护等几方 面。
1．每天维护
①清洗样品针，试剂针，特别是
搅拌棒容易缠上纤维蛋白，是最 常见的交叉污染源. ②管路清洗.
2．每周维护
①执行比色杯清洗程序对比色杯进行
清洗。(南京产分析仪要求每天清洗)这 是由于比色杯经过反复使用后，会在 比色杯内壁附有用常规方法难以彻底 冲洗的物质，这些物质会引起交叉污 染，通过使用专用的反应杯清洗剂能 比较彻底地对这些附着物进行清洗。
准品； 2.如有可能，校准品应能溯源到参考方 法或/和参考物质； 3.对不同的分析项目要根据其特性确立 各自的校准频率。”
对于一个临床检测项目，如果所用方
法的测定原理、试剂、仪器、校准品 中任何一个不同，都可能得到不同的 测定结果。如果我们想要得到准确可 靠的测定结果，而该结果又具有与其 他实验室的可比性.就应该自己建立一 个标准测定系统.
生化分析仪的校准和维护
普陀区人民医院 陈友土
一、 生化分析仪校准
(一)、 认识校准的重要性和必要性:
首先必须明确生化分析仪不论如何 先进，它还是一个比较器，它测试出 来的标本结果是随着标准限的设置不 同而变化的。卫生部临床检验中心明 确指出:对测定标本的仪器一定要求 进行校准.
生化检验知识点总结
生化检验知识点总结一、生化检验概述生化检验是临床医学中一项重要的检验手段，通过对患者血液、尿液、体液等样本进行化学成分和功能状态的检测，可以帮助医生判断疾病的诊断、疾病的发展和治疗效果，为临床诊断和治疗提供重要的参考依据。
二、生化检验的临床意义1. 疾病的诊断：生化检验可以帮助医生确定患者是否患有某些疾病，如心脏病、糖尿病、肝病、肾病等。
2. 疾病的分析：通过生化检验可以分析患者的病情，了解疾病的类型、程度以及影响范围，有助于医生制定治疗方案。
3. 治疗效果的评估：生化检验可以评估治疗效果，了解患者是否已经康复，是否需要调整治疗方案。
4. 预防和健康体检：生化检验可以帮助人们及早发现潜在的健康问题，预防疾病的发生。
三、生化检验的常见项目生化检验的常见项目包括血液生化指标、尿液生化指标、体液生化指标等。
1. 血液生化指标（1）血糖：血糖是人体能量的重要来源，血糖的检测可以帮助医生诊断糖尿病、低血糖等疾病。
（2）肝功能：肝功能指标包括谷草转氨酶、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素等，可以反映肝脏的功能状态。
（3）肾功能：肾功能指标包括肌酐、尿素氮、尿酸等，可以反映肾脏的排泄功能和肾小球滤过功能。
（4）血脂：血脂指标包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等，可以反映血液中脂质的代谢状况。
2. 尿液生化指标（1）尿酸：尿酸是人体代谢产生的一种废物，尿酸过高可以导致痛风等疾病。
（2）尿蛋白：尿蛋白可以反映肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能的异常。
3. 体液生化指标（1）血清蛋白：血清蛋白是人体液体中的一种重要成分，可以反映患者的蛋白质代谢状态。
（2）电解质：电解质包括钠、钾、氯等，可以反映患者的酸碱平衡和水盐代谢状态。
四、生化检验的常见异常及意义1. 血糖异常：血糖异常可以导致糖尿病、低血糖等疾病，严重影响患者的生活质量和健康状况。
2. 肝功能异常：肝功能异常可以导致肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，严重影响患者的生活质量和寿命。
生化分析仪的校准
72
4.18
29.8 -2.68
63
0
42
1.79
ALB
T 偏差%
29
0
24
2.08
34.8 -5.17
33.7 -5.04
40.8 3.88
26.9 5.98
46.7 -4.18
29.8 -2.76
39
1.28
27
0
UREA
T
偏差%
5.0
4.5
19.3 -5.76
8.96
0.45
24
-6.77
7.67
现就生化分析仪的校准问题提 出个人看法。
一、校准的重要性和必要性 首先必须明确生化分析仪不论如何先进， 它还是一个比较器，它测试出来的标本 结果是随着标准限的设置不同而变化的。
二、确立仪器标准测定系统的概念
对于一个临床检测项目，测定系统包括测定原 理、试剂、仪器、校准品四要素。在全自动生 化分析仪上使用配套的试剂和标准品，即日立 7170使用Roche的试剂和校准品（c.f.a.s），在 贝克曼CX-7生化分析仪上使用贝克曼的试剂和 校准品等。各仪器厂家均有自己的标准测定系 统。对于校准品不能乱用，如：绝对不能用贝 克曼的校准品校准日立生化仪，同样也不能用 宝灵曼的校准品去校准贝克曼生化仪。
表 日立7170、Roche试剂每天进行校准(n=81)K值变化
TG Chol Glu Ca CK GGT Mean 1172 1449 1744 592 3864 2603
SD 16.9 17.4 18.1 56.8 61.1 67.9 CV% 1.4 1.2 1.0 9.6 1.6 2.6
生化检验项目校准—盐城市第一人民医院左月媛
• 符合朗伯比尔定律用包括水空白在内的两 点校准 • 抗原抗体及乳胶增强反应用多点校准
这是不同批号空白OD值
• 所选5个项目为水空白与校准品两点线性校 准
校准包含哪个浓度范围？ 应指多点法，范围为线性范围
校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。
校准范围也定义为分析方法的工作范围。
CV% 0.038 0.160
ALT不同批号校准品
校准品批号 均值 4855.48 5034.18 5074.58 5042.28 次数 106 98 42 91 CV 3.46 4.28 3.91 2.90 2.44 4.08
111(98U/L)
112(87U/L) 113(85.1U/L) 114(90.1U/L)
溯 源 二级标准品 厂家方法 校 准 品
校 准
常规分析
常规实验室校准（calibration）应做的是
1. 在规定条件下，为确定测量仪器(或测量系统)所指示 的量值，或实物量具(或参考物质)所代表的值，与对应的由 标准所复现的量值之间关系的一组操作。 校准结果可以记录在校准证书或校准报告中。 2.校准品应有溯源性（traceability）通过一条具有规定 不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能 够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起 来的特性。
校准过程需要讨论的其他问题
• 人员因素 人员应相对固定
• 科领导是否对校准重视 • 有无制定校准SOP
制定的校准SOP太简单，甚至有错误； 只有校准SOP，无记录或审核要求； 无校准出问题的纠正措施文件和记录，以及评审与改正 的措施； 能否严格要求技术人员执行SOP。
• 为什么用校准品后得到的K值与理论K值不一致？
生化检验之校准
生化检验之校准1、校准（Calibration）的定义在一定条件下的一系列操作来确认检测仪器和检测系统所指示的量值，或者某一物质，或者参考物质代表的值，与相应标准量值之间的关系。
包括校准和校准验证两个方面。
2、校准的意义确保检测系统的检验结果在规定的报告范围内的稳定性和可靠性。
3、校准方法1)、线性（Linear）法：①、1点线性法（K系数法）：通过测定空白液（或第1标准液）的吸光度和输入的K值而得出工作曲线。
②、2点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
③、多点线性法：通过空白液（或第1标准液）和标准液（第2标准或第6标准液）浓度与吸光度之间的关系，采用线性回归法制成线性工作曲线。
④、同工酶法（线性法）：检测的样本中含有两种不同的同工酶，如果含有抑制剂的试剂不能完全抑制对检测有干扰的同工酶活性。
采用同工酶法进行校准，可测定同工酶的总活性（同工酶P）和所检测同工酶的活性(同工酶Q)。
2）、非线性法：①、Logit-log3P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
“P”表示参数(parameter)之意，由3个参数（S1Abs、K、a）参与计算。
注：S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜率，a表示近似常数。
②、Logit-log4P法：对数函数法中的一种，同样适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束的工作曲线。
由4个参数（S1ABS、K、a、b）参与计算。
③、Logit-log5P法：对数函数法中的一种，适用于随浓度的升高而吸光度表现为收束较明显的工作曲线。
因该方法由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算，而使结果更加精确。
④、指数函数法（Exponential）：该方法的工作曲线随着浓度的升高而吸光度出现离散的趋势。
由5个参数（S1Abs、K、a、b、c）参与计算。
⑤、样条函数法（Spline）：是将每一标准液测定的吸光度值连接起来（点对点），形成一个完整曲线，即为曲线拟合。
生化分析仪的校准
生化分析仪的校准
一、分类
生化分析仪的校准分为检测项目的校准和计量部门对仪器的计量学校准。
二、检测项目的校准
（一）临床实验室制定的仪器校准程序应包括：仪器和校准项目的校准方法、校准品的种类、校准品的来源、校准品的数量、校准间隔、校准验证等。
（二）校准品
（1）定义：校准品是含有已知量的待测物，用以校准该测定方法的数值，它与该方法及试剂、仪器是相关联的。
（2）作用：校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂等造成的系统误差。
则校准品最好为人血清基质，以减少基质效应造成的误差。
（三）校准频率
（1）不同的试剂、仪器对于校准的频率要求不一样，在实
际工作中，应该根据校准K值的变化决定校准的频率。
（2）下列情况必须进行校准：
①至少每6个月校准一次
②更换试剂批号
③重要仪器部件的保养维护和更换
④质控结果失控及其他纠正措施无效时
（三）校准验证
（1）通过无基质效应的，用参考方法定值的新鲜冰冻患者血清，将检测系统测定结果与参考方法定值相比较，实现检测系统的溯源。
（2）参加室间质评计划
（3）定值质控血清
（4）与公认的配套系统进行比较
三、计量部门对仪器进行的计量学校准
（一）由国家或相关部门检定或校准的自动生化分析仪应贴上标识，以表明其工作和校准状态，及下次校准的时间。
（二）生化分析仪需由国家计量或相关部门检定和校准是，内容包括：波长、反应温度、试剂和样本的加样精度、吸光度准确性、基线漂移等。
四、校准程序
（一）实验室应制定相应的校准程序，并记录每次的校准数据，包括校准时间、试剂空白、校准K值等，并从中找出校准规律，不断完善校准程序，使之更加实用和有效。
生化仪校准报告
生化仪校准报告1. 引言生化仪是一种用于测量生物样本中化学物质浓度的仪器。
为了确保测量结果的准确性和可靠性，校准是一个必要的步骤。
本报告旨在介绍生化仪的校准过程，并提供一个逐步的思路指导。
2. 校准前准备在进行生化仪校准之前，我们需要准备以下材料和设备：•校准液：根据生化仪的规格和要求选择合适的校准液。
校准液通常有已知浓度的化学物质。
•清洁布或纸巾：用于擦拭生化仪的传感器表面。
•手套和护目镜：确保进行操作时的安全。
3. 校准步骤3.1 清洁生化仪首先，戴上手套和护目镜，确保进行操作时的安全。
然后，使用清洁布或纸巾轻轻擦拭生化仪的传感器表面，以确保其干净无尘。
3.2 准备校准液根据生化仪的规格和要求，准备相应的校准液。
在校准液瓶上确认其浓度，并确保它处于有效期内。
3.3 设置生化仪打开生化仪的电源，并按照生化仪的说明书设置正确的参数和参数范围。
确保生化仪连接到电源和计算机等外部设备（如果需要）。
3.4 校准第一个通道将校准液倒入生化仪的第一个通道。
等待一段时间，直到生化仪稳定。
记录仪器显示的浓度值。
3.5 校准第二个通道将校准液倒入生化仪的第二个通道。
等待一段时间，直到生化仪稳定。
记录仪器显示的浓度值。
3.6 检查校准结果将生化仪显示的校准结果与校准液的已知浓度进行比较。
如果测量结果与已知浓度相差较大，可能需要重新校准或检查仪器是否存在故障。
3.7 定期校准为了确保生化仪的准确性和可靠性，建议根据生化仪的规格和要求，进行定期校准。
校准的频率取决于使用频率和仪器的稳定性。
4. 结论校准是保证生化仪测量结果准确性的关键步骤。
通过按照逐步思路进行校准，可以确保校准的正确性和效果。
定期校准是维持生化仪性能的重要措施，以确保测量结果的可靠性和一致性。
注意：本文档仅为校准的基本步骤和思路指导，具体的校准方法和细节可能因生化仪的型号和规格而有所不同。
请始终参考生化仪的操作手册和生产商的指导。
生化校准方法分析
• 基蛋生物 • 潘石
K因子法
• 理论k值：根据摩尔系数（）来计算。一般 试剂生产降价给出旳k值都属于此。
• 实测k值：是根据仪器目前旳实际状态，试 剂旳稳定性等因子数测得旳值。
• 校准k值：经过高质量校准直接校准得到旳 k值
• K因数法合用旳分析措施有一点终点法，两 点终点法，两点速率法，多点速率法。
• 双波长旳选择常见： • 血红蛋白在340nm和380nm波长吸光度相同， • 以NADH和NADPH作为测定底物或产物旳试验常
用340nm、380nm 340、405 ALP和GGT常用405nm、476nm TRINDER反应多选用520nm、600nm或550nm、
660nm 免疫比浊常用340nm、700nm等。
• 同一种项目相同旳试剂也可用不同旳措施进行测 定，在血清葡萄糖测定措施中，己糖激酶HK法旳 特异性高，分析措施中有一点终点法，两点终点 法，速率A法，有研究表白，三种分析措施中只 有两点终点法能扣除其光谱干扰（溶血、脂浊、 黄疸）旳影响，到反应终点旳第二点间仍能保持 相正确与校准曲线基本一致旳曲线，其吸光度差 值乃能保持原百分比，因而检测成果较正确。误 差较小，能很好地克服（溶血、脂浊、黄疸）取 得较精确旳成果。
• K=SV/TV & .1*10>6
• 线性两点法
• 非线性法：又称非直线性校准法 非线性法涉及logit-log法、指数函数法、样条函数法等措施
• Logit-log3p对数函数法中旳一种，合用于浓度升高而吸光度体现为收束旳工作曲线。 • P表达参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参加计算。S1Abs表达试剂空白，K表达校准所得
• 波长旳选择应根据吸收光谱曲线，选择特定反应 产物对吸光度吸收旳最高峰值时旳。波长为测定 波长及双单波长测定旳主波长。
七个要点保证您的生化结果准确无误
七个要点保证您的生化结果准确无误检验人可以说是“临床的侦察兵”，而生化检验又是检验工作的主要组成部分，每一项生化结果都将为临床的诊断、治疗及预后提供重要参考价值，因而如何保证高质量的生化检验结果很值得去思考。
笔者就个人的工作经验，作一些总结：1. 室内质控很关键室内质控是检测样本的前提，是保证检验质量的关键。
因此，开展常规项目的室内质量控制，绘制质控图和观察是否在控这些工作必不可少。
对于在控的项目，要了解该项目的质控值相对于靶值是偏高还是偏低，对于哪些接近2SD警告线的项目，更要重点关注，并在审核过程中应该予以纠正。
对于失控项目分析寻找失控原因，解决问题后重新测定质控品，再进行标本的检测，以此来监测检验系统的稳定性与精密度，要质控结果都在控的情况下，才可进行报告的审核工作，保证发出结果的可靠性。
由于室内质控只能检测结果的精密度，为增强结果准确性的判断，要积极参加室间质量评价活动，室间质量评价可以校正各参与实验室结果的准确性，使得各实验室间结果具有可比性，减少实验室内系统误差，同时也为同级医院结果互认提供依据。
2. 谨防检测方法学引起的“误会”相信有不少的同行都遇到过个别项目的结果是“0”值、负值或异常低值等，如果该项目用的是终点法，应考虑标本量是否太少或血清凝固，需重新处理标本进行测定；如果是采用速率法，要考虑是否是酶活力过高（ALT、AST、CK、LDH等可高出十倍以上不等）而导致反应底物耗尽，看该项目的动态反应曲线是否正常，注意有无提示数据报警，如LIMT0、LIMT1、LIMT2等，若有应使用减量稀释后再测。
另外一些项目由于方法学问题，可能会干扰其他项目测定。
如测定葡萄糖用的是氧化酶法的话，会对钾和磷有正干扰，MTB法测定钙对钾有负干扰。
检验CK-MB常采用的方法是免疫抑制速率法，会有CK小于CK-MB的出现，考虑是否由CK-MM或引起CK的抗原性改变引起的，对于CK-MM过高引起的可稀释后重测，如是CK引起的只能如实报告。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
冰冻产品的处理步骤：从-70℃或-20℃冰箱中取出 样本，置室温（18-25）℃下平衡，使之完全融化 ，温和混匀。
冻干产品的复溶步骤： 从冰箱中取出样本，置室 温（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，轻 拍小瓶，以确保所有物质已沉淀在该小瓶底部，小 心拔开胶塞，采用已校准的移液管沿瓶壁缓慢精确 加入规定体积的去离子水，压胶塞到原位后置室温 下使之完全溶解，温和混匀。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
logit-log4p对数函数法中的一种，适用于浓度升 高而吸光度表现为收束的工作曲线。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
样条函数法（spline）：是将每一标准液测定的 吸光度连接起来（点对点），形成一个完整曲线 ，即为曲线拟合。该曲线拟合优于折线法校准。
，出现“校准失败”的报警。 试剂参数为：Primary wavelength：340nm；
Secondary wavelength：700nm； Main read time：31-33； Blank read time：26-28； Sample volume：10ul； R1 reagent volume：185ul； R2 reagent volume：50ul； Calibration method：Spline； 校准品个数设置：3；
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
三、处理： 1. 分别对10umol/L、33umol/L的校准品进行对倍
稀释，得到5umol/L、16.5umol/L浓度的校准； 2. 把参数中校准品个数修改为：5； 3. 浓度设置修改为0、5、10、16.5、33umol/L。 4. 仍采用Spline定标模式重新进行校准，后校准
K因子法（+ -）： 理论k值：根据理论摩尔消光系数来计算。通常试 剂生产厂家给出的k值都属于。 实测K值：是根据仪器实测的摩尔消光系数来设置K 值 校准k值：是根据仪器当前的实际状态，试剂的稳 定性等通过校准品校准后得到的K值。
K因数法适用的分析方法有一点终点法，两点 终点法，两点速率法，多点速率法。
5、之后校准显示通过，质控在控，证明校准成功
四、分析： 1. 全自动生化分析仪的校准模式设置中均有线性或
非线性的选择。当我们对其进行设置时，会根据 试剂盒的反应原理选择合适的校准模式。 2. 通常情况下，常规的生化项目我们会选择线性模 式校准，而免疫比浊项目我们会选择非线性模式 校准。 3. 若选择线性校准，往往我们只需带一个校准品进 行两点校准即可。 4. 若选择非线性校准时，我们会带多个浓度校准品 进行多点校准。
校准品：含有已知量的欲测物，用以校准该测定 方法的数值，它与该方法、试剂、仪器是相关联 的。校准品的作用是为了减少或消除仪器、试剂 等造成的系统性误差。
最好为人血清基质，减少基质效应 仪器、试剂、校准品的配套性 如有可能校准品应溯源到参考方法或参考物质 要有明确的不确定度
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
线性校准（Linear）：其反应为线性（直线） ，一般只需一个校准品进行校准。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
非线性法：又称非直线性校准法 非线性法包 括logit-log法、指数函数法、样条函数法等 方法 Logit-log3p对数函数法中的一种，适用于浓 度升高而吸光度表现为收束的工作曲线。P表 示参数之意，由3个参数（S1Abs、k、a）参与 计算。S1Abs表示试剂空白，K表示校准所得斜 率，a表示近似常数。
顺利通过，结果如下：
Cal Factor 吸光度
0 umol/L 5 umol/L 10 umol/L
-87.2
-213.5
16.5 umol/L -279.6
33 umol/L -365.3
-0.0032 -0.0195 -0.0366 -0.0558 -0.0744
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
一级标准品
决定性方法
参考方法
溯
二级标准品
校
源
厂家方法
准
校准品
常规分析
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
项目校准主要涉及内容
• 校准方法的选择 • 校准品的选择及准备 • 校准频率的选择 • 校准后的验证 • 问题讨论
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准方法的选择
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
生化检验项目校准
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
仪器的性能验证：
• 零点漂移 • 波长准确度及重复性 • 杂散光 • 吸光度正确度 • 吸光度重复性 • 吸光度线性误差 • 交叉污染率 • 温度正确度 • 比色杯间差距
检测项目校准
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准目的是准确度的传递
应按厂家提供说明书操作。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准品浓度水平及个数选择 • 校准至少包含你需要报告结果的内容/范围。 • 校准范围也定义为分析方法的工作EOPLE’S HOSPITAL
案例分析
一、现象： 某品牌HCY试剂（仪器：雅培 C8000），校准无法通过
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
•logit-logXp与样条函数法
•抛物线型(左下图)，则多考虑用logic方法拟合。 •曲线类型不确定时，或校准曲线类型如图12-37所示 的S型非线性校准类型，则多考虑Splain方法拟合。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
校准品的选择及准备
浓度分别设置为：0、10、33umol/L。
LUZHOU PEOPLE’S HOSPITAL
二、了解情况： 查看校准结果，发现其每个浓度的吸光度实
际在该仪器上已做出测定，分别为：0：-0.0027 10：-0.0344 33：-0.0738，但参与最终结果 计算的Cal Factor（校准因数）却显示为0，说 明该仪器并未通过所测定的吸光度进行曲线拟合 ，故出现“校准失败”报警。