菌种保藏方法

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菌种保藏方法

菌种保藏方法

菌种保藏方法
菌种保藏方法,如下:
1、传代保藏,传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。

很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏,将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。

保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏,冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。

我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏,配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。

在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。

保存时间至少可以达到
1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。

5、液氮超低温保藏,液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。

液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点
菌种保藏是微生物学研究中非常重要的一环,它能够确保菌种的长期保存和传承。

常见的菌种保藏方法包括以下几种:
1. 冷冻保存法:将菌株在-80℃的低温下保存。

这种方法操作简单,保存时间长,但是对于某些菌株来说,冷冻保存可能会对其生长和代谢产生不利影响。

2. 干燥保存法:将菌株培养在固体培养基上,然后将其晾干并保存在干燥的环境中。

这种方法保存时间长,保存成本低,但是对于某些菌株来说,干燥保存可能会导致其失活。

3. 液氮保存法:将菌株在液氮中保存。

这种方法保存时间长,保存效果好,但是液氮保存设备和运输成本较高。

4. 低温保存法:将菌株保存在4℃的低温环境中。

这种方法操作简单,保存成本低,但是保存时间相对较短。

5. 防冻蛋白保存法:将菌株培养在含有防冻蛋白的培养基中,然后在-20℃的低温下保存。

这种方法对于某些菌株来说效果很好,但是防冻蛋白的成本较高。

以上是常见的菌种保藏方法及其优缺点。

在选择菌种保藏方法时,需要根据菌株
的特性和实验需求进行选择。

同时,为了确保菌株的质量,保存前需要对菌株进行鉴定和纯化,并且在保存过程中需要注意保存条件,避免保存过程中出现污染和失活等问题。

几种食用菌菌种保藏方法

几种食用菌菌种保藏方法

几种食用菌菌种保藏方法食用菌菌种是指用于食用或驯化培养的真菌种类。

在保藏食用菌菌种时,主要有以下几种方法:1.冷冻保藏:将菌种置于-80℃的低温环境中。

首先,将菌种种植在琼脂平板上的单独菌落。

然后,将单独的菌落切下并置于含有30%甘油的琼脂平板上。

最后将含有菌落的琼脂平板置于-80℃的低温冷冻库中进行保存。

这种方法适合于长时间保存,但对设备和电力有一定需求。

2.雪贮法:将菌种置于冷藏室的冷湿源物质上。

首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后,将菌落保留在琼脂平板上并将其置于冷藏室中。

这种方法适用于一般食用菌的保存,在适宜的湿度和温度下,可以保存数月至一年。

3.干燥保藏:将菌种置于干燥环境中。

首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于无菌的滤纸或多孔塑料袋中。

最后将菌种放置于干燥通风良好的地方,等待其自然干燥。

这种方法适用于一些干货类食用菌种,如香菇、平菇等。

4.培养罐保藏:将菌种保藏于培养罐中。

首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于无菌培养罐中,加入适宜的培养基,并密封培养罐。

最后将培养罐保存在适宜的温度和湿度下。

这种方法适用于菌种的短期保藏。

5.低温干燥保藏:将菌种保藏于低温干燥器中。

首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于低温干燥器中,通过低温干燥将其保存起来。

这种方法适用于一些低温耐受性较强的食用菌。

总结起来,以上是几种食用菌菌种保藏的方法。

选择合适的方法可根据菌种的特性、用途和预期保藏时间来确定。

在进行菌种保藏时,要注意无菌操作,避免菌种的污染或变异,并在适宜的环境条件下保存。

这将有助于保持菌种的营养价值和生物特性,以及保证其在后续使用中的质量。

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点菌种保藏是微生物学研究中的重要环节,其目的是长期保存各类菌种以便于日后的使用和研究。

常用的菌种保藏方法有冷冻保存、制备淡防冻溶液、干燥保存、液氮冷冻保存、冷冻干燥保存等。

下面是这些方法的优缺点。

1.冷冻保存:冷冻保存是通过将菌种保存在低温下,在液氮冷冻罐中或冷冻干燥保存,常见的保存温度为-80°C或液氮温度。

其优点是保存方便,菌种保存时间相对较长;缺点是保存设备和条件要求较高,保存过程中会有一定的细胞破坏。

2.制备淡防冻溶液:制备淡防冻溶液是指制备一种富含保护物质的冻存液,然后将菌种悬浮于其中,并在-20°C或-80°C保存。

其优点是相对简单,易于操作以及相对较长的保存时间;缺点是需要特定的冻存液配方和保存温度。

3.干燥保存:干燥保存是将菌种培养物在低温和低气压下干燥,然后保存于干燥剂中。

其优点是较为简单,设备要求低,保存时间较长;缺点是保存后重新复苏的成功率较低,保存过程中可能会有一定的细胞破坏。

4.液氮冷冻保存:液氮冷冻保存是将菌种保存在极低温的液氮中,常见的保存方法是将菌种培养物按一定比例混合液氮与甘油,然后使用液氮保存。

其优点是保存时间极长,细胞破坏较小;缺点是保存设备和条件要求较高。

5.冷冻干燥保存:冷冻干燥保存是将菌种首先冷冻,然后通过真空干燥的方法去除水分,最后保存在干燥剂中。

其优点是保存效果稳定,保存时间长;缺点是设备要求较高,操控难度大。

总的来说,不同的菌种保藏方法有各自的优点和缺点。

选择合适的方法应根据菌种的特性、实验室的设备和条件、保藏期限以及实验目的等因素综合考虑。

同时,在进行菌种保藏时,应严格控制一系列的操作步骤,包括消毒、菌种的培养与保存温度的选择、保存条件的监测等,以确保菌种的质量和纯度,以及保存结果的可靠性。

菌种保藏方法

菌种保藏方法

菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下,以便长期保存并用于研究或应用。

菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失,以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。

下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。

一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下,一般为-80℃或液氮温度。

这种方法比较简单,操作方便,且保存效果较好。

首先,将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中,然后用无菌冻存管将菌液分装好,经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。

在需要使用菌株时,只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。

二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后,能够在相对湿度较低的条件下长期保存。

这种保存方法主要适用于真菌,特别是产生分生孢子的真菌。

首先,从培养基上接种分生孢子,培养出菌丝后进行枯燥处理。

一般采用短暂的枯燥处理,依靠菌丝中的水分进行干燥。

然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存,放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。

三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中,以保持菌株的活力。

这种方法适用于较短时间的菌种保存。

首先,将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中,待培养基中的水分被干燥剂吸收后,将菌株封存在密封袋或密封瓶中。

干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片,确保环境的干燥程度。

四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下,一般为4℃至10℃之间。

这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。

菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中,然后在低温条件下保存。

需要使用时,只需从低温保存中取出,接种到新的培养基中即可。

总结起来,菌种保藏是一项重要的科研工作,不同的菌种可以采用不同的保藏方法。

冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存,真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存,气干法适用于较短时间的保存,冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。

实验室菌种保藏的方法

实验室菌种保藏的方法

实验室菌种保藏的方法菌种是主要的生物资源,也是食用菌生产首要的生产资料。

一个优良的菌种被选育出来以后,必须保持其优良性状不变或尽可能地少变慢变,才不至于降低生产性能,能长期在生产中使用。

因此,菌种保藏在食用菌生产上具有重要的意义。

各种微生物由于遗传特性不同,因此适合采用的保藏方法也不一样。

一种良好的有效保藏方法,首先应能保持原菌种的优良性状长期不变,同时还须考虑方法的通用性、操作的简便性和设备的普及性。

下面介绍几种常用的菌种保藏方法:1斜面低温保藏法将菌种接种在适宜的斜面培养基上,待菌种生长完全后,置于4。

C左右的冰箱中保藏,每隔一定时间(保藏期)再转接至新的斜面培养基上,生长后继续保藏,如此连续不断。

此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。

放线菌、霉菌和有芽匏的细菌一般可保存6个月左右,无芽抱的细菌可保存1个月左右,酵母菌可保存3个月左右。

如以橡皮塞代替棉塞,再用石蜡封口,置于4。

C冰箱中保藏,不仅能防止水分挥发、能隔氧,而且能防止棉塞受潮而污染。

这一改进可使菌种的保藏期延长。

此法由于采用低温保藏,大大减缓了微生物的代谢繁殖速度,降低突变频率;同时也减少了培养基的水分蒸发,使其不至于干裂。

该法的优点是简便易行,容易推广,存活率高,故科研和生产上对经常使用的菌种大多采用这种保藏方法。

其缺点是菌株仍有一定程度的代谢活动能力,保藏期短,传代次数多,菌种较容易发生变异和被污染。

2石蜡油封藏法此法是在无菌条件下,将灭过菌并已蒸发掉水分的液体石蜡倒入培养成熟的菌种斜面(或半固体穿刺培养物)上,石蜡油层高出斜面顶端IC明使培养物与空气隔绝,加胶塞并用固体石蜡封口后,垂直放在室温或4。

C冰箱内保藏。

使用的液体石蜡要求优质无毒,化学纯规格,其灭菌条件是:150〜170。

C烘箱内灭菌Ih;或121。

C高压蒸汽灭菌60〜80min,再置于80℃的烘箱内烘干除去水分。

食用菌菌种保藏的方法

食用菌菌种保藏的方法

食用菌菌种保藏的方法
食用菌是一种广泛使用的食品,如何保存食用菌的菌种是非常重要的。

下面介绍几种常用的菌种保藏方法。

一、冷冻法
冷冻法是将菌种置于低温下,使其处于冷冻状态以达到保藏的目的。

将菌丝均匀地涂于平板上,置于-80℃的低温冷冻柜中冷冻,或将菌丝混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。

这种方法保存的菌种质量较好,保藏时间较长。

二、干燥法
将菌丝培养在无菌环境下,培养到菌丝生长至顶部时,用无菌石英砂或无菌滤纸吸干培养皿内的水分,再将石英砂或滤纸中的菌种置于无菌条件下进行干燥,然后密封保存。

这种方法使用简单,保存时间较长,但保存的菌种易受到氧气、温度和湿度等因素的影响。

三、冷藏法
冷藏法是将培养好的菌种置于低温环境下进行保存。

将培养好的菌种涂于平板上,进行初步培养,再将平板用无菌纸包好,置于4℃的冰箱中保存。

这种方法保存的菌种质量较好,但保存时间较短。

四、液氮保存法
将培养好的菌种混入15%甘油溶液中,用液氮冷冻保存。

这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要液氮存储设备。

五、糖分保藏法
将培养好的菌种混入10%蔗糖水溶液中,用常温保存。

这种方法保存的菌种质量较好,保存时间长达数年,但需要注意保藏容器的密封性。

不同的菌种保藏方法适用于不同的情况,我们需要根据实际情况选择合适的方法。

同时,在进行菌种保藏时,需要注意保藏容器的密封性、温度、湿度等因素,以确保保存的菌种质量。

保藏菌种的方法

保藏菌种的方法

保藏菌种的方法
保藏菌种的方法有以下几种:
1. 冷冻保存:将菌株培养至富集期,制备稀释液,加入保护剂,将菌株在-70℃以下的冰箱中保存,可保存1年以上。

2. 真空冷冻干燥:将菌株培养至富集期,制备稀释液,加入保护剂,将菌株在-50℃下真空冷冻干燥,干燥后保存于防潮、密封的瓶中,可保存3-5年。

3. 石蜡包埋法:将菌株培养至富集期,制备溶剂,用石蜡包埋法制备成固体菌株片,可在常温下保存2-3年。

4. 液氮保存:将菌株培养至富集期,制备稀释液,加入保护剂,将菌株放入液氮罐中保存,可保存数十年。

以上方法均需在菌株保存前进行无菌检测,避免交叉污染。

同时,在保存过程中,要注意防止温度变化、光照、湿度等因素的影响。

简述菌种保藏的几种方法及条件。

简述菌种保藏的几种方法及条件。

简述菌种保藏的几种方法及条件。

菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程,其主要方法有:
一、冷冻法。

冰冻法是最常用的保藏菌株的方法,也是目前最理想的保藏方法之一,其主要原理是将活菌体放入冰冻室,温度由常温降至-80℃,使得菌种活动受到抑制,在-80℃的状态下可以长期保存。

二、液氮法。

液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法,主要是将活菌体置入液氮容器中,使其处于-195℃的极低温状态。

三、干燥法。

干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥,使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态,这种状态下可以防止菌种的增殖。

四、水银法。

水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性,将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。

保藏菌种的条件:
1、环境温度应该控制在0~4℃,并保持温度稳定。

2、控制保藏过程中的湿度,干燥法中的湿度应在10%~15%之间,而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮,避免菌种因温度过高而复苏。

3、控制光照,避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。

4、控制空气中的致病因子;
5、定期检测样品的质量,确保其始终处于较好的保藏状态。

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食用菌菌种保藏的6种方法

食用菌菌种保藏的6种方法

食用菌菌种保藏的6种方法
菌种保藏的目的是通过降低菌种的代谢活力,使其处于休眠状态,减缓衰亡速度,保持菌种原有优良性状,防止杂菌污染;当恢复生活条件时,菌种能在很短时间内恢复生机,迅速生长繁殖。

母种的保藏有如下方法:
1.斜面冰箱保藏法:把生长丰满健壮的斜面母种,把棉塞在管口剪平,用蜜蜡封口或换用胶塞,存放于摄氏4度冰箱内保存。

高温菌在16摄氏度为宜。

有效期3—6个月。

2.石蜡油保藏法:斜面母种注入经二次灭菌后,在摄氏40度温箱2天蒸发水分而冷却了的石蜡油至斜面顶尖1—1.5厘米处,再用蜜蜡封管口或换用胶塞,直立于摄氏4度冰箱或室温存放。

保存期可1—2年。

3.孢子保藏法:用2×0.5×0.8厘米经灭菌的滤纸条吸附上孢子,可参考孢子分离法,然后把带孢子的纸条放入无菌试管内,置干燥器内2—3天吸干水分,再改用胶塞。

在冰箱或室温内可保存多年。

4.菌丝球保藏法:常用经灭菌的生理盐水、无菌水、蒸馏水、营养液等装入试管约5毫升作媒介,把经过液体培养至对数生长期的菌丝球4—5个,移入媒介内,用胶塞封口,冰箱摄氏4度或室温可保存1—2年。

5.液氮保藏法:常用经灭菌10%甘油蒸馏水或10%二甲基亚砜蒸馏水为保护剂,注入斜面母种管,刮下菌丝体成悬浮液或孢子液,吸取菌液0.5—0.8毫升注入已灭菌安瓿管,
熔封管口,置液氮冷冻器内,每分钟降摄氏1度,1小时内使其温度降至摄氏负35度,其后迅速降至气相摄氏负150度,液相摄氏负196度保存。

保存期可超过10年。

6.自然基质保藏法:此法多用于原种保藏。

在一些欠设备的地区,也可作母种保藏法。

实验室最常用的五种菌种保藏方法

实验室最常用的五种菌种保藏方法

在现代生物学研究和生物技术应用中,菌种保藏是至关重要的环节。

恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性,为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。

本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法,深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。

一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。

其基本原理是将菌种置于超低温环境(通常为液氮温度,即-196℃)下,使菌种细胞处于极度冷冻的状态,从而抑制其代谢活动,达到长期保存的目的。

该方法具有诸多显著优点。

低温能够极大地减缓细胞的生理活动,几乎使其处于完全停滞状态,从而有效地延长菌种的存活时间。

低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小,经过长期保存后,菌种的特性通常能够较好地保持。

操作相对简单,只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液,然后置于液氮罐中即可。

在具体操作时,首先要选择合适的冷冻保存液。

常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂,如甘油、二甲基亚砜等,它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。

制备好冷冻保存液后,将菌种接种到冷冻保存液中,制成菌悬液。

将菌悬液分装到合适的冷冻管中,迅速放入液氮罐中进行保存。

在液氮罐中,要定期检查液氮的液位,确保菌种始终处于适宜的低温环境中。

低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存,尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种,如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等,具有良好的保藏效果。

然而,该方法也存在一些不足之处,例如液氮的成本较高,液氮罐的储存空间有限,以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。

二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。

常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。

沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中,然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。

该方法具有操作简便、成本低廉的特点。

在干燥过程中,菌种细胞内的水分逐渐散失,代谢活动减缓,从而达到保藏的目的。

菌种保藏储存方法大全

菌种保藏储存方法大全

菌种保藏储存方法大全菌种保藏储存方法大全食用菌由于营养价值高,生产成本低,经济效益高,近几年在农村兴起了生产热潮,但是,生产中食用菌菌丝繁殖快,容易老化。

本文根据实际情况介绍了7种简单易行的菌种贮藏方法供广大农户参考。

1.麦粒贮藏法取优质小麦淘洗后浸入20℃水中泡5小时,稍晾干后装管。

装入量以管长的l/4~1/3为宜。

将装有麦粒的试管灭菌后趁热摇散,冷却后接入菌丝体,在适温下培养至大多数麦粒上出现稀疏菌丝时,终止培养。

菌种可置于20℃以下干燥处保藏1~2年。

2.冰箱贮藏法将已经长好的试管菌种放于冰箱内储存,置于保鲜层保藏,能保证7个月菌种不退化。

3.生理盐水贮藏法将菌种接入马铃薯培养液中,每250ml三角瓶装60ml培养液,振动培养液或每天摇动5~10次,培养5~7天,然后将形成的菌丝球吸入装有5ml无菌生理盐水的试管中,每管约移入4~5个菌丝球,塞上棉塞,用蜡封好管口。

低温可保藏1年。

4.尿素暂存法在避光、干燥、通风良好的地方放置袋装尿素,将试管菌种主体埋在尿素颗粒中,试管口露在外面,可贮藏菌种活力30天之多。

此法在恒定低温环境下即可进行。

5.液体石蜡贮藏法选用化学液体石蜡,高压灭菌后放入40℃恒温箱中数小时或干燥器中数日,用无菌吸管或注射器吸取液体石蜡注入菌种试管。

注入量应高出斜面尖端1cm,管口塞上棉塞并用石蜡封好。

直立贮藏在清洁、干燥、凉爽的低温处,可以贮藏5年。

6.蒸馏水法 //农村致富经网 //适用于平菇、金针菇、香菇的菌种。

在自然温度下也可以贮藏其他菌种。

6.1贮藏平菇、金针菇菌种先将8成熟待贮藏试管菌种移入接种箱内后,用注射器从试管栓内注入蒸馏水,将培养基面全部淹没至管口2cm为止。

管口用矿蜡封闭,常温下置于阴凉处立放,可以贮藏1~1.5年。

6.2贮藏香菇、木耳菌种用15015mm的指型管将培养至7成熟的固体或半固体试管种在接种箱内无菌操作下,放人25200mm的大试管内,向大试管内注入蒸馏水至管口1cm处,封口用橡皮栓包好,并用矿蜡加固密封,置于阴凉处。

菌种保藏的方法

菌种保藏的方法

菌种保藏的方法菌种保藏是指将某一特定的菌种保存在适当的条件下,以确保其生活和活力,并能够长时间保存下去的过程。

菌种保藏的方法主要有冷冻法、干燥法、液氮法、乳酸法和多核隔离法等。

下面将逐一介绍这些方法及其适用范围。

冷冻法是一种常见的保藏菌种的方法之一。

它是将菌种培养物以低温冷冻保存的方法,常见的保存温度为-80°C或更低。

冷冻法适用于大多数细菌和许多真菌,但对于某些特殊的真菌菌种可能效果不佳。

干燥法是将菌种培养物完全或部分脱水后保存的方法,常见的干燥方法有冻干和真空干燥。

干燥法适用于许多细菌、真菌和酵母菌,而且保存时间较长,但对于一些需较高水分条件的菌种可能不适用。

液氮法是将菌种保存在液氮中的方法,常见的保存温度为-196°C。

液氮法适用于大多数菌种,包括细菌、真菌和病毒。

液氮法的优点是保存时间长,可以达到数十年甚至更长的时间,并且菌种的生活力相对较好。

乳酸法是一种利用乳酸细菌的代谢产物来保藏菌种的方法。

这种方法适用于一些较难保存的菌种,如肠道菌和一些微嗜酸性菌。

乳酸法的原理是将菌种和乳酸细菌一起培养,乳酸细菌产生的乳酸可以降低培养物的pH值,从而模拟菌种在肠道内的环境,达到保藏菌种的效果。

多核隔离法是将菌种分离成不同的细胞核并分别保存的方法。

这种方法适用于一些证明难以保存的菌种,如高度依赖特定环境条件或具有复杂生命周期的菌种。

多核隔离法可以通过分离不同的菌落或以体细胞核和生殖细胞核分离的方式来保存菌种。

以上是几种常见的菌种保藏方法。

不同的方法适用于不同的菌种,选择适合的保藏方法可以确保菌种的长期保存和维持生活力。

在进行菌种保藏时,需要严格控制培养物的纯度和保存条件,以确保保存的菌种的准确性和可用性。

菌种保存方法-

菌种保存方法-

菌种保存⽅法-菌种保存⽅法:⼀.菌种保藏⽅法⼤致可分为以下⼏种:1.传代培养保藏法⼜有斜⾯培养、穿刺培养、疱⾁培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌⽤),培养后于4—6℃冰箱内保存。

2.液体⽯蜡覆盖保藏法是传代培养的变相⽅法,能够适当延长保藏时间,它是在斜⾯培养物和穿刺培养物上⾯覆盖灭菌的液体⽯蜡,⼀⽅⾯可防⽌因培养基⽔分蒸发⽽引起菌种死亡,另⼀⽅⾯可阻⽌氧⽓进⼊,以减弱代谢作⽤。

3.载体保藏法是将微⽣物吸附在适当的载体,如⼟壤、沙⼦、硅胶、滤纸上,⽽后进⾏⼲燥的保藏法,例如沙⼟保藏法和滤纸保藏法应⽤相当⼴泛。

4.寄主保藏法⽤于⽬前尚不能在⼈⼯培养基上⽣长的微⽣物,如病毒、⽴克次⽒体、螺旋体等,它们必须在⽣活的动物、昆⾍、鸡胚内感染并传代,此法相当于⼀般微⽣物的传代培养保藏法。

病毒等微⽣物亦可⽤其他⽅法如液氮保藏法与冷冻⼲燥保藏法进⾏保藏。

5.冷冻保藏法可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、⼲冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。

常⽤的有⽢油菌保存:取灭过菌的1.5ml EP管,按照60%—80%⽢油的加⼊量,保存零下80度。

例:取37°培养过夜的菌液2-4ml⽢油6-8ml,充分混匀后分装于1.5ml EP管中,置于-80°冰箱即可。

6.冷冻⼲燥保藏法先使微⽣物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利⽤升华现象除去⽔分(真空⼲燥)。

有些⽅法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻⼲燥保藏法等均需使⽤保护剂来制备细胞悬液,以防⽌因冷冻或⽔分不断升华对细胞的损害。

保护性溶质可通过氢和离⼦键对⽔和细胞所产⽣的亲和⼒来稳定细胞成分的构型。

保护剂有⽜乳、⾎清、糖类、⽢油、⼆甲亚砜等。

⼆.常⽤的器材所要保存的微⽣物;⾁膏蛋⽩胨斜⾯培养基,灭菌脱脂⽜乳,灭菌⽔,化学纯的液体⽯蜡,⽢油,五氧化⼆磷,河沙,瘦黄⼟或红⼟,冰块、⾷盐,⼲冰,95%酒精,10%盐酸,⽆⽔氯化钙;灭菌吸管,灭菌滴管,灭菌培养⽫,管形安瓿管,泪滴形安瓿管(长颈球形底),40⽬与100⽬筛⼦,油纸,滤纸条(0.5×1.2cm),⼲燥器,真空泵,真空压⼒表,喷灯,L形五通管,冰箱,低温冰箱(-30℃),液氮冷冻保藏器。

实验室最常用的五种菌种保藏方法

实验室最常用的五种菌种保藏方法

实验室最常用的五种菌种保藏方法一、冷冻保存在实验室中,冷冻保存是最常用的菌种保藏方法之一。

这种方法利用低温的环境,将菌种置于-70°C以下的冰柜或液氮罐中进行保存,以减缓菌种的新陈代谢过程,从而延长其保存时间。

冷冻保存不仅适用于常见的细菌菌种,对真菌、酵母菌等微生物也同样适用。

在冷冻保存的过程中,需要注意样品容器的密封性和防潮性,以避免保存过程中的交叉污染和冻结损伤。

二、干燥保存干燥保存是另一种常见的菌种保藏方法。

这种方法通过将菌种置于低温低湿环境中,使其水分蒸发,使菌种变得干燥并进入休眠状态,从而延长其保存时间。

常见的干燥保存方式包括真空冷冻干燥、干燥剂吸附法等。

干燥保存尤其适用于灵敏对湿度敏感的菌种,以及一些难以存活在液体培养基中的微生物。

三、低温保存除了冷冻保存外,低温保存也是常见的菌种保藏方式之一。

在这种方法中,菌种通常被保存在4°C左右的冰箱中,通过控制温度和湿度,延缓菌种的新陈代谢,并保持其生长状态。

这种保存方式不仅适用于微生物的短期保存,也可以用于长期保存对保存温度敏感的微生物。

四、液氮保存液氮保存是一种极低温的保存方式,通过将微生物样品浸没在液氮中进行保存。

这种方法不仅可以有效地防止菌种的新陈代谢和变异,还能够保持菌种的生物特性和遗传信息。

液氮保存适用于需要长期保存的珍贵菌株和难培养的微生物,如土壤中的特殊嗜冷菌和特殊嗜热菌等。

五、冻干保存冻干保存是将微生物样品在冷冻的条件下先冻结,然后通过真空干燥的方式将水分蒸发,最终将样品转变成固态的干燥状态。

这种方法既能保留微生物的生物特性,又能有效地延长样品的保存时间,适用于需要长时间运输和保存的微生物。

总结回顾通过冷冻保存、干燥保存、低温保存、液氮保存和冻干保存等五种菌种保藏方法,可以满足实验室对于微生物样品保存的不同需求。

不同的菌种和实验目的,需要选择合适的保存方式,以确保微生物的品质和可用性。

在进行菌种保存的过程中,需要注意样品的密封性、温度和湿度的控制,以及保存设备的维护和管理。

主要的菌种保藏方法

主要的菌种保藏方法

主要的菌种保藏方法有:
斜面低温保藏法:将菌种保藏于低温环境中,使菌种处于休眠状态,保持其生命力。

液体石蜡保藏法:将菌种浸泡在液体石蜡中,然后保存在低温环境中,使菌种与氧气隔绝,降低其代谢强度,维持其生命力。

滤纸保藏法:将菌种悬液滴加在灭菌的滤纸上,干燥后保存在低温环境中,使菌种与氧气隔绝,降低其代谢强度,维持其生命力。

真空冷冻干燥保藏法:将菌种在低温下进行真空冷冻干燥处理,使菌种处于休眠状态,保持其生命力。

液态氮超低温保藏法:将菌种保藏于液态氮中,使菌种处于极低温度下,与氧气隔绝,降低其代谢强度,维持其生命力。

这些方法都是为了终止菌种的繁殖,降低其代谢强度,使之处于休眠状态,从而保持其生命力。

发酵菌种的保藏方法

发酵菌种的保藏方法

发酵菌种的保藏方法
一、长期保藏方法:
1.冷冻保藏:将菌种培养物接种在培养基上,培养至菌液平台期,然
后将菌液搅拌均匀后,加入等体积的甘油或酵母浸渣,混匀后分装至无菌
冻结管中,用-80℃冷冻保存。

2.干燥保藏:将菌种培养物接种在培养基上,培养至菌液平台期,用
无菌纱布将菌液吸干,然后将纱布放入无菌干燥器中进行干燥,干燥至完
全失去水分后,将纱布收入无菌试管中,封口后保存于冰箱中。

3.液态氮保藏:将菌种培养物接种在培养基上,培养至菌液平台期,
然后用冷冻管将菌液分装好,将冷冻管插入液态氮中保藏。

二、短期保藏方法:
1.酸性保藏:将菌种接种在适宜培养基上,培养至平台期,然后加入
适量的无菌稀盐酸,使培养液酸化到pH2-3左右,保存于冰箱中。

2.盐浸保藏:将菌种培养物接种在适宜培养基上,培养至菌液平台期,然后加入适量的无菌富含NaCl的液体培养基,浸泡菌种,保存于冰箱中。

3.生理盐水保藏:将菌种培养物接种在培养基上,培养至菌液平台期,然后加入生理盐水,将菌液稀释至适宜的浓度,保存于冰箱中。

无论何种保藏方法,都具备相应的优点和限制,具体应根据具体菌种
的特性和实验需求进行选择和调整。

同时,保藏前需确保菌种纯度高,无
杂菌污染,并进行相应的质量控制措施,以保证保藏的可行性和有效性。

八种菌种保藏方法的优缺点

八种菌种保藏方法的优缺点

八种菌种保藏方法的优缺点
保藏菌种是微生物学研究中非常重要的一部分。

以下是八种常见的菌种保藏方法及其优缺点:
1. 冷冻保藏:
优点:简单易行,保藏时间长,适用于大多数微生物。

缺点:需要低温设备,可能会导致部分菌株失活。

2. 干燥保藏:
优点:操作简便,无需低温设备,适用于多种菌株。

缺点:某些菌株可能无法在干燥条件下存活。

3. 液氮冷冻保藏:
优点:温度极低,可长期保存。

缺点:设备昂贵,需要特殊处理。

4. 石蜡包埋:
优点:能够保存非常脆弱的菌株。

缺点:操作复杂,需要特殊设备。

5. 非常规保藏:
例如使用特殊培养基或添加保护剂等方法。

优点:针对特定菌株的保护效果更好。

缺点:需要特殊处理,不适用于所有菌株。

6. 液体保藏:
将菌株保存在培养基中。

优点:适用于快速生长的菌株,易于操作。

缺点:需要定期转移菌株以维持活性。

7. 冷冻干燥:
将菌株冷冻后进行干燥处理。

优点:保藏时间长,易于保存和转运。

缺点:某些菌株可能无法在冷冻干燥条件下存活。

8. 长期传代:
通过连续传代培养菌株。

优点:保持菌株活力,适用于快速生长的菌株。

缺点:需要定期进行传代,较为耗时。

这些方法各有优缺点,具体选择哪种方法取决于菌株的特性、实验条件和保存期望等因素。

菌种保藏方法

菌种保藏方法

菌种保藏方法菌种的保藏是微生物学研究中非常重要的一环,它直接关系到菌种的保存质量和长期保存的有效性。

正确的菌种保藏方法不仅可以保证菌种的纯度和活力,还可以为科研工作提供可靠的菌种资源。

因此,科研工作者在进行菌种保藏时,需要严格按照规范的方法进行操作,以确保菌种的保存质量。

下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。

首先,最常见的菌种保藏方法之一是冷冻保存。

冷冻保存是将菌种在-80°C以下的低温条件下保存,通常使用甘油、DMSO等冷冻保护剂来保护菌种。

在进行冷冻保存时,首先需要将菌种悬液和冷冻保护剂混合均匀,然后分装到冷冻管中,标注好菌种的信息,并迅速置于-80°C以下的冷冻箱中保存。

这种方法保存的菌种可以长期保存,并且在恢复时也比较方便,因此被广泛应用于菌种保藏中。

其次,干燥保存也是一种常见的菌种保藏方法。

干燥保存是将菌种在无水或低水活性的条件下保存,通常使用干燥剂或真空干燥的方法将菌种中的水分去除。

在进行干燥保存时,需要将菌种悬液均匀涂布在无菌的玻璃片或滤纸上,然后置于通风干燥或真空干燥的条件下进行保存。

这种方法保存的菌种可以长期保存,并且在恢复时也比较方便,因此也被广泛应用于菌种保藏中。

另外,液氮保存是一种非常有效的菌种保藏方法。

液氮保存是将菌种在液氮温度下(-196°C)进行保存,这种极低温度可以有效地抑制菌种的代谢活动,从而实现菌种的长期保存。

在进行液氮保存时,需要将菌种悬液和冷冻保护剂混合均匀,然后分装到液氮罐中,标注好菌种的信息,并迅速置于液氮罐中保存。

这种方法保存的菌种可以长期保存,并且在恢复时也比较方便,因此也被广泛应用于菌种保藏中。

最后,微生物冷冻干燥技术也是一种常见的菌种保藏方法。

微生物冷冻干燥技术是将菌种在低温下冷冻,并在真空条件下进行干燥,从而实现菌种的长期保存。

这种方法保存的菌种可以长期保存,并且在恢复时也比较方便,因此也被广泛应用于菌种保藏中。

综上所述,菌种的保藏是微生物学研究中非常重要的一环,正确的菌种保藏方法可以保证菌种的保存质量和长期保存的有效性。

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适用条件及保藏时间:
• 此法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般 生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,即使 对一些很难保存的致病菌,如脑膜炎球菌与淋病球菌等 亦能保存。适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十 余年,但设备和操作都比较复杂。
优点:低温、干燥、无氧、有保护剂,可保藏各大类微生物,保藏时间可达几十 年,是目前使用最广、最有效的保藏方法。一般专业机构大都使用此法保藏。
液氮保藏法
液氮保藏法
操作方法: 液氮温度可达-196℃。把菌悬 液密封于安瓶中,置液氮罐内保 藏。
优点:保藏效果好。 缺点:价格昂贵。
纸片(滤纸) 压或减压干燥后,置于装有干燥剂的容器内 进行保存。
保存法
• 细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏, 前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至 可保藏14—17年之久。此法较液氮、冷冻干 燥法简便,不需要特殊设备。
硅胶保存法
• 以6~16目的无色硅胶代替砂子,干热灭 菌后,加入菌液。加菌液时,由于硅胶的吸 附热常使温度升高,因而需设法加以冷却。
纸片保存法
将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常压或减 压干燥后,置于装有干燥剂的容器内进行保存。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前 两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏 14—17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便, 不需要特殊设备。
悬液保藏法
蒸馏水保存法:
• 适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌, 将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保 存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
液体石蜡覆盖保藏法
斜面低温保藏法
将菌种接种在适宜的斜面培养基上, 待菌种生长完全后,置于4℃左右的冰 箱中保藏,每隔一定时间(保藏期)再 转接至新的斜面培养基上,生长后继续 保藏,如此连续不断。 ▪ 此法广泛适用于各大类微生物菌种 的短期保藏 ▪ 此法的主要保藏措施是低温。一般 可保存1~6个月左右。 ▪ 优点:简便易行,容易推广,存活率 高; ▪ 缺点:菌株仍有一定程度的代谢活动 能力,保藏期短,传代次数多,菌 种较容易发生变异和被污染。
糖液保存法:
• 适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10% 的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长 达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食 盐水等进行保存。
冷冻干燥保藏法
冷冻干燥保藏法
方法:
• 先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,
然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。 需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分 不断升华对细胞的损害。保保护剂有牛乳、血清、糖 类、甘油、二甲亚砜等。
载体保藏 法
液体石蜡 覆盖保藏

悬液保藏 法
冷冻干燥 保藏法
分类 斜面培养、穿刺培养、
疱肉培养基培养
方法
将菌种接种在斜面、液体或 穿刺培养基上,待生长完全后,
置普通冰箱4℃保藏,湿度50 %~70%以下,棉塞换成不通气
橡皮塞更好。
传代培养法
(Subculture
method)
适用情况
时间
有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理
• 沙和土用酸浸泡去除其中的有机质,洗 涤中和,干燥,分装于安瓶管内,加塞灭菌, 把健壮的孢子悬液滴于砂土中搅拌均匀,真
空干燥后封口,置于冰箱或干燥器中。
• 此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、 放线菌,因此在抗生素工业生产中应用最广,
效果亦好,可保存2年左右,但应用于营养 细胞效果不佳。
• 将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常
低温可减缓生长速度,单细胞 时,会很快死亡,因此在这种情况下,
仍有一定的活动条件,一般4~6 个月必须传代一次。
只能求助于传代培养保存法。传代培 养就是要定期地进行菌种转接、培养 后再保存,它是最基本的微生物保存
法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。
优点:方便,不受条件限制,各类微生物均可
。 缺点:时间短、传代多、易退化。
仍有一定的活动条件,一般4~6 个月必须传代一次。
只能求助于传代培养保存法。传代培 养就是要定期地进行菌种转接、培养 后再保存,它是最基本的微生物保存
法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。
优点:方便,不受条件限制,各类微生物均可
。 缺点:时间短、传代多、易退化。
液体石蜡覆盖保藏法
穿刺培养
采用以下两种方式进行灭菌:
液体石蜡 覆盖保藏

适用情况 可用于丝状真菌、酵母、 细菌和放线菌的保藏。特 别对难于冷冻干燥的丝状 真菌和难以在固体培养基 上形成孢子的担子菌等的
保藏更为有效。
Байду номын сангаас
保藏时间 此方法简便有 效,保藏时间
2~10年
优点:方法简便。 缺点:必须直立存放,占 空间大,不便携带。
载体保藏法
悬液保藏法
沙土保存法
①121℃湿热灭菌30 min, 置 40℃恒温箱中蒸发水分,
经无菌检查后备用。
载体保藏法
方法
把液体石蜡注入 已长好菌的斜面 上并高出斜面顶 端1 cm,使菌种 与空气隔绝。将 试管直立,置低
温(4~6℃)干燥 处或室温下保存。 保藏期间应定期
检查
②160℃干热灭菌2 h,冷却 后,经无菌检查后备用。
分类 斜面培养、穿刺培养、
疱肉培养基培养
方法
将菌种接种在斜面、液体或 穿刺培养基上,待生长完全后,
置普通冰箱4℃保藏,湿度50 %~70%以下,棉塞换成不通气
橡皮塞更好。
传代培养法
(Subculture
method)
适用情况
时间
有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理
低温可减缓生长速度,单细胞 时,会很快死亡,因此在这种情况下,

沙土培养法
沙和土用酸浸泡去除其中的有机质,洗涤 中和,干燥,分装于安瓶管内,加塞灭菌, 把健壮的孢子悬液滴于砂土中搅拌均匀,真 空干燥后封口,置于冰箱或干燥器中。
此法多用于能产生孢子的微生物如霉菌、 放线菌,因此在抗生素工业生产中应用最广, 效果亦好,可保存2年左右,但应用于营养细 胞效果不佳。
1.保持菌种原有性状和活力的稳定。 2.确保菌种不死亡、不变异、不被污染。
原理(theory):
DNA复制时自发突变导致菌种退化,因此要创造代谢 不活泼的状态。
休眠态(孢子、芽孢) 代谢不活泼的状态
环境(干燥、低温、缺氧、缺营养)
学习的重点:
菌种保藏的目的、原理及任务
常用的菌种保藏方法
• 分类 • 方法 • 保藏时间 • 适用情况
大连民族学院
生物工程083班 Made by lyq
学习的重点:
菌种保藏的目的、原理及任务
常用的菌种保藏方法
• 分类 • 方法 • 保藏时间 • 适用情况
菌种的保藏( Strain preservation)
菌种是重要的生物资源,研究和选择良好的菌种保藏方 法具有重要的意义。
目的(objective):
菌种保藏方法(Methods of strain preservation )
一种良好的菌种保藏方法: 保持原菌的优良性状长期稳定 方法的通用性 操作的简便性 设备的普及性
菌种保藏方法的分类
菌种保藏方法(Methods of strain preservation )
液氮保藏 法
传代培养 保藏法
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