人胰岛细胞抗原2抗体蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)elisa
了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA—2A)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在1型糖尿病(DM)中的检出率及
龙源期刊网 了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA—2A）与谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）在1型糖尿病（DM）中的检出率及其诊断价值
作者：薛勇
来源：《饮食与健康·下旬刊》2015年第10期
【摘要】目的：分析探讨蛋白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值。
方法：选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B 组和C组，每组各40例，A组采取蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测，B组采取谷氨酸脱羧酶抗体检测，C组采取白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体联合检测，并在检测结束后，对比三组的检出率。
结果：A组的检出率为87.50%，B组的检出率为80.00%，C组的检出率为
100.00%，C组患者的检出率明显高于A、B两组，P
【关键词】白酪氨酸磷酸酶抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;1型糖尿病
谷氨酸脱羧酶（GAD）是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸（GABA）的限速酶，在胰岛β细胞中存在GAD，并也合成、分泌GABA。
本文就蛋白酪氨酸磷酸酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值进行了研究分析，将我院确诊的120例1型糖尿病患者作为研究对象，并分别给予蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测、谷氨酸脱羧酶抗体检测及酸磷酸酶抗体检测联合谷氨酸脱羧酶抗体检测，现报告整理完毕，具体陈述如下。
1 研究资料和方法
1.1 研究资料
选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B组和C组，每组各40例。
国家基层糖尿病防治考试题库(含答案)
B
2018）主要管理对象为：
型糖尿病患者
≥18岁的2型糖尿病患者
所有2型糖尿病患者
型及2型糖尿病患者
B
多选题)糖尿病初诊时建议对患者进行的体格检查内容包括：
身高
体重
腰围
足背动脉搏动
ABCDE
IFG）：
空腹血糖6.2mmol/L，OGTT2h血糖7.5mmol/L
纸质档案由责任医务人员或档案管理人员统计管理
患者的就诊记录、转诊、会诊及住院记录均应纳入健康档案
糖化血红蛋白，在血糖达标后可每年检查1次
2型糖尿病高危人群，应至少()测量一次空腹血糖：
每年
2型糖尿病患者的控制目标
FPG 4.4~6.1mmol/L
N-FPG 4.4~8.0mmol/L
有骨折病史
运动必须持之以恒，长期坚持才能达到理想的效果
ACEI的患者，需要经常检查其：
肾功能和血钾
高血压
血脂异常
()联合治
胰岛素促泌剂
α-糖苷酶抑制剂
噻唑烷二酮类药物
胰岛素
其他降糖药物
糖尿病患者年龄≥50岁，合并至少1项主要危险因素时，若无出血高风险，
糖尿病患者使用阿司匹林过敏，可改用氯吡格雷
糖尿病酮症酸中毒
HHS诊断标准，错误的是：
血清酮体为强阳性
若考虑高血糖危象，无需处理，立即转诊
乙酰乙酸
β-羟丁酸
丙酮
20岁，诊断1型糖尿病2年，平时每日用胰岛素40U，控制血
1周因胰岛素用完停用。因乏力3天，昏迷4小时入院，以下处理
立即测血糖、血酮
立即测尿糖、尿酮
糖尿病相关检验项目及意义
糖尿病相关检验项目及意义1、GADA（谷氨酸脱羧酶抗体）【GAD 65KD】2、ICA （胰岛细胞抗体）【ICA 40KD、ICA 64KD、ICA 120KD】3、IAA （胰岛素自身抗体）【IAA 5.8KD】4、ZnT-8A（锌转运蛋白8抗体）5、IA-2A （蛋白络氨酸磷酸酶抗体）6、INS-Ab（抗胰岛素抗体）7、INS （胰岛素测定）8、胰岛素释放试验9、C-P （C肽测定）10、C肽释放试验11、葡萄糖耐量试验12、HBA1c（糖化血红蛋白）13、GSP （糖化血清蛋白）14、Glu （血糖测定）15、U-ALB （尿微量白蛋白定量）16、β2-MG （尿β2微球蛋白）以下五项为糖尿病自身抗体1、GADA（谷氨酸脱羧酶抗体）【GAD 65KD】：GADA是胰岛β细胞的特异性抗体，在1型糖尿病发病前期和发病时多为阳性，而在正常人群及2型糖尿病患者中多为阴性，故常用于1型（包括LADA）和2型糖尿病的鉴别诊断和预测。
与其他自身抗体相比，GADA具有出现最早、持续时间最长、不易消失、敏感性和特异性较高的特点，在糖尿病的分型、病情发展预测、指导临床治疗方面具有重要价值。
具有与β细胞缓慢损伤相关性好，出现早，持续时间长，年龄跨度大，阳性率高等特点，是目前公认的诊断LADA以及预测胰岛功能的免疫学指标，可于发病前10年测出，且在此期间呈高滴度持续存在，在大多数I1DM患者中阳性，且阳性率不随病程延长而下降，如在初发T1DM患者中查出GADA抗体有助于排除T2DM，以助于DM诊断分型并指导治疗，是目前发现的胰岛相关抗体的检测中，认为是灵敏度和特异性最高的项目。
2、ICA （胰岛细胞抗体）【ICA 40KD、ICA 64KD、ICA 120KD】：抗胰岛细胞抗体（ICA）是β细胞破坏的免疫学标志，在1型糖尿病患者中阳性率很高，特别是1型糖尿病儿童阳性率更高，可达90%以上，而在2型糖尿病中阳性率很低，因此，在预测和诊断1型糖尿病方面有高度的敏感性和特异性。
检测自身免疫性糖尿病抗体谱GADA，ICA，IA-2A，IAA，ZnT-8A在诊断Ⅰ型糖尿病中的应用
检测自身免疫性糖尿病抗体谱GADA，ICA，IA-2A，IAA，ZnT-8A在诊断Ⅰ型糖尿病中的应用价值发布时间：2021-06-30T06:25:43.308Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2021年第3期作者：杨晓芳郭炜[导读] 目的探析在Ⅰ型糖尿病的诊断中自身免疫性糖尿病抗体谱的检测是否具有推广应用的价值。
方法随机选取Ⅰ型糖尿病患者和健康体检者作为观察组和对照组，对照两组的检测指标。
结果观察组在GADA、ICA、IA-2A、IAA、ZnT-8A上的检出率比对照组高，且存在统计学差异（P<0.05）。
结论在Ⅰ型糖尿病的诊断中加强联合测定GADA、ICA、IA-2A、IAA、ZnT-8A这样的自身免疫性糖尿病抗体谱，有助于诊断准确率的提高，有应用推广的价值。
杨晓芳郭炜新疆昌吉州人民医院新疆昌吉 831100【摘要】目的探析在Ⅰ型糖尿病的诊断中自身免疫性糖尿病抗体谱的检测是否具有推广应用的价值。
方法随机选取Ⅰ型糖尿病患者和健康体检者作为观察组和对照组，对照两组的检测指标。
结果观察组在GADA、ICA、IA-2A、IAA、ZnT-8A上的检出率比对照组高，且存在统计学差异（P<0.05）。
结论在Ⅰ型糖尿病的诊断中加强联合测定GADA、ICA、IA-2A、IAA、ZnT-8A这样的自身免疫性糖尿病抗体谱，有助于诊断准确率的提高，有应用推广的价值。
【关键词】糖尿病；抗体；诊断；应用在诸多常见病中糖尿病发生率越来越高，且患者也不仅限于老年人，患病年龄日趋年轻化，因此，及早诊断、及早治疗、科学用药等对控制糖尿病患者血糖、提高其生存质量等极其重要[1]。
基于提高Ⅰ型糖尿病的诊断率，促使此类患者及早得到准确诊断结果，及早治疗的目的，本研究通过分组对照的方式研究GADA、ICA、IA-2A、IAA、ZnT-8A的检测在Ⅰ型糖尿病的诊断中是否具有应用推广的价值，下面具体介绍如下。
1一般资料和方法1.1一般资料从2019年1月至2020年1月在本院确诊的Ⅰ型糖尿病患者中随机选取210例作为观察组（男125例，女85例，年龄20-57岁，糖尿病初发），随机从2019年1月至2020年1月期间来院体检的正常体检者中选取210例作为对照组（男120例，女90例，年龄22-56岁，肝胆脾胃肾功能正常，无内分泌疾病，家族病史不包括糖尿病），在年龄、性别上两组没有统计学差异（P＞0.05）。
糖尿病抗体
糖尿病抗体四项检测的临床意义1、抗谷氨酸脱羧酶抗体谷氨酸脱羧酶是抑制性神经递质GAD65和GAD67两种异抗体为1型糖尿病中抗GAD抗体主要的靶抗原。
抗GAD抗体是胰岛素依赖型糖尿病（1型糖尿病）的重要免疫标志。
抗GAD抗体在糖尿病前驱阶段和170-90%12型糖尿病。
联合检测抗谷氨酸脱羧酶抗体和LADA。
此外抗GAD抗体还与僵人综合征相关，该抗体在此病症中的阳性率为60-100%。
参考值：<10.0IU/ml2、抗酪氨酸磷酸酶抗体 IA2-Ab抗酪氨酸磷酸酶抗体（IA2）是与1型糖尿病相关的抗体，在糖尿病前驱阶段和1型糖尿病中的阳性率为50-75%，是胰岛自身免疫活动的早期标志物，其出现通常预示着病情进展迅速。
在年轻初发病者中的阳性率更高，与初发病进展速度有关。
参考值：<10.0IU/ml3、抗胰岛素抗体 IAA1机体产生抗胰岛素抗体。
检测抗胰岛素抗体可指导胰岛素的用量，为耐药性糖尿病治疗提判断预后，胰岛素释放曲线低下而检测胰岛素抗体滴度偏高，说明患者不是胰岛功能衰竭，提示病情稳定。
相反则表明胰岛素功能衰竭，预后较差。
参考值：阴性4、抗胰岛细胞抗体 ICA抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体，抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分，主要为lgG类，是胰岛细胞中β细胞损伤的标志物，是诊断胰岛依赖性糖尿病高敏感性和高特异性的指标。
早期1型糖尿病患者ICA阳性率可达60%～80%，治疗数周后阳性率迅速下降至50%以下，2～3年后，约20％的患者仍为阳性，提示ICA的出现可能是暂时现象，似与1型糖尿病的起病时间紧密相关，可作为其早期诊断指标；少数患者ICA滴度可持续维持很高，数年不变；有个别患者起病时为阴性，以后转为阳性；糖尿病近亲阳性率可达19%，预示其家族成员患病的危险性较大。
高效价ICA与胰岛β细胞功能破坏有关，可作为评价疾病严重程度的标志。
参考值：阴性联合检测上述四项，有助于鉴别诊断1型糖尿病，判断疾病预后，并评估1型糖尿病的发病风险。
糖尿病5项抗体检测意义
糖尿病五项抗体检测意义糖尿病五项抗体联合检测的临床意义：1.在高危人群中筛查1型糖尿病谷氨酸脱羟酶抗体（GADA）是Ⅰ型糖尿病的出现的最早的抗体，GADA 阳性是可以提前预测的。
GAD 抗体在1型糖尿病患者出现症状很多年前甚至是10 年前就已经存在，在最初发的Ⅰ型糖尿病患者的血中阳性率可达到60%～80%。
同时，在 1 型糖尿病患者的实验室诊断，锌转运蛋白 8 抗体可作为其诊断的预警信息，出现在临床症状之前，可以早期预测并指导临床治疗。
所以GADA和抗锌转运蛋白8抗体（ZnT8）是目前诊断成人隐匿性自身免疫糖尿病的首选免疫学指标，对 1 型糖尿病的治疗和预防具有重要意义2.用血清抗体指导糖尿病临床分型。
比如GAD 抗体早在 1 型糖尿病出现症状 10 年前就已存在了，再比如美国糖尿病协会免疫学工作组在" 新诊断的1型糖尿病患者干预研究指南"中，也明确规定了临床上确诊并进行干预治疗的1型糖尿病的标准。
就是这些糖尿病相关自身抗体中，患者必须存在至少一种以上为阳性。
如果是IAA阳性的，还需要注意患者是否接受过胰岛素治疗，如接受过胰岛素治疗，其疗程必须小于2w IAA抗体阳性才可以作为患者诊疗的评判标准。
3.预测β细胞功能衰竭血清抗体在预测β细胞功能衰竭时，ICA的阳性预测值可达74%，而GADA和（或）IA-2A 则为47%。
通常GADA和/或IA2A高水平常提示可能出现了完全的β细胞功能衰竭，而低水平者可仅出现缓慢进展的β细胞功能不全。
4.预测治疗的疗效对于临床上应用的干预治疗的患者，通过血清学检测去评估患者的治疗效果，比如环孢霉素治疗，患者血清ICA、IAA水平降低，提示胰岛β细胞功能有所恢复的。
所以综合起来，这些抗体与I型糖尿病高度相关，联合检测对糖尿病的分型诊断、预测及提高检出率是有重要临床意义的。
各项抗体的检测意义：1.谷氨酸脱羟酶抗体（GADA）为Ⅰ型糖尿病的出现的最早的抗体，GADA 阳性是可以提前预测的。
糖尿病简介及治疗
其他特殊类型糖尿病
A．胰岛β细胞功能遗传性缺陷
第12号染色体，肝细胞核因子1α（HNF-1α）基因突变（MODY3）
第7号染色体，葡萄糖激酶（GCK）基因突变（MODY2）
第20号染色体，肝细胞核因子4α（HNF-4α）基因突变（MODY1）
线粒体DNA
其他
B．胰岛素作用遗传性缺陷
A型胰岛素抵抗
矮妖精貌综合征（Leprechaunism）
*
糖代谢分类
静脉血浆葡萄糖（mmol/L）
空腹血糖（FPG）
糖负荷后2小时血糖（2hPPG）
正常血糖（NGR）
<6.1
<7.8
空腹血糖受损（IFG）
6.1-<7.0
<7.8
糖耐量减低（IGT）
<7.0
7.8-<11.1
糖尿病（DM）
≥7.0
≥11.1
IFG或IGT统称为糖调节受损（IGR，即糖尿病前期）
高血糖 是胰岛素分泌的缺陷或/和其生物效应降低（胰岛素抵抗）所致。 慢性高血糖将导致多种组织，特别是眼、肾脏、神经、心血管的长期损伤、功能缺陷和衰竭
1
2
糖尿病的形成
胰岛素抵抗是指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用的效率下降，机体代偿性的分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症，以维持血糖的稳定。胰岛素抵抗易导致代谢综合征和2型糖尿病。50年代Yallow等应用放射免疫分析技术测定血浆胰岛素浓度，发现血浆胰岛素水平较低的病人胰岛素敏感性较高，而血浆胰岛素较高的人对胰岛素不敏感，由此提出了胰岛素抵抗的概念。
糖尿病合并严重的高甘油三酯血症、皮肤脂肪瘤
糖尿病与痈
神经病变
01
02
中枢神经 周围神经 感觉异常 运动神经受累 自主神经
组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA试剂盒说明书
组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
糖尿病培训考试题库含答案
1、（单选题）糖尿病管理的“五驾马车”是：DA.饮食控制、运动疗法、药物治疗、戒烟戒酒、血糖监测B.饮食控制、运动疗法、药物治疗、按摩理疗、血糖监测C.饮食控制、运动疗法、药物治疗、按摩理疗、教育及心理治疗D.健康教育及心理改善、饮食控制、运动疗法、药物治疗、血糖监测2、（单选题）国家基层糖尿病防治管理指南（2018）主要管理对象为：BA.1型糖尿病患者B.≥18岁的2型糖尿病患者C.所有2型糖尿病患者D.1型及2型糖尿病患者3、（多选题）基层卫生机构应配备以下哪些降糖基本药物：ABCDEA.二甲双胍B.胰岛素促泌剂C.α-糖苷酶抑制剂D.噻唑烷二酮类药物E.胰岛素4、（单选题）目前中国的糖尿病患病率约为：BA.17.1%B.10.4%C.8.2%D.15.3%5、（单选题）诊断糖尿病依据是：AA.静脉血浆葡萄糖B.毛细血管血糖C.糖化白蛋白D.尿糖6、（多选题）下面关于糖尿病的描述正确的是：ADA.胰岛素抵抗或胰岛素分泌缺陷B.病程久了一定会发生并发症C.一定有“三多一少”症状D.以高血糖为特征E.一定超重或肥胖7、（单选题）下列哪项是2型糖尿病的基本病理生理改变：BA.葡萄糖耐量减低B.胰岛素作用下降或/和分泌不足C.糖皮质激素分泌过多D.胰高血糖素分泌过多8、（单选题）糖尿病确诊方法是：BA.血浆胰岛素水平测定B.空腹血糖或口服葡萄糖耐量试验C.糖化血红蛋白测定D.血浆C肽水平测定9、（单选题）空腹状态指：CA.至少4小时没有进食热量B.至少6小时没有进食热量C.至少8小时没有进食热量D.至少12小时没有进食热量10、（单选题）以下关于1型糖尿病与2型糖尿病的鉴别要点，错误的是：CA.1型糖尿病患者多消瘦，2型糖尿病患者多超重或肥胖B.1型糖尿病患者发生酮症的倾向更大C.若自身免疫标记阴性，则一定可以排除1型糖尿病D.1型糖尿病对外源性胰岛素的依赖性更高11、（单选题）女，45岁。
轻度肥胖，无明显口渴、多饮和多尿现象，空腹血糖6.8mmol/L。
1型糖尿病相关的主要自身抗体及其检测的临床意义
1型糖尿病相关的主要自身抗体及其检测的临床意义作者：刘伟平向丽来源：《糖尿病新世界》 2014年第20期刘伟平1 向丽21.自贡市第一人民医院检验科，四川自贡 643000；2.重庆长寿石堰镇卫生院，重庆401220[摘要] 该文综述了1型糖尿病(T1DM)相关的主要自身抗体及其检测的临床意义。
T1DM的主要自身抗体包括胰岛细胞抗体（ICA）、谷氨酸脱羧酶自身抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶IA-2自身抗体(IA-2A)和胰岛素自身抗体(IAA)共四种。
ICA是胰岛β细胞损伤的标志物，也是免疫介导疾病的一个标志。
GADA是T1DM发病初期的免疫标志，也作为T1DM患者接受治疗时的疗效监测指标。
IA-2A在成人隐匿性自身免疫性糖尿病(T1DM亚型)中具有较高的滴度，可用于成人隐匿性自身免疫性糖尿病的辅助诊断。
IAA在TIDM自身免疫形成中发挥了重要作用，但它不是糖尿病特异性抗体，在甲状腺疾病和正常人群中均具有一定的阳性率。
[关键词] 1型糖尿病；自身抗体；临床意义[中图分类号] R587 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（２０１4）12（a）－０049-02[作者简介] 刘伟平(1980-)，湖南株洲人，硕士，主管检验师，主要从事临床免疫和分子生物学检验研究工作。
糖尿病是一种以血糖升高为主要特征的代谢紊乱性疾病，也是一种发病率较高的疾病[1-2]。
1型糖尿病(Type 1 Diabetes Mellitus，T1DM)，由于该型糖尿病依赖胰岛素治疗可取得满意的效果，故以前称为胰岛素依赖型糖尿病，多发生在儿童和青少年群体，也可发生于各种年龄。
T1DM的基本特征为起病较为急剧，体内胰岛素绝对不足，容易发生酮症酸中毒[3]。
T1DM是一种免疫介导的糖尿病，它具有胰岛β细胞合成分泌胰岛素功能受损表现。
在T1DM患者的血液中可查出多种自身免疫抗体，如谷氨酸脱羧酶自身抗体(Glutamic Acid Decarboxylase Autoantibodies，GADA)、胰岛细胞抗体（Islet Cell Antibodies，ICA）、蛋白酪氨酸磷酸酶IA-2自身抗体(Tyrosine Phophatase IA-2 Autoantibodies，IA-2A)、胰岛素自身抗体(IAA)等[4-5]。
探讨Ⅱ型糖尿病相关的胰岛自身抗体影响因素
探讨Ⅱ型糖尿病相关的胰岛自身抗体影响因素赵璐;姜涛;姜正二【摘要】目的:探讨检测酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛细胞抗体(ICA)和抗胰岛素抗体(IAA)在Ⅱ型糖尿病(T2DM)诊治中的临床意义.方法选取延吉市第二人民医院内分泌科收治的158例初诊为Ⅱ型糖尿病患者和79例正常糖耐量者为对照组,测定血清中4种胰岛自身抗体(IA-2A、GADA、ICA、IAA)阳性检出率,并对其结果进行分析.结果:初诊为T2DM患者血清阳性率分别为IA-2A(7.59％)、GADA(14.55％)、ICA(20.25％)和IAA(8.22％),对照组阳性检测率为IA-2A(1.26％)、GADA(1.26％)、ICA(2.53％)和IAA(2.53％),T2DM与对照组相比,其中三种(IA-2A、GADA、ICA)阳性率明显高于对照组,其差异显著(P<0.05),同样IAA阳性率高于对照组,但其差异并无显著(P>0.05).结论:血清中IA-2A、GADA、ICA抗体的检测对检出T2DM有重要的指导价值,以利于T2DM患者早期预报,采取有效的病因分析和及时治疗措施,减少病程的发展,提供有效依据.【期刊名称】《黑龙江科技信息》【年(卷),期】2018(000)036【总页数】2页(P4-5)【关键词】酪氨酸磷酸酶抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;胰岛细胞抗体;免疫印迹法【作者】赵璐;姜涛;姜正二【作者单位】延边大学医学院,吉林延吉 133002;延边大学医学院,吉林延吉133002;延边大学医学院,吉林延吉 133002【正文语种】中文【中图分类】R587.1糖尿病是因胰岛素分泌绝对或相对不足而引起的以高血糖为主要特征的代谢性疾病。
非胰岛素依赖性糖尿病又称Ⅱ型糖尿病（T2DM），T2DM特点是以胰岛素抵抗为主伴胰岛素分泌不足 [1]。
胰岛素抵抗是指胰岛素执行其正常生物效应不足，表现为外周组织对葡萄糖的利用障碍，使胰岛B细胞的功能逐步衰弱，导致糖耐量异常和高血糖的发生。
人胰岛细胞抗原2抗体蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)elisa
人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)水平。
用纯化的人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)，再与HRP标记的胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
自身免疫性糖尿病
• GADA在1型糖尿病发病的早期阳性率为38-76%，几乎都 是 GAD 65，而 GAD 67分布很少，2型糖尿病阳性率仅 0-4%。
• 注意：1型糖尿病患者的ICA和Anti-GAD检出率呈正相 关，两种抗体的一致率在发病早期为90%，疾病过程中 为54%。
• 现代的生活方式：吃高热量的食物和运动量的减少也能引起 糖尿病，有人认为这也是由于肥胖而引起的。肥胖症和2型糖 尿病一样，在那些饮食和活动习惯均已“西化”的美籍亚裔 和拉丁美商人中更为普遍。
2020/12/15
自身免疫性糖尿病PPT课件
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1型和2型糖尿病的主要区别
2020/12/15
自身免疫性糖尿病PPT课件
在胰岛B细胞中存在谷氨酸脱羧酶（GAD），是一种自身 抗原，其相应抗体为抗谷氨酸脱羧酶抗体（Anti-GAD）， 是1型糖尿病最主要的自身抗体。它可以攻击分泌胰岛素 的细胞，造成胰岛素细胞的免疫损伤，异导致胰岛素素 分泌水平下降，发生糖尿病。
2020/12/15
自身免疫性糖尿病PPT课件
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抗谷氨酸脱羧酶抗体（Anti-GAD）
➢典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即 “三多一少”症状，糖尿病（血糖）一旦控制不好会引 发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法 治愈。
2020/12/15
自身免疫性糖尿病PPT课件
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糖尿病的概念
➢多年来，医学界一直致力于对糖尿病的研究。这是因为 一旦患上“糖尿病”，人体的麻烦随其而至，因为免疫 功能减弱，容易感染由感冒、肺炎、肺结核所引起的各 种感染疾病，而且不易治愈。并且选择性地破坏细胞， 吞噬细胞。抗癌细胞的防御机能会大大减弱，至使癌细 胞活跃、聚集。 一旦得了“糖尿病”，寿命可能减去 十多年。因此许多人对糖尿病谈之而色变，千方百计的 治疗。
胰岛自身抗体联合检测在不同病程Ⅰ型糖尿病中的阳性率
胰岛自身抗体联合检测在不同病程Ⅰ型糖尿病中的阳性率沙悦;王妲;孙琦;杨国华【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2001(023)003【摘要】目的观察不同病程Ⅰ型糖尿病患者中血清胰岛细胞抗体(ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)和酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)的阳性率,探讨胰岛自身抗体在本病发病机制和诊断中的作用.方法取41例病程≤5年和30例病程≥10年的Ⅰ型糖尿病患者血清,用酶联免疫吸附法(ELISA)定性测定ICA,放射免疫一步法(RIA)定量测定GADA,免疫沉淀法(IP)定量测定IA-2A.结果 ICA、GADA和IA-2A的阳性率分别为21.1%、39.4%和38.0%.三种抗体联合,阳性检出率为67.6%,其中GADA和/或IA-2A阳性者占62.0%.病程≤5年组GADA阳性率为51.2%,显著高于病程≥10年组(23.3%)(P＜0.01),而ICA和IA-2A的阳性率及三种抗体的阳性种类数在两组差异均无显著性.71例患者中ICA阳性组有病毒感染史者显著高于ICA阴性组,但三种抗体均阴性者和至少一种抗体阳性者在发病年龄、体重指数、性别比例及有无糖尿病家族史、病毒感染史和其它自身免疫病等方面差异均无显著性.结论Ⅰ型糖尿病患者血清胰岛自身抗体联合检测可获得较高的阳性率,对临床特点不典型患者的诊断有较大意义.GADA在短病程患者中的阳性率显著高于长病程患者,而ICA和IA-2A的阳性率与病程无关.全身性自身免疫倾向可能与胰岛自身抗体持续阳性有关,但不是其唯一原因.ICA阳性者病毒感染史多见,而发病年龄、性别等对ICA、GADA和IA-2A三种抗体的阳性率无明显影响.【总页数】4页(P273-276)【作者】沙悦;王妲;孙琦;杨国华【作者单位】中国医学科学院中国协和医科大学协和医院内分泌科,;中国医学科学院中国协和医科大学协和医院内分泌科,;中国医学科学院中国协和医科大学协和医院内分泌科,;中国医学科学院中国协和医科大学协和医院内分泌科,【正文语种】中文【中图分类】R587.1;R446.62【相关文献】1.1型糖尿病胰岛自身抗体阳性率及其与病程的关系 [J], 袁凤易;李生中;刘莉;徐丹;徐平2.三种胰岛自身抗体联合检测对1型糖尿病早期诊断的意义 [J], 徐宽枫;徐萍;张梅;覃又文;刘超3.锌转运蛋白8抗体阳性的1型糖尿病患者胰岛自身抗体阳性率及生化指标水平[J], 赵鸿斌;祁洁;李彦青4.1型糖尿病患者血清胰岛自身抗体阳性率及其与临床指标的相关性 [J], 刘艺文;余洁;马明磊;平凡;张化冰;李伟;许岭翎;李玉秀5.短期胰岛素泵强化治疗在不同病程2型糖尿病患者治疗中的应用效果 [J], 陈瑛; 黄盘冰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)elisa试
剂盒使用说明书
Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置
标准品稀释液：1.5ml×1瓶
酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）
【人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)试剂盒】本试剂仅供研究使用
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：
封板膜:2片（48）/2片（96）
说明书:1份
密封袋:1个
标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存
酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存
显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存
显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存
终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存
浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)水平。
用纯化的人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)，再与HRP标记的胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)浓度。
目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)的含量。
服务承诺：
供货期：款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导。
请来电咨询
为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。
保存条件及有效期：
试剂盒保存：2-8℃| 有效期：6个月
【人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)试剂盒】样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心
20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/
分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标
准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1800ng/L，1200ng/L ，600ng/L，300ng/L，150ng/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
【人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)试剂盒】注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围：
0.2IU/L - 6IU/L。