分子生物学复习题第八章重组DNA技术

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《分子生物学》复习题解答【2010级生物科学(师范)版】

质粒，如酵母和植物。 ④ 原核生物的DNA位于细胞的中央，称为类核。
真核生物有细胞核，DNA序列压缩为染色体存在于细胞核中。 ⑤ 真核基因组都是由DNA序列组成，原核基因组还有可能由RNA组成，
如RNA病毒。
5、转位因子的特点。（1）结构特点：在转位因子的两端，存在末端重复序列（TIR），在转位过程中至关重要。（2）结构特点：绝大多数转位因子含有开放阅读框架（ORF），它可能编码转座酶，促进转位因子的转位。（3）结构特点：受体DNA上很短的一段靶序列，由于转位因子的插入，靶序
靶位点连接。最后，填补插入位点两侧的单链区。（4）分析比较细菌转座子的结构与特点？答：1974年，随着发现与抗生素抗性有关的基因可以在质粒与细菌的染色
5、简述拓扑异构酶的概念、分类、特点及作用机理。（1）概念：在真核、原核生物中发现有催化双螺旋DNA的超螺旋化或者回
到松弛态的酶类，即负责DNA拓扑异构体的超螺旋与松弛态相互间的转化，反应都与链的切断——缝合机制相关。（2）分类：I型拓扑异构酶，II型拓扑异构酶。（3）特点：既能水解，又能连接磷酸二酯键。（4）作用机理： ① Ⅰ型拓扑异构酶不需要ATP的能量而催化异构体化，作为反应的中间产物，在原核生物来说是游离型的5′-OH末端扣3′-磷酸末端与酶形成共价键，而真核生物是3′-OH末端5′-磷酸末端与酶形成共价键。此酯键中所贮存的能量，可能在切断端的再结合上起着作用。 ② 在Ⅱ型拓扑异构酶中，DNA促旋酶可单独催化闭环状DNA产生超螺旋，这是独特的。其它二个型的酶，除可使超螺旋松弛也需要ATP的能量外，还可催化促旋酶的催化反应。
7、熔解温度（Tm）
Tm是指DNA的热变性过程中，260nm处的紫外吸收值的增加量达到最大增量的一半时的温度。 8、拓扑异构酶拓扑异构酶是指在真核、原核生物中发现有催化双螺旋DNA的超螺旋化或者回到松弛态的酶类，即负责DNA拓扑异构体的超螺旋与松弛态相互间的转化，反应都与链的切断——缝合机制相关。 9、双螺旋呼吸作用双链DNA中配对碱基的氢键不断处于断裂和再生状态之中，特别是稳定性相对较低的富含A-T的区段，在微观上，常会发生瞬间的单链泡状结构，这种现象称双螺旋的呼吸作用。 10、镜像重复镜像重复由反方向完全相同的两个序列组成的重复序列。

分子生物学期末考试重点

1. 定义重组DNA 技术将不同的DNA 片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。

2. 说出分子生物学的主要研究内容1. DNA 重组技术2. 基因表达研究调控3. 生物大分子的结构功能研究4. 基因组、功能基因组与生物信息学研究3. 简述DNA 的一、二、三级结构一级： 4 种核苷酸的连接及排列顺序，表示了该DNA 分子的化学成分二级： 2 条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋结构三级：DNA 双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间结构4. 原核生物DNA 具有哪些不同于真核生物DNA 的特征？①DNA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成，多核苷酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯键的走向决定，一条是5---3，另一条是3---5②DNA双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧构成基本骨架，碱基排在内侧③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对5. DNA 双螺旋结构模型是由谁提出的？沃森和克里克6. DNA 以何种方式进行复制，如何保证DNA 复制的准确性？线性DNA 的双链复制：将线性复制子转变为环状或者多聚分子，在DNA 末端形成发卡式结构，使分子没有游离末端，在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。

环状DNA 复制：B型、滚环型、D型①以亲代DNA 分子为模板进行半保留复制，复制时严格按照碱基配对原则②DNA聚合酶I非主要聚合酶，可确保DNA合成的准确性③DNA修复系统：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统7. 简述原核生物DNA复制特点只有一个复制起点，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，变现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉8. 真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？细胞生活周期水平调控；染色体水平调控；复制子水平调控9. 细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段；重组修复，复制后的修复；DNA直接修复，修复嘧啶二聚体；SOS系统，DNA的修复，导致变异10•什么是转座子？分为哪些种类？是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。

分子生物学习题库与参考答案

分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。

分子生物学重组DNA技术试题

分子生物学重组DNA技术试题分生—重组DNA技术试题一、单选1、在分子生物学领域，分子克隆主要是指（）A、DNA的大量复制B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切D、RNA的大量反转录E、RNA的大量剪切2、在分子生物学领域，重组DNA又称（）A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程3、在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶E、DNA解链酶4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为（）A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端E、缺口末端5、可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为（）A、限制性外切核酸酶B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶D、非限制性内切核酸酶E、DNA内切酶6、CDNA是指（）A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD、在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA7、基因组代表一个细胞或生物体的（）A、部分遗传信息B、整套遗传信息C、可转录基因D、非转录基因E、可表达基因8、在基因工程中通常所使用的质粒存在于（）A、细菌染色体B、酵母染色体C、细菌染色体外D、酵母染色体外E、以上都不是9、就分于结构而论，质粒是（）A、环状双链DNA分子B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D、线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子10、聚合酶链反应可表示为（）A、PECB、PERC、PDRD、BCRE、PCR11、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNA文库法D、聚合酶链反应E、差异显示法12、重组DNA的基本构建过程是将（）A、任意两段DNA搂在一起B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体D、目的基因接入哺乳类DNAE、外源基因接人宿主基因13、ECoRI切割DNA双链产生（）A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、钝性末端E、配伍末端14、催化聚合酶链反应的酶是（）A、DNA连接酶B、反转录酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶15、将PstI内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属（）A、同聚物加尾连凑B、人工接头连接C、平端连接D、粘性末端连接E、非粘性末端连接16、限制性核酸内切酶切割DNA后产生（）A、3磷酸基末端和5羟基末端B、5磷酸基末端和3羟基末端C、3磷酸基末端和5磷酸基末端D、5羟基末端和3羟基末端E、3羟基末端、5羟基末端和磷酸17、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是（）A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶18、以质粒为载体。

分子生物学检验技术复习题与答案

分子生物学检验技术复习题与答案一、单选题（共80题，每题1分，共80分）1、世界上首次用已经分化成熟的体细胞核通过克隆技术培育的动物是A、克隆猪B、克隆绵羊C、克隆鼠D、克隆猴E、克隆奶牛正确答案：B2、检测靶序列是DNA的技术是A、Norther杂交B、Southern杂交C、Western杂交D、Eastem杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：B3、有关核酶的恰当解释是A、它是RNA分子，但具有酶的功能B、它是蛋白质C、是专门水解核酸的蛋白质D、它是由RNA和蛋白质构成的E、它是由DNA和蛋白质构成的正确答案：A4、下列哪种物质在 PCR 反应中不能作为模板：A、单链DNAB、RNAC、cDNAD、肽链E、双链DNA正确答案：D5、双链DNA的Tm值主要与下面哪项有关A、C-T含量B、A-T含量C、T-G含量D、A-G含量E、C-G含量正确答案：E6、寡核苷酸芯片主要采用A、原位合成法制备B、杂交技术C、探针固化技术D、显微光蚀刻技术E、DNA微阵列的制作方法正确答案：A7、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、组织细胞提取C、cDNA文库法D、基因组文库法E、化学合成法正确答案：A8、凝胶色谱分离蛋白质的依据是A、等电点B、亲和作用C、固定相对蛋白质的吸附作用不同D、分子大小E、疏水作用正确答案：D9、α互补筛选法属于：A、免疫化学筛选B、酶联免疫筛选C、原位杂交筛选D、标志补救筛选E、抗药性标志筛选正确答案：D10、关于DNA双螺旋结构模型的叙述中，除了哪一项外其余都是正确的A、螺旋直径为2nmB、两股链间有严格的碱基配对关系C、两股核苷酸链呈反向平行D、为右手螺旋，每个螺距含10对碱基E、极性磷酸二酯键位于双螺旋内侧正确答案：E11、DNA变性的本质是下列哪种键的断裂？A、氢键B、二硫键C、离子键D、盐键E、共价键正确答案：A12、从细菌体内分离出的质粒DNA，在体外的状态是A、线性B、开环C、多聚体D、单链E、超螺旋正确答案：E13、下述双链DNA序列（仅列出其中一条链序列）中，不属于完全回文结构的是A、AAGATCTTB、AGAATTCTC、GGAATTCCD、CGTTAAGCE、TGAATTCA正确答案：D14、在基因工程中所使用的质粒DNA通常存在于：A、酵母染色体外B、哺乳类细胞染色体外C、细菌染色体上D、细菌染色体外E、酵母染色体上正确答案：D15、目前常用的基因表达体系细胞包括A、以上都是B、昆虫细胞C、大肠埃希菌D、哺乳动物细胞E、酵母细胞正确答案：A16、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB是一种可视物质B、EB特异性结合核酸分子C、EB插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光D、EB在紫外光下放射荧光E、EB是核酸转性染料正确答案：C17、EB溴化乙锭作为核酸电泳指示剂的原理是A、EB特异性结合核酸分子B、EB在紫外光下放射荧光C、EB是核酸传性染料D、插入核酸分子之间并在紫外光下产生荧光E、EB是一种可视物质正确答案：D18、DNA提取中不能有效去除蛋白质的是A、RNaseB、酚-氯仿抽提C、蛋白酶KD、SDSE、高盐洗涤正确答案：A19、下列几种DNA分子的碱基组成比例,其中Tm值最高的是A、G+C-40%B、G+C=60%C、G+C=25%D、A+T=80%E、A+T=15%正确答案：E20、DNA超螺旋结构中哪项恰当A、核小体由DNA和非组蛋白共同构成B、以上都不恰当C、核小体由DNA和H1，H2，H3，H4各二分子构成D、组蛋白的成分是H1，H2A，H2B，H3和H4E、核小体由RNA和H1，H2，H3，H4各=分子构成正确答案：D21、最早发现的抑癌基因是A、VHLB、p53C、DCD、RbE、APC正确答案：D22、Southem杂交通常是指A、RNA与RNA杂交B、DNA与RNA杂交C、DNA与蛋白质杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA与DNA杂交正确答案：E23、在已知序列信息的情况下获取目的基因的最方便方法是：A、聚合酶链反应B、cDNA文库法C、组织细胞提取D、基因文库法E、化学合成法正确答案：A24、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为A、0.5-2mmol/LB、0.3-1mmol/LC、0.5-1mmol/LD、2-2.5 mmol/LE、0.3-2mmol/L正确答案：A25、DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不恰当A、体内以B构型最常见B、腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数C、DNA双螺旋中碱基对位于外侧D、同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似E、二股多核苷酸链通过A与T或C与C之间的氢键连接正确答案：C26、一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。

分子生物学复习题第八章重组DNA技术

第八章重组DNA技术一、选择单选1、下列哪项不属于生物工程？A. PCR技术B.重组DNA技术C.蛋白质工程D.酶工程E.细胞工程2、重组DNA技术中所用的限制酶是哪类？A.Ⅰ型限制酶B.Ⅱ型限制酶C.Ⅲ型限制酶D.Ⅳ型限制酶E.Ⅴ型限制酶3、可以利用蓝白筛选法筛选用pUC转化的重组DNA克隆，是因为pUC包含以下哪种元件？A.复制起点B. amp RC.acZ'D.多克隆位点MCSE.调节基因lacI4、关于λ噬菌体，以下叙述错误的是A.基因组DNA的部分序列并非溶原性生长所必需B.基因组DNA感染大肠杆菌后形成闭环结构C.在溶原性生长时进行滚环复制D.复制时形成多联体结构E.其转化的细菌经过培养形成噬菌斑5、pBR322质粒包含两个抗性基因：氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，据此可以利用哪种方法筛选重组DNA克隆？A.α互补B. PCRC.插入失活D.核酸分子杂交E.蓝白筛选6、制备重组DNA首先要制备目的DNA，要保证目的DNA的量和纯度能满足重组要求。

常用的制备方法不包括A.PCR扩增B.从组织细胞分离基因组DNAC.化学合成D.逆转录合成cDNAE.限制酶截取7、第一种应用于临床的重组蛋白是A.基因工程疫苗B.基因工程抗体C.激素D. 生长因子E.细胞因子8、在重组DNA技术中，目的DNA与载体在体外连接的过程称为DNA的体外重组。

体外重组的方法不包括：A.加人工接头连接B.加同聚物尾连接C.互补黏端连接D.连接E.平移连接9、重组DNA的宿主细胞有原核细胞和真核细胞。

用于制备基因文库的宿主细胞主要是A.哺乳动物细胞B.大肠杆菌C.酵母D.枯草杆菌E.昆虫细胞10、哪种方法要求宿主细胞必须是感受态细胞？A.CaCl2法B.病毒感染法C.脂质体载体法D.显微注射法E.穿刺法11、蓝白筛选属于筛选重组DNA克隆方法的哪种？A.PCR分析B.插入失活分析C.核酸分子杂交分析D.酶切分析E.免疫分析12、重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A. T病毒基因组DNA的一部分B. 细菌染色体外的独立遗传单位C. 细菌染色体DNA的一部分D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位E. 真核细胞染色体DNA的一部分13、某限制性内切核酸酶切割5’…GGGGGG▼AATTCC…3’序列后产生A. 5’突出末端B. 5’或3’突出末端C. 5’及3’突出末端D. 3’突出末端E. 平末端14、“克隆”某一目的DNA的过程不包括A. 重组DNA分子导人受体细胞B. 外源基因与载体的拼接C. 基因载体的选择与构建D. 筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞E. 表达目的基因编码的蛋白质15、关于基因文库及其构建，以下叙述错误的是A.基因文库包括基因组文库和cDNA文库B.构建基因组文库常用的克隆载体是λ噬菌体、粘粒和酵母人工染色体系统C.目前构建的cDNA文库可以包含一种生物基因组所含的全部编码序列D.真核生物cDNA文库中的目的基因可以在原核细胞内表达活性产物E.构建cDNA文库要用到逆转录酶多选：1、用目的DNA和质粒制备重组DNA，下列哪些工具酶是必需的？A.DNA聚合酶B.核酸酶C.连接酶D.限制酶E.修饰酶2、影响限制酶切割效率的因素有那些？A.底物纯度B.底物甲基化程度C.底物结构D.反应温度E.反应体系组成3、哪些因素会降低限制酶的特异性?A.高浓度限制酶B.高浓度甘油C.低离子强度D.用Mn2+取代Mg2+E.高pH值4、限制酶的应用非常广泛，包括:A.DNA重组B.质粒改造C. DNA杂交D.探针制备E.基因定位5、关于重组DNA技术使用的DNA 连接酶A.用以将目的DNA与载体共价连接成重组DNAB.包括大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA连接酶C.大肠杆菌DNA连接酶需要NAD，而T4 DNA连接酶需要ATPD.大肠杆菌DNA连接酶用于连接切口或互补黏端E.T4 DNA连接酶用于连接互补黏端或平端6、重组DNA技术常用的DNA聚合酶有A.DNA聚合酶ⅠB. Klenow片段C. Taq DNA聚合酶D. 逆转录酶E. T4 DNA聚合酶7、载体分为克隆载体和表达载体两类。

DNA重组技术

8
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② 工具酶
DNA重组技术中对DNA的“精雕细刻”主要用酶作为工具。分子生物学研究过程中发现的酶，许多都用作工具，所以称在核酸及有关研究中像基本工具一样不可缺少的酶类为工具酶。这类酶包括限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、末端修饰酶、RNA聚合酶、逆转录酶等。
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限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）
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PCR 的特点及应用： PCR操作简便、省时、灵敏度高、对原始材料的质和量要求低。因此，广泛应用于许多领域。 1. 基因克隆及定量、扩增特异性片段用于探针、体外获得突变体、提供大量DNA用于测序等； 2. 遗传病的产前诊断； 3. 致病病原体的检测； 4. 癌基因的检测和诊断； 5. DNA指纹、个体识别、亲子关系鉴别及法医物证； 6. 动、植物检疫； 7. 在转基因动植物中检查植入基因的存在。
限制性核酸内切酶是从细菌中分离提纯的核酸内切酶，可以识别并切开核酸序列特定位点——分子手术刀；是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具，所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶；限制性核酸内切酶不仅是DNA重组中重要的工具，而且与电泳技术相结合还可以用于基因组酶切图谱的鉴定以及法医鉴定等。 Arber、Smith和Nathans因为在发现限制性内切酶方面开创性工作而共同获得了1978年的诺贝尔奖。 13
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6 重组体的转化及鉴定
转化转化过程是指将DNA重组体或质粒转到适宜的宿主细胞中。通过这个过程，使目的基因片段得到大量扩增、或产生需要的基因表达产物、或使宿主生物具备所需的性状，同时目的基因还能在宿主细胞中稳定遗传。若需要让克隆的基因表达和产生大量编码蛋白，可对转化的大肠杆菌进行扩大培养使目的基因大量表达和积累。通过对表达产物分离纯化便可获得想要的产品。

分子生物学各章节复习题

第一章1、概念：分子生物学DNA重组技术结构分子生物学“基因”的分子生物学定义：产生一条功能多肽链或功能RNA所必需的全部核甘酸序列。

2、用你现有的知识解释DNA为什么是遗传信息的载体。

3、关注了解近几年诺贝尔奖获得者及其科学发现。

第二章名词解释:DNA的C值：C值是一种生物的单倍体基因组DNA的总量。

C值矛盾（C Value paradox）：C值一般随生物进化而增加，研究发现某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大，而在两栖类中C值变化也很大，这种C值与生物进化（结构和组织的复杂性）矛盾的现象称为C值矛盾。

冈崎片段DNA的半保留复制（semi-conservative replication）：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。

半不连续复制（semi-conservative replication）：DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。

复制子(Replicon)：从复制原点到终点，组成一个复制单位，叫复制子。

转座子（transposon）：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。

反转录转座子（retrotransposon）：指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。

单链结合蛋白(SSBP-single-strand binding protein)：在DNA复制过程中，稳定已被解开的DNA单链，阻止复性和保护单链不被核酸酶降解。

DNA连接酶: 双链DNA中一条链有切口，一端是3ˊ-OH，另一端是5ˊ-磷酸基，连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键，而使切口连接，不能将两条游离的DNA单链连接起来。

在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用。

拓扑异构酶(DNA Topisomerase):拓扑异构酶І：使DNA一条链发生断裂和再连接，作用是松解（消除）负超螺旋。

2 重组DNA技术练习题

2 重组DNA技术一、A11、基因工程方面说法错误的是A、可构建有生物活性并有药用价值的蛋白质、多肽B、DNA诊断是利用分子生物学及分子免疫学的一种技术C、基因治疗是纠正或补偿其基因缺陷D、基因治疗包括体细胞基因治疗和性细胞基因治疗E、研究疾病基因克隆对认识、理解一种遗传病的发生机制具有重要意义2、下述关于基因工程与医学之间的关系正确的是A、有助于发展新药B、有利于新的遗传疾病的发现，但对其治疗无实质意义C、利用RNA诊断来鉴定遗传疾病D、基因治疗是导入内源性基因以便于纠正其基因缺陷E、基因治疗包括体细胞基因、性细胞基因和干细胞基因治疗3、关于基因工程的叙述，下列哪项是错误的A、也称基因克隆B、只有质粒DNA能被用作载体C、需供体DNAD、重组DNA转化或转染宿主细胞E、重组DNA需进一步纯化、传代和扩增4、有关限制内切酶的叙述，正确的是A、可将双链RNA特异切开B、可将单链DNA随机切开C、可将双链DNA特异切开D、可将两个DNA片段连接起来E、催化DNA的甲基化5、实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是A、Taq酶B、T4 DNA连接酶C、DNA聚合酶ID、DNA聚合酶ⅡE、DNA聚合酶Ⅲ6、关于质粒的叙述，下列哪项是错误的A、大小约为数千个碱基对B、是双链的线性分子C、存在于大多数细菌的胞质中D、易从一个细菌转移人另一个细菌E、常带抗药基因7、下列哪项不是限制性内切酶识别序列的特点A、特异性很高B、常由4～6个核苷酸组成C、一般具有回文结构D、少数内切酶识别序列中的碱基可以有规律地替换E、限制性内切酶的切口均是粘性末端8、基因重组不包括A、转化B、转换C、整合D、转导E、转位9、重组DNA的连接方式不包括A、黏性末端连接B、平端连接C、黏-平头末端连接D、转化作用E、易位作用。

生物化学dna重组试题及答案

生物化学dna重组试题及答案1. DNA重组技术中常用的载体有哪些？答：DNA重组技术中常用的载体包括质粒、噬菌体和人工染色体等。

2. 简述PCR技术的原理。

答：PCR技术（聚合酶链反应）是一种分子生物学方法，用于在体外快速扩增特定的DNA片段。

其原理是利用DNA聚合酶在体外进行DNA复制，通过反复的变性、退火和延伸三个步骤，实现DNA片段的指数级扩增。

3. 限制性内切酶在DNA重组中的作用是什么？答：限制性内切酶在DNA重组中的作用是识别并切割特定的DNA序列，产生具有黏性末端或平末端的DNA片段，便于将外源DNA插入载体中。

4. 什么是基因枪法？它在转基因植物中如何应用？答：基因枪法是一种将DNA直接导入植物细胞的方法，通过高速微粒子将DNA射入细胞。

在转基因植物中，基因枪法可用于将目标基因直接导入植物细胞，实现基因的稳定表达。

5. 描述DNA连接酶的作用。

答：DNA连接酶的作用是连接DNA片段的末端，形成磷酸二酯键，使两个DNA片段连接成一个完整的DNA分子。

6. 什么是Southern杂交技术？它在分子生物学研究中有何应用？答：Southern杂交技术是一种用于检测特定DNA序列的方法，通过将DNA样品转移到膜上，然后用标记的探针进行杂交，从而检测目标DNA序列的存在。

在分子生物学研究中，Southern杂交技术常用于基因克隆、基因表达分析和遗传疾病诊断等。

7. 简述DNA测序的基本原理。

答：DNA测序的基本原理是通过特定的化学或酶学方法，逐个确定DNA分子上的核苷酸序列。

常用的DNA测序方法包括Sanger测序法和下一代测序技术（NGS）。

8. 什么是基因编辑技术？请列举一种常用的基因编辑技术。

答：基因编辑技术是指通过特定的分子生物学手段，对生物体的基因序列进行精确的添加、删除或替换。

常用的基因编辑技术包括CRISPR-Cas9系统，它利用导向RNA（gRNA）引导Cas9酶识别并切割特定的DNA序列，实现基因的精确编辑。

分子生物学8 DNA重组技术liu

一、目的基因的制备
在基因工程中，欲要克隆的基因或要表达的
基因称为目的基因，又称为目的DNA （target DNA），包括cDNA和基因组DNA (genomic DNA)。化学合成法基因组DNA cDNA PCR扩增目的基因
1．化学合成法
对已知碱基序列的目的基因可以利用化学合
三、目的基因
在基因工程中，欲要克隆的基因或要表
达的基因称为目的基因，又称为目的 DNA（target DNA）。包括cDNA和基因组DNA(genomic DNA)。
第二节基因载体
外源DNA本身没有自主复制能力，导入宿主细胞后不能随宿主细胞的繁殖而复制，达不到使外源DNA 片段扩增的目的。如果要将外源DNA导入宿主细胞进行扩增或表达，就需要将外源DNA与某种能在宿主细胞中进行自主复制和表达的DNA重组，并由其携带进入宿主细胞。这种可以用来插入外源DNA片段构建重组DNA分子，并将外源DNA携带进入宿主细胞并进行复制的DNA称为基因克隆载体，简称为载体（vector）。可充当克隆载体的DNA分子有质粒DNA、噬菌体 DNA和病毒DNA。
又称限制性内切酶，简称为限制酶，能识别
双链DNA分子内部的特异位点并裂解磷酸二酯键。
5’AACGTTCGAAGCTTTAGGCCCGAT3’
(一)限制酶的命名与分类
限制酶常以4个字母命名，第一个字母取自产
生该酶的细菌属名，用大写；第二、三个字母是细菌的种名，用小写；第四个字母代表株名。另外用罗马字代表同一菌株中不同限制酶的编号。如HindⅢ的H代表Haemophilus 属，in代表influenzae种，d代表Rd菌株，Ⅲ 代表该菌株中第三个被分离到的限制酶。限制性核酸内切酶分为Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型，基因克隆中所用的限制酶是Ⅱ型酶。

分子生物学复习题

分子生物学复习题（答案在后面）一、名词解释1. 基因2.限制性片段长度多态性3. 载体4.开放阅读框（ORF）5.基因组6.限制性内切酶7.调节基因8.启动子9.CpG岛10. 操纵子11. 基因表达12.诱导13.基因表达调控14. 结构基因15.分子生物学16.大肠杆菌核心酶17.基因工程18.反式作用因子19.癌基因20.顺式作用元件21.流产起始22.质粒23. 内含子24.卫星DNA二、不定项选择题1. 关于DNA复制调控说法正确的是（）A.真核细胞DNA的复制只发生在细胞的S期B.大肠杆菌染色体的复制与细胞分裂直接偶联C.大肠杆菌复制子由起始物位点和复制起点两部分组成D.ColE1质粒DNA的复制完全依靠宿主DNA聚合酶2. 原核生物中起始氨基酰-tRNA是（）A.fMet-tRNAB.Met-tRNAC.Arg-tRNAD.leu-tRNA3. 真核生物RNA的加工过程包括（）A.加帽子反应B.加polyA反应C.RNA的折叠D.RNA的切割4. 链霉素的抑菌机理是（）A.抑制翻译起始。

B.与核糖体大亚基结合，抑制转录起始。

C.与核糖体小亚基结合，引起读码错误。

D.以上都不是5.以三叶草模型表示的核酸种类是（）A.线粒体DNAB.染色体DNAC.tRNAD.rRNA6. 下列哪些是癌基因（）A. RbB. c-mycC. srcD. P537. 对基因表达调控描述正确的是（）A.决定基因在一定时间和空间表达或者不表达的一种机制。

B.决定基因表达量的一种机制。

C.是适应环境变化的一种机制。

D.以上都是。

8. 密码子特性有（）A. 通用性B. 重叠性C. 简并性D. 摆动性9.下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述（）A,σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B.全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物C.全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物D.σ因子、核心酶和促选酶形成的复合物10. 以下那一个编码真核生物蛋白质的核酸序列能直接放入大肠杆菌中表达（）A.mRNAB.cDNAC.基因组基因D.病毒基因11. 基因工程技术的创建是由于发现了（）A. 反转录酶B. DNA连接酶C. Ⅱ型限制性内切酶D. 末端转移酶12. 关于启动子叙述错误的是( )A. 原核和真核生物均有B. 调控转录起始C. 与核糖体结合D．都不能被转录13.遗传信息的转录过程包括（）A. 启动子的选择B. 转录起始C. RNA链的延伸D. RNA链的终止14.下列哪些是抑癌基因（）A. RbB. c-mycC. srcD. P5315. 反式作用因子中的DNA识别或结合域有（）A.螺旋-转折-螺旋结构B.锌指结构C.碱性-亮氨酸拉链D.同源域蛋白16.关于反式作用因子说法正确的是（）A.其化学本质为蛋白质B.可以与DNA结合C.具有基因特异性D.可以调节基因的转录17.关于蛋白质翻译－运转同步机制描述错误的是（）A.蛋白质定位的信息存在于该蛋白质自身结构中B.绝大部分被运入内质网内腔的蛋白质都带有一个信号肽C.仅有信号肽不足以保证蛋白质运转的发生D.蛋白质达到靶位置后，信号肽必须切除18. 原核生物细胞信使RNA含有几个其功能所必须的特征区段，它们是（A. 启动子，SD序列，起始密码子，终止密码子，茎环结构B. 转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，尾部序列C.转录起始位点，启动子，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，尾部序列，茎环结构D.启动子，转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF，尾部序列，茎环结构19.卫星DNA是（）A.高度重复的DNA序列B.中度重复的DNA序列C.GC丰富的DNA序列D.不编码的RNA序列20. 质粒DNA导入细菌的过程称为（）A. 连接B. 转染C. 感染D. 转化21.关于反式作用因子说法错误的是（）A.其化学本质为蛋白质B.可以与DNA结合C.可以调节基因的转录D.具有基因特异性22.参与原核生物转录的物质有（）A. RNA聚合酶B. DNAC. dNTPD. mRNA23. 氯霉素的抑菌机理是（）A.与核糖体小亚基结合，引起读码错误。

重组DNA技术

重组DNA技术
重组DNA技术
1 重组DNA技术的基本概念 2 重组DNA技术的基本原理 3 重组DNA技术所需的基本条件
1 重组DNA技术与基因工程的基本概念
A 重组DNA技术的基本定义
重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与
载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受
体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物
DNA连接酶
DNA连接酶的基本性质
修复双链DNA上缺口处的磷酸二酯键 nick
OH P
5‘ … G-C-T-C-T-G-C-A G-G-A-G … 3’ 3‘ … C-G-A-G A-C-G-T-C-C-T-C … P OH nick 5’
DNA连接酶
5‘ … G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G …
限制性核酸内切酶
II 型限制性核酸内切酶酶解反应的操作
II 型核酸内切酶的多酶联合酶解：对盐浓度要求相同的酶，原则上可以同时酶切，但应注意：
BamHI SmaI
5‘ 3‘ …GCTACATGGATCCCGGGTTCGCAT…3’ CGATGTACCTAGGGCCC AAGCGTA…5’ 5‘… … GCTACATG GATCCCGGG TTCGCAT…3’ 3‘ …CGATGTACCTAG GGCCCAAGCGTA…5’ 5‘ …GCTACATGGATCCC 3‘ …CGATGTACCTAGGG GGGTTCGCAT…3’ CCCAAGCGTA…5’
MgCl2
NaCl DTT Volume TT
10 mM
0 - 150 mM 1 mM 20 - 100 ml 37 ℃ 1 - 1.5 hr
0 - 50 mM 低盐酶
100 mM 中盐酶

分子生物学专题试题题库

《分子生物学》专题题库专题一分子生物学总论一、名词解释1．重组DNA技术：将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。

2. 中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。

3. gene：生物体携带和传递遗传信息的基本单位。

产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。

二、单项选择题1. 证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。

这两个实验中主要的论点证据是：( )A. 从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂B. DNA突变导致毒性丧失C. 生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能D. DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E. 真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2. 1953年Watson和Crick提出：( )A. 多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B. DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链C. 三个连续的核苦酸代表一个遗传密码D. 遗传物质通常是DNA而非RNAE. 分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3. 第一个用实验证明“基因”学说的科学家是（）。

A．T. H. Morgan B. Gregor Mendel C. Watson D. Griffith4. 证实DNA是遗传物质的实验描述正确的是( )A、Avery利用灭活S型肺炎链球菌完成的转化实验和Hershey的噬菌体侵染细菌实验B、Griffith的肺炎链球菌感染实验C、Morgan的果蝇染色体实验D、烟草花叶病毒重建实验5. 生物分类学中，将地球生命分成“五界”；在分子生物学中，常将生命分成“三域”（domain)，“三域”是指：A、动物B、细菌C、真核D、古细菌E、植物三、填空题1. 请写出以下简称的英文全称：DNA：deoxyribonucleicacid RNA：ribonucleicacidmRNA：messengerRNA siRNA：smallinterferingRNA四、简答与论述题1．分子生物学的主要研究内容有哪些？分子生物学的主要研究内容包括以下4个方面：DNA重组技术，基因表达调控研究，生物大分子结构功能研究，基因组、功能基因组与生物信息学研究。

分子生物学复习整理

1、增强子：能提高转录起始效率的序列被成为增强子或强化子。

增强子可位于转录起始点的5’或3’末端，而且一般与所调控的靶基因的距离无关。

2、C值反常：也称C值谬误。

指C值往往与种系的进化复杂性不一致的现象，即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然联系，某些较低等的生物C值却很大，如一些两栖动物的C 值甚至比哺乳动物还大。

3、DNA重组技术：又称基因工程，将不同的DNA片段（如某个基因或基因的一部分）按照预先的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状的技术。

4、基因家族：在基因组进化中，一个基因通过基因重复产生了两个或更多的拷贝，这些基因即构成一个基因家族，是具有显著相似性的一组基因，编码相似的蛋白质产物。

5、SD序列：存在于原核生物起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段，它与16SrRNA3’端反向互补，所以可将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。

根据首次识别其功能意义的科学家命名。

6、核酶：是一类具有催化活性的RNA分子，通过催化靶位点RNA链中的磷酸二酯键的断裂，特异性的剪切底物RNA分子，从而阻断基因的表达。

7、RNA干扰：是利用双链小RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA，从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失表型的方法。

8、反式作用因子：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。

9、操纵子：是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。

10、基因组：生物有机体的单倍体细胞中的所有DNA，包括核中的染色体DNA和线粒体、叶绿体等亚细胞器中的DNA。

11、cDNA文库：真核生物基因组DNA非常庞大，而且含有大量重复序列，无论用电泳分离技术还是用杂交方法都难以直接分离到靶基因片段。

为了较快地分离到相关基因，通过反转录mRNA得到的cDNA不含冗余序列，通过特异性探针筛选的cDNA构成的cDNA文库。

分子生物学考试复习题及答案

分⼦⽣物学考试复习题及答案第⼀章绪论⼀．简述分⼦⽣物学的主要内容。

1.DNA重组技术（⼜称基因⼯程）2.基因表达调控研究3.⽣物⼤分⼦的结构功能的研究——结构分⼦⽣物学4.基因组、功能基因组与⽣物信息学研究⼆．什么是遗传学的中⼼法则和反中⼼法则？遗传学中⼼法则：描述从⼀个基因到相应蛋⽩质的信息流的途径。

遗传信息贮存在DNA中，DNA被复制传给⼦代细胞，信息被拷贝或由DNA转录成RNA，然后RNA翻译成多肽。

反中⼼法则：由RNA逆转录到DNA，再由DNA转录到RNA，然后RNA翻译成多肽、蛋⽩质。

第⼆章染⾊体与DNA⼀、名词解释半保留复制：DNA复制时，以亲代DNA的每⼀条链作为模版，合成完全相同的两个双链⾃带DNA分⼦，每个⼦代DNA分⼦中都含有⼀条亲代DNA链的复制⽅式。

冈崎⽚段：在DNA复制过程中，前导链能连续合成，⽽滞后链只能是断续的合成5 3 的多个短⽚段，这些不连续的⼩⽚段称为冈崎⽚段。

复制⼦：从复制原点到终点，组成⼀个复制单位，叫复制⼦。

插⼊序列：最简单的转座⼦，不含有任何宿主基因，它们是细菌染⾊体或质粒DNA的正常组成部分。

DNA的变性和复性：变性：指DNA双链的氢键断裂，完全变成单链。

复性：指热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。

双向复制：复制从⼀个固定的起始点开始，同时向两个⽅向等速进⾏。

引物酶：⼀种特殊的RNA聚合酶，在DNA模版上合成⼀段RNA链，这段RNA链是DNA复制起始时必需的引物。

转座⼦：存在与染⾊体DNA上可⾃主复制和位移的基本单位。

碱基切除修复：⾸先由糖苷⽔解酶识别特定受损核苷酸上的N-β糖苷键，在DNA上形成AP位点，由AP核酸内切酶把受损的核苷酸的糖苷-磷酸键切开，移去包括AP位点在内的⼩⽚段DNA，由聚合酶Ⅰ合成新⽚段，DNA连接酶最终把两者连接成新的DNA链。

DNA重组修复：即“复制后修复”。

机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA部位可先复制再修复。

在复制时，先跳过损伤部位，在和成链中留下⼀个缺⼝。

分子生物学8DNA重组技术liu

二、其他工具酶
1.DNA连接酶（DNA
ligase）：催化DNA片段之间的3’-5’磷酸二酯键的形成。 2.DNA聚合酶：基因克隆中常用的DNA聚合酶有大肠干菌DNA聚合酶、Klenow片段和 T4DNA聚合酶。 3.末端脱氧核苷腺转移酶：将dNTP逐一加到 DNA的3’-OH上。
3．cDNA
从生物细胞中提取总RNA，通过反转录酶反应合成与mRNA互补的DNA（complementary DNA， cDNA）, 再复制成双链cDNA片段，与适当载体连接后形成重组DNA混合体，重组DNA导入受体菌进行扩增，得到库不同，它只有表达的转录体互补序列，不包括内病毒载体 Adenoviros vector 腺病毒相关载体 Adenovirus-associated virus 慢病毒载体真核表达质粒
pcDNA3.1
第三节基因克隆的基本程序
基因克隆的基本程序包括五大步骤:
目的基因的获取;
(分) 目的基因与载体的拼接;(切、接）将重组体转入受体细胞;（转）重组体的筛选和鉴定；（筛）重组体的扩增与表达
The important bacteriophage（噬菌体） used for vectors are bacteriophageλ and bacteriophage M13. The vectors developed by modifying bacteriophageλ include : λgt system (insert type vector 插入型载体,used for cDNA cloning) EMBL system(replacement type vector置换型载体, used for genormic DNA)

(完整版)分子生物学期末复习题目及答案

①基因：原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位及控制性状的功能单位。

它包括编码蛋白质和RNA的结构基因以及具有调节控制作用的调控基因。

②基因组：含有一个生物体生存、发育、活动和繁殖所需要的全部遗传信息的整套核酸。

即单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。

③C值：真核生物单倍体基因组所包含的全部DNA含量称为该生物的C 值。

用皮克表示（1pg=10-12g, 属于质量单位）④C值矛盾（C值悖理）：C值矛盾指真核生物中DNA含量的反常现象。

即DNA含量与进化复杂性不呈线性关系，表现为：●C值不随着生物的进化程度和复杂性而增加。

●关系密切的生物C值相差很大。

●真核生物DNA的量远大于编码蛋白等物质所需的量。

⑤启动子：是RNA聚合酶识别、结合和启动转录的一段DNA序列，它含有RNApol特异结合和转录起始所需的保守位点，但启动子本身不被转录。

原核启动子分两类：RNApol能直接识别并结合的核心启动子；启动子上游部位，即UP元件，是在RNApol作用时需要的辅因子及其结合的位点。

原核启动子结构有4个保守特征：即转录起始点、-10区、-35区以及-10区和-35区之间的间隔序列－10区（-10box），是DNA解旋酶的重要部位，突变导致解链速率降低。

－35区（Sextama box)，是σ因子识别的重要部位，突变降低了RNA聚合酶的结合速率。

⑥复制叉：在复制起点，已解链形成的单链模板与未解链的双链DNA之间形成的“Y字形”连接区域，称为复制叉。

它是和复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位。

⑦复制眼：原核生物的染色体和质粒都是环状双链分子，复制从Oric(复制起点)开始以顺时针和逆时针双向进行，DNA在复制叉处两条链解开，各自合成其互补链，中间产物形成θ形结构，在电镜下可看到形如眼的结构，即复制眼。

⑧半保留复制：DNA复制时，以亲代DNA的每一条链作为模板，合成完全相同的两个双链子代DNA，产生的每个子代双链DNA中都含有一条亲代DNA链和一条新合成的互补链，这就是半保留复制。

分子生物学-DNA重组

分子生物学-DNA重组(总分：567.00，做题时间：90分钟)一、名词解释(总题数：22，分数：44.00)1.同源重组(homologous recombination)（分数：2.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：(依赖于大范围的DNA同源序列的联会，联会的部分不受限制，重组可发生在联会部分的任何位置上。

在重组过程中，两条染色体或2个DNA分子相互交换对等的部分。

)解析：2.一般重组(general recombination)（分数：2.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：(即非特异重组或同源重组。

)解析：3.位点特异性重组(site-specific recombination)（分数：2.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：(在能识别特定的核苷酸序列的重组酶作用下，DNA分子间的重组。

重组分子间不一定要求碱基配对，即使是碱基配对也只有少数几个碱基形成异源双链体。

这种重组最初是从x噬菌体基因组进入和离开宿主菌染色体的途径中发现的。

)解析：4.转座重组(transposition recombination)（分数：2.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：(重组发生在序列不相同的DNA分子间，在形成重组分子时往往依赖于DNA的复制而完成重组过程，而不依赖于DNA序列间的同源性。

分子生物学复习题 第八章重组DNA技术

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