第6章 动物实验与血清学试验
第六章 实验动物的生物学特性
5.
神经类型： 强、均衡灵活型（活泼型）。 强、均衡迟钝型（安静型）。 强、不均衡兴奋型（不可抑制型）。 弱、兴奋抑制不发达（衰弱型）。
雄鼠
性成熟 体成熟 45-60d 90d
雌鼠
70-75d 80d
3)
妊娠期19-23天，雌鼠性周期4-5天，可维持32个月。 代谢 大鼠对各营养素缺乏非常敏感，易产生营养缺乏症，特别对氨 基酸、蛋白质及维生素的缺乏敏感。 大鼠仅在爪垫上有汗腺，尾巴是散热器官。高温下，靠流出大 量唾液调节体温。
Ear vein before administering of tranquilizer
Ear vein after administering of tranquilizer
Fix the position of needle by your left thumb and withdraw blood from the ear vein
For collection of small amount of blood (Approximate 0.1 ml ) From Tail in Mouse
Blood Collection From Orbital Sinus in Mouse
Should apply anesthetic before blood withdraw Collect amount up to 0.5 ml
Blood Collection From Cardiac Puncture in Mouse
For collect up to 1 ml of blood within a short period of time Must be performed under general anesthetic
【宠物微生物课件】血清学试验
一、血清学试验概述
2、犬瘟热病毒抗体检测卡
犬瘟热是宠物临床常见的传染病之一
一、血清学试验概述
犬瘟热是宠物临床常见的传染病之一
一、血清学试验概述
犬瘟热病毒抗体检测卡结果判定
感谢各位聆听
血清学试验
第二阶段：出现可见反应
➢ 特点：作用较慢，需几分钟、几十分钟或更久。
一、血清学试验概述
（三）血清学试验的种类
01
凝集试 验；
03
补体结合 试验；
05
免疫标记技 术；
07
电免疫反 应；
02
沉淀试 验；
04
中和试验；
06
免疫复合物 散射反应；
一、血清学试验概述
（四）影响血清学试验的因素
01
02
电解质
一、血清学试验概述
2、反应的可逆性
抗原抗体结合是分子表面的结合，这一结合受理化因素影响， 如当温度超过60℃或pH降至3以下时，抗原抗体复合物出现 分离。
一、血清学试验概述
3、最适比与带现象
一、血清学试验概述
4、反应的二阶段性 第一阶段：抗原抗体结合
➢ 特点：作用快，只需几秒至几分钟即可，但无可见反应；Biblioteka ②可逆性④
阶段性:（1）特异性结合阶段。 (2）可见反应阶段。
一、血清学试验概述
1、特异性与交叉性
A抗原
表位1 表位2
免疫动物产生Ab1、Ab2。 Ab1、Ab2 + AgA 特异性反应 Ab1+AgB 交叉反应
B抗原
表位3 表位1
免疫动物产生Ab1、Ab3。 Ab1、Ab3 + AgB 特异性反应 Ab1+AgA 交叉反应
兽医微生物学-分节段的负链RNA病毒
1901年分离到禽流感病毒 1955年明确其与人及哺乳动物流感的关系 20世纪70年代水禽广泛存在的禽流感病毒是流感病 毒的基因库，对家禽业构成潜在的威胁。 禽流感的高致病力毒株对鸡有致病性，旧称“真性 鸡瘟”，现名高致病性禽流感（highly pathogenic avian influenza, HPAI），是OIE规定通报的疫病。
（1）H7N7、H3N8→马； （2）H1N1、H3N2→猪； （3）H10N4→貂；H4N5 →海豹； （4）H1N1 、H2N2 、H3N2 、H5N1 、H3N8 →人； （5）在禽类发现的组合很多，特别是H5N1 、H7N7是 高致病性的
✓抗原漂移与抗原转换
抗原漂移（Antigenic Drift）
④大量的病毒可通过粪排出，在环境中长 期存活，尤其在低温的水中。病毒通过野 禽传播，特别是野鸭。尚不清楚病毒如何 能在野禽群体中常年存在，有可能以低水 平维持，即使在迁徙越冬时也是如此。我 国的多种野鸭有较高的病毒检出率。
（5）诊断
① 病毒的分离与鉴定
鉴于高致病性毒株的潜在危险，一 般实验室只做血清学和RT-PCR检测。 高致病力毒株的分离及进一步鉴定 需送国家级的实验室完成。
第六章 分节段的负股RNA病毒 主要包括以下病毒：
正粘病毒科 布尼病毒科 沙粒病毒科
都是：
分节段的单股负股RNA病毒
正粘病毒科
布尼病毒科
沙粒病毒科
第一节 正粘病毒科 Orthomyxoviridae
一、正粘病毒科的分类
目前：本科分为5个属
✓ 甲型流感病毒属
Influenzavirus A 感染：人、禽、猪、马、貂、海豹、鲸等
2、基因组线状、负链、单股RNA，6~8节段 甲型、乙型、蛙传贫病毒8节段，丙型7节段，托 高土6节段，每个节段都具有末端重复序列，所有 节段的3‘端相同。
兽医免疫学实验教学大纲
兽医免疫学实验教学大纲兽医免疫学实验教学大纲兽医免疫学是兽医学专业中非常重要的一门课程，它主要研究动物免疫系统的结构、功能以及免疫应答的机制。
为了提高学生的实践操作能力和科学研究能力，兽医免疫学实验教学成为了该课程中不可或缺的一部分。
本文将探讨兽医免疫学实验教学大纲的设计。
实验一：血清学实验血清学实验是兽医免疫学实验教学中的重要环节之一。
通过该实验，学生可以了解血清学检测的原理和方法，掌握血清学检测的实验操作技巧。
实验内容包括血清学检测的基本步骤、血清学试验的原理和结果解读等。
此外，实验中还可以引入一些常见的免疫学疾病的血清学检测案例，让学生通过实验操作和实际案例的分析，加深对免疫学知识的理解和应用。
实验二：细胞免疫学实验细胞免疫学实验是兽医免疫学实验教学中的另一个重要环节。
通过该实验，学生可以了解细胞免疫学的基本原理和方法，掌握细胞免疫学实验操作技巧。
实验内容包括细胞免疫学实验的基本步骤、细胞免疫学试验的原理和结果解读等。
在实验中，可以引入一些典型的细胞免疫学实验，如淋巴细胞增殖试验、细胞毒性试验等，让学生通过实验操作和实际案例的分析，加深对细胞免疫学知识的理解和应用。
实验三：免疫组化实验免疫组化实验是兽医免疫学实验教学中的另一个重要环节。
通过该实验，学生可以了解免疫组化的基本原理和方法，掌握免疫组化实验操作技巧。
实验内容包括免疫组化实验的基本步骤、免疫组化试验的原理和结果解读等。
在实验中，可以引入一些常见的免疫组化实验，如免疫组化染色、免疫组化检测等，让学生通过实验操作和实际案例的分析，加深对免疫组化知识的理解和应用。
实验四：免疫技术应用实验免疫技术应用实验是兽医免疫学实验教学中的另一个重要环节。
通过该实验，学生可以了解免疫技术的基本原理和方法，掌握免疫技术实验操作技巧。
实验内容包括免疫技术实验的基本步骤、免疫技术试验的原理和结果解读等。
在实验中，可以引入一些常见的免疫技术应用实验，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹等，让学生通过实验操作和实际案例的分析，加深对免疫技术应用知识的理解和应用。
实验动物血液生理生化参考手册
实验动物血液生理生化参考手册实验动物血液生理生化参考手册第一章：实验动物血液的组成和功能实验动物的血液主要由红细胞、白细胞、血小板和血浆组成。
红细胞主要负责运输氧气和二氧化碳，白细胞则是免疫系统的重要组成部分，血小板则参与血液凝固过程。
血浆则包含了多种蛋白质、激素、营养物质和代谢产物等。
第二章：实验动物血液的采集方法实验动物血液的采集方法包括尾静脉、颈静脉和心脏穿刺等方法。
其中，尾静脉采血是最为常用的方法，适用于小鼠和大鼠等小型实验动物。
颈静脉采血适用于中大型实验动物，如兔子和猫等。
心脏穿刺则适用于大型实验动物，如狗和猪等。
第三章：实验动物血液的生理指标实验动物血液的生理指标包括红细胞计数、血红蛋白浓度、白细胞计数、血小板计数、血糖浓度、血脂浓度、血清蛋白质浓度等。
这些指标可以反映出实验动物的健康状况、代谢水平和免疫功能等。
第四章：实验动物血液生化指标实验动物血液生化指标包括肝功能指标、肾功能指标、心肌酶谱、血清电解质等。
这些指标可以反映出实验动物的器官功能状态、代谢水平和电解质平衡等。
第五章：实验动物血液疾病模型实验动物血液疾病模型包括贫血模型、白血病模型、血栓模型等。
这些模型可以用于研究血液疾病的发病机制、诊断方法和治疗策略等。
第六章：实验动物血液检测技术实验动物血液检测技术包括血常规、生化分析、凝血功能检测等。
这些技术可以用于对实验动物血液的生理和生化指标进行检测和分析，为研究提供数据支持。
总结：实验动物血液生理生化参考手册介绍了实验动物血液的组成和功能、采集方法、生理指标、生化指标、疾病模型和检测技术等方面的内容。
这些知识对于进行实验动物研究和临床诊断都具有重要意义。
动物血清制备实验报告
动物血清制备实验报告本实验旨在研究动物血清的制备方法，探究其应用领域及生物学意义。
实验原理：动物血清是一种含有丰富抗体及其他生物活性因子的生物制品，广泛应用于生物医学和生物技术领域。
其制备方法一般包括以下几个步骤：1. 动物免疫：选取合适的动物作为免疫体，通常选择小鼠、大鼠、兔子等。
根据需要，可选择单一抗原进行免疫，也可以采用多次免疫或多个抗原的混合免疫。
2. 收集血清：免疫后经过一定的时间，将动物取杀，取出血液，离心分离血浆，即可获得动物血清。
3. 补充试剂：血清属于液态制品，需要添加一定比例的防腐剂，如青霉素、链霉素、青霉素等，以防止细菌生长。
实验步骤：1. 准备免疫动物：选择健康、无特殊疾病的动物作为免疫体，并进行预免疫处理，增强动物免疫力。
2. 免疫处理：按照免疫计划，将免疫原与佐剂混合，并按照一定的途径注射到免疫动物体内，可以选择皮下注射、肌肉注射、腹腔注射等。
3. 动物管理：在免疫过程中，需要对动物进行日常管理，包括喂养、环境控制、体温测量等。
4. 血液采集：根据免疫计划，逐步采集免疫动物的血液样本，可以选择尾静脉采血、眼眶静脉采血等方法。
5. 血清分离：采集完血液样本后，将其低速离心，得到纯净的血浆，血浆中包含了动物体内产生的丰富抗体及其他生物活性因子。
6. 血清处理：将血浆分装到无菌试管中，根据需要添加适量的防腐剂，进行混匀搅拌，然后密封保存于-20以下，以保证其稳定性质。
实验结果：通过动物血清制备的实验，可得到丰富的血清样品，其中富含抗体及其他活性分子。
这些血清样品可以应用于多个领域，包括：1. 免疫学研究：动物血清中含有反应特定抗原的抗体，可用于免疫组织化学、免疫电镜等实验，研究免疫反应机制。
2. 生物医学研究：动物血清中的特定抗体可以用于诊断疾病，如乙肝、艾滋病等，通过检测患者血清中的特定抗体水平，判断患者是否感染病原体。
3. 药物研发：动物血清中的抗体可以用作药物的检测和评价，通过检测药物与特定抗体的结合能力，评估药物的疗效和安全性。
动物血清实验室规章制度
动物血清实验室规章制度第一章总则第一条为了规范动物血清实验室管理、确保实验室工作安全有序进行，制定本规章。
第二条动物血清实验室是进行动物血清相关实验的专门场所，主要用于研究生物学、生物医学等领域。
第三条动物血清实验室应当遵守国家相关法律法规，积极开展科学研究，保障实验人员和实验动物的健康安全。
第四条动物血清实验室应当由经验丰富的专业人员负责管理，制定相关制度，监督实验室的运行。
第五条动物血清实验室应当保持实验设备的正常运作，定期维护检修，确保实验室设备的安全可靠。
第六条实验室应当定期对实验室人员进行安全生产知识培训，确保实验室工作的正常进行。
第七条实验室应当建立相应的事故应急预案，保障实验室在发生事故时能够及时、有效地处置。
第八条实验室应当建立完善的管理制度，保障实验室内部秩序和工作效率。
第二章实验室设备管理制度第九条实验室应当配备齐全、功能完善的实验设备，定期进行维护检修，确保设备的正常运转。
第十条实验室应当有专人负责实验设备的管理，建立设备档案，记录设备的使用情况、维护情况等。
第十一条实验室应当组织实验设备的定期检测、校准，确保实验结果的准确性。
第十二条实验室设备出现故障时，应当及时通知设备管理人员进行维修，不得擅自操作。
第十三条实验室应当建立实验设备保养制度，对设备进行定期保养，延长设备的使用寿命。
第三章实验室人员管理制度第十四条实验室应当建立健全的人员管理制度，规范实验室人员的工作行为。
第十五条实验室应当对实验人员进行岗前培训，确保实验人员具备相关专业知识和操作技能。
第十六条实验室应当建立实验人员的值班制度，确保实验室的24小时监控。
第十七条实验人员应当遵守实验室的各项制度规定，不得私自调整实验方案或操作方式。
第十八条实验室应当定期对实验人员进行安全教育培训，增强实验人员的安全意识和应急能力。
第十九条实验室应当建立实验人员奖惩机制，对工作表现优秀的人员进行奖励，对违规行为严厉处罚。
第四章实验动物管理制度第二十条实验室应当建立健全的实验动物管理制度，确保实验动物的健康和安全。
4病毒血清学实验方法
二、方法与步骤
（一）试验材料
病毒
必须是具有感染力的病毒，先进行病毒 滴度的测定。
细胞培养，将病毒10倍稀释接种敏感细 胞，观察CPE，确定滴定终点以CCID50 或LD50表示。
标准病毒试验浓度：100 CCID50/单位 体积或100 LD50/单位体积。
（一）试验材料
抗体
包含病毒抗体阳性和阴性血清。 用细胞培养法测病毒抗体的滴度：将倍比稀释
＝（71－50）/（71－29）＝0.5
大于50%的CPE阳性率血清稀释度的对数+距离比例×稀释 系数的对数=lg10-3+0.5 ×lg0.1=-3.5,其反对数是10-3.5。
阳性血清组的病毒CCID50为10-3.5/0.1ml。
因抗血清组的CCID50为10-3.5，阴性血清组的病毒 CCID50为10-5.5,所以10-3.5-10-5.5=2,表明分离的病毒 是与中和抗体相对应的病毒。
lgCCID50=大于50%的CPE阳性率血清稀释度的对 数+距离比例×稀释系数的对数=lg10-5+0.5 ×lg0.1=-5.5,其反对数是10-5.5.
阴性血清组的病毒CCID50为10-5.5/0.1ml。
用Reed-Muench计算 表： 阳性组血清病毒CCID50的计算
病毒稀释 CPE孔数
第六章 病毒血清学实验方法
第一节、中和试验
（neutralization test)
概念：体外将病毒与特异抗体混合并 发生反应，再将混合物接种至敏感的 宿主体内，然后测定残存病毒感染力 的方法。
– 中和抗体：凡与病毒抗原结合使病毒失去 感染力的抗体。
–优点
敏感性和特异性高； 中和抗体在体内存在时间长。
《动物传染病实验》课件：6 快速血清学检测技术
（四）实验方法
1. 在 一 洁 净 玻 片 的 3 个 位 置 滴 加 3滴 致 敏 乳 胶 （ 每 滴 约
20μl）。 2.用移液器分别取20μl的乙型脑炎病毒阳性血清、阴性血
清和被检血清分别滴加到上述3滴致敏乳胶中，并用枪 头混匀。 3.轻轻摇晃玻片，使抗原和血清充分混匀，静置1~2分钟， 观察结果。
溶血反应：将红细胞多次注射于动物（如将绵 羊红细胞多次免疫家兔）可使之产生相应的抗 体（溶血素），这种抗体与红细胞结合，若有 补体存在，则红细胞被溶解，这种现象称为溶 血反应。红细胞和溶血素被称为溶血系统，常 在补体结合反应中用作测定有无补体游离存在 的指示剂。
补体结合反应中的抗体主要是IgG和IgM。该反 应的特点在于补体本身没有特异性，能与任何 抗原抗体复合物结合。
间接凝集反应：将可溶性抗原（或抗体）先吸附于一种与免疫无关的、 一定大小的颗粒状载体的表面，然后与相应抗体（或抗原）作用。在有 电解质存在的适宜条件下，即可发生凝集。（如：乳胶凝集）
补体结合反应：可溶性抗原，如蛋白质、多糖、 类脂质和病毒等，与相应抗体结合后，抗原抗 体复合物可以结合补体，但这一反应肉眼不能 察觉，如再加入红细胞和溶血素，即可根据是 否出现溶血反应来判定反应系统中是否存在相 应的抗原或抗体，称之为补体结合反应。
参与凝集反应的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。
可分为直接凝集反应和间接凝集反应两类。
直接凝集反应 ：颗粒状抗原（如细菌、红细胞等）与相应抗体直接结合 所出现的凝集现象。分为玻片法和试管法。 玻片法---定性---用已知抗体检测未知抗原 试管法---定量---用已知抗原来检测受检血清中有无某抗体及抗体的含量
免疫标记技术：是将已知抗体或抗原标记上容易显示的物质，通过检 测标记物来反应抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原或抗 体的存在与否或量的多少。
兽医临床病理学 第6讲血清生物化学检测
《兽医临床病理学》第6讲
血清、血浆
• 血清：血液离体后自然凝固，分离的淡黄 色透明液体，缺少某些凝血因子，如纤维 蛋白原（凝血因子Ⅰ）。
• 血浆：血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色 液体，含有纤维蛋白原。
《兽医临床病理学》第6讲
血清样品的制备
• 采集血液，置不含抗凝剂的试管内。 • 室温下自然凝集20～30min • 沿试管壁分离血凝块 • 2000～3000rpm离心10min • 移液管将血清移出，标记。
《兽医临床病理学》第6讲
白蛋白/球蛋白（A/G）
• 是蛋白质异常的第一个评价指标。 • 犬马绵羊和山羊的白蛋白浓度通常高于球蛋白浓度
（A/G>1.0); 牛猪和猫的白蛋白浓度等于或低于球蛋白浓度 （A/G<1.0)
1.“Belinda” is a 6-year-old spayed female German Shepherd dog with a history of unilateral hip replacement for hip dysplasia. 2.Belinda has presented three times within the last year for vomiting and diarrhea related to dietary indiscretion. 3.She presented again today for vomiting associated with getting into the garbage last night. 4.On physical examination, Belinda is quiet and alert. She is very thin with a dull haircoat. No abnormalities or pain are noted on abdominal palpation. Mucous membranes are slightly tacky but pink.（P152，case1）
第06章医药动物实验的基本知识
4.Ⅳ类杂交动物，指不同品系之间的交配而产生的 后代。两个纯系之间杂交产生的第一代动物，又 称F1动物。这种鼠，不仅遗传背景清楚，而且由 于杂交优势，对外界适应性强，产仔率高，反应 较均一，故使用极为广泛 5.纯杂种动物，是指随意交配而繁殖的动物，即为 一般动物室供应的杂种动物。其具有很强的生命 力，适应性强，繁殖快 ，生长迅速易于管理。缺 点是：无固定的遗传学特征，对实验反应性不规 则，重复性差，无明确的可比性，只能充当一般 的预试实验和特点选用不同的动物； 1.根据实验研究的层次和水平选用不同类型的动 物； 3.选用实验动物在考虑数量时应能满足统计上的 需要； 4.能用小动物的实验尽量不用大动物：经济、易 管、来源广、用药剂量小。
5.通过动物实验，创立了“应激学说”，对 临床上广泛应用激素疗法起了重要的指导 作用 6.临床医学的许多重大技术的创造和发展也 与动物实验息息相关。
三、医学科学研究与动物实验的关系 1.医学科研中采用动物实验，可以进行各种因素的 细微探讨，而临床研究难于做到； 2.临床上很多疾病潜伏期或病程很长，研究周期也 长，采用动物模型，可以大大缩短其潜伏期或 病程； 3.临床上平时不易遇到的疾病可用动物实验随时进 行研究 4.药物的长期疗效和远期效应，在实验室采用动物 实验方法来关察，没有过多的影响因素； 5.医学上有些重要概念的确立，只有通过动物实验 才能作到，临床上是根本做不到的。
（二）按微生物学要求 分为
1. Ⅰ级 普通动物（代号 CV） 自然条件下饲养的动物，带菌， 但无人畜共患的病原体。 2. Ⅱ级 清洁动物（代号 CL） 在一般实验动物室内繁殖饲 养，种系清楚，不杂乱，没有该动物所特有的疾病（如脱 脚病等） 3. .Ⅲ级 无特殊病原菌动物（Specific Pathogen Free ， SPF）俗称SPF动物，系指动物体内外均无特殊病原菌和 寄生虫，但又不是绝对无菌的。 4. Ⅳ级 无菌动物（Grem-Free animals，GF）在全封闭、 隔离条件下饲养的纯系动物、无菌。 • 悉生动物（Gnotobiote animals，GN）系指动物体 内带有以被确知的微生物，它比无菌动物的生活力要强得 多，是研究某种特定免疫功能的好材料。
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3. 4. 5.
麻醉之前应禁食，准确称量动物体重，作为计算麻醉剂用 量的依据。 应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的，如戊巴比妥钠、 硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力，使肌肉松弛，而氯胺酮则 相反。 大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿 托品和苯巴比妥钠。 静脉注射麻醉药是必须缓慢，边注射边观察动物。 在麻醉过程中密切观察动物的反应，动物在麻醉期间体温 下降，应注意保温。
家兔的抓取
犬抓取注意点
不要轻易使用长柄铁钳，钳伤造 成的伤害会使它对你更加恐惧， 影响以后实验的进行。 抓取后用绳子将嘴绑住。
狗嘴的捆绑方法
二、实验动物的麻醉方 法
实验动物的麻醉方法
对实验动物进行麻醉的目的是：消除实验过程中引起的痛 苦和不适，确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行， 是动物实验伦理的一个重要方面。 应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素 进行综合考虑，决定选用的麻醉剂和麻醉方法。 麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉 中绝大多数采用全身麻醉。
大鼠
1.5-5.0 1.0-8.0
应
用
大批动物集中处死采血，速度快 大批动物集中采血，若一次少量采,可反 复几次
尾静脉切割采血法
0.01-0.05
0.1-0.5
用于用血量少的检验， 如血常规，能长时期反复多次采血
眼眶后静脉采血法
0.02-0.1
0.2-1.0
能反复多次采血
腋窝动静脉采血法
心脏采血法 腹主动脉采血法
4、犬的采血方法
后肢外侧小隐静脉采血 前肢背侧皮下头静脉采 血 颈静脉采血 股动脉采血
前肢静脉采血 后肢小隐静脉采血
实验动物血液的采集方法
各种实验动物活体安全采血量和致死采血量
动物种类 小鼠 大鼠 豚鼠 兔 犬 猴 最大安全采血量 （ml） 0.3 2 5 10 50 15 最小致死采血量 （ml） 0.5 5 10 40 300 60
2～4小时。 对呼吸和神 经影响小， 1000～1500（ip） 但可降低血 压 30～40（ip） 2～4小时。 注射后作用 迅速，一般 最常用，肌 松不够完全。 约半小时。
45～50（ip）
40～50（ip）
40～50（ip） 20～25（iv） 30～40（iv）
实验动物的麻醉方法
实验动物麻醉应注意的事项
空气栓塞法 优点：方法简单、迅速， 缺点：动物死于急性循环衰竭，各脏器凝血十分明显。 急性失血法 先行麻醉，再分离颈动脉或股动脉，将一根较粗的塑料管插入动脉内放 血。动物在3～5min内即可死亡。 优点：动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种 比较好的方法。 化学药物致死法 通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。 例如： 10％氯化钾溶液：静脉注射，用量为犬20～30ml/只，兔5～10ml／只
一、动物的抓取
动物的抓取
小白鼠的捉持
捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾，置于实验台或鼠笼上， 并稍向后拉；用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的 皮肤，将鼠置于左手心中，拉直后肢，以无名指及小指按住 鼠尾或小鼠的左后肢即可。
小鼠抓取方法
动物的抓取
大白鼠的捉持
大白鼠的捉拿时，可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾， 放在实验台或鼠笼上，并稍向后拉；左手掌面向鼠背，食指 和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入， 将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。
第六章 动物实验与血清学试验
Hale Waihona Puke 主要内容12实验动物的抓取方法
实验动物的麻醉方法
3 实验动物血液的采集方法 4 实验动物各种体液的采集方法 5
实验动物的处死方法
进行实验操作前必须注意的事情
1. 实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试
验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑，减少一些不 必要的动物实验，如若不得不做的动物实验，要尽可能 将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。 2. 动物实验的实践性非常强，不能仅靠书本理论知识，需 要通过反复实践加以掌握，以保证实验的顺利进行和减 少动物承受的痛苦
大 鼠 抓 取 方 法
动物的抓取
豚鼠的捉拿、固定
豚鼠胆小易惊，抓取时必须稳、准、迅速。 先用手掌扣住鼠背，抓住其肩胛上方，将手张开，用手指环握颈部，另一只 手托住其臀部，即可轻轻提起、固定。
豚鼠抓取方法
动物的抓取
家兔的捉持
用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔 提起，另一手托其臀部，使兔呈 坐位姿势。
实验动物的麻醉方法
全身麻醉
吸入麻醉法：用挥 发性麻醉药。 常用麻醉药： 乙醚 氯仿
注射麻醉法：用非 挥发性麻醉药。 常用麻醉药： 戊巴比妥钠 硫喷妥钠 氯氨酮 乌拉坦
实验动物的麻醉方法
常用非挥发性麻醉药的剂量
药物及常 用的溶液 浓度 乌拉坦 （20～ 25%） 戊巴比妥 钠 （ 1～ 4％） 硫喷妥钠 （2～4％） 剂量（mg/kg) 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 1000～1200（iv） 1000～1500 （ip） 1000～1500 （ip） 1000～1500 （ip） 麻醉持续时 间与特点
0.5-1.5
-
1.0-5.0
0.2-1.0 5.0-10.0
需处死动物，麻醉后采血
需处死动物，麻醉后采血
实验动物血液的采集方法
2、豚鼠采血方法
耳缘切口采血 背中足静脉采血 心脏采血 耳缘静脉采血 耳中央动脉采血 颈静脉采血 颈动脉采血 心脏采血
3、兔的采血方法
实验动物血液的采集方法
血清学试验
本质：抗原抗体在体外出现肉眼可见的特 异性反应 优点：特异性强、敏感性高、简便、快速 血清学试验包括：血清学鉴定和血清学诊 断
血清学鉴定
用含已知特异性抗体的免疫血清（诊断血 清）与分离培养出的未知纯种细菌或标本 中的抗原，进行血清学反应，以确定病原 菌的种或型。
直接凝集试验
四、动物各种体液的采集方法
动物各种体液的采集方法
1、尿液的采集方法
常用的采集方法较多，一般在实验前需给动物灌服一定量 的水。 代谢笼法（适用于大、小鼠） 导尿法（常用于雄性兔、狗） 压迫膀胱法（适用于兔、狗等较大动物） 输尿管插管法 膀胱插管法 膀胱穿刺法 剖腹采尿法 反射排尿法
三、实验动物血液的采集方 法
实验动物血液的采集方法
1、大鼠、小鼠的采血 方法
尾部采血 眼眶后静脉丛采血 颈(股)静脉或颈(股)动脉 采血 摘眼球采血 断头采血 心脏采血
尾部采血
心脏采血
大小鼠不同采血方法的比较
采血量（ml） 采血方法 断头采血法 摘眼球采血法
小鼠
0.2-1.0 0.2-1.5
五、实验动物的处死方法
实验动物的处死方法
安死术的概念
“安死术”是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动 物过程中减少动物的惊恐或焦虑，安静地、无痛苦地死亡。
实验动物的处死方法
1、大鼠小鼠处死方法
颈椎脱臼法 急性失血法 麻醉致死法 断头法 击打法
实验动物的处死方法
2、犬、兔、豚鼠处死方法
国际上对动物实验伦理有如下五项要求:
⑴动物居住空间应符合标准 ,注意日常的饲育管理 , 不使动物饥饿、缺 水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶使用犬、猫和猴时，实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧 和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。 ⑸要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。
荚膜肿胀试验
血清学诊断
已知抗原检测血清中相应抗体 取患者急性期和恢复期双份血清，后者的 抗体效价比前者升高4倍或4倍以上才有诊 断意义。
THE END
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动物各种体液的采集方法
2、消化液的采集
唾液（直接抽取法；制造腮腺瘘法） 胃液（直接收集胃液法；制备胃瘘法） 胰液和胆汁（通过对胰总管和胆总管的插管而获得）
3、脑脊液的采集
狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法 大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法
4、其他体液的采集
胸水的采集 腹水的采集 骨髓的采集 精液的采集 阴道内液体的采集