血清总蛋白测定标准操作规程

血清总蛋白测定标准操作规程

1 检验申请

单独检验项目申请：血清总蛋白测定(缩写TP)；组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理

2.1标本采集

2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本

2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存

2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项

2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3 方法原理

蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，肽键在碱性溶液中，能与铜离子作用产生紫红色络合物，在540nm有吸收峰，并与蛋白含量成正比。通过与同样处理的标准蛋白比较可求出血清总蛋白

含量。

碱性

蛋白质 + 铜离子 ------------ 紫红色络合物

4 试剂及其他用品

4.1试剂：总蛋白试剂盒（货号TP6020，80ｍl*5），由北京利德曼生化技术有限公司出品。

4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14 天。开盖后避免污染。

4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.4试剂盒主要成分：氢氧化钠600 mmol/L、硫酸铜12 mmol/L、酒石酸钾钠32 mmol/L、碘化钾30 mmol/L、稳定剂＜0.1%。

5 校准品与校准模式

5.1校准品：Beckman-Coulter SYNCHRON MULTI 校准液，其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。

5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。

5.3校准周期：校准间隔时间不限，试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要定标。。

5.4校准液重建方法：Beckman-Coulter SYNCHRON Protein 校准液即开即用，无需特殊准备。

6 质控品与室内质控规则

6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。

6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。

6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。

7 适用仪器

适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。

8 标本检测步骤

装载试剂→ 进行校准→ 进行质控→ 输入标本检测项目→ 加载标本→ 标本测定→结果复核→ 报告。

9 主要分析参数

化学原理：双缩脲法；测定原理:比色法；测定方法：终点法；反应方向：正反应；单位：g/L；校准模式：线性；校准周期：不限；校准点：1个；波长: 540nm；样本量：5μl；试剂：300ｕl；测定时间：10Min；分析范围：10-100g/L。

10 结果计算

总蛋白含量（g/L）=（标本吸光度÷标准管吸光度）×标准液浓度。

11 检验结果的报告及范围

11.1结果的报告

11.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。

11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

11.2报告范围：10～100g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。

12 操作性能

12.1精密度：血清/血浆：批内CV 2.0%，总CV 3.0%；脑脊液批内CV 5.0%，总CV 7.5%。

12.2线性范围：10～100g/L。

12.3方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达11.3mmol/L时影响小于2%，血红蛋白达5g/L时影响小于9%，胆红素达547umol/L时影响小于10%。

13 参考范围

65-85g/L

(早产儿36-60 g/L ；新生儿46-70 g/L ；1-2岁56-75 g/L；≥3岁60-80 g/L；成人非卧床64-83g/L；卧床60-78 g/L。)

14 临床意义

14.1血浆总蛋白包括血浆中所有的蛋白质，其中主要有白蛋白和球蛋白两大类。血浆蛋白主要的生理