两种菌种保藏方法的比较

细菌保种方法

/dxyz-b109-99-t-345518非常详细各菌种保存方法的优缺点1．斜面低温保藏法将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2—8℃的冰箱中保藏。

保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月，移种一次。

酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。

此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。

缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。

2．液体石蜡保藏法（1）将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。

（2）将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。

（3）用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准，使菌种与空气隔绝。

（4）将试管直立，置低温或室温下保存（有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长）。

此法实用而效果好。

霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1—2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温箱内，亦可保藏3个月之久。

此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需经常移种。

缺点是保存时必须直立放置，所占位置较大，同时也不便携带。

从液体石蜡下面取培养物移种后，接种环在火焰上烧灼时，培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅，应特别注意。

3．滤纸保藏法（1）将滤纸剪成0．5×1．2cm的小条，装入0．6×8cm的安瓿管中，每管1—2张，塞以棉塞，1．05kg/cm2>，121．3℃灭菌30分钟。

（2）将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

微生物菌种保藏方法

微生物菌种保藏方法微生物菌种保藏是指将微生物菌种保存在适宜的条件下，使其保持活力和遗传稳定性的方法。

随着微生物资源的日益减少，菌种保藏对于微生物研究和应用具有重要意义。

现今常见的微生物菌种保藏方法主要包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等。

I.冷冻保存法冷冻保存法是将微生物菌种在低温下保存，通常是在-80℃或更低的温度下。

冷冻保存的优点是简单易行，保存效果较好。

其步骤如下：1.选择合适的培养基和条件进行培养，确保菌种处于活跃状态；2.菌种分装，常用的分装方式有管内冻存和板块冻存两种。

管内冻存是将菌种转移到小试管中，加入一定的保护剂，如甘油，然后在-80℃下冷冻。

板块冻存是在无菌平板上涂布菌种，用无菌的干胶涂布，然后在-80℃下冷冻；3.将分装好的菌种保存在冷冻机或液氮罐中。

II.冷冻干燥法冷冻干燥法是将微生物菌种先进行冷冻，然后在真空条件下除去水分，最后进行密封保存。

冷冻干燥法的优点是菌种保存稳定性较好，不易失去活力。

其步骤如下：1.选择合适的培养基和条件进行培养，确保菌种处于活跃状态；2.将菌种在低温下冷冻，例如在-80℃冷冻24小时；3.将冷冻的样品放入真空干燥机中，通过极低的压力和温度，使水分从固态直接转变为气态，并在防止湿气生成的条件下除去水分；4.将干燥后的菌种用无菌胶瓶进行密封保存。

III.液氮保存法液氮保存法是将微生物菌种保存在液氮中，保证其温度处于极低的状态。

液氮保存法的优点是保存时间长，保存效果好。

其步骤如下：1.选择合适的培养基和条件进行培养；2.将菌种在低温下冷冻，例如在-80℃冷冻24小时；3.将冷冻的菌种转移到液氮罐中，确保菌种完全浸泡在液氮中；4.密封液氮罐保持其内部温度稳定。

总结起来，微生物菌种保存方法包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等多种方法。

科学选用适合的保存方法以及正确操作步骤，可以有效地保护微生物菌种的活力和遗传稳定性，为微生物研究和应用提供有力支持。

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点
菌种保藏是微生物学研究中非常重要的一环，它能够确保菌种的长期保存和传承。

常见的菌种保藏方法包括以下几种：
1. 冷冻保存法：将菌株在-80℃的低温下保存。

这种方法操作简单，保存时间长，但是对于某些菌株来说，冷冻保存可能会对其生长和代谢产生不利影响。

2. 干燥保存法：将菌株培养在固体培养基上，然后将其晾干并保存在干燥的环境中。

这种方法保存时间长，保存成本低，但是对于某些菌株来说，干燥保存可能会导致其失活。

3. 液氮保存法：将菌株在液氮中保存。

这种方法保存时间长，保存效果好，但是液氮保存设备和运输成本较高。

4. 低温保存法：将菌株保存在4℃的低温环境中。

这种方法操作简单，保存成本低，但是保存时间相对较短。

5. 防冻蛋白保存法：将菌株培养在含有防冻蛋白的培养基中，然后在-20℃的低温下保存。

这种方法对于某些菌株来说效果很好，但是防冻蛋白的成本较高。

以上是常见的菌种保藏方法及其优缺点。

在选择菌种保藏方法时，需要根据菌株
的特性和实验需求进行选择。

同时，为了确保菌株的质量，保存前需要对菌株进行鉴定和纯化，并且在保存过程中需要注意保存条件，避免保存过程中出现污染和失活等问题。

各菌种保存方法的优缺点

各菌种保存方法的优缺点1．斜面低温保藏法(1)将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2-8℃的冰箱中保藏。

(2)保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月，移种一次。

酵母菌两个月，细菌最好每月移种一次。

此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。

缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状；污染杂菌的机会亦较多。

2．液体石蜡保藏法(1)将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1.05kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。

(2)将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。

(3)用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm 为准，使菌种与空气隔绝。

(4)将试管直立，置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。

此法实用而效果好。

霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温箱内，亦可保藏3个月之久。

此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需经常移种。

缺点是保存时必须直立放置，所占位置较大，同时也不便携带。

从液体石蜡下面取培养物移种后，接种环在火焰上烧灼时，培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅，应特别注意。

3．滤纸保藏法(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1—2张，塞以棉塞，1.05kg/cm2，121.3℃灭菌30分钟。

(2)将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。

(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。

论述菌种的保藏方法

论述菌种的保藏方法菌种的保藏是指将某一种菌株保存在适宜的条件下，以确保其长期存活和保持其遗传特性的一种操作。

菌种的保藏对于科学研究和应用具有重要意义，因为菌株的失活或突变可能导致实验结果的不准确性或应用价值的丧失。

本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。

一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌株保存在低温条件下，以减缓菌株的代谢和生长速率，达到延长其存活时间的目的。

常见的冷冻保藏方法有两种：液氮冷冻和低温冷冻。

1. 液氮冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，迅速将冷冻管浸入液氮中进行冷冻保存。

液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。

2. 低温冷冻：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，然后分装至冷冻管中，置于-80℃的低温冰箱中保存。

相比于液氮冷冻，低温冷冻的操作更加简便，且可以在普通实验室条件下进行。

二、干燥保藏法干燥保藏法是将菌株保存在无水条件下，通过降低菌株周围环境的水分含量，抑制菌株的代谢活动，并防止细胞内酶的活性。

常见的干燥保藏方法有两种：冷冻干燥和真空干燥。

1. 冷冻干燥：将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的保护剂，然后在真空下进行冷冻干燥。

冷冻干燥的过程中，通过降低温度和压力，使水分直接从固态转变为气态，从而达到保护菌株的目的。

2. 真空干燥：将培养基中的菌株悬浮液均匀涂布在无菌的滤纸或硅胶膜上，然后将其置于真空干燥器中进行真空干燥。

真空干燥的过程中，通过降低压力，将水分从菌株周围环境中蒸发掉，使菌株处于无水状态。

三、液氮冷冻法液氮冷冻法是将菌株保存在液氮中的一种方法。

液氮的温度极低，可以有效地抑制菌株的代谢活动，保证其长期存活。

该方法适用于多种菌株的保藏，包括细菌、真菌和酵母等。

液氮冷冻法的操作步骤如下：1. 将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂，以增加菌株的抗冻性。

2. 将菌株悬浮液分装至冷冻管中，每支约0.5-1.0 mL，然后封闭冷冻管。

常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点菌种保藏是微生物学研究中的重要环节，其目的是长期保存各类菌种以便于日后的使用和研究。

常用的菌种保藏方法有冷冻保存、制备淡防冻溶液、干燥保存、液氮冷冻保存、冷冻干燥保存等。

下面是这些方法的优缺点。

1.冷冻保存：冷冻保存是通过将菌种保存在低温下，在液氮冷冻罐中或冷冻干燥保存，常见的保存温度为-80°C或液氮温度。

其优点是保存方便，菌种保存时间相对较长；缺点是保存设备和条件要求较高，保存过程中会有一定的细胞破坏。

2.制备淡防冻溶液：制备淡防冻溶液是指制备一种富含保护物质的冻存液，然后将菌种悬浮于其中，并在-20°C或-80°C保存。

其优点是相对简单，易于操作以及相对较长的保存时间；缺点是需要特定的冻存液配方和保存温度。

3.干燥保存：干燥保存是将菌种培养物在低温和低气压下干燥，然后保存于干燥剂中。

其优点是较为简单，设备要求低，保存时间较长；缺点是保存后重新复苏的成功率较低，保存过程中可能会有一定的细胞破坏。

4.液氮冷冻保存：液氮冷冻保存是将菌种保存在极低温的液氮中，常见的保存方法是将菌种培养物按一定比例混合液氮与甘油，然后使用液氮保存。

其优点是保存时间极长，细胞破坏较小；缺点是保存设备和条件要求较高。

5.冷冻干燥保存：冷冻干燥保存是将菌种首先冷冻，然后通过真空干燥的方法去除水分，最后保存在干燥剂中。

其优点是保存效果稳定，保存时间长；缺点是设备要求较高，操控难度大。

总的来说，不同的菌种保藏方法有各自的优点和缺点。

选择合适的方法应根据菌种的特性、实验室的设备和条件、保藏期限以及实验目的等因素综合考虑。

同时，在进行菌种保藏时，应严格控制一系列的操作步骤，包括消毒、菌种的培养与保存温度的选择、保存条件的监测等，以确保菌种的质量和纯度，以及保存结果的可靠性。

菌种保藏方法

菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下，以便长期保存并用于研究或应用。

菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失，以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。

下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。

一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下，一般为-80℃或液氮温度。

这种方法比较简单，操作方便，且保存效果较好。

首先，将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中，然后用无菌冻存管将菌液分装好，经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。

在需要使用菌株时，只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。

二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后，能够在相对湿度较低的条件下长期保存。

这种保存方法主要适用于真菌，特别是产生分生孢子的真菌。

首先，从培养基上接种分生孢子，培养出菌丝后进行枯燥处理。

一般采用短暂的枯燥处理，依靠菌丝中的水分进行干燥。

然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存，放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。

三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中，以保持菌株的活力。

这种方法适用于较短时间的菌种保存。

首先，将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中，待培养基中的水分被干燥剂吸收后，将菌株封存在密封袋或密封瓶中。

干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片，确保环境的干燥程度。

四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下，一般为4℃至10℃之间。

这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。

菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中，然后在低温条件下保存。

需要使用时，只需从低温保存中取出，接种到新的培养基中即可。

总结起来，菌种保藏是一项重要的科研工作，不同的菌种可以采用不同的保藏方法。

冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存，真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存，气干法适用于较短时间的保存，冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。

菌种的保藏方法

菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。

菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度，为后续的研究提供保障。

本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。

1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻干管吸取菌液。

将冻干管放入液氮中，冷冻至-80℃，待冻干后，将管子密封，保存在-80℃的冰箱中。

冻干菌株可以保存多年，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入液氮中，冷冻至-196℃，保存在液氮罐中。

静态液氮保存的菌株可以保存数十年，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将冻存管放入4℃的冰箱中保存。

冷藏法保存的菌株可以保存数个月，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入冰箱中，温度为4℃-8℃。

活体保存法可以保存数个月，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入冰箱中，温度为4℃-8℃。

每隔一段时间，将菌株转移到新的培养基上进行培养，以保持菌株的纯度和稳定性。

总之，菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。

简述菌种保藏的几种方法及条件。

菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程，其主要方法有：
一、冷冻法。

冰冻法是最常用的保藏菌株的方法，也是目前最理想的保藏方法之一，其主要原理是将活菌体放入冰冻室，温度由常温降至-80℃，使得菌种活动受到抑制，在-80℃的状态下可以长期保存。

二、液氮法。

液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法，主要是将活菌体置入液氮容器中，使其处于-195℃的极低温状态。

三、干燥法。

干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥，使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态，这种状态下可以防止菌种的增殖。

四、水银法。

水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性，将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。

保藏菌种的条件：
1、环境温度应该控制在0~4℃，并保持温度稳定。

2、控制保藏过程中的湿度，干燥法中的湿度应在10%～15%之间，而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮，避免菌种因温度过高而复苏。

3、控制光照，避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。

4、控制空气中的致病因子；
5、定期检测样品的质量，确保其始终处于较好的保藏状态。

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实验室最常用的五种菌种保藏方法

在现代生物学研究和生物技术应用中，菌种保藏是至关重要的环节。

恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性，为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。

本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法，深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。

一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。

其基本原理是将菌种置于超低温环境（通常为液氮温度，即-196℃）下，使菌种细胞处于极度冷冻的状态，从而抑制其代谢活动，达到长期保存的目的。

该方法具有诸多显著优点。

低温能够极大地减缓细胞的生理活动，几乎使其处于完全停滞状态，从而有效地延长菌种的存活时间。

低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小，经过长期保存后，菌种的特性通常能够较好地保持。

操作相对简单，只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液，然后置于液氮罐中即可。

在具体操作时，首先要选择合适的冷冻保存液。

常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂，如甘油、二甲基亚砜等，它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。

制备好冷冻保存液后，将菌种接种到冷冻保存液中，制成菌悬液。

将菌悬液分装到合适的冷冻管中，迅速放入液氮罐中进行保存。

在液氮罐中，要定期检查液氮的液位，确保菌种始终处于适宜的低温环境中。

低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存，尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种，如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等，具有良好的保藏效果。

然而，该方法也存在一些不足之处，例如液氮的成本较高，液氮罐的储存空间有限，以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。

二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。

常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。

沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中，然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。

该方法具有操作简便、成本低廉的特点。

在干燥过程中，菌种细胞内的水分逐渐散失，代谢活动减缓，从而达到保藏的目的。

菌种保藏方法

一、石蜡油低温保藏法本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡，达到菌体与空气隔绝，使菌处于生长和代谢停止状态，同时石蜡油还防止水分蒸发，在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。

保藏温度要求在-4～4℃下。

液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。

具体操作是：菌种为斜面培养菌种，斜面不宜过长；选择纯净优质石蜡油，置三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1～2h，将其放烘箱中(160℃左右)干热处理，去除灭菌时渗入的水分，待石蜡油变得清澈透明后冷却即可加入斜面，斜面上不能出现气泡，液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm为宜。

二、甘油管冷冻保藏法1．试验方法介绍本法也是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。

其方法是，将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。

将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108～1010/ml)。

取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。

-20℃保存时间较短。

或采用体积比为8：2的甘油－生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。

2．效果该法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种，适用范围广，操作简便，效果好，无变异现象发生。

甘油－生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液，其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用，且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分，从而更好地保护了待保存的菌株。

三、真空冷冻干燥法1．试验原理真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除不宜于丝状真菌的菌丝体外，对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用，不宜用冻干法保存的微生物不到2%。

冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结，然后在真空条件下干燥，使微生物的生长和酶活动停止。

为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害，要采用保护剂来制备细胞悬液，使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质，通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。

菌种科学保藏常用方法

菌种科学保藏常用方法中华保健食品商务网 2004-5-31生产母种通常用PDA培养基，选用180×18毫米试管，制成斜面试管接种而成。

PDA培养基配方：土豆（去皮、去芽）200克（也可用淀粉，用量为6克/1000毫升）葡萄糖20克琼脂20克磷酸二氢钾2克复合维生素B 2克旦白胨5克硫酸镁0.3克加水1300毫升本刊记者高级农艺师丁湖广菌种是国家重要的生物资源，是以微生物为对象的研究和生产所必不可少的材料。

因此，世界各国对菌种的保藏极为重视，有55个国家专门设菌种保藏机构。

国际微生物学会设有世界菌种保藏机构，简称WFCC，编写有《世界菌种保藏名录》。

我国菌种保藏机构，有中国微生物菌种保藏管理委员会（设在北京），共保藏有8000多个菌株，其任务是收藏、供应各种优良菌种。

菌种保藏的目的是：使菌种长期保藏之后，仍然保持着原有的生命力、优良生产性能、形态特征，以及不污染杂菌和不发生虫害。

菌种保藏的原理是通过低温、干燥、隔绝空气（真空）和断绝营养等手段，以达到最大限度地降低菌种的代谢强度，抑制菌丝的生长的繁殖。

由于菌种的代谢相对静止，生命活动将处休眠状态，所以能够保藏较长时间。

现将菌种保藏的几种主要方法介绍如下。

一、斜面低温保藏这是一种常用最简便的保藏方法。

首先将需要保藏的菌种移接到PDA培养基上。

为了减少培养基水分散发，延长保藏时间，在配制时琼脂用量加到2.5％，再加入0.2％磷酸氢二钾、磷酸二氢钾及碳酸钙等缓冲剂，以中和保藏过程中产生的有机酸。

如果是保藏香菇和木耳菌种，应把配方中的葡萄糖换成麦芽糖，培养基装入量不少于12毫升。

菌种接种后置于用适宜温度下培养至菌丝长满斜面，然后选择菌丝生长健壮的试管，先用硫酸纸包扎好管口棉塞，再将若干支试管用牛皮纸包好。

也可以用无菌胶塞代替棉塞，既能防止污染，又可隔绝氧气，避免斜面干燥。

具体做法是：选择大小合适的橡皮胶塞，洗净晾干，在75％酒精液中消毒1小时后，用无菌纱布吸去酒精，在火焰上方烧去残留的酒精液；于无菌条件下，将试管口在火焰上灼烧灭菌，拔出棉塞，换上胶塞，再用石蜡密封，放入4℃左右的电冰箱内保存。

菌种保藏的方法

菌种保藏的方法菌种保藏是指将某一特定的菌种保存在适当的条件下，以确保其生活和活力，并能够长时间保存下去的过程。

菌种保藏的方法主要有冷冻法、干燥法、液氮法、乳酸法和多核隔离法等。

下面将逐一介绍这些方法及其适用范围。

冷冻法是一种常见的保藏菌种的方法之一。

它是将菌种培养物以低温冷冻保存的方法，常见的保存温度为-80°C或更低。

冷冻法适用于大多数细菌和许多真菌，但对于某些特殊的真菌菌种可能效果不佳。

干燥法是将菌种培养物完全或部分脱水后保存的方法，常见的干燥方法有冻干和真空干燥。

干燥法适用于许多细菌、真菌和酵母菌，而且保存时间较长，但对于一些需较高水分条件的菌种可能不适用。

液氮法是将菌种保存在液氮中的方法，常见的保存温度为-196°C。

液氮法适用于大多数菌种，包括细菌、真菌和病毒。

液氮法的优点是保存时间长，可以达到数十年甚至更长的时间，并且菌种的生活力相对较好。

乳酸法是一种利用乳酸细菌的代谢产物来保藏菌种的方法。

这种方法适用于一些较难保存的菌种，如肠道菌和一些微嗜酸性菌。

乳酸法的原理是将菌种和乳酸细菌一起培养，乳酸细菌产生的乳酸可以降低培养物的pH值，从而模拟菌种在肠道内的环境，达到保藏菌种的效果。

多核隔离法是将菌种分离成不同的细胞核并分别保存的方法。

这种方法适用于一些证明难以保存的菌种，如高度依赖特定环境条件或具有复杂生命周期的菌种。

多核隔离法可以通过分离不同的菌落或以体细胞核和生殖细胞核分离的方式来保存菌种。

以上是几种常见的菌种保藏方法。

不同的方法适用于不同的菌种，选择适合的保藏方法可以确保菌种的长期保存和维持生活力。

在进行菌种保藏时，需要严格控制培养物的纯度和保存条件，以确保保存的菌种的准确性和可用性。

实验室最常用的五种菌种保藏方法

实验室最常用的五种菌种保藏方法一、冷冻保存在实验室中，冷冻保存是最常用的菌种保藏方法之一。

这种方法利用低温的环境，将菌种置于-70°C以下的冰柜或液氮罐中进行保存，以减缓菌种的新陈代谢过程，从而延长其保存时间。

冷冻保存不仅适用于常见的细菌菌种，对真菌、酵母菌等微生物也同样适用。

在冷冻保存的过程中，需要注意样品容器的密封性和防潮性，以避免保存过程中的交叉污染和冻结损伤。

二、干燥保存干燥保存是另一种常见的菌种保藏方法。

这种方法通过将菌种置于低温低湿环境中，使其水分蒸发，使菌种变得干燥并进入休眠状态，从而延长其保存时间。

常见的干燥保存方式包括真空冷冻干燥、干燥剂吸附法等。

干燥保存尤其适用于灵敏对湿度敏感的菌种，以及一些难以存活在液体培养基中的微生物。

三、低温保存除了冷冻保存外，低温保存也是常见的菌种保藏方式之一。

在这种方法中，菌种通常被保存在4°C左右的冰箱中，通过控制温度和湿度，延缓菌种的新陈代谢，并保持其生长状态。

这种保存方式不仅适用于微生物的短期保存，也可以用于长期保存对保存温度敏感的微生物。

四、液氮保存液氮保存是一种极低温的保存方式，通过将微生物样品浸没在液氮中进行保存。

这种方法不仅可以有效地防止菌种的新陈代谢和变异，还能够保持菌种的生物特性和遗传信息。

液氮保存适用于需要长期保存的珍贵菌株和难培养的微生物，如土壤中的特殊嗜冷菌和特殊嗜热菌等。

五、冻干保存冻干保存是将微生物样品在冷冻的条件下先冻结，然后通过真空干燥的方式将水分蒸发，最终将样品转变成固态的干燥状态。

这种方法既能保留微生物的生物特性，又能有效地延长样品的保存时间，适用于需要长时间运输和保存的微生物。

总结回顾通过冷冻保存、干燥保存、低温保存、液氮保存和冻干保存等五种菌种保藏方法，可以满足实验室对于微生物样品保存的不同需求。

不同的菌种和实验目的，需要选择合适的保存方式，以确保微生物的品质和可用性。

在进行菌种保存的过程中，需要注意样品的密封性、温度和湿度的控制，以及保存设备的维护和管理。

发酵菌种的保藏方法

发酵菌种的保藏方法
一、长期保藏方法：
1.冷冻保藏：将菌种培养物接种在培养基上，培养至菌液平台期，然
后将菌液搅拌均匀后，加入等体积的甘油或酵母浸渣，混匀后分装至无菌
冻结管中，用-80℃冷冻保存。

2.干燥保藏：将菌种培养物接种在培养基上，培养至菌液平台期，用
无菌纱布将菌液吸干，然后将纱布放入无菌干燥器中进行干燥，干燥至完
全失去水分后，将纱布收入无菌试管中，封口后保存于冰箱中。

3.液态氮保藏：将菌种培养物接种在培养基上，培养至菌液平台期，
然后用冷冻管将菌液分装好，将冷冻管插入液态氮中保藏。

二、短期保藏方法：
1.酸性保藏：将菌种接种在适宜培养基上，培养至平台期，然后加入
适量的无菌稀盐酸，使培养液酸化到pH2-3左右，保存于冰箱中。

2.盐浸保藏：将菌种培养物接种在适宜培养基上，培养至菌液平台期，然后加入适量的无菌富含NaCl的液体培养基，浸泡菌种，保存于冰箱中。

3.生理盐水保藏：将菌种培养物接种在培养基上，培养至菌液平台期，然后加入生理盐水，将菌液稀释至适宜的浓度，保存于冰箱中。

无论何种保藏方法，都具备相应的优点和限制，具体应根据具体菌种
的特性和实验需求进行选择和调整。

同时，保藏前需确保菌种纯度高，无
杂菌污染，并进行相应的质量控制措施，以保证保藏的可行性和有效性。

八种菌种保藏方法的优缺点

八种菌种保藏方法的优缺点
保藏菌种是微生物学研究中非常重要的一部分。

以下是八种常见的菌种保藏方法及其优缺点：
1. 冷冻保藏：
优点：简单易行，保藏时间长，适用于大多数微生物。

缺点：需要低温设备，可能会导致部分菌株失活。

2. 干燥保藏：
优点：操作简便，无需低温设备，适用于多种菌株。

缺点：某些菌株可能无法在干燥条件下存活。

3. 液氮冷冻保藏：
优点：温度极低，可长期保存。

缺点：设备昂贵，需要特殊处理。

4. 石蜡包埋：
优点：能够保存非常脆弱的菌株。

缺点：操作复杂，需要特殊设备。

5. 非常规保藏：
例如使用特殊培养基或添加保护剂等方法。

优点：针对特定菌株的保护效果更好。

缺点：需要特殊处理，不适用于所有菌株。

6. 液体保藏：
将菌株保存在培养基中。

优点：适用于快速生长的菌株，易于操作。

缺点：需要定期转移菌株以维持活性。

7. 冷冻干燥：
将菌株冷冻后进行干燥处理。

优点：保藏时间长，易于保存和转运。

缺点：某些菌株可能无法在冷冻干燥条件下存活。

8. 长期传代：
通过连续传代培养菌株。

优点：保持菌株活力，适用于快速生长的菌株。

缺点：需要定期进行传代，较为耗时。

这些方法各有优缺点，具体选择哪种方法取决于菌株的特性、实验条件和保存期望等因素。

微生物菌种保藏的原理和方法

微生物菌种保藏的原理和方法微生物菌种保藏是指将微生物菌种保存在适宜的条件下，以保证其长期存活和遗传特性的保持。

微生物菌种的保藏有着重要的科研意义和应用价值，可以用于微生物学研究、新药研发、环境修复等领域。

微生物菌种保藏的原理主要包括冷冻保存和冷冻干燥保存两种方法。

冷冻保存是将微生物菌种存放在低温环境下，通过降低菌种代谢活动的速度来保持其存活和遗传特性。

冷冻保存的主要步骤包括选择合适的保藏液、培养菌种、制备冷冻物等。

保藏液一般是由无菌培养基和一定浓度的甘油或蔗糖组成，可以提供菌种所需的养分和保护菌体免受冷冻引起的损伤。

培养菌种时需要选择处于活跃生长期的菌株，通过适当的培养条件来使其保持较高的活力。

制备冷冻物时，可以将菌株转移到保藏液中，并在超低温环境下迅速冷冻。

冷冻干燥保存是将微生物菌种冻结后，通过真空干燥的方法除去水分，将菌种转变为无水状态，以提高其耐久性和保存时间。

冷冻干燥保存主要包括培养菌种、冻干物制备和密封保存等步骤。

培养菌种的方法与冷冻保存类似，选择合适的培养基和培养条件来培养活跃菌株。

冻干物制备时，将菌株转移到含有保护剂的培养基中，并通过冻结和真空干燥的过程除去水分，形成冻干物。

最后，将冻干物密封保存，避免受潮和污染。

微生物菌种保藏在实际操作中需要注意一些关键技术和管理要求。

首先，要确保保存的微生物菌株是原始菌株的纯种，并且具有所需的遗传特性。

其次，保藏液或冻干物储存容器应该具备良好的密封性能，以防止水分的进入和菌株的污染。

另外，保存的温度应该稳定在低温，通常为-80℃或更低的温度，以保证菌株的长期存活。

此外，对于长时间保存的菌株，应定期进行复苏培养，以确保其存活和活力。

总之，微生物菌种保藏是一项重要的技术，为微生物资源的保存和利用提供了有效的手段。

通过冷冻保存和冷冻干燥保存等方法，可以长期保留微生物菌种的遗传特性和活力，为微生物学研究和应用提供了可靠的资源。

在实际操作中，应遵循正确的步骤和管理要求，以确保菌种的质量和保存效果。

菌种保藏的几种方法

菌种保藏的几种方法菌种保藏是指将特定 microscopic organisms 以各种方式保存以供将来使用的过程。

全世界都在努力收集和保留丰富的菌种以解决食品安全、人类健康、环境等多个重要问题。

人们已经开发出一系列有效的保藏方法，为获得有利于研究地菌种，控制环境问题及提供保藏服务提供了有力支持。

本文综述菌种保藏的几种方法，总结了市面上常见的对菌种保存有良好效果的几个方法。

第一种是冷冻法，是最常用也最有效的菌种保藏方法。

也可称作低温保藏，就是将需要保藏的菌株置于一定温度（≤-18℃）的环境中进行保藏，以防止菌种的变化、变质以及凋亡。

这是保藏菌种最为普遍的方法，对于大多数常见的菌种都有很高的安全度。

第二种是干燥保藏。

干燥法的原理是去湿，制出的菌落的水分很低（一般小于1%），从而防止一些微生物的生长和变形，从而达到保藏菌种的目的。

但是遗憾的是，由于菌落内部水分极低，被保藏的菌种非常脆弱，很难再次复原。

第三种是灭活保藏，是最简单的一种保藏方式，它都近似于冷冻，一般使用的是一种化学的抑制剂，通过抑制菌落的生长和繁殖，使其处于灭活状态，从而起到保藏菌种的作用。

当需要用时，可将其复原。

它可以很好地抑制菌落的繁殖，但也有一些缺点，比如使用复原液之后会发生微生物组成的变化，即所谓的“回滚”现象。

另一种是高压处理法，即把生物体放在极高压力(≥100MPa)的环境中，从而杀灭菌种中的细胞，从而达到保藏菌落的目的。

高压处理的菌种可以有效维持其完整的形态，而无需使用其他的抑制剂。

高压处理的菌种可以很好地复原，但使用这种方法保藏菌种通常需要较大的成本。

最后一种是细胞培养方法。

细胞培养法是一种经典的生物保存技术，它的主要原理是在适当的培养环境中，利用细胞内有生长根源所需要的物质和能量来保持细胞的存活，这也是细胞整个生命周期中最稳定的一时期，从而可以有效地保存菌种。

缺点是，这种方法保藏的菌落应用于研究时，会发生细胞失活的情况，引起实验数据可靠性的影响。