微生物学--细菌感染的病原学诊断

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第八章细菌感染的预防原则

(Medical Microbiology)医学微生物学第八章细菌性感染的病原学诊断和防治原则学习目标掌握掌握细菌性感染性疾病的病原学诊断方法和病原学防治方法。

简言之, 问自己的第6个问题,并能回答此问题。

Q1: 什么是细菌性感染？Q2: 哪些类型的细菌可导致细菌性感染?Q3: 细菌性感染从何而来？Q4: 细菌性感染为什么会发生？Q5:细菌性感染的结局是什么？Q6: 如何正确地诊断、防治细菌性感染性疾病？第二节细菌性感染性疾病的预防原则Etiological diagnosis of bacterial infectious diseases主要特点:●对传染病，预防应针对流行的三个环节进行●对一般的感染性疾病，预防主要是消毒和易感人群保护1. 传染病的预防原则●管理传染源：及时报告和合理治疗，临床医生的责任；捕杀或治疗动物传染源●切断传播途径: 不同途径的详细内容参见相关病原体章节隔离:针对不同传播途径, 采取相应的隔离措施消毒:对传染源所处的环境进行消毒; 消灭传播媒介; 预防性消毒(如饮水、牛奶等）●保护易感人群:非特异性预防: 加强锻炼、个人营养; 个人卫生和防护，避免暴露于传染源特异性预防: 疫苗接种2. 一般感染性疾病的预防原则●切断传播途径:消毒:对病原体存在的环境进行消毒; 消灭传播媒介; 预防性消毒(如饮水、牛奶等）●保护易感人群:非特异性预防: 加强锻炼、个人营养; 个人卫生和防护，避免暴露于传染源特异性预防: 疫苗接种3. 特异性预防: 人工主动免疫●人工主动免疫(artificial active immunization): 将病原菌的抗原性物质接种于人体,刺激机体的免疫系统产生特异性免疫应答,从而特异性预防相应细菌性感染性疾病的措施●预防接种(prophylactic inoculation)或疫苗接种(vaccination) :采用人工主动免疫的方法，以获得保护性免疫力4. 疫苗定义和类型●疫苗(Vaccine): 以病原微生物自身、组成成分或其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用生物技术等方法制成的用于预防和治疗疾病的生物制品●分类：死疫苗(killed vaccine)或灭活疫苗(inactive vaccine): 用物理或化学方法灭活病原微生物的纯培养物而制成的生物制品,无传染性或感染性,但保留免疫原性减毒活疫苗(attenuated live vaccine): 通过自然筛选或人工方法获得的病原微生物的减毒或无毒株,经纯培养后制备而成,无致病性但有繁殖能力类毒素:参见第七章多糖疫苗(carbohydrate vaccine): 提取纯培养细菌的荚膜多糖成分制备的生物制品联合疫苗:•多联疫苗:将预防多种疾病的疫苗原液按特定比例混合制成的具有多种免疫原性的生物制品•多价疫苗:将同一种细菌的不同亚型或血清型的抗原成分,合并组成一种生物制品,以预防该种细菌性感染性疾病。

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。

2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。

3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。

4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。

2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。

3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。

微生物感染的病原学实验室诊断分析前

清洁、快速、经济
自动化染色仪
手工染色
标准、清洁、安全
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
标本质量评估－痰涂片
Garbage in！！
有PMN的痰标本，且鳞状上皮细胞特别少=接受，进行培养
粘液丝
细胞内吞噬细菌
呼吸道标本的涂片评估模式
肺炎-可接受的
很少的鳞状上皮细胞 <10个每低倍视野很多的中性粒细胞
标本质量
脓痰
粘液样痰
唾液or诱导痰 (?)
带血痰
革兰氏染色
——所有微生物检验的开端
Gram Staining
What Am I ?
Gram -
Gram +
革兰氏染色的意义
• 1.判断标本的合格性； • 2.标本菌群初始状态的确立与培养条件的选择； • 3.致病菌的初步判断； • 4.与培养结果互相对照,提高检验准确性； • 5.初步报告，为临床快速药物选择和处理提供辅助意见；
采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低！
护士采样的标本类型：
– 尿液 – 粪便 – 痰和拭子 – 伤口分泌物 – 血培养 –……
采样人员应接受专门培训，严格参考微生物室提供的标本采集要求进行采样！
注意防止标本被污染或者造成患者机会感染！
标本采集的要求
• 1，在用药前采样；
• 2，按照采样规则要求，选择正确的采样部位、采样容器、及采样量；
手工染色方法
• 影响因素：
– 1，脱色时间； – 2，涂片的质量； – 3，干燥和固定 – 4，细菌菌龄、用药后等形态变异 – 5，染液沉渣； – 6，交叉污染； – 7，接触感染性标本，危险性试剂
应用特点

细菌与病毒的病原学检查法

抗原检测：
凝集试验、对流免疫电泳、酶免疫技术、免疫荧光技术
核酸检测：
1.核酸杂交技术:Southern印迹杂交、Northern印迹杂交、原位杂交
2.PCR技术 3.基因芯片 4.16rRNA基因序列分析：编码rRNA，保守区、可变区
三、抗体的检测（血清学诊断）
凝集试验：直接、间接、协同、冷凝集沉淀试验：环状、絮状、双向、对流电泳补体结合试验：酶联免疫吸附试验（ELISA）：
取双份血清，抗体效价比早期高4倍以上有意
义。
第二节病毒感染的微生物学检查法
一、形态学检查
1.电子显微镜检查
直接镜检法：107颗粒/ml，电镜观察病毒
颗粒的形态和结构
免疫电镜法（IEM）：
标本+特异性抗体病毒颗粒聚集电镜观察
轮状病毒的粪便、HAV、HBV的血清、疱疹病毒的疱疹液，可早期诊断。
三、病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标
细胞的变化：CPE 红细胞吸附（HAd）：红细胞凝集：病毒干扰作用：风疹病毒，埃可病毒,Vero细
胞。
中和试验（NT）：是病毒在活体内或细胞培
养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验
空斑形成试验：蚀斑形成单位（PFU），感染
性病毒的滴度用PFU/ml表示。
四、病毒成分的检测
血凝抑制试验
病毒+红细胞血凝现象
病毒+抗体+红细胞血凝现象消失
用于流感病毒、副流感病毒的诊断、流行病学调查及鉴定病毒的型和亚型。
ELISA法：HSV、CMV、EB病毒等
蛋白印迹技术：用已知病毒蛋白检测未
知病毒
病毒抗原的检测：HIV和HBV抗原
病毒核酸的检测

细菌性感染性疾病的诊断分级

细菌性感染性疾病的诊断分级感染性疾病的诊断可以分为拟诊断、极似诊断、确定诊断。

这种三级诊断的理念由来已久，1981年有文献对伤寒进行三级诊断。

近年来，分级诊断理念在病毒性疾病、真菌性疾病领域成为业界热点，已经成为真菌学领域指南的基本理念。

但在细菌学领域，三级诊断理念尚未形成普遍共识。

细菌学领域二级诊断已经被广为接受。

二级诊断包括拟诊断、确定诊断。

拟诊断指基于临床表现的诊断；确定诊断指在拟诊的基础上，有确定的微生物学证据的诊断。

因为启动微生物学检查的前提就是临床表现，所以感染性疾病领域中，很多时候确定诊断等同于微生物学确定诊断，如感染性心内膜炎等。

病毒学/真菌学领域在拟诊断、确定诊断之外，还有一个极似诊断(probable)。

极似诊断指两种情况：①临床表现不明确，但微生物学证据明确；②临床表现明确，但只有初步的微生物学证据。

后一种情况证据本身可信，但尚未明确微生物种属，或检查结果阳性预测值(PPV)略低，故曰初步。

注意病毒学领域的假设性治疗(presumptive therapy)，对应的诊断即极似诊断。

需要辨析probable的翻译，probable diagnosis 国内最常译作"临床诊断"。

但这个翻译不理想：英汉用词字面无对应，汉语用词容易混淆，英语里有时把拟诊断等同为临床诊断，即possible cases＝clinical cases[8]。

将probable 翻译为极似，虽略有改进，但也不理想。

实际工作中，如果明确"临床诊断"所指，如何翻译是次要问题。

如果不明，首先需要明确其根本含义，如何翻译仍是次要问题。

细菌学领域是否有三级诊断？细菌学领域极似诊断的证据是什么？现从病原学、疾病角度予以阐述。

一、病原学角度研究显示，以毒力质粒pPCP1和pMT1为扩增标靶的实时PCR检测结果，可以作为鼠疫耶尔森菌感染极似诊断层面的证据[9]。

在流感嗜血杆菌脑膜炎的诊断中，Kim等[10]将下列三种脑脊液检查证据都列为极似诊断层面证据，革兰染色、乳胶凝集试验、PCR。

微生物学知识点常见微生物感染的诊断与治疗

微生物学知识点常见微生物感染的诊断与治疗微生物学知识点常见微生物感染的诊断与治疗微生物感染是指人体被各种微生物引起的感染性疾病，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。

这些微生物感染可以引起各种不同的疾病，严重时可能导致生命危险。

为了有效地诊断和治疗这些感染，了解微生物学知识点是非常重要的。

本文将介绍常见微生物感染的诊断与治疗方法。

一、细菌感染的诊断与治疗细菌感染是最常见的微生物感染类型之一，细菌可以引起肺炎、腹泻、尿路感染等疾病。

首先，诊断细菌感染需要进行病原学检查，包括细菌培养和药敏试验。

细菌培养可以在实验室中培养出细菌，并鉴定其种类，药敏试验则可以测试细菌对不同抗生素的敏感性。

基于这些检查结果，医生可以选择合适的抗生素进行治疗。

常用的抗生素包括青霉素、阿莫西林、头孢菌素等。

二、病毒感染的诊断与治疗病毒感染是另一种常见的微生物感染类型，病毒可以引起感冒、流感、肝炎等疾病。

与细菌感染不同，病毒感染的诊断比较困难，通常需要采用分子生物学检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）检测病毒基因片段。

治疗病毒感染主要是针对症状进行对症治疗，如退烧、止咳等。

对一些病毒感染，如流感，也可以使用抗病毒药物，如奥司他韦。

三、真菌感染的诊断与治疗真菌感染可以引起皮肤感染、口腔念珠菌病等疾病。

诊断真菌感染主要是根据病变部位取样进行真菌涂片检查和真菌培养，可以确定感染菌株以及菌株的敏感性。

治疗真菌感染常使用抗真菌药物，如克霉唑、氟康唑等，可以口服或者局部使用。

对于一些顽固性真菌感染，也可以考虑使用静脉抗真菌药物。

四、寄生虫感染的诊断与治疗寄生虫感染包括疟疾、血吸虫病等，常见于热带地区。

寄生虫感染的诊断一般是通过血液检查，如血涂片或者血清学检测来确定感染。

治疗寄生虫感染常使用抗寄生虫药物，如氯喹、莫西沙星等。

治疗的同时，还需要注意症状的缓解和并发症的预防。

五、医院感染的诊断与防治医院感染是指在医疗机构中获得的感染，常与手术、留置导尿管等治疗操作相关。

微生物感染的病原学检查 PPT精品课件

急性、恢复期增高≥4倍有诊断意义 ☛ IgM:病毒感染早期
1.ELISA(间接法)
Ag+Ab?+抗球蛋白*+酶底物→显色
2. 蛋白印迹法（Western Blot）
病毒Ag→电泳(SDS-PAGE)→转移至硝酸纤维素膜→加Ab?→加抗Ab*→加底物→显色
3.血凝抑制试验
原理:
[病毒(HA)+Ab?]+RBC→血凝抑制
第二节病毒感染的微生物学检查法
☛ 病毒及其抗原检测显微镜观察分离培养与鉴定 Ab→Ag?
☛ 核酸检测 ☛ 特异性Ab检测
一、显微镜检查
1.电镜 /免疫电镜 2.光镜：
包涵体/ 多核巨细胞等
二、病毒的分离培养与鉴定
(一)动物接种
☛ 选敏感动物 ☛ 适宜途径
乙脑病毒→小白鼠脑内牛痘苗病毒→家兔角膜
☛ 观察发病情况 ☛ 标本检测
(二)鸡胚培养
☛ 选择胚龄/接种途径 ☛ 标本检测
绒毛尿囊膜10~13d
羊膜腔10~12d 卵黄囊5~8d 尿囊腔 9~11d
（三）组织培养(器官/组织/细胞)
1.细胞培养类型
(1) 原代细胞培养
动物/鸡胚/人胚组织 ↓剪碎/胰酶
单个细胞 ↓培养液
单层细胞(原代细胞) ↓胰酶
☛干扰现象:病毒1(风疹病毒 ) ？
↓先感染细胞（猴肾细胞） → CPE(-) ↑后感染病毒2 (ECHO病毒)
☛意义：可检查不引起CPE/血凝/血吸的病毒
（5）空斑形成试验（test of plaque formation）
稀释病毒→单层细胞 →覆盖一层营养琼脂 ↓37℃，3~5d 空斑
测定病毒数量：
微生物感染的病原学检查

【精品】医学微生物学复习考试论述题答案

第一章微生物基本概念【思考题】1．从形态结构、培养特性和致病性上，比较原核细胞型微生物、真核细型微生物和非细胞型微生物的主要区别。

（1）形态结构：原核细胞型微生物如细菌，只有原始核，由裸露的环状双链DNA构成，无核膜和核仁，细胞器很不完善，只有核糖体。

真核细胞型微生物如真菌，细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞器分化明显。

非细胞型微生物如病毒，无典型的细胞结构，只能在活的易感细胞内生长繁殖。

只有一种类型核酸（为DNA或RNA）。

（2）培养特性：细菌和真菌能在人工合成培养基上生长，病毒不能在无生命培养基上生长，需采用鸡胚接种、动物接种和细胞培养方法培养。

（3）致病性：细菌主要依靠侵袭力和内、外毒素致病。

病毒可直接杀死宿主细胞，但主要是通过免疫病理损伤致病。

第二章细菌的形态与结构【思考题】1．试比较革兰阳性菌和阴性菌细胞壁结构上的差异及其在致病性、抗原性、染色性和药物敏感性的意义。

革兰阳性菌细胞壁由肽聚糖和穿插其中的磷壁酸组成，特点是肽聚糖含量高，结构致密，为三维立体网状结构。

革兰阴性菌细胞壁中肽聚糖含量少，结构疏松，但具有由脂蛋白、脂质双层和脂多糖构成的外膜。

（1）致病性：脂多糖由脂质A、核心多糖和O特异性多糖所构成，是- 1 -细菌内毒素的主要成分。

革兰阴性菌主要靠内毒素致病，而革兰阳性菌无内毒素，主要靠外毒素致病。

（2）抗原性：磷壁酸是革兰阳性菌特有的成分，是重要的表面抗原。

（3）药物敏感性：革兰阴性菌脂质双层上镶嵌有孔蛋白，可阻止一些抗菌药物如青霉素的进入，故绝大多数革兰阴性菌对青霉素不敏感，而大多数革兰阳性菌对青霉素敏感。

（4）染色性：脱色时，革兰阳性菌肽聚糖结构更加致密，结晶紫不被脱出体外，菌体呈紫色。

革兰阴性菌细胞壁主要成分是外膜，含大量脂质，可溶于乙醇，结构更为疏松，结晶紫易被脱出菌体外，故菌体最终呈红色。

2．细菌的特殊结构有哪些？各有何主要功能及医学意义？细菌特殊结构主要包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞。

微生物学细菌感染的检查方法与防治

甲基红 (methyl red) 试验
产气肠杆菌分解葡萄糖产生丙酮酸，后者经脱羧后生成中性的乙酰甲基甲醇，故培养液pH＞5．4，甲基红指示剂呈桔黄色，是为甲基红试验阴性。大肠埃希菌分解葡萄糖产生丙酮酸，培养液pH＜4．5，甲基红指示剂呈红色，则为甲基红试验阳性。
枸橼酸盐利用 (citrate utilization) 试验
糖发酵试验
不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。例如大肠埃希菌能发酵葡萄糖和乳糖；而伤寒沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖。即使两种细菌均可发酵同一糖类，其结果也不尽相同，如大肠埃希菌有甲酸脱氢酶，能将葡萄糖发酵生成的甲酸进一步分解为CO2和H2，故产酸并产气；而伤寒沙门菌缺乏该酶，发酵葡萄糖仅产酸不产气。
Himalayan palm civet
6+/6
Chinese hare
0+/3
病毒在细胞中增值的指标： 1 细胞变化 2 红细胞吸附 3 干扰现象 4 细胞代谢改变
Uninfected cells
3 days
4 days
Fig. 1
Isolation of SCoV like animal virus in FRhK-4 cell cultures.
检测病毒抗原及抗体方法
对于一些血清型别不多的病毒或在寻常细胞培养系统中还不能成功增殖的病毒，直接检测抗原是快速而实用的方法。这一方法要求标本中有一定量的抗原和具备高质量的抗体；其原则为免疫学技术，即用特异标记的抗体检测相应的抗原。可以用免疫荧光或免疫酶标记抗体检测在病毒感染局部脱落细胞或分泌物细胞中的抗原，也可用酶联免疫测定法 (ELISA) 或乳胶凝集法检测抗原。这一方法在数小时或一天内可获得结果。

医院感染的常见类型诊断标准

医院感染的常见类型、诊断标准医院感染定义医院感染Nosocomial Infection, Hospital Infection 或 Hospital Acquired Infection是指住院病人在医院内获得的感染,包括在住院期间发生的感染和在医院内获得出院后发生的感染；但不包括入院前已开始或入院时已存在的感染.医院工作人员在医院内获得的感染也属医院感染.一.下列情况属于医院感染无明确潜伏期的感染,规定在入院48h后发生的感染为医院感染；有明确潜伏期的感染,自入院时起超过平均潜伏期后发生的感染为医院感染.本次感染直接与上次住院有关.在原有感染基础上出现其他部位新的感染除外脓毒血症迁徙灶,或在原感染已知病原体基础上又分离出新的病原体排除污染和原来的混合感染的感染.新生儿经产道时获得的感染.由于诊疗措施激活的潜在性感染,如疱疹病毒、结核杆菌等的感染.医护人员在医院工作期间获得的感染.二、下列情况不属于医院感染皮肤粘膜开放性伤口只有细菌定植而无炎症表现.由于创伤或非生物性因子刺激而产生的炎症表现.新生儿经胎盘获得出身后48h内发病的感染,如单纯疱疹病毒、弓形体病、水痘等.患者原有的慢性感染在医院内急性发作.呼吸系统一.上呼吸道感染临床诊断：发热≥38.0℃超过2天,有鼻咽、鼻旁窦和扁桃腺等上呼吸道急性炎症表现.病原学诊断：临床诊断基础上,分泌物涂片或培养可发现有意义的病原微生物.说明：必须排除普通感冒和非感染行病因如过敏等所至的上呼吸道急性炎症.二.下呼吸道感染临床诊断符合下述两条之一即可诊断1. 患者出现咳嗽、痰粘稠,肺部出现湿罗音,并有下列情况之一者:1发热2白细胞总数及嗜中性粒细胞比例增高3 X线显示肺部有炎性浸润性病变2. 慢性气道疾患患者稳定期慢性支气管炎伴或不伴阻塞性肺气肿、哮喘、支气管扩张症继发急性感染,并有病原学改变或X线胸片显示与入院时比较有明显改变或出现新病变病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列6条之一即可诊断:1.经筛选的痰液连续两次分离出相同病原体.2.痰定量培养分离到病原菌计数≥106cfu/ml.3.血培养或并发胸腔积液者的胸液分离到病原体.4.经纤维支气管镜或人工气道吸引采集的下呼吸道分泌物分离到浓度≥105cfu/ml的病原菌、经支气管肺泡灌洗BAL分离到浓度≥104cfu/ml的病原菌,或经防污染样本毛刷PSB、防污染支气管肺泡灌洗PBAL 采集的下呼吸道分泌物分离到病原菌对于原有慢性阻塞性肺病包括支气管扩张者细菌浓度必须≥103cfu/ml.5.痰或下呼吸道采样标本中分离到通常非呼吸道定植的细菌或其它特殊病原体.6.免疫血清学、组织病理学的病原学诊断证据.三.胸膜腔感染临床诊断：发热,胸痛,胸水外观呈脓性,或带臭味,常规检查白细胞计数≥1000×106/L病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列两条之一即可诊断.1.胸水培养分离到病原菌.2.胸水普通培养无菌生长,但涂片见到细菌.心血管系统一、心内膜炎病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述三条之一即可诊断.1.心脏瓣膜或赘生物培养出病原体.2.临床诊断基础上,两次或多次血液培养阳性.3.临床诊断基础上,心脏瓣膜革兰染色发现病原菌.二、心肌炎或心包炎临床诊断：符合下述两条之一即可诊断.1.病人至少有下列症状或体征中的两项且无其它明确原因可以解释：发热、胸痛、奇脉、心脏扩大.合并有下列情况之一：1有心肌炎或心包炎的异常心电图改变.2心脏组织病理学检查证据.3影响学发现心包渗出.2.病人≤1岁至少有下列症状或体征中的两项且无其它明确原因可以解释：发热、奇脉或心脏扩大、呼吸暂停、心动过缓,并至少有下列情况之一：1有心肌炎或心包炎的异常心电图改变、2心脏组织病理学检查证据.3影响学发现心包渗出.病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述两条之一即可诊断.1.心包组织培养出病原菌或外科手术/针吸取物培养出病原体.2.在临床诊断基础上,血中抗体阳性如流感嗜血杆菌、肺炎球菌,并排除其它部位感染.血液系统一、血管相关性感染临床诊断：符合下列三条之一即可诊断.1.静脉穿刺部位有脓液排出,或有弥散性红斑蜂窝组织炎的表现.2.沿导管的皮下走行部位出现疼痛性弥散性红斑除外理化因素所致.3.经血管介入性操作,发热 >38℃,局部有压痛,无其他原因解释.病原学诊断：导管尖端培养或血液培养分离出有意义的病原微生物.二.败血症临床诊断：发热>38℃,或低体温<36℃,可伴有寒战,合并下列情形之一：1.有入侵门户或迁徙病灶.2.有全身性感染中毒症状而无明确感染灶.3.有皮疹或出血点、肝脾肿大、血液中性粒细胞增多伴核左移,且无其它原因可以解释.4.收缩压低于12KPa90mmHg,或较原收缩压下降超过5.3KPa 40mmHg.病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述两条之一即可诊断.1.血液培养分离出病原微生物.2.血液中检测到病原体的抗原物质.三、输血相关感染常见有病毒性肝炎乙、丙、丁、庚型等、艾滋病、巨细胞病毒感染、疟疾、弓形体病等临床诊断：必须同时符合下述三种情况才可诊断1.从输血至发病,或从输血至血液中出现病原免疫学标志物的时间超过该病原体的评价潜伏期2.受血者受血前从未有过该种感染,免疫学标志物阴性3.证实供血员血液存在感染性物质,如：血中查到病原体、免疫学标志物阳性、病原DNA或RNA阳性等病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述四条之一即可诊断.1.血液中找到病原体.2.血液特异性病原体抗原检测阳性,或其血清在IgM抗体效价达到诊断水平,或双份血清呈4倍升高.3.组织或体液涂片找到包涵体.4.病理活检证实.腹部和消化系统一.感染性腹泻临床诊断：符合下述三条之一即可诊断1.急性腹泻、粪便常规镜检白细胞≥10个/高倍视野.2.急性腹泻,或伴发热、恶心、呕吐、腹痛等.3.急性腹泻每天3次以上,连续2天,或1天水泻5次以上.病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列情形之一者:1.粪便或肛拭子标本培养出肠道病原体.2.常规镜检或电镜直接检出肠道病原体.3.从血液或粪中检出病原体的抗原或抗体,达到诊断标准.4.从组织培养的细胞病理变化如毒素测定判定系肠道病原体所致.二.胃肠道感染临床诊断：患者出现发热≥38℃、恶心、呕吐和或腹痛、腹泻,而无其他原因可解释.病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列三条之一即可诊断.1.从外科手术或内镜取得组织标本或外科引流液培养出病原体.2.上述标本革兰染色或氢氧化钾浮载片可见病原体、多核巨细胞.3.手术或内镜标本显示感染的组织病理学证据.三.抗生素相关性腹泻临床诊断：近期曾应用或正在应用抗生素,出现腹泻伴大便性状改变如水样便、血便、粘液脓血便或见斑块条索状伪膜,可合并下列情况之一:1.发热≥38℃2.腹痛或腹部压痛、反跳痛3.周围血白细胞升高病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述三条之一:1.大便涂片有菌群失调或培养发现有意义的优势菌群2.如作纤维结肠镜检查见肠壁充血、水肿、出血,或见到2mm-20mm,灰黄白色斑块伪膜3.细菌毒素测定证实四.病毒性肝炎临床诊断：有输血或血制品史、不洁食物史,肝炎接触史,出现下述症状或体征中的任何两项并有肝功能异常,而无其它原因可解释者:1.发热.2.厌食.3.恶心、呕吐.4.肝区疼痛.5.黄疸.病原学诊断：在临床诊断基础上,血清甲、乙、丙、丁、戊、庚任何一种肝炎病毒活动性标志物阳性.五.腹盆腔内组织感染包括胆囊、胆道、肝、脾、胰、腹膜、膈下、盆腔、其它组织或腔隙的感染,含持续腹膜透析继发性腹膜炎.临床诊断：具有下列症状体征中任何两项、而无其它原因可以解释,同时有检验、影像学检查的相应异常发现.1.发热>38℃.2.恶心、呕吐.3.腹痛、腹部压痛或反跳痛或触及块物伴触痛.4.黄疸.病原学诊断：在临床诊断基础上,符合下列情形之一者:1.经手术切除、引流管、穿刺吸引或内镜获取的标本检出病原体.2.血培养阳性,且与局部感染菌相同或与临床相符.六.腹水感染临床诊断：腹水原为漏出液,出现下列两项情况者:1.腹水性质为渗出液.2.腹水不易消除,出现腹痛、腹部压痛或反跳痛.腹水常规检查白细胞 >200×106/L,中性粒细胞 >25%.病原学诊断：临床诊断基础上,腹水细菌培养阳性.中枢神经系统一.细菌性脑膜炎临床诊断：符合下列情形之一者:1.发热,颅高压症状之一,脑膜刺激征之一,加上脑脊液CSF化脓性改变2.发热,颅高压症状之一,脑膜刺激征之一,加上CSF白细胞轻至中度升高；经抗菌药物治疗后症状体征消失,CSF恢复正常3.在应用抗生素过程中,出现发热,不典型颅高压症状体征,CSF白细胞轻度增多,加上以下任何一条：1CSF中抗特异性病原体的IgM达诊断标准,或IgG呈4倍升高,或CSF涂片找到细菌2有颅脑操作史,或颅脑外伤或腰椎穿刺史3脑膜附近有感染灶或有脑脊液漏者4新生儿血培养阳性病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述三条之一：1.CSF中培养出病原菌.2. CSF病原微生物抗原检测阳性.3.CSF涂片找到病原菌.二.颅内脓肿:包括脑脓肿、硬膜下和硬膜外脓肿临床诊断：符合下述两条之一即可诊断.1.发热,颅高压症状之一,颅内占位体征功能区定位征,并具有以下影像学检查证据之一：1CT.2脑血管造影.3核磁共振.4核素扫描.2.外科手术证实.病原学诊断：临床诊断基础上,穿刺抽到浓液或组织活检找到病原体,或细菌培养阳性.三.椎管内感染包括硬脊膜下脓肿和脊髓内脓肿临床诊断：符合下述两条之一即可诊断.1.发热、有神经定位症状和体征或局限性腰背痛和脊柱运动受限并具有下列情况之一：.1棘突及棘突旁有剧烈压痛及叩击痛.2神经根痛.3完全或不完全脊髓压迫征.4检查证实：脊髓CT、椎管内碘油造影、核磁共振、X线平片、CSF蛋白及白细胞增加并奎氏试验有部分或完全性柱管梗阻.2.手术证实病原学诊断：手术引流液细菌培养阳性.泌尿系统临床诊断：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状,或有下腹触痛、肾区叩痛,伴或不伴发热,并具有下列情形之一者:1.尿检白细胞男性≥5个/高倍视野,女性≥10个/高倍视野,插导尿管患者应结合尿培养.2.临床医师诊断为泌尿道感染,或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染.病原学诊断：临床诊断基础上,并符合下述四条之一者:1.清洁中段尿或导尿留取尿液非留置导尿培养G＋球菌浓度≥104cfu/ml、G－杆菌浓度≥105cfu/ml.2.耻骨联合上膀胱穿刺留取尿液培养细菌浓度≥103cfu/ml.3.新鲜尿液标本经离心,应用相差显微镜检查1×400,在30个视野中有半数视野见到细菌.4.无症状性菌尿症：患者虽然无症状,但在近期1周有内窥镜检查或留置导尿史,尿液培养G＋球菌浓度≥104cfu/ml、G－杆菌浓度≥105cfu/ml,应视为泌尿系统感染.手术部位SSI一.表浅手术切口感染仅限于切口涉及的皮肤和皮下组织,感染发生于术后30天内临床诊断：具有下列情况之一者:1.表浅切口有红、肿、热、痛,或有脓性分泌物2.临床医师诊断的表浅切口感染病原学诊断：临床诊断基础上细菌培养阳性二.深部手术切口感染无植入物手术后30天内,有植入物术后1年内发生的与手术有关涉及切口深部软组织深筋膜和肌肉的感染.临床诊断：符合上述界定,并具有下列情况之一者:1.从深部切口引流出或穿刺抽到脓液,感染性手术后引流液除外2.自然裂开或由外科医师打开的切口,有脓性分泌物或有发热 >38℃,局部有疼痛或压痛3.再次手术探查、经组织病理学或影像学检查发现涉及深部切口脓肿或其它感染迹象4.临床医师诊断的深部切口感染病原学诊断：临床诊断基础上,细菌培养阳性三.器官或腔隙感染无植入物手术后30天、有植入物手术后1年内发生的与手术有关除皮肤、皮下、深筋膜和肌肉以外的器官或腔隙感染.临床诊断：符合上述界定,并具有下述三条之一即可诊断：1.引流管或穿刺有脓液2.再次手术探查、经组织病理学或影像学检查发现涉及器官或腔隙感染的迹象3.由临床医师诊断的器官或腔隙感染病原学诊断：初步诊断基础上,细菌培养阳性皮肤和软组织一.皮肤感染临床诊断：符合下列情形之一者:1.皮肤有脓性分泌物、脓疱、疖肿等2.患者有局部疼痛或压痛,局部红肿或发热,无其它原因解释者病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列情形之一者:1.从感染部位的引流物或抽吸物中培养出病原体；2.血或感染组织特异性病原体的抗原检测阳性二.软组织感染软组织感染包括坏死性筋膜炎、感染性坏疽、坏死性蜂窝组织炎、感染性肌炎、淋巴结炎或淋巴管炎临床诊断：符合下述三条之一即可诊断:1.从感染部位引流出脓汁2.外科手术或组织病理检查证实有感染3.患者有局部疼痛或压痛、局部红肿或发热,且无其它原因可以解释病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列情形之一者:1.血特异性病原体抗原检测阳性,或血清抗IgM抗体效价达到诊断水平,或双份血清IgG呈4倍升高2.从感染部位的引流物或组织中培养出病原体三.褥疮感染诊断标准褥疮感染包括：褥疮表面和深部组织感染临床诊断：褥疮局部红、压痛或褥疮边缘肿胀,并有脓性分泌物病原学诊断：临床诊断基础上,分泌物培养阳性四.烧伤感染临床诊断：烧伤表面的形态或特点发生变化,如焦痂迅速分离或变成棕黑、黑或紫罗兰色或烧伤边缘水肿,同时具有下列情形之一者:1.创面有脓性分泌物2.患者出现发热>38℃或低体温<36℃、合并低血压病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述两条之一:1.血培养阳性并除外有其它部位感染2.烧伤组织活检显示微生物向临近组织浸润五.乳腺脓肿或乳腺炎的诊断标准临床诊断：符合下列情形之一者:1.红、肿、热、痛等炎症表现或伴有发热,排除授乳妇女的乳汁郁积2.外科手术证实3.临床医生诊断的乳腺脓肿病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述两条之一即可诊断1.引流物或针吸液培养阳性2.血液培养阳性,并排除其它部位感染六.脐炎诊断标准临床诊断：患者脐部有红肿或分泌物病原学诊断：临床诊断基础上,符合下列情形之一者:1.引流物或针吸液培养阳性.2.血培养阳性,并排除其它部位感染七.婴儿脓疱病诊断标准临床诊断：符合下述两条之一即可诊断1.皮肤出现脓疱2.临床医生诊断为脓疱病病原学诊断：临床诊断基础上,分泌物培养阳性骨、关节一、关节和关节囊感染临床诊断：符合下述两条之一即可诊断.1.病人有下列症状或体征中的两项且无其它原因可以解释：关节疼痛、肿胀、触痛、发热、渗出或运动受限.合并下列情况之一：1关节液检验发现白细胞2关节液的细胞组成及化学检查符合感染且不能用风湿病解释3有感染的影像学证据2.外科手术或病理学检查发现关节或关节囊感染的证据病原学诊断：符合下述两条之一即可诊断1.关节液或滑囊活检培养出病原体2.临床诊断的基础上,关节液革兰染色发现病原体二、骨髓炎临床诊断：符合下述两条之一即可诊断1.病人有下列症状或体征中的两项且无其它原因可以解释：发热≥38℃,局部肿块、触痛、发热或感染灶有引流物,并有感染的影像学证据2.外科手术或组织病理学检查证实病原学诊断：符合下述两条之一即可诊断1.骨髓培养出病原体2.在临床诊断的基础上,血液培养出病原体或血液中查出细菌抗体如流感嗜血杆菌、肺炎球菌,并排除其它部位感染三、椎间盘感染临床诊断：符合下述三条之一即可诊断1.病人无其它原因解释的发热或椎间盘疼痛,并有感染的影像学证据2.外科手术或病理学检查发现椎间盘感染的证据3.手术切下或针吸的椎间盘组织证实有感染病原学诊断：在临床诊断的基础上,符合下述两条之一即可诊断1.感染部位组织中培养出病原体2.血或尿中检出抗体如流感嗜血杆菌、肺炎球菌、脑膜炎球菌或B组链球菌,并排除其它部位感染生殖道一、外阴切口感染经阴道分娩,病人外阴切口感染发生于产后2周内临床诊断：符合上述规定,并有下述两条之一即可诊断1.外阴切开有红、肿、热、痛或脓性分泌物2.外阴切开有脓肿病原学诊断：临床诊断基础上,细菌培养阳性二、阴道穹隆部感染临床诊断：符合下述两条之一即可诊断1.子宫切除术后,病人阴道残端有脓性分泌物2.子宫切除术后,病人阴道残端有脓肿病原学诊断：临床诊断基础上,细菌培养阳性三、急性盆腔炎临床诊断：符合下述两条之一即可诊断1.有下列症状或体征且无其它原因解释,发热、恶心、呕吐、下腹痛或触痛,尿频、尿急或腹泻,里急后重.阴道分泌物增多呈脓性2.后穹隆或腹腔穿刺有脓液病原学诊断：在临床诊断基础上,宫颈管分泌物细菌培养阳性四、子宫内膜炎临床诊断：发热或寒颤,下腹痛或压痛,不规则阴道流血或恶露有臭味病原学诊断：临床诊断的基础上,宫腔刮出子宫内膜病理检查证实或分泌物细菌培养阳性五、男女性生殖道其它感染临床诊断：符合下述两条之一即可诊断1.病人有下列症状或体征中的两项且无其它原因解释：发热、局部疼痛、触痛或尿痛,并有影像学证实或病理学证实2.外科手术或组织病理学发现感染部位脓肿或其它感染的证据病原学诊断：符合下述两条之一即可诊断1.从感染部位的组织或分泌物中培养出病原体2.临床诊断基础上,血液中培养出病原体口腔临床诊断：符合下述三条之一即可诊断1.口腔组织中有脓性分泌物2.通过外科手术或病理检查而证实的口腔感染或有脓肿3.临床医生诊断的感染并采用口腔抗真菌治疗病原学诊断：临床诊断基础上,符合下述五条之一即可诊断1.革兰染色检出病原微生物2.氢氧化钾染色阳性3.粘膜刮屑显微镜有多核巨细胞4.口腔分泌物抗原检测阳性5.IgM抗体效价达诊断水平或双份血清IgG呈4倍增加其它部位涉及多个器官或系统,而又不适合归于某系统的感染；通常为病毒感染：如麻疹、风疹、传染性单核细胞增多症；病毒性皮疹也应列入此类,如单纯疱疹、水痘、带状疱疹等.。

诊断学-实验室检查-实验室诊断-常用病原学检测

体液
体液
体液
粪便
传播途径粪-口
慢性感染否基因组类型 ssRNA
经皮肤/ 经粘膜
是
dsDNA
经皮肤/ 经粘膜
是
ssRNA
经皮肤/ 经粘膜
是
ssRNA
粪-口
否 ssRNA
Hepatitis B Virus
• 乙型肝炎的病原体 • 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人
口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染 • 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达 9.8%
3200 Base Pair Genome
HBV DNA Polymerase
HBsAg
Both comprised of HBsAg
HBV nomenclature
• HBV: hepatitis B virus • HBsAg: hepatitis B virus surface antigen • HBsAb: hepatitis B virus surface antibody • HBcAg: hepatitis B virus core antigen • HBcAb: hepatitis B virus core antibody • HBeAg: hepatitis B virus e antigen • HBeAb: hepatitis B virus e antibody
中和试验 ELISA
风湿热（抗O试验）广泛用于病原体的诊断和流行病学调查
玻片凝集试验
试管凝集试验
酶联免疫吸附试验
④细菌的快速鉴定
API细菌数值鉴定系统
PCR技术
姬姆萨染色衣原体包涵体
HSV病毒
被支原体感染的精子

临床医学检验技师初级(师)微生物学及检验(细菌感染的病原学诊断)-试卷1

临床医学检验技师初级（师）微生物学及检验（细菌感染的病原学诊断）-试卷1(总分：60.00，做题时间：90分钟)一、 A1型题(总题数：30，分数：60.00)1.下列革兰染液成分不包括（分数：2.00）A.稀释复红B.结晶紫C.95％酒精D.卢戈碘液E.5％石炭酸复红√解析：解析：革兰染液成分有结晶紫、95％酒精、卢戈碘液、稀释复红。

2.临床上最常见的真菌培养基是（分数：2.00）A.脑心浸膏琼脂B.沙保琼脂√C.尿素琼脂D.马铃薯葡萄糖琼脂E.玉米粉聚山梨酯一80琼脂解析：解析：本题考查真菌的临床培养。

真菌培养常用的培养基有沙保琼脂、脑心浸膏琼脂、米粉吐温琼脂、蔡氏培养基、马铃薯葡萄糖琼脂等，其中沙保琼脂适用于分离绝大多数真菌，应用广泛。

3.下列关于培养基性能试验说法不正确的是（分数：2.00）A.分离培养基应每周测试1次B.鉴别培养基需每批及每月测试1次C.如需观察多项性能，可使用多种菌株完成D.每批新购、新配的培养基，均应用已知性质的标准菌株进行预测E.用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最容易生长的细菌菌种，并且应多量生长√解析：解析：本题考查对培养基性能试验的理解。

用于测试分离培养基性能的菌株，原则上应使用预期最难生长的细菌菌种，并且应少量生长，其余均正确。

4.专性需氧菌经人工液体培养基培养后，可观察到的生长现象是（分数：2.00）A.液体表面形成菌膜√B.液体底部有沉淀C.液体变色D.可闻到腐败性的恶臭E.液体分层解析：解析：专性需氧菌在液体培养基中培养时，因生长代谢时需要氧气，故呈表面生长，常在液体表面形成菌膜。

5.中国蓝培养基属于（分数：2.00）A.基础培养基B.营养培养基C.鉴别培养基D.选择培养基√E.增菌培养基解析：解析：中国蓝平板可抑制革兰阳性菌，有选择地促进革兰阴性细菌生长，是很好的弱选择培养基。

6.糖发酵管属于（分数：2.00）A.基础培养基B.营养培养基C.选择培养基D.鉴别培养基√E.厌氧培养基解析：解析：用于培养和区分不同细菌种类的培养基称为鉴别培养基。