蛋白质检测操作规程
总蛋白检测标准操作规程
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
65-85g/L
11.检验结果的解释
仪器加样针、比色杯、管路等未清洗干净时可能对试验结果产生影响。
反应曲线异常时需进行确认，干扰物质超出限度时需进行确认。
高度溶血可导致结果偏高。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
当发生以下情况时建议重新校准：变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质量控制程序
9.1质控品来源
BACKMAN质控品，上海市临检中心提供
9.2质控品浓度
低/中/高三个浓度
9.3储存条件
复溶后于-20℃冷冻保存可稳定1个月。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
试剂
硫酸铜
3.0g/L
酒石酸钾钠
9.0g/L
氢氧化钠
0.6mol/L
碘化钾
5.0g/L
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
546nm
辅助波长
700nm
反应方法
终点法
反应方向
向上
反应温度
37℃
试剂
250ul
5.3注意事项
推荐选用血清，因为血浆含纤维蛋白，故肝素抗凝血浆的TP值一般比血清高。标本应避免溶血、脂血、黄疸。
血清白蛋白测定标准操作规程
血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清白蛋白测定（缩写ALB）;组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2。
1标本采集2。
1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2。
1。
2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2。
1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2。
1。
5下列标本为不合格标本2。
1。
5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本,或少于0。
1ml的血清或血浆。
2。
1。
5。
2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2。
1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.2。
1。
5。
4其他如标识涂改、标本试管破裂等.2。
2标本保存2.2。
1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.2.2.2标本保存时间：室温(15～25℃)下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.3标本采集的注意事项2.3。
1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2。
3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品.4。
2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。
开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。
变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用.4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备4.4试剂盒主要成分:缓冲液（pH 4.2）50 mmol/L，溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂＜0.1%。
蛋白质含量测定法（Bradford法）标准操作规程SOP
蛋⽩质含量测定法（Bradford法）标准操作规程SOP审批页⽬录1⽬的 (4)2范围 (4)3定义 (4)4环境、健康和安全 (4)5培训 (4)6职责 (4)7程序（内容） (4)7.1原理 (4)7.2实验材料 (4)7.3操作步骤 (5)7.4结果计算 (5)7.5判定标准 (6)7.6注意事项 (6)8相关⽂件 (6)9参考⽂献 (6)10流程图 (6)11附录 (6)蛋⽩质含量（Bradford法）测定记录 (1)蛋⽩质含量（Bradford法）测定记录(适⽤于多个样品) (1)1⽬的规范蛋⽩质含量检测（Bradford法）的操作过程。
2范围本规程适⽤于样品中蛋⽩质含量的检测（Bradford法）。
3定义————4环境、健康和安全————5培训5.1培训部门：分析研究部。
5.2培训对象：分析研究部相关⼈员。
5.3培训⽅式和时数：⾃学，1⼩时。
5.4考核⽅式：问答。
6职责6.1质量保证部：负责监督本⽂件的执⾏。
6.2分析研究部：负责严格执⾏本规程规定。
7程序（内容）7.1原理本法系依据在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋⽩质分⼦中的碱性氨基酸(精氨酸)和芳⾹族氨基酸结合形成蓝⾊复合物，该蓝⾊复合物在595nm处有最⼤吸收值，在⼀定浓度范围内其颜⾊深浅与蛋⽩质浓度呈正⽐，以蛋⽩质对照品溶液作标准曲线，采⽤⽐⾊法测定供试品中蛋⽩质的含量。
7.2实验材料7.2.1试药与试液7.2.1.1超纯⽔：电阻率不低于18.2MΩ·cm，本⽅法所有试液均⽤超纯⽔配制。
7.2.1.2酸性染⾊液：（1）⾃配：称取0.l0g考马斯亮蓝G250，加⼄醇50ml溶解后，加磷酸100ml，加⽔稀释⾄1000ml，混匀。
滤过，取滤液，即得。
本试剂置棕⾊瓶内避光保存，如有沉淀产⽣，使⽤前再滤过，2～8℃保存6个⽉。
（2）购买商品化试剂：如Quick Start TM Bradford 1X Dye Reagent，Cat#500-0205，⼚家BIO-RAD。
24小时尿蛋白定量操作规程
24小时尿蛋白定量操作规程
以下是24小时尿蛋白定量操作规程的一般步骤：
准备：
1. 确保实验室和试剂处于清洁有序的状态，并根据需要准备所需的试剂和设备。
2. 需要24小时尿样。
操作步骤：
1. 在清晨起床时，用清洁的容器收集全部排尿，并记录开始时间。
2. 将收集到的尿样倒入带有标记线的24小时尿收集容器中。
3. 在24小时内，将生成的所有尿液都收集到同一个容器中，确保不漏尿。
4. 在收集期间，将尿液保存在冰箱中或进行适当的冷藏，以避免蛋白质降解。
5. 在24小时后的同一时间结束尿液收集，并记录结束时间。
6. 将尿液进行充分混合。
7. 紧接着，取1-2mL的混合好的尿液样本，转移到干净的离心管或容器中，并进行标签。
8. 将尿液样本离心10-15分钟，以去除任何固体颗粒。
9. 将离心管中的尿液转移到分析用的小试管中，准备进行尿蛋白定量检测。
10. 根据所使用的具体检测方法，按照该方法的操作规程进行测量，并记录结果。
注意事项：
1. 24小时尿蛋白定量需要收集所有尿液，包括清晨第一次排尿。
2. 在尿液收集期间要保持卫生，以避免尿液受到污染。
3. 尿液样本需要及时冷藏或保存在冰箱中，以避免蛋白质降解。
4. 操作过程中要注意使用一次性手套和其他个人防护用具，以避免污染尿样。
5. 操作要规范，确保准确性，避免任何可能影响尿蛋白定量结果的因素。
蛋白质检测安全操作规程
蛋白质检测安全操作规程
一、目的：为规范蛋白质检测操作，确保蛋白质检测人员安全制定此规程。
二、范围：本规程适用于蛋白质检测操作
三、内容：
3.1蛋白质是含氮的有机化合物。
蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，蛋白质含量（含氮量*6.25=蛋白含量）。
有机物中的胺根在强热和CuSO4，浓H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
凯氏定氮法反应式为：
2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中CuSO4做催化剂）
凯氏定氮器中与碱作用，通过蒸馏释放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中
反应式为:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
用已知浓度的H2SO4（或HCI）标准溶液滴定，根据HCI 消耗的量计算出氮的含量，然后乘以相应的换算因子既得蛋。
检验科本周蛋白检测标准操作规程
检验科本周蛋白检测标准操作规程1.【检验目的】2.为了规范本周蛋白定性检测方法, 特制定本规程。
3.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP, 室负责人监督落实。
4. 2.2本SOP的改动, 可由任一使用本SOP的工作人员提出, 并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
5.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型: 新鲜尿液3.2患者准备: 患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型: 配套小便试管3.5实验试剂: 2g/L磺基水杨酸溶液。
2mol/L 醋酸盐缓冲溶液(PH4.9±0.1):取醋酸钠(CH3COONa-3H2O)17.5g,加冰醋酸4.1ml,再加蒸馏水至1ml,调PH至4.9.6.【测定原理】7.本-周氏蛋白又称凝溶蛋白, 是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。
此种蛋白在一定的PH条件下加热至40-60P时沉淀发生, 温度升高至1P时, 沉淀消失, 再冷却时又可重现沉淀。
8.【操作步骤】5.1将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性检查, 如呈阴性反应, 也需对尿液标本中本-周氏蛋白进一步检测。
9. 5.2取透明尿液4 ml于试管中, 再加入乙酸缓冲液1 ml, 混匀后放置56P水浴中15分钟, 如有浑浊或出现沉淀, 再将试管放沸水中煮沸3分钟, 观察试管中浑浊或沉淀的变化。
如浑浊变清、减弱或沉淀减少均提示本-周氏蛋白阳性。
若煮沸后, 浑浊增加或沉淀增加, 表明此尿液中还有其他蛋白质, 此时应将试管从沸水中取出, 立即过滤, 如滤液开始透明, 温度下降后浑浊, 再煮沸时又透明, 提示本-周氏蛋白为阳性。
10.【结果计算与判断】如浑浊变清, 浑浊减弱或沉淀减少, 均提示本-周氏蛋白阳性。
11.若煮沸后, 浑浊增加或沉淀增多, 表明此尿液中还有其他蛋白质, 此时应将试管从沸水中取出, 立即过滤。
如过滤开始透明, 温度下降后浑浊, 再煮沸时透明, 提示本-周氏蛋白为阳性。
蛋白质检测操作规程最新
蛋白质检测操作规程最新《蛋白质检测操作规程》一、实验室安全操作规程1. 实验室应具备必要的安全设施，如安全淋浴器，消防器材，急救箱等。
2. 操作人员应穿戴好实验室服装、手套和护目镜，并在操作过程中避免接触有害物质。
3. 实验室内禁止饮食，操作台面应保持清洁整洁，避免交叉污染。
二、蛋白质检测操作规程1. 样品准备：取得待测样品，根据要求进行样品制备，如细胞抽提、蛋白质提取等。
2. 蛋白质浓度检测：采用比色法或荧光法等方法，测定待测样品中蛋白质的浓度，并根据需求稀释样品。
3. 凝胶电泳：将待测蛋白质样品加入凝胶样品槽，进行蛋白质分离，检测蛋白质的分子量。
4. Western blot：将分离的蛋白质转移到膜上，然后用特异性抗体探测需要的蛋白质。
5. 结果分析：根据Western blot结果，判断目标蛋白质的表达情况，经过定量分析，得出相应的实验数据。
三、实验记录和报告1. 操作人员应记录实验的详细过程、使用的试剂和仪器型号、操作步骤、实验数据等内容。
2. 实验完成后，应将实验记录整理成报告，包括实验目的、原始数据、结果分析和结论等部分。
四、仪器设备维护和清洁1. 实验后及时清洁和消毒使用过的实验仪器和设备，确保下次使用前的卫生安全。
2. 定期对实验室仪器进行检查和维护，保证仪器正常使用。
五、结果存档和数据管理1. 所有实验记录和报告要有相应的存档，并按照规定的时间要求保存。
2. 实验数据的管理应该做好备份，并防止数据丢失或篡改。
通过以上《蛋白质检测操作规程》，实验室可按照规程科学、规范的开展蛋白质检测工作，确保实验数据的准确性和实验室的安全运行。
蛋白质含量测定法(BCA法)标准操作规程SOP
蛋白质含量测定法（BCA法）标准操作规程文件编码：SOPXXXX目录1. 目的 (1)2. 范围 (1)3. 职责 (1)4. 依据 (1)5. 定义 (1)6. 内容 (1)6.1. 原理 (1)6.2. 实验材料 (1)6.3. 操作步骤 (2)6.4. 结果计算 (3)6.5. 判定标准 (4)6.6. 注意事项 (4)7. 相关文件 (5)8. 附件 (5)9. 变更历史 (5)1.目的1.1.规范蛋白质含量检测（BCA法）的操作过程。
2.范围2.1.本规程适用于BF02及其它适合于BCA法的样品（原液或成品）的蛋白质含量测定。
3.职责3.1.方法学研究员负责严格执行本规程规定；3.2.方法学研究室负责人负责本规程的培训并监督本规程的执行。
4.依据4.1.《中国药典》2015年版，通则0731“蛋白质含量测定法”，第四法2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸法（BCA法）5.定义5.1.BCA：2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸法5.2.BSA：牛血清白蛋白5.3.TCA：三氯乙酸5.4.EDTA：乙二胺四乙酸5.5.EGTA：乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸5.6.DTT：二硫苏糖醇6.内容6.1.原理依据蛋白分子在碱性溶液中将Cu2+还原为Cu+，2,2，-联喹啉-4,4，-二羧酸（BCA）与Cu+结合形成紫色复合物，该复合物在562nm处有最大吸收值。
在一定浓度范围内，其溶液颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液（BSA）作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
6.2.实验材料6.2.1. 试药与试液6.2.1.1. 超纯水：电阻率不低于18.2MΩ·cm ，本方法所有试液均用超纯水配制。
6.2.1.2. 铜-BCA 试液：取2, 2'-联喹啉-4，4'-二羧酸钠l.0g ，无水碳酸钠2.0g ，酒石酸钠0. 16g ，氢氧化钠0. 4 g 与碳酸氢钠0.95g ，加水使溶解成100ml ，调节pH 值至11.25,作为甲液，甲液室温保存不超过6个月；另取4 % 硫酸铜溶液作为乙液，乙液室温保存不超过6个月，临用前取甲液、乙液，按体积比（甲液：乙液=50:1）进行混匀后使用。
蛋白质含量测定法(Bradford法)标准操作规程SOP
审批页目录1目的 (4)2范围 (4)3定义 (4)4环境、健康和安全 (4)5培训 (4)6职责 (4)7程序（内容） (4)7.1原理 (4)7.2实验材料 (4)7.3操作步骤 (5)7.4结果计算 (5)7.5判定标准 (6)7.6注意事项 (6)8相关文件 (6)9参考文献 (6)10流程图 (6)11附录 (6)蛋白质含量（Bradford法）测定记录 (1)蛋白质含量（Bradford法）测定记录(适用于多个样品) (1)1目的规范蛋白质含量检测（Bradford法）的操作过程。
2范围本规程适用于样品中蛋白质含量的检测（Bradford法）。
3定义————4环境、健康和安全————5培训5.1培训部门：分析研究部。
5.2培训对象：分析研究部相关人员。
5.3培训方式和时数：自学，1小时。
5.4考核方式：问答。
6职责6.1质量保证部：负责监督本文件的执行。
6.2分析研究部：负责严格执行本规程规定。
7程序（内容）7.1原理本法系依据在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白质分子中的碱性氨基酸(精氨酸)和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物，该蓝色复合物在595nm处有最大吸收值，在一定浓度范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。
7.2实验材料7.2.1试药与试液7.2.1.1超纯水：电阻率不低于18.2MΩ·cm，本方法所有试液均用超纯水配制。
7.2.1.2酸性染色液：（1）自配：称取0.l0g考马斯亮蓝G250，加乙醇50ml溶解后，加磷酸100ml，加水稀释至1000ml，混匀。
滤过，取滤液，即得。
本试剂置棕色瓶内避光保存，如有沉淀产生，使用前再滤过，2～8℃保存6个月。
（2）购买商品化试剂：如Quick Start TM Bradford 1X Dye Reagent，Cat#500-0205，厂家BIO-RAD。
商品化试剂均根据产品说明书使用。
凯氏定氮法测定蛋白质原理及操作
一、概述蛋白质是生命活动中不可或缺的重要物质，其含量的测定在生物化学研究和食品加工领域具有重要意义。
针对蛋白质含量的测定方法有许多种，其中凯氏定氮法是一种经典且常用的测定方法，本文将就凯氏定氮法测定蛋白质的原理及操作进行详细介绍。
二、凯氏定氮法原理1. 基本原理凯氏定氮法是通过测定样品中氨基氮的含量来间接测定蛋白质含量的方法。
蛋白质是由氨基酸构成的，而氨基酸中含有氮元素，故可以通过测定样品中氮元素的含量来推算出样品中蛋白质的含量。
2. 操作步骤（1）样品的预处理：将待测样品进行适当的预处理，通常是将样品中的有机物燃烧成气体，从而将其中的氮元素转化为氮气。
（2）氮气的收集：收集样品燃烧产生的氮气，通常是通过化学吸收剂的吸收来将氮气纯化。
（3）氮气的测定：将纯化后的氮气进行定量测定，得出氮气的含量。
（4）蛋白质含量的计算：根据氮气的含量，通过一定的计算公式来推算出样品中蛋白质的含量。
三、凯氏定氮法操作注意事项1. 样品的选择选择代表性好的样品进行测定，避免样品中含有其他干扰物质，影响测定结果的准确性。
2. 仪器的使用严格按照仪器的操作说明进行操作，保证测定过程的准确性和精确度。
3. 数据的处理对测定得到的数据进行严格的处理，计算过程中不应出现错误，以确保蛋白质含量的测定结果准确可靠。
四、凯氏定氮法测定蛋白质的优缺点1. 优点（1）测定范围广：凯氏定氮法可以适用于各种类型的样品，包括食品、饲料、生物组织等。
（2）测定结果可靠：经过严格的样品预处理和操作步骤，测定结果具有较高的准确性和精确度。
2. 缺点（1）操作繁琐：凯氏定氮法的操作步骤相对繁琐，需要较长的操作时间。
（2）不适用于含氮杂质的样品：如果样品中含有其他氮元素化合物的干扰物质，则可能影响凯氏定氮法的测定结果。
五、结语凯氏定氮法作为一种经典且常用的蛋白质测定方法，其原理和操作步骤相对简单明了，但需要严格遵守操作规范，以确保测定结果的准确性和可靠性。
蛋白质检测操作规程
蛋白质检测操作规程1. 背景蛋白质是生物体内最重要的分子之一，其在细胞结构、酶活性、信号传导等过程中起着关键的作用。
因此，准确、高效地进行蛋白质检测对于生物学研究至关重要。
本文将介绍一套标准的蛋白质检测操作规程，以确保实验的准确性和稳定性。
2. 实验材料•10 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）•蛋白质样品•BCA蛋白定量试剂盒•BSA标准品•离心管•96孔板•吸光度计•移液枪•显微管•离心机3. 实验步骤3.1. 样品制备1.将需要测定蛋白质含量的样品取出，并加入足够的10 mM Tris-HCl缓冲液以使样品完全溶解。
2.将样品在室温下离心10分钟，以去除可能存在的颗粒杂质。
3.将澄清的样品转移到干净的离心管中，并密封保存以备后续使用。
3.2. 标准曲线制备1.取一定体积的BSA标准品并加入相同体积的10 mM Tris-HCl缓冲液，将其稀释为一系列浓度梯度的BSA溶液，如0.1, 0.2, 0.4, 0.6和0.8 mg/mL。
2.使用BCA蛋白定量试剂盒按照说明书操作，将每个浓度梯度的BSA溶液与试剂盒中的工作试剂混合。
3.将混合液加入孔板的相应孔中（每个浓度梯度设置3个孔位），并在37°C恒温水浴中孵育30分钟。
3.3. 样品检测1.使用BCA蛋白定量试剂盒按照说明书操作，将标准曲线的吸光度测量值记录下来。
2.取出保存好的样品，并使用BCA蛋白定量试剂盒按照说明书操作进行检测。
3.将样品加入孔板的相应孔中，并在37°C恒温水浴中孵育30分钟。
4.使用吸光度计测量孔板中各孔的吸光度值，并记录下来。
4. 数据处理与分析4.1. 绘制标准曲线1.使用标准曲线中各BSA浓度对应的吸光度测量值绘制图表。
2.进行线性拟合，得到标准曲线的方程式。
4.2. 计算样品蛋白质含量1.使用样品各孔的吸光度值代入标准曲线方程式，计算出各样品的蛋白质含量。
5. 结果与讨论通过以上操作步骤，可以得到样品中蛋白质的含量。
蛋白含量(Lowry法)测定标准操作规程
细胞因子蛋白含量（Lowry法）测定标准操作规程依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。
范围：适用于细胞因子原液的检定。
目的：检测细胞因子原液的蛋白质含量。
原理：lowry法是在双缩脲反应的基础上发展起来的。
是由试剂A和试剂B二部分组成。
试剂A是碱性铜试剂；试剂B含有磷钨酸和磷钼酸。
在碱性条件下，蛋白质与碱性铜试剂产生双缩脲反应，形成紫红色的蛋白质与铜的复合物，然后此复合物中的酪氨酸和色氨酸残基还原试剂B中的磷钼酸-磷钨酸，产生深兰色，为钼兰和钨兰的混合物，其呈色强度与蛋白质浓度呈正相关，可用比色法测定蛋白质浓度。
内容：1 材料1．1样品：经二人核对好批号后测定。
1．2试剂钨酸钠Na2WO4·2H2O 化学纯钼酸钠Na2M O O4·2H2O 分析纯磷酸H3PO4 分析纯浓盐酸HCl 分析纯硫酸锂Li2SO4 分析纯酒石酸钾钠C4H4O6KNa·4H2O 分析纯硫酸铜CuSO4 分析纯氢氧化钠NaOH 分析纯无水碳酸钠Na2CO3 分析纯溴水Br2 分析纯1．3标准品：由中国药品生物制品检定所提供。
1．4注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。
1．5其它材料：试管架、吸球、硫酸纸、药勺、记号笔、玻璃比色杯。
1．6仪器、设备紫外分光光度仪,UV-265扭力天平，TN100B冰箱，BOD-170A1．7器皿试管、量筒（250ml、100ml）、玻璃瓶（500ml、250ml）、棕色磨口瓶（50ml、500ml）、吸管（1ml、5ml、10ml），以上均由本室洗刷组处理干净。
2 方法2．1准备工作2．1．1工作环境：控制区确认场地清场合格，摘下“清场合格”标志牌,挂上“使用中”标志牌。
2．1．2调试仪器设备2．1．2．1紫外分光光度仪，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。
2．1．2．2扭力天平，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。
2．1．2．3冰箱，确认运行状态完好，已挂有“备用”标志。
蛋白质操作规程(3篇)
第1篇一、目的为确保蛋白质实验的顺利进行，保证实验结果的准确性和安全性，特制定本操作规程。
二、适用范围本规程适用于蛋白质的提取、纯化、鉴定、分析等实验操作。
三、操作步骤1. 实验准备（1）实验前应仔细阅读实验方案，了解实验原理、目的、步骤及注意事项。
（2）准备实验所需试剂、仪器和设备，确保其处于正常工作状态。
（3）实验前应佩戴防护眼镜、手套和口罩，避免接触有害物质。
2. 蛋白质提取（1）取适量组织或细胞，用组织匀浆器或超声波破碎器破碎。
（2）加入适量裂解液，充分搅拌，使蛋白质溶解。
（3）低温离心，收集上清液，即为蛋白质粗提液。
3. 蛋白质纯化（1）根据蛋白质的性质，选择合适的纯化方法，如离子交换、凝胶过滤、亲和层析等。
（2）将蛋白质粗提液按照纯化方法进行操作，如加入缓冲液、平衡液、洗脱液等。
（3）收集纯化后的蛋白质，低温保存。
4. 蛋白质鉴定（1）采用SDS-PAGE电泳对蛋白质进行初步鉴定。
（2）通过Western blot技术检测蛋白质的特异性抗体。
（3）通过质谱分析等技术对蛋白质进行结构鉴定。
5. 蛋白质分析（1）采用紫外分光光度计测定蛋白质浓度。
（2）采用凝胶过滤色谱、动态光散射等技术研究蛋白质的分子量。
（3）通过酶活性、底物消耗等方法研究蛋白质的生物活性。
四、注意事项1. 实验过程中应严格遵守无菌操作原则，防止污染。
2. 实验操作应规范，避免人为误差。
3. 试剂、仪器和设备应定期校准、维护，确保实验结果的准确性。
4. 实验过程中产生的废弃物应按照相关规定进行处理。
5. 实验过程中应关注自身安全，防止化学品、生物制品等对人体的危害。
五、实验记录1. 实验记录应详细记录实验时间、试剂、仪器、操作步骤、实验结果等。
2. 实验记录应真实、准确、完整，便于实验结果的追溯和分析。
六、附则本规程由实验室负责解释和修订，自发布之日起实施。
第2篇一、前言蛋白质是生命活动的重要物质基础，广泛应用于生物学、医学、农业等领域。
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作规程
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作----(纯度检测)一.目的：检测蛋白质的纯度是否达到生产抗体的要求。
二.依据：《分子克隆手册》，Ab-mart公司内部标准。
三. 职责：质量控制部。
四.试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
五. 器皿与耗品：所有玻璃器皿使用前用玻璃清洁剂清洗, 80℃烤干。
tube、tip一次性使用。
六. 仪器设备：电泳仪（电源1--300V）电泳槽灌胶模具染色具凝胶扫描仪七. 环境要求：相对洁净环境，室温。
八. 溶液的配置：1.A液：1.5MTris·HCl pH8.8称取18.15gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至8.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）2.B液: 1MTris·HCl pH6.8称取12.1gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至6.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）3.C液: 30%丙烯酰胺称取29.2g丙烯酰胺(分析纯),0.8gN,N’-甲叉双丙烯酰胺(分析纯), 加适量的超纯水溶解,再定容至100 ml,用滤纸过滤,。
贴上标贴，避光4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）4.D液:10%SDS称取10gSDS(分析纯),用超纯水溶解至100 ml.贴上标贴，室温储存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）5.E液:10%过硫酸胺称取10g过硫酸胺(分析纯), 用超纯水溶解至100 ml。
贴上标贴，-20℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）6.F液:TEMED(amersco)7.电泳缓冲液(10X)称取60.57g Tris碱(分析纯),288.268g甘氨酸(分析纯),20gSDS(分析纯),加超纯水定容至2000ml，临用前加超纯水稀释10倍，贴上标贴，室温储存。
_Bradford法检测蛋白质含量标准操作规程
Bradford法测蛋白质含量标准操作规程Bradford法检测蛋白质含量1.试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
2.器皿与耗品：所有玻璃器皿为清洁级，37度烤干。
tube、tip：一次性使用，容量瓶，96孔酶标板，3.仪器设备：酶标仪：旋涡混匀器。
4.溶液的配置：4.1.G250储存液：95%无水乙醇：100ml88%磷酸：200 ml考马斯量兰G250：350mg室温下可长期保存，稳定。
4.2.G250工作液：双蒸水：425ml95%无水乙醇：15 ml88%磷酸：30 mlG250储存液：30 ml可根据体积相应缩小比例配制，用1号滤纸过滤并保存于室温棕色瓶中，可使用数周。
6.3牛血清白蛋白标准品BSA(实验室购买).配制标准品标准程序：将牛血清白蛋白配制成1mg/ml，取牛血清白蛋白100mg，先用超纯水溶解，待其溶解后定容到一个洁净的100ml容量瓶中，300ul分装，保存于-20度，使用时，将其稀释至200ug/ml，配制标准品备用。
4.3.标准品的鉴定用原有的标准品做标准曲线，随机取三支本分装品为样品，测定样品蛋白含量，得X ±SD（其中X 单位为ug/ml）与RSD, 当X值为98-102，且RSD值小于等于2%者，认为该标准品的标示浓度为200ug/ml。
Bradford法测蛋白质含量标准操作规程5.程序：5.1.样品的处理5.1.1.一次检测过程包括标准不能超过20个样品。
若是原液或成品, 每个样品需做2个或3个稀释度：V水＝V原（d－1）其中V水为需要加入纯化水的体积，V原为稀释前样品的体积，d为稀释度5.1.2.待测样品如为冻干品，则根据标示量稀释至1mg/ml，再稀释10倍；待测样品如为未知浓度的样品，可以根据bradford标准品颜色目测后稀释样品。
5.1.3.待测样品均需溶解后先离心，再进行稀释和检测操作。
5.1.4.稀释后的样品需做同样的三个反应体系。
食品中蛋白质的测定
食品中蛋白质的测定一、目的对公司产品中的蛋白质测定制定标准操作规程，检验室操作人员按本规程操作，保证公司产品中的蛋白质检测结果准确。
二、范围本操作规范适用于食品中蛋白质的测定。
三、依据GB 5009.5-2016《食品中蛋白质的测定》，第一法凯氏定氮法。
四、实验原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量计算氮含量，再乘以换算系数，即为蛋白质的含量。
五、仪器与试剂配制1、高温炉：凯氏定氮仪。
2、分析天平：感量为1mg 。
3、硼酸溶液（20g/L ）：称取20g 硼酸，加水溶解后并稀释至1000mL 。
4、氢氧化钠溶液（400g/L ）：称取40g 氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL 。
5、硫酸标准滴定溶液[c （21H 2SO 4）]0.0500mol/L 或盐酸标准滴定溶液[c （HCl ）]0.0500mol/L 。
6、甲基红乙醇溶液(1g/L):称取0.1g 甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL 。
7、亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L):称取0.1g 亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL 。
8、溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L):称取0.1g 溴甲酚绿,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100 mL 。
9、A 混合指示液:2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
10、B 混合指示液:1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的三级水。
六、实验步骤1、自动凯氏定氮法称取充分混匀的固体试样0.2g 2g 、半固体试样2g 5g 或液体试样10 g 25 g(约当于30mg 40mg 氮),精确至0.001 g,至消化管中,再加入0.4g 硫酸铜、6g 硫酸钾及20mL 硫酸于消化炉进行消化。
蛋白质的测定方法(剀氏定氮法)
蛋白质的测定方法（凯氏定氮法）一、原理有机物与硫酸共热，其中的氮转变为硫酸铵，然后测定氮量，然后乘以 6.25，即可得到有机物中粗蛋白含量。
二、试剂1.浓硫酸（98%、18mol/l）2.0.1N稀硫酸溶液：取浓硫酸（98%、18mol/l）2.8ml稀释，定容至1000ml。
3.40%氢氧化钠溶液4.0.1N标准氢氧化钠溶液：（1）配制：取氢氧化钠（分析纯）4克溶于蒸馏水中，定容至1000ml。
（2）标定：取配制的氢氧化钠溶液15ml、酚酞指示剂2-3滴，用0.1N的草酸溶液标定，至溶液变为无色时，记下耗用草酸溶液的量，换算成氢氧化钠的实际浓度，记录。
5．混合指示剂（亚甲基蓝+甲基红）：由2倍体积0.1%甲基红无水乙醇溶液与1倍体积0.1%亚甲基蓝水溶液混合而成。
（此指示剂碱性时呈绿色，中性时呈灰色，酸性时呈红色）。
6.混合催化剂：称取硫酸钾100克、硫酸铜10克、硒粉1克均匀混合后研细待用。
7.酚酞指示剂：溶酚酞1.000克于100ml95%乙醇中。
三、操作规程：Ⅰ.样品预处理：将待测物质烘至恒重（70℃条件下）、磨碎，再烘至恒重制成样品装如广口瓶保存于干燥器中以备测定。
Ⅱ.消化（1）取样：准确称取样品0.2000-0.3000克，装入50ml凯氏烧瓶中（将称量纸卷为圆筒状转入），同时加入浓硫酸6ml以及0.5克催化剂。
（2）将凯氏烧瓶放入通风橱中的消化炉，将炉温调至450℃开始消化，开始10分钟左右注意经常摇动凯氏烧瓶以防止样品经碳化变黑后产生的大量炮沫溅出。
注意不能让泡沫及黑色物质上升到烧瓶颈部）。
消化时间一般为5小时，消化完全后样品消化液呈淡蓝绿色。
（3）冷却消化液，将样品消化液无损地转入50ml容量瓶（注意要用蒸馏水把凯氏烧瓶冲洗干净3-4次，洗涤液也转入容量瓶），定容至50ml、摇匀，待测。
Ⅲ.蒸馏（凯氏蒸馏）（1）清洗装置：测定前用自来水冲洗反应室3次，然后空蒸1分钟，以备测定开始。
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作规程
SDS-PAGE蛋白电泳标准操作规程----(纯度检测)一.目的：检测蛋白质的纯度是否达到生产抗体的要求。
二.依据：《分子克隆手册》，Ab-mart公司内部标准。
三. 职责：质量控制部。
四.试剂与水：所有试剂为分析纯（AR）；水为蒸馏水或超纯水。
五. 器皿与耗品：所有玻璃器皿使用前用玻璃清洁剂清洗, 80℃烤干。
tube、tip一次性使用。
六. 仪器设备：电泳仪（电源1--300V）电泳槽灌胶模具染色具凝胶扫描仪七. 环境要求：相对洁净环境，室温。
八. 溶液的配置：1.A液：1.5MTris·HCl pH8.8称取18.15gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至8.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）2.B液: 1MTris·HCl pH6.8称取12.1gTris碱(分析纯)加适量的超纯水溶解,用浓盐酸(分析纯)调pH值至6.8,加超纯水定容至100 ml。
贴上标贴，4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）3.C液: 30%丙烯酰胺称取29.2g丙烯酰胺(分析纯),0.8gN,N’-甲叉双丙烯酰胺(分析纯), 加适量的超纯水溶解,再定容至100 ml,用滤纸过滤,。
贴上标贴，避光4℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）4.D液:10%SDS称取10gSDS(分析纯),用超纯水溶解至100 ml.贴上标贴，室温储存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）5.E液:10%过硫酸胺称取10g过硫酸胺(分析纯), 用超纯水溶解至100 ml。
贴上标贴，-20℃保存。
此溶液有效使用期限为三个月。
（溶液配置台帐见附件）6.F液:TEMED(amersco)7.电泳缓冲液(10X)称取60.57g Tris碱(分析纯),288.268g甘氨酸(分析纯),20gSDS(分析纯),加超纯水定容至2000ml，临用前加超纯水稀释10倍，贴上标贴，室温储存。
蚕丝胶蛋白检测操作规程
蚕丝胶蛋白检测操作规程蚕丝胶蛋白是一种重要的天然蛋白质，在纺织、医药、化妆品等行业有广泛的应用。
为了保证蚕丝胶蛋白的质量、纯度和活性，需要进行相应的检测操作。
下面是蚕丝胶蛋白检测的操作规程，供参考。
一、检测前的准备工作1. 准备好所需的仪器设备，包括离心机、振荡器、分光光度计等。
2. 准备好所需的试剂和材料，包括蚕丝胶蛋白样品、Tris-HCl缓冲液、酸性酒精、胰酶、NaOH溶液等。
3. 清洗仪器设备和试剂瓶，并将其消毒。
4. 根据实验要求，准备好实验操作所需的试管、移液管、显微镜玻片等。
二、蚕丝胶蛋白检测操作步骤1. 样品制备a. 取适量的蚕丝胶蛋白样品，并将其溶解在适量的Tris-HCl缓冲液中，制备成适当的浓度。
b. 将样品在离心机中离心10分钟，以去除杂质。
c. 将离心后的样品取出，放置在振荡器中振荡20分钟，以使蛋白质充分溶解。
2. 蛋白质含量检测a. 取适量的蚕丝胶蛋白溶液，并加入适量的酸性酒精，以沉淀蛋白质。
b. 离心10分钟，将上清液倒掉。
c. 将离心后的沉淀用NaOH溶液溶解，并用分光光度计测定其吸光度。
d. 根据已知标准曲线，计算蚕丝胶蛋白的质量浓度。
3. 蛋白质活性检测a. 取适量的蚕丝胶蛋白溶液，并加入胰酶，使其进行消化反应。
b. 将反应溶液在离心机中离心10分钟，并取上清液。
c. 将上清液以一定比例稀释后，使用分光光度计测定其吸光度。
d. 根据已知标准曲线，计算蚕丝胶蛋白的活性。
4. 结果记录和分析a. 将蛋白质含量和活性的测定结果记录下来，并进行统计和分析。
b. 根据实验要求，对结果进行解释和讨论，得出结论。
三、注意事项1. 在操作过程中，要严格遵守实验室的操作规程和安全要求。
2. 各种试剂的用量要精确，避免误差的产生。
3. 操作前要确保仪器设备和试剂瓶的清洁和消毒，以避免污染样品。
4. 在检测过程中，要注意操作细节，尽量减小误差的产生。
5. 结果的准确性和可靠性要经过重复实验的验证。
8-蛋白质测定标准操作规程
1目的规范食品中蛋白质的标准操作规程。
2范围本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。
本标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定，第三法适用于蛋白质含量在10 g/100 g 以上的粮食、豆类、奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的筛选测定。
本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品测定。
3责任质量部组织制订、化验室负责实施。
4内容4.1 凯氏定氮法4.1.1规范性引用性文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
4.1.2 原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。
碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。
4.1.3 试剂和材料除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的三级水。
4.1.3.1 硫酸铜（CuSO4²5H2O）。
4.1.3.2 硫酸钾（K2SO4）。
4.1.3.3 硫酸（H2SO4 密度为1.84g/L）。
4.1.3.4 硼酸（H3BO3）。
4.1.3.5 甲基红指示剂（C15H15N3O2）。
4.1.3.6 溴甲酚绿指示剂（C21H14Br4O5S）。
4.1.3.7 亚甲基蓝指示剂（C16H18ClN3S²3H2O）。
4.1.3.8 氢氧化钠（NaOH）。
4.1.3.9 95%乙醇（C2H5OH）。
4.1.3.10 硼酸溶液（20 g/L）：称取20 g 硼酸，加水溶解后并稀释至1000 mL。
4.1.3.11 氢氧化钠溶液（400 g/L）：称取40 g 氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100 mL。
4.1.3.12 硫酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）或盐酸标准滴定溶液（0.0500 mol/L）。
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蛋白质检测操作规程
蛋白质检测操作规程
1. 实验准备
1.1 确保实验室设备的正常运行和维护，包括离心机、电泳仪、洗涤机等。
1.2 准备所需试剂，包括蛋白质提取缓冲液、电泳胶液和电泳运行缓冲液等。
1.3 清洗实验用具，确保无污染。
1.4 验证实验操作前的标准曲线，以确保实验结果的准确性。
2. 蛋白质提取
2.1 根据实验需要，选择合适的提取方法，如细胞裂解法、组织切片法等。
2.2 选择合适的蛋白质提取缓冲液，添加适量的蛋白酶抑制剂，并将样品完全裂解。
2.3 离心提取液，收集上清液，并测定上清液的蛋白质浓度。
3. SDS-PAGE凝胶电泳
3.1 准备好电泳胶液，根据需要选择合适的凝胶浓度，分别制备上胶和下胶。
3.2 将上胶注入电泳仪槽中，插入电泳大胶片，并确保其不起泡。
3.3 将电泳运行缓冲液注入电泳槽中，确保液面覆盖胶片。
3.4 加载样品至准备好的电泳孔中，注意遵守加载顺序和样品量的要求。
3.5 调节电泳仪的电压和电流，开始电泳。
3.6 根据需要，可添加分子量标记物用于蛋白的分子量测定。
3.7 在电泳结束后，取出凝胶，进行染色或转移操作。
4. 蛋白质染色
4.1 根据需要选择合适的染色方法，如银染色、Coomassie Brilliant Blue染色等。
4.2 准备染色液，按照相应的比例混合染色试剂，如染色液A和染色液B等。
4.3 将凝胶浸入染色液中，充分浸透，并在摇床上轻轻摇动。
4.4 染色时间根据实验需要而定，但需保证染色效果明显。
4.5 取出染色凝胶，清洗过量染色液，并进行目视观察与图像记录。
5. 结果分析
5.1 在蛋白质染色凝胶中，观察蛋白质条带的形态和数量。
5.2 根据蛋白质的分子量，计算其相对迁移率，并进行分析和比较。
5.3 根据染色强度，定量计算不同蛋白质的含量，并进行对比分析。
5.4 根据实验结果，撰写实验报告，并对实验结果进行总结和讨论。
操作规程中应注意的事项：
1. 实验操作前需了解实验所需试剂和设备的特性和操作方法，严格按照相关方法和说明进行实验操作。
2. 在蛋白质提取和电泳过程中，注意操作的无菌和无污染，并确保实验环境的干净和整洁。
3. 在实验过程中，严格按照试剂和样品添加的顺序和比例进行操作，以避免操作不当造成实验失败。
4. 在实验结果的分析和解释过程中，应谨慎考虑实验误差和其他因素的影响，避免主观性的结论和错误判断。
5. 在实验结束后，及时清理实验用具和设备，保持实验室的整洁和有序。
6. 实验结果应保留并妥善保存，以备进一步的分析和验证。