实验四新城疫病鸡剖检及病毒学检查
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)背景介绍•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病，严重影响鸡类养殖业。
•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。
实验目的•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。
•提供可靠的数据支持，用于预防和控制鸡新城疫的传播。
实验设计•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•分为实验组和对照组，实验组注射疫苗，对照组不注射。
•定期进行血液检测，测量抗体水平。
实验步骤1.收集血样。
2.提取血清。
3.使用特定抗体试剂盒进行检测。
4.测量光密度值，判断鸡新城疫抗体水平。
5.记录实验结果。
实验结果•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。
•实验组的鸡只无明显临床症状，对疫情具有稳定抵抗力。
•对照组鸡群出现多例感染病例，病死率较高。
结论与建议•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况，为预防和控制疫情提供重要依据。
•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力，减少感染风险。
•鼓励养殖场加强抗体检测工作，及时发现病例并采取相应措施。
致所有鸡农：鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。
本实验通过抗体检测方法，证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力，减少感染的风险。
希望您能严格按照抗体检测规程，提高鸡只的免疫力，保障养殖业的稳定发展。
感谢您的关注与支持！注意：本报告仅为实验结果总结，并非具体实验报告。
具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。
实验方法•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。
•对照组的鸡只不注射疫苗。
•按照一定周期，定期采集血液样本。
数据分析•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。
•实验组的鸡只抗体水平明显升高，且持续稳定。
•对照组的鸡只抗体水平较低，易受感染。
结果讨论•实验结果证明，注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。
•抗体检测是一种可靠的方法，可以快速判断鸡群的感染情况。
•实验结果也表明，饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。
结论•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。
鸡新城疫的诊断与防治
鸡新城疫的诊断与防治鸡新城疫（Newcastle disease，ND）是一种重要的急性和高度传染的禽类疾病。
该疾病主要影响家禽，特别是鸡、火鸡和鸽子。
鸡新城疫由鸡新城疫病毒（NDV）引起，病毒为单股负链RNA病毒，属于禽病副黏病毒科。
鸡新城疫主要通过患禽病毒的禽类传播。
鸡新城疫的症状包括呼吸道症状、神经系统症状和消化道症状。
患禽可能表现为呼吸困难、喘鸣、鼻和眼部分泌物增多、粪便变浓、瘫痪和死亡。
为了及时诊断和控制鸡新城疫，下面将介绍鸡新城疫的诊断和防治措施。
1. 临床表现2. 实验室检测（1）病毒分离和鉴定：采集患禽的呼吸道分泌物和组织标本，通过病毒分离方法将病原体鉴定为鸡新城疫病毒。
（2）鸡新城疫病毒抗体检测：使用适当的血清学试验检测患禽中鸡新城疫病毒的抗体水平。
1. 疫苗接种疫苗接种是预防鸡新城疫的最有效手段之一。
目前主要有灭活疫苗和活疫苗两种类型。
在疫情流行地区和高风险地区，可以选择合适的疫苗进行接种，提高鸡群的免疫力。
2. 卫生管理加强禽舍卫生管理，保持仔禽舍的清洁卫生，严格执行生物安全措施，防止病原体通过人员、工具和设备等途径传播。
3. 隔离管理发现疑似病例时，应立即进行隔离，防止疫情扩散。
隔离管理也包括对患禽的处理和处置，防止病原体传播。
4. 综合防控除了疫苗接种、卫生管理和隔离管理外，还应加强对野生鸟类和其他动物的监测和管控，防止进一步传播鸡新城疫病毒。
建立健全的监测系统，及时发现和报告疫情，加强对鸡群的日常监测和管理。
鸡新城疫是一种重要的禽类疾病，对禽类行业造成了严重的经济损失。
及时诊断和防治鸡新城疫是保障禽类健康和禽类产品质量的重要举措。
通过加强疫苗接种、卫生管理、隔离管理和综合防控，可以有效预防和控制鸡新城疫的传播。
希望禽类养殖企业和相关部门能够加强合作，共同做好鸡新城疫的防治工作，保障禽类产业的健康发展。
鸡病解剖实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解鸡的内部解剖结构，熟悉鸡的器官系统及其功能。
2. 通过病理解剖，观察鸡内脏器官的病理变化，了解常见鸡病的病理特征。
3. 提高实验操作技能，培养科学思维和观察能力。
二、实验材料与工具1. 实验材料：一只已经处死的病鸡（疑似患有新城疫）。
2. 实验工具：解剖剪、解剖刀、镊子、解剖盘、解剖台、放大镜、显微镜等。
三、实验步骤1. 准备工作- 将病鸡解剖台擦拭干净，铺上解剖布。
- 将病鸡平放在解剖台上，用解剖剪沿颈部切开皮肤，暴露气管。
- 用解剖刀沿着气管剪开皮肤和肌肉，将气管与周围的器官分离。
2. 解剖气管- 观察气管内部是否有炎症、肿胀、出血等现象。
- 观察气管壁的厚度、颜色、弹性等。
3. 解剖心脏- 沿着心脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露心脏。
- 观察心脏的大小、形状、颜色等。
- 检查心脏瓣膜是否正常，心腔内是否有血液凝固或血块。
4. 解剖肺脏- 沿着肺脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肺脏。
- 观察肺脏的大小、形状、颜色等。
- 检查肺脏是否有炎症、出血、水肿等现象。
5. 解剖肝脏- 沿着肝脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肝脏。
- 观察肝脏的大小、形状、颜色等。
- 检查肝脏是否有炎症、出血、肿瘤等现象。
6. 解剖脾脏- 沿着脾脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露脾脏。
- 观察脾脏的大小、形状、颜色等。
- 检查脾脏是否有炎症、出血、肿瘤等现象。
7. 解剖肾脏- 沿着肾脏的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肾脏。
- 观察肾脏的大小、形状、颜色等。
- 检查肾脏是否有炎症、出血、结石等现象。
8. 解剖肠道- 沿着肠道的侧面剪开皮肤和肌肉，暴露肠道。
- 观察肠道的大小、形状、颜色等。
- 检查肠道是否有炎症、出血、粘连等现象。
9. 总结观察结果- 对各个器官的病理变化进行记录和分析，找出可能的病因。
- 对病鸡的死亡原因进行初步判断。
四、实验结果与分析1. 气管：气管内有炎症，气管壁增厚，颜色暗红。
2. 心脏：心脏大小正常，颜色暗红，心腔内有少量血液凝固。
鸡常见病毒病
鸡常见病毒病鸡常见病毒病一、鸡新城疫鸡新城疫是急性、败血性、毁灭性传染病。
传播快，死亡率高，世界各地均有流行，亚洲地区流行广泛，故又称亚洲鸡瘟。
（一）病原：鸡新城疫病毒（NDV）属副粘病毒，存在于病鸡的唾液、鼻液、粪便、血液和所有的组织器官中，所以病鸡是主要传染源。
病毒在低温阴湿条件下很长时间不会死亡，但在直射阳光下很快被杀灭，对消毒药抵抗力不强。
感染途径主要是呼吸道和消化道。
病毒能使一些禽类及哺乳动物的红血球发生凝集，这种凝集又能为特异血清所抑制，这一特性可用来诊断的鉴定病毒或进行免疫监测。
（二）症状和剖检：最急性型病鸡常不显任何症状而突然死亡，多见于流行初期。
常见为急性型，病鸡体温升高达43－44℃，食欲减退或废绝，有渴感，精神萎靡，缩颈垂头，翅下垂，闭眼，鸡冠及肉髯变成暗红或紫色，咳嗽，呼吸困难，常发出“咯咯”声，倒提时有大量酸臭液体从口中流出，粪便稀薄呈黄绿色或黄白色，后期排出蛋清样排泄物，一般2－5天死亡。
剖检有全身性膜变化，嗉囊充满酸臭稀薄的液体和气体。
腺胃粘膜水肿，其乳头或乳头间有出血点或溃疡及坏死，这是本病的特征变化。
肌胃角质层下也常有出血，小肠至盲肠、直肠有大小不等的出血点，肠粘膜上有纤维素性坏死性病变，假膜脱落后形成溃疡。
盲肠扁桃体肿大、出血和坏死，周围组织水肿。
肺有时水肿或瘀血。
产蛋母鸡卵黄膜和输卵管充血，卵黄膜极易破裂，卵黄流入腹腔引起卵黄性腹膜炎。
亚急性或慢性型病鸡病程稍长，主要出现神经症状，翅、腿麻痹，运动失调，常见伏地转圈，头向后向一侧扭转。
近年来普遍使用疫苗，但有的免疫程序不尽合理，母源抗体或免疫抗体干扰活疫苗的作用，使一些个体免疫力不够坚强，导致出现非典型新城疫。
病鸡症状不明显，死亡率不高，以呼吸系统症状为主，产蛋鸡群常出现产蛋量突然急剧下降，产小蛋、软壳蛋或沙壳蛋，有的蛋白稀溥如水。
病初对病鸡群采血进行血凝抑制（HI）试验，HI 抗体水平不整齐，个体之间相差很大，病后2周再检查，HI抗体水平有明显的不正常升高。
鸡得了新城疫会自愈吗？治疗鸡新城疫方案大全
鸡得了新城疫会自愈吗？治疗鸡新城疫方案大全鸡得了新城疫会自愈吗？鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性高度接触性传染病，死忙率高，一年四季都能发病，所以一旦发病要赶紧治疗。
那么治疗鸡新城疫方案都有哪些呢？鸡得了新城疫会自愈吗？鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性高度接触性传染病，死忙率高，一年四季都能发病，所以一旦发病要赶紧治疗。
那么治疗鸡新城疫方案都有哪些呢？鸡得了新城疫会自愈吗？(1)本病一年四季均可发生，以冬春季节多发。
(2)鸭、鹅可以带毒，但不致死，鹌鹑、鸽、观赏鸟等也可感染并可引起发病。
(3)非典型新城疫发生速度慢，发病数量少，流行缓慢，死亡率低。
与典型新城疫比较，发病率高，死亡率高，流行快，有明显区别。
所以鸡得了新城疫不会自愈，一定要及时处理。
鸡得了新城疫怎么办？1.快速诊断：主要出现咳嗽为主的呼吸道异常，进到鸡舍，首先给你的感觉就是鸡咳嗽；部分出现怪叫，“咯”的尖叫声，鸡精神沉郁，有闭眼，缩颈等；拉绿色粪便，翠绿色粪便。
产蛋率下降，蛋壳质量差等。
2.建议养殖户不要自己对不能确诊的鸡群进行，疫苗治疗或药物治疗，否则一旦有误损失不可估量。
尤其发现鸡群咳嗽的现象，不得忽视待之。
3.必要时要进行剖检诊断。
典型的鸡新城疫的主要病理变化为全身败血症样变化，以呼吸道和消化道的病变为严重。
4.对已经感染的病鸡进行紧急治疗，没治疗价值的尽快淘汰掉，安全无害化处理。
5.同时做好鸡场内其它健康鸡与病鸡及病区的隔离，消毒，管理等工作，此外还要对本鸡场场其它健康鸡群进行疫苗紧急预防。
治疗鸡新城疫方案大全鸡新城疫治疗方案一：药物方剂①双黄连口服液100毫升、维生素C泡腾片10片、盐酸左旋咪唑可溶性粉2克，混合饮水，供成鸡100只或雏鸡200只使用，分早晚2次饮水给药，连用3-5天。
②清瘟败毒散和板青颗粒混合使用。
清瘟败毒散100-300克，供100只成鸡拌料使用，连用3-5天。
板青颗粒50克，分2次饮水，连用3-5天。
鸡常见病的诊断及防治--aaaa
鸡常见病的诊断及防治一新城疫新城疫俗称鸡瘟，是由新城疫病毒引起的一种急性，高效接触性败血传染病。
〈1〉症状患鸡精神沉郁，食欲减退，喘，张口呼吸，闭眼呆立，排黄绿色或白色稀类，嗉囊内充满粘液，倒提流出大量酸臭液体，鸡冠及肉垂暗红或青紫。
蛋鸡则产蛋迅速下降、蛋壳奶色、粗糙、并出现畸形蛋、软皮蛋。
后期见神经症状，如运动失调，转圈、扭劲、头触地或抬头望天等。
非典型新城疫主见呼吸困难，鸡只零星死亡，拉绿粪，生产性能下降，个别见神经症状。
〈二〉剖检：嗉囊内积有酸臭液体，气管环充血，内有粘液；腺胃乳头点状出血，腺胃两端粘膜可见出血和溃疡，肌胃角质膜下偶见出血条纹，十二指肠近末端，卵黄遗迹后4—5厘米处，盲肠尖回肠、盲肠扁桃体等见肿胀，出血或溃疡，直肠针尖关出血，腹腔脂肪见出血点，卵泡充血、出血、畸形、液化，肝脏有时见出血点或坏死灶。
〈三〉防治：1、4—5 倍量新城疫系Ⅳ苗饮水紧急接种。
2、乳酸环丙沙星5g/200斤水连饮4 天。
3、电解多维饮水。
二、传染性法氏病〈一〉症状：突然发病，病鸡精神沉郁，采食下降，羽毛蓬松，缩头呆立，闭眼卧地不起。
拉白色稀粪，后迅速死亡，两爪干桔。
〈二〉剖检：胸肌、腿肌散布点头出血或条纹状出血斑，脾胃和肌胃交界处见血带和出血斑，肾脏肿胀，尿酸盐沉积呈“花斑肾”。
法氏囊肿大变硬，浆膜水肿，呈胶冻样，外观浅黄色或柴葡萄状，切开囊腔，皱褶水肿，内见血液或粘液性渗出物，后期法氏囊萎缩，内有黄色干酷样物质。
〈三〉防治1、法氏囊高免卵黄抗体2mL/只一次性注射。
2、电解多维饮水。
3、蒽诺沙星5g/200斤饮水，连用4天。
三、马立克氏病本病最早3周龄发病，但多数在2—5月龄发病。
<一>症状病鸡消瘦、贫血、鸡冠萎缩，呈苍白色，拉绿色稀粪，生产性能下降或丧失，最终衰竭死亡。
神经型患鸡见神经状如大劈叉、垂翅、软劲等。
眼型常为一侧眼失明，虹膜褪色，瞳孔缩小，边缘不整齐。
皮肤主见局部皮肤增厚，上有灰白色大小不等的肿瘤病灶。
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告
鸡新城疫临床检疫和病理学检疫实验报告目的和要求
掌握鸡新城疫（ND）的临床诊断要点。
设备与器材
患新城疫的病、死鸡各一只，常规解剖器械一套。
口罩、乳胶手套一双及消毒液。
内容和方法
1. 流行特点
鸡发生典型 ND 时，发病率和病死率都很高，仅鸡感染发病。
2. 临床症状
典型鸡 ND 主要出现呼吸困难、精神沉郁、腹泻、产蛋下降、神经症状。
3. 剖检变化
解剖前戴口罩和手套，死鸡用消毒液浸泡，按病理剖检程序进行剖检。
典型鸡 ND 的特征性病变是全身呈出血性败血变化，剖检见腺胃乳头出血，盲肠扁桃体和肠粘膜呈条纹状出血及纤维素性坏死点，根据以上特点一般可以确诊。
需要指出的是，对于缺少典型症状和病变的非典型病例，必须进行实验室诊断。
剖检后，消毒处理后深埋。
鸡新城疫的检疫
二、非典型新城疫：
1.症状：发生于有一定抗体水平的免疫鸡群，病 情比较缓和，发病率和病死率都不高。症状不 典型。 雏鸡以呼吸道症状为主，张口呼吸，有“呼噜 ”声，咳嗽，口流黏液，排黄绿色稀粪，个别 的继而出现神经症状（扭颈）。继发其它病， 可引起死亡。 产蛋鸡表现为产蛋下降，10%∼30%。蛋壳颜色 变浅，软壳蛋、畸形蛋增多。
症状与病变
一、典型新城疫：
1.症状： 可根据临床表现和病程长短分为最急性型、 急性型、亚急性型或慢性型。
（1）最急性型:无明显症状，突然死亡。
（2）急性型：
发病急，发病率和病死率高；
体温升高，可达44℃，精神沉郁，羽毛松乱，缩颈闭眼， 离群独处；
咳嗽，呼吸困难，张口呼吸，发出“咯咯”的喘鸣音，冠、 髯紫黑；
吸道病变可见鼻腔、喉、气管粘膜充血 、出
血，气管内有大量粘液，肺可见淤血或水肿。 脑膜充血或出血。 产蛋鸡卵泡和输卵管显著充血，卵泡膜极易破 裂以致卵黄流入腹腔引起卵黄性腹膜炎。
肠枣核形 出血溃疡
十二指肠的升段１／２处；卵黄蒂后约３厘 米处；回肠的前1/5 处（即两个盲肠尖相 夹处）可见椭圆形出血、坏死溃疡灶。
4.培养：鸡胚(SPF)9--11日龄尿囊腔或鸡胚成纤 维细胞。 5.本病毒存在于病鸡所有器官、体液、分泌物和 排泄物中，但以脑、脾、肺中的含毒量最高， 故分离病毒时多用脾、脑、肺为接种材料。 6.病毒对热、光等物理因素的抵抗力较其他病毒 稍强，但对一般的消毒剂敏感，常用2%氢氧化 钠、1%来苏儿等。
2.剖检变化： 其病变不很典型，仅见粘膜卡他性炎症，喉头和 气管粘膜不同程度的充血、出血，有多量粘液。 在后期病死鸡中，如多剖检一些病例，有时可发 现腺胃乳头（刀刮后出血明显）和肌胃角质膜下、 十二指肠黏膜轻度出血。 卵泡：发育不良，偶尔有较大卵泡，但卵黄变稀， 卵黄囊出血。
鸡新城疫的实验室诊断及鉴别
鸡新城疫的实验室诊断及鉴别鸡新城疫又被称为亚洲鸡瘟，其病原为新城疫病毒，该病传染性很强，具有很高的发病率以及死亡率。
鸡只患病后，常常出现无法正常呼吸、严重下痢以及神经症状，对其进行剖检，可以看到病鸡消化道内存在呈弥漫性的溃疡或者点状出血。
当前，主要结合临床症状以及病理变化对该病进行初步诊断，要想对该病进行确诊，还需依靠实验室诊断工作。
1 实验室诊断1.1病毒分离病鸡表现出相关临床症状以后，其绝大多数器官以及分泌物中已经存在大量的病毒。
病鸡脑、肺、脾以及呼吸道分泌物均可作为病毒分离的材料。
如果死鸡已经发生了腐败，应当从骨髓分离病毒。
在实际诊断过程中，最好采用接种孵化9-10天的鸡胚来分离病毒。
在无菌条件下提取病料，采用生理盐水将病料稀释10倍或者20倍制为悬浮液，采用离心机离心后取上清液，加入300-500IU/ml的青霉素或者100-300μg/ml的链霉素，接着在0-4℃的环境中放置4h或者在37℃的环境中放置1h。
提取0.1ml上述清液并将其接种于鸡胚尿囊腔中。
如果病毒为强毒株，仅仅2-3天即可将鸡胚杀死；如果病毒为弱毒株，通常需要4-6天来杀死鸡胚。
每天需要对鸡胚进行检查，在此过程中一旦发现死亡，需要立即收集尿囊液以开展细菌检查、血凝试验以及血凝抑制试验。
为了加快诊断的速度，也可以在鸡胚死亡之前，采用注射器将尿液吸出以开展检查工作，接着将鸡胚放入温箱进行孵化，通常接种36h后即可检测出血凝素。
1.2 血凝抑制试验如果抗鸡新城疫血清能够对可疑病毒对红细胞所产生的凝集作用进行有效抑制，即可将该病毒判定为鸡新城疫病毒[1]。
另外，可以通过鸡新城疫病毒判断病愈鸡血清内是否存在能够对红细胞凝集进行抑制的抗体，从而诊断出病鸡是否感染了新城疫。
如果可疑病鸡其血清能够对新城疫病毒对血红细胞的凝集作用进行有效抑制，即可确定该鸡曾经患有新城疫。
通常情况下，对于急性病鸡，在其死亡之前血液中往往不存在抗体，如果病程能够达到5-6天，病鸡血液中级存在血凝抑制抗体；如果病程超过了10天，其抗体效价甚至可以达到1：1280。
肉鸡的疾病诊断实验报告分析
④加入等体积异丙醇，轻轻颠倒离心管充分混匀液体，室温放置10min；⑤4℃，13000r/min离心15min用枪小心吸去所有上清；⑥1mL75%乙醇洗一遍，4℃，10000r/min离心10min，用枪小心吸去所有上清，在超净台中干燥5min；⑦加入20μL DEPC处理水溶解沉淀。
（3）反转录（10ｕl体系）表4反转录体系试剂剂量5×Buffer 2.0ｕldd H2O 4.5ｕlRT酶0.5ｕl引物 1.0ｕl反转录其条件:37℃15min,85℃15s,16℃10min。
转录产物于-20℃保存。
（4）反转录产物进行PCR扩增用4对PCR扩增引物，禽流感H5,H9引物，流感病毒引物，新城疫病毒引物表5引物信息表引物名称序列目的基因片段新城疫上游引物5’-ACCAAAGAGAATCTGA-3’330bp 新城疫下游引物5’-GACAGTCCCACTGGTCTC-3’1图分别为新城疫、禽流感H1、禽流感H5禽流感H9检测结果：但由于图中阳性条带均不是目标条带，所以不能判定其是否为新城疫或禽流感病毒的感染，且由于之前鸡群接种过疫苗，所以还需要进一步试验来验证。
2鸡胚攻毒实验由于该鸡群接种过新城疫、禽流感疫苗，所以PCR鉴定结果的阳性不能判定是野毒感染还是由于疫苗的作用，于是为了鉴定是否为野毒感染，我们采用接种SPF鸡胚方法，回收尿囊液，测定病毒的凝血效价来进行判定。
2.1材料与方法：10日龄SPF鸡胚18枚，分别接种从脑组织提取的病毒7枚，从气管提取的病毒7枚，4枚空白对照。
尿囊腔接种标记气室与胚胎位置，并在胚胎面与气室交界之边缘上约1mm处避开血管作一标记，此即为注射点。
将鸡胚竖放在卵杯上，钝端向上。
消毒气室的蛋壳，用开孔器钻开一长约2mm小口。
再次消毒钻孔区，接种病毒液0.2ml，将针头刺入孔内，经尿囊膜入尿囊腔，注入病毒液。
消毒后用石蜡溶化封孔，于37℃孵卵器孵育。
然后每天对鸡胚进行活力检测，看其是否死亡。
鸡新城疫的检疫及处理
新城疫的临诊检疫要点
1、主要侵害鸡。不同品种、年龄、性别的鸡都易感，但幼龄鸡更易感。 秋、冬季多发。感染率、病死率都很高。呈暴发或地方流行性。 2、在少数突然发病，迅速死亡之后，出现多数体温升高，缩颈闭眼， 冠暗紫，离群独处。口鼻流出多量黏液，甩头、吞咽，呼吸困难，病鸡 群中“咯咯”喘鸣此起彼伏。便稀黄绿，混有血丝。肢体麻痹，昏迷死 亡。病程2-5天。5天以上不死者，神经症状明显，歪头斜颈，旋转运 动，后退倒地，共济失调，受刺激时发作加剧。温和型成鸡产蛋率急剧 下降，间有拉稀，病程较长。 3、特征性病变 全身浆膜、黏膜出血，尤其消化道、呼吸道最明显。腺 胃乳头和肌胃角质层下出血，盲肠扁桃体肿大、出血、坏死，肠黏膜出 血、纤维素性坏死，形成伪膜及溃疡。
观察
弃去50
振荡1min，37℃静置20min，每5 min观察一次，观察1h
新城疫-HA试验结果判定
“+”表示红细胞完全凝集后沉于孔底，呈颗粒状பைடு நூலகம்边缘不整齐或 呈锯齿状，液体中无悬浮的红细胞。
“-”表示红细胞未凝集，反应孔底部的红细胞沉淀成小圆点，位 于小孔最底端，边缘水平。
“±”表示可疑。红细胞下沉情况介于“+“与”-”之间。 新城疫病毒液能凝集鸡的红细胞，但随着病毒液被稀释，其凝集 红细胞的作用逐渐变弱。当稀释到一定倍数时，就不能使红细胞出 现明显的凝集，从而出现可疑或阴性结果。能使红细胞发生完全凝 集的病毒的最大稀释倍数为该病毒的血凝滴度或称凝集价。
12 盐水 对照
50 / /
观察
振荡1min，37℃静置20min
弃去50
0.5%红细胞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50
50
实验四 鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价
【病毒血凝抑制试验的操作方法（单位：L） 】
弃50
以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血清的血凝抑制效价，即HI效价。
【结果判定】
• 以100％抑制凝集（完全不凝集）的被检血清最大稀释度为该血 清的血凝抑制效价，即HI效价。凡被已知新城疫阳性血清抑制血 凝者，该病毒为新城疫病毒。
暗而明，暮则自明而暗，或暗或明，变化不一，这是山间早晚的景色。野花开放，有一股清幽的香味，好的树木枝叶繁茂，形成浓郁的绿荫。天高气爽，霜色洁白，泉水浅了，石底露出水面，这是山中四季
的景色。意译法：太阳升起，山林里雾气开始消散，烟云聚拢，山谷又开始显得昏暗，清晨自暗而明，薄暮又自明而暗，如此暗明变化的，就是山中的朝暮。春天野花绽开并散发出阵阵幽香，夏日佳树繁茂
琴一张，有棋一局，而常置酒一壶。”客曰：“是为五一尔，奈何？”居士曰：“以吾一翁，老于此五物之间，岂不为六一乎？”写作背景：宋仁宗庆历五年(1045年)，参知政事范仲淹等人遭谗离职，欧阳
修上书替他们分辩，被贬到滁州做了两年知州。到任以后，他内心抑郁，但还能发挥“宽简而不扰”的作风，取得了某些政绩。《醉翁亭记》就是在这个时期写就的。目标导学二：朗读文章，通文顺字
鸡新城疫的实验室诊断及免疫效果的评价
目的
1、掌握鸡新城疫的临诊要点。 2、了解和掌握鸡新城疫的实验室诊断和免疫监测技
术。
内容：
1、鸡新城疫的临诊要点。 2、鸡新城疫的实验室诊断。 3、鸡新城疫的免疫效果评价。
血凝试验（HA）和血凝抑制试验 (HI)
HA和HI的原理
⒈HA试验：许多病毒表面有血凝素，能与各种动物的红 细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称为 病毒的血凝现象 。
鸡新城疫病的检疫
养殖与饲料2018年第8期源抗体都是逐渐降低，说明母体禽流感抗体的高低和雏鸡母源抗体的高低呈正相关关系；②雏鸡母源抗体从出壳到6日龄为逐渐递增趋势，在5~6日龄母源抗体达到高峰，随后开始逐渐降低；③监测结果表明母源抗体在16日龄前母源抗体≥4㏒2，都还具有保护作用，但考虑到注射疫苗后抗体达到保护值需要2~4d ，因此建议在12~14日龄进行首免，对于规模养殖场建议雏鸡出壳后从1日龄开始每间隔4d 进行1次母源抗体监测，根据抗体高低决定首免日龄；④H 5亚型和H 7亚型母源抗体总体水平比较接近；⑤禽流感母源抗体可以维持20d 左右都具有抵抗力，但是如果禽流感在没有免疫的情况下在1个月后还能监测出禽流感抗体的存在，即可怀疑鸡群感染了禽流感。
通过对3批次817杂交商品代肉鸡不同日龄母源抗体的监测得出了本场鸡群母源抗体消长规律，为雏鸡禽流感H 5亚型和H 7亚型首免日龄提供科学依据，但是由于品种不同、父母代种鸡免疫情况、养殖场环境、感染情况、用药等个体差异不能照搬照抄，条件允许情况下还是应该根据本场鸡群母源抗体监测情况决定首免日龄，这样才能更加科学地制定免疫程序，防止禽流感的发生，提高经济效益。
【责任编辑：胡敏】表1817杂交商品代肉鸡H 5亚型和H 7亚型母源抗体监测结果日龄禽流感H 5亚型母源抗体平均值(log2)禽流感H 7亚型母源抗体平均(log2)A 组B 组C 组A 组B 组C 组1 5.6 5.4 5.3 5.5 5.4 5.23 6.8 6.6 6.5 6.9 6.7 6.468.17.87.58.07.87.397.2 6.8 6.7 6.9 6.8 6.712 5.2 5.1 5.1 5.6 5.4 5.316 4.3 4.2 4.2 4.3 4.2 4.1223.53.32.93.53.43.2摘要本文总结了鸡新城疫病的检疫方法，常用的检疫方法有病毒分离培养、血凝试验（HA ）、血凝抑制（HI ）试验、荧光抗体检测和PCR 等，由于病毒表面有血凝素，对鸡红细胞有凝集作用，通过此特征可对鸡群进行血清抗体检测，从而判断感染情况。
禽疫病的检疫-鸡新城疫
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3. 检疫后的处理
1．确诊为新城疫后应及时报告当地政府，采取隔离、封锁，禁止转场或出 售。
2．假定健康鸡全群隔离饲养，并进行紧急免疫接种，如在接种观察期间出 现可疑鸡只，亦应进行无害化处理。
3．发生过新城疫的鸡场在半年之内，其鸡只不准出售、外运。
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禽疫病的检疫-鸡新城然宿主鸡和火鸡等，各种年龄均可发病、以雏鸡和中鸡较多。
（2）临床症状
①最急性型:头夜不异常，凌晨已死亡，不见特征症状。
②急性型：体温升高达44℃，嗜眠，昏睡，鸡冠、肉髯发绀，呼吸紊乱，咳
嗽、罗音、喘气、呼吸困难，嗉囊、口积液，常见严重下痢等，死亡率达
脏等。
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特征型病变：腺胃乳头出血 肠道淋巴结出血、坏死
出血性肠炎
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慢性型：十二指肠岛屿状坏死
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2.实验室检疫
病毒分离与鉴定；HA、HI试验。 血清学诊断：全血平板凝集试验、血清中和试验（SN）、空斑中和试验 （PN）、琼脂扩散试验（AGPT）、荧光抗体技术、酶联免疫吸附试验 （ELISA）、核酸探针、聚合酶链式反应（PCR）等
《动物检验检疫》
禽疫病的检疫-鸡新城疫
目录 Contents
1 临诊检疫 2 实验室检疫 3 检疫后的处理
禽疫病的检疫-鸡新城疫
鸡新城疫(ND)是由付粘病毒科、付粘病毒属 的鸡新城疫病毒所引起的恶性传染病疾病。
临床特征：主要危害呼吸系统和消化系统，引 起呼吸困难、严重下痢、粘膜和浆膜出血，病程
稍长出现神经症状。 34
新城疫病毒的鸡胚培养与病毒滴度检测
5. 封孔
• 用熔好的石蜡或消毒胶布封闭注射孔。 用熔好的石蜡或消毒胶布封闭注射孔。
6. 孵育与观察
• 气室朝上于37℃温箱中孵育； 气室朝上于37℃温箱中孵育； • 以后每天检卵1~2次。 以后每天检卵1~2次 • 弃去24h内的死亡鸡胚： 弃去24h内的死亡鸡胚： 内的死亡鸡胚 – 机械损伤、细菌或霉菌污染等引起。 机械损伤、细菌或霉菌污染等引起。
8. 新城疫病毒滴度的检测 血凝试验（HA） 血凝试验（HA）
• 凡能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数,称为该病毒的 凡能使鸡红细胞完全凝集的病毒最高稀释倍数, 血凝滴度。 血凝滴度。
六、思考题
1. 鸡胚接种过程中，应该注意的问题？ 鸡胚接种过程中，应该注意的问题？ 2. 接种病毒后，24h内鸡胚死亡原因？ 内鸡胚死亡原因？ 接种病毒后，24h内鸡胚死亡原因 3. 如何判断新城疫病毒的血凝滴度？ 如何判断新城疫病毒的血凝滴度？ 4. 临床上还有哪些病毒具有血凝性？ 临床上还有哪些病毒具有血凝性？
7. 病毒的收获与鸡胚的观察
① 收集24h后死亡鸡胚，置4℃冰箱过夜，以免收获时流血; 收集24h后死亡鸡胚 后死亡鸡胚， 冰箱过夜，以免收获时流血; ② 取出冷却的鸡胚，消毒气室端卵壳表面； 取出冷却的鸡胚，消毒气室端卵壳表面； ③ 用镊子击破气室部卵壳并去除壳膜，撕破绒毛尿囊膜； 用镊子击破气室部卵壳并去除壳膜，撕破绒毛尿囊膜； ④ 以眼科镊镊住绒毛尿囊膜，用吸管吸取 以眼科镊镊住绒毛尿囊膜， 尿囊液，置无菌容器中保存备用。 尿囊液，置无菌容器中保存备用。 一般能尿囊液6 10mL。 一般能尿囊液6-10mL。 ⑤ 取出鸡胚胎，于平皿内观察胚胎有无病 取出鸡胚胎， 理变化，如出血、蜷缩、侏儒胚等。 理变化，如出血、蜷缩、侏儒胚等。
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二、兽医传染病的一般诊断程序
发生疫情 临床诊断
流行病学、临床症状、病理解剖等
实验室诊断
病理组织学、病原学（涂片镜检、病原分离、PCR、动 物回归）、血清学（HI、AGID、ELISA）等
确诊
三、病鸡剖检及病毒学检查
实验目的
1. 掌握动物病毒病实验室诊断的一般程序。 2. 掌握病鸡剖检的一般方法。 3．了解鸡新城疫的病理变化和临诊要点。 4．掌握新城疫病毒的分离鉴定。
一、兽医传染病学实验室注意事项 二、兽医传染病的一般诊断程序 三、病鸡剖检及细菌学检查
一、兽医传染病学实验室注意事项
注意个人预防、避免病原传播
穿着工作服，实验结束后需立即消毒清洗。 实验操作期间，勿以手指或其他器物等接触口
唇、眼、鼻及面部。 实验完毕，应洗手消毒后离去。
一、兽医传染病学实验室注意事项
疡或坏死。肌胃角质层下也可见出血点。
病毒分离
将脾脏剪碎，按照1:5的比例加入含三抗的PBS，用研磨器研磨成组织匀浆
将匀浆置于1.5ml离心管中，5000rpm离心10min。
离心后，取上清0.1ml接种鸡胚
37度孵化鸡胚72h（每隔12h照胚，挑出死胚和弱胚）， 弃掉24h之内的死亡胚
收获鸡胚尿囊液之前，将鸡胚置于4度6h以上，促进血管收缩
收获尿囊液，测定尿囊液的HA效价， 并用新城疫的阳性血清进行HI实验，做出鉴定
鸡胚培养法是用来培养某些对鸡胚敏感的病原的一 种培养方法，此方法可用以进行多种病原的分离、 培养，毒力的滴定，中和试验以及抗原和疫苗的制 备等。
鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长 后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。
37℃，相对湿度为40—70％，孵育 72—96h
9—11日龄鸡胚
鸡胚孵育
气室向上放置，孵育的最适温度为37℃， 相对湿度为40—70％，孵育72—96h
接种后检查
接种后24h内死亡的鸡胚，系由于接种时鸡胚受损或其他原因而死 亡，应该弃去；
24h后，每天照蛋2次，如发现鸡胚死亡立即放入冰箱，于一定时 间内（72h）不能致死的鸡胚亦放入冰箱冻死，以便收缩血管。
常见接种方法： 1.尿囊腔接种 2.绒毛尿囊膜接种 3.卵黄囊接种 4.羊膜腔接种
尿囊腔接种步骤
标本处理：病料研磨（5倍至10倍稀 释），除菌处理
照胚： 活胚检查： 胚动、血管、绒毛尿囊 膜发育 确定接种部位：画气室、画接种部 位（避开大血管及头部）
消毒：酒精—碘酒—酒精 接种：0.1-0.2ml，气室下 孵育：气室向上放置，孵育的最适温度为
危险材料及其污染的器物处理
动物尸体、内脏、血液等废弃病料，以及废弃的病原 培养物、生物制品等须深埋或经过严格消毒处理（焚 烧、煮沸、高压灭菌等）后丢弃到公共垃圾处理场， 严禁将未经消毒的危险性材料直接丢弃。
用过的棉球、纱布、吸水纸等污物须置于固定容器内 统一消毒处理，不得任意抛弃。
桌面、地板或地面被污染时，应用适当消毒液清洗。
死亡的鸡胚置冰箱中1～2h即可取出收取材料并检查鸡胚病变。
鸡胚收获
原则上接种什么部位，收获什么部位。 尿囊腔内接种者用无菌手术去气室顶壳，打开整个气室区； 以无菌镊子撕去一部分蛋膜，撕破绒尿膜而不撕破羊膜； 用镊子轻轻按住胚胎，以无菌吸管或消毒注射器吸取绒毛尿囊液置于无 菌试管中，多时可收获5～8mL； 将收获的材料低温保存。
三、病鸡剖检及病毒学检查
疑似新城疫病
流行病学调查
尸体剖检 （取样、病变的观察）
病原的分离
（发病时间、发病率、死亡率、发病鸡群 的用药和免疫情况等）
取样：病变组织（脾脏—病毒分离）、血液 病变的观察：口腔、嗉囊、气管及肺、腺胃 与肌胃、肠道粘膜。
病毒分离：鸡胚
病原的鉴定 做出诊断
血凝（HA）与血凝抑制（HI）试验
尸体剖检
尸体剖检
病鸡剖检基本原则 1、外 内 2、观察 取样 剖检 3、肝 脾 胃 肠 法氏囊
肾脏 肺 心 喉头血，淋巴系统肿胀、出血和坏死，以消 化道和呼吸道为明显。
2. 口腔有黏液，嗉囊内积酸臭味液体和气体； 3. 腺胃黏膜水肿，其乳头或乳头间有鲜明的出血点，或有溃