DNA电泳相关试剂及缓冲液的配制

DNA 电泳相关试剂及缓冲液的配制
1. 0.5M EDTA(pH=8.0):在800ml 蒸馏水中加入186.1g 二水乙二胺四乙酸钠（EDTA-Na 2·2H 2O),充分搅拌，这时溶液为乳白色，加NaOH 调解pH 值至8.0，这时溶液颜色逐渐变为澄清。

最后
定容至1L 。

高压灭菌。

2. 5 X TBE:Tris 碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L 。

高压灭菌。

（不过我在实验中没有灭菌，实验结果影响不大）。

1 X TBE:5 X TBE 缓冲液与蒸馏水按 1: 4
稀释就OK 。

配置方法方法1：1%的溴酚蓝
将托盘天平上称取1g 溴酚蓝定溶于100ml 无水乙醇中，转移入
滴瓶中，贴标签备用。

方法2：0.05%
的溴酚蓝
配western blot
用的2*SDS 上样缓冲液需要用到0.1%
的溴酚蓝，
2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。

实际上，溴酚蓝在水中的溶解度不高，直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。

下面是其较合适的配制方法：
0.05%的溴酚蓝配制方法：取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

变色范围pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。

只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。

估计影响不大，因为指示剂用量毕竟很少。

方法3：1％溴酚蓝
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。

相关词条
甲醇、乙醇、苯、有机化学、氢氧化钠
Western上样缓冲液配制整理
● 6×SDS 样品缓冲液 4×Tris·Cl/SDS,PH6.8 (0.28mol/L) 7ml
甘油[30%(V/V)]
3.0ml
（3.8g ） 甘油密度为 1.2613g/cm3 (20/4℃)
SDS [1%（m/V ）] 1g
溴
酚
蓝[0.0012%(m/V)] 1.2mg
DTT (0.5mol/L)
0.93g
如果需要，加去离子蒸馏水至10ml ；等量分装成0.5ml 并于-70℃贮存
● 8×Tris·Cl/SDS,PH6.8 ●丽春红S 染色液
Tris-base （0.5mol/L ） 6.05g
40ml 水中溶解后以1mol/L 盐酸调至PH6.8，补加至100ml 。

HCl
调至6.8 0.45um 滤膜过滤，再加0.4gSDS
SDS[0.4%(m/V)] 0.4g 4℃可保存1月
1. Prepared using Tris base, pH adjusted with HCl.
2. If 2-ME is used, omit DTT.
3. If DTT is used, omit 2-ME.。