解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响
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药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2015 V ol． 34，N o． 1
解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响
韩 珍1 ，贺 弋2
（ 1． 首都医科大学附属北京佑安医院生物医学信息中心，北京 100069； 2． 宁夏医科大学生理学教研室，宁夏 银川 750004）
金、萱草花等中药组成。该方具有疏肝解郁安寐的
功效，白芍药直入肝经，柔肝疏肝以益其匮乏之气，
自然血生而火熄； 郁金行气化瘀、清心解郁、醒脑开
窍； 萱草花，又名金针菜，根据《本草纲目》记载，其
具有“宽 胸 膈，安 五 脏，安 寐 解 郁，清 热 养 心 ”的
作用。
虽然抑郁症的病理生理机制尚不清楚，但抑郁
解郁方Ⅲ组
3． 00
13． 12 ± 1． 80
注： 与 正 常 组 比 较，△△ P ＜ 0． 01； 与 模 型 组 比 较，* P ＜ 0． 05， ＊＊ P ＜ 0． 01
为“郁症”范畴，其病理机制为气机失调，内气及血，
导致肝气郁结，心神失养。在治疗方面历代医家多
主张治郁先治气，调气先治肝。解郁方是由白芍、郁
Key words： Depression； Jieyufang； Ｒeserpine model mouse； Monoamine neurotransmitter； Monoamine oxidase； Mechanism of action
抑郁症（ depression） 是临床最常见的精神疾患 之一，随着人们生活工作节奏的加快，抑郁症的发病 率日趋增加。国际卫生组织预测 2020 年抑郁症将成 为全球 第 2 位 威 胁 人 类 健 康、增 加 经 济 负 担 的 疾 患［1］。目前研究认为脑内单胺递质的功能紊乱与抑 郁症的多种症状有关，增加单胺递质水平是减轻抑郁 症的重要途径之一［2 ～4］。利血平模型作为一种有效 的抑郁模型，已被广泛应用于抑郁症的基础研究和各 种治疗方法的筛选［5］。本实验通过利血平模型，研究 解郁方对小鼠单胺类神经递质及单胺氧化酶（ monoamine oxidase，MAO） 含量的影响。
症的单胺递质学说已经得到了普遍的认同，查阅文
献目前国内的中药开发的药效学实验多以该学说为
wk.baidu.com理论指导。1965 年，Schildkraut 和 Bunney 提出抑
郁症的中枢 5 － 羟色胺（ 5 － HT） 和去甲肾上腺素能
（ NE） 改变的假说，认为抑郁症发病机制可能与中枢
神经突触所释放的神经递质 5 － HT 或 NE 的减少有
海跃进医疗器械厂） ； MM － 1 型微型混合器（ BIO 公
司生产） ； TG328A 型分析天平（ 上海天平仪器厂） ；
LXJ － IIB 型离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； 5 mL
玻璃匀浆器。
2 方法
2． 1 分组及给药 小鼠按性别、体重随机分为正常
对照组、模型组、阳性药物组和解郁方组。正常对照 组： 给予蒸馏水； 模型组： 利血平（ 0． 004 g·kg － 1 ） ； 阳性药物组： 吗氯贝胺（ 0． 04 g·kg － 1 ） ； 解郁方组： 分为Ⅰ、Ⅱ 和 Ⅲ 组 （ 12． 00、6． 00、3． 00 g · kg － 1 ） 。
关。研究证明，5 － HT 耗竭剂能使抑郁症状加剧， 且 5 － HT 降低程度与症状严重程度呈正比［7］。NE
参与学习、记忆、睡眠、焦虑以及奖赏系统的功能，在
抑郁症病人中，以上功能均有不同程度的紊乱。躁
每组 10 只小鼠，灌胃给药，吗氯贝胺组每天 2 次，其
余组每天 1 次，连续 21 d。 2． 2 造模 参见拮抗利血平实验［6］，末次给药 1 h 后，腹腔注射利血平 0． 004 g·kg － 1 。
2． 3 标本采集 实验结束后，实验动物断头处死，迅
速在冰台上剥离全脑，去小脑后平均分为左右两份
·5·
限公司） ； 5 － 羟色胺酶联免疫检测试剂盒 （ 批号：
20071109） ； 去甲肾上腺素酶联免疫检测试剂盒（ 批
号： 20071109） ； 多巴胺酶联免疫检测试剂盒（ 批号：
20071109） ； 均为 ADL 公司产品； 单胺氧化酶检测试
剂盒（ 批 号： 20071112 ） ； 蛋 白 定 量 测 定 试 剂 盒 （ 批
1 材料 1． 1 动物 健康 ICＲ 小鼠，雌、雄各半（ 体重 18 ～ 22 g） ，宁夏医学院实验动物中心提供，动物合格证 号： SCXK（ 宁） 2005 － 0001，在实验室常规条件下饲 养，自然昼夜，所有实验在白天进行。 1． 2 药物及试剂 解郁方（ 由白芍、郁金、萱草花 等药物组成 ） ，临床用量为 0． 6 g·（ kg·d） － 1 （ 成人 体重按 60 kg 计算） ，由宁夏医学院中药教研室鉴 定，化学教研室煎制，贮存于 4 ℃ 冰箱中备用； 吗氯 贝胺（ 批 号： 071105，上 海 信 谊 百 路 达 药 业 有 限 公 司） ； 利血平 （ 批号： x070302，上海复旦复华药业有
关键词： 抑郁症； 解郁方； 利血平模型； 单胺类神经递质； 单胺氧化酶； 作用机理 中图分类号： Ｒ285． 5 文献标识码： A 文章编号： 2095 － 5375（ 2015） 01 － 0004 － 003
DOI:10.13506/j.cnki.jpr.2015.01.002
The effects of Jieyufang on the content of monoamine neurotransmitter and monoamine oxidase in the brain of depressive model mouse HAN Zhen1 ，HE Yi2
基金项目： 宁夏自然科学基金项目（ No． NZ0654） 作者简介： 韩珍，女，博士研究生，研究方向： 细胞生物学、肝纤维化的逆转、睡眠生理和抗抑郁研究，E － mail： yanyiziloulan@ sina． com
药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2015 V ol． 34，N o． 1
摘要： 目的 研究解郁方抗抑郁作用的机理。方法 采用酶联免疫检测试剂盒测定小鼠脑组织中单胺类神经 递质含量； 分光光度计法检测小鼠脑组织中单胺氧化酶（ monoamine oxidase，MAO） 活性，来研究解郁方抗抑郁作用 的机制。结果 解郁方Ⅰ和Ⅱ（ 12． 00、6． 00 g·kg －1 ） 组均可显著升高小鼠脑内去甲肾上腺素、5 － 羟色胺、多巴胺 （ 分别为 P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） ，解郁方Ⅰ和Ⅱ组可显著降低 MAO 活性（ 分别为 P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） 。结论 解郁方 可能是通过抑制 MAO 活性，使突触间隙的单胺类神经递质含量升高，而起到抗抑郁作用。
解郁方Ⅰ组 12． 00
922． 75 ± 31． 73＊＊ 766． 03 ± 53． 14* 776． 98 ± 55． 52＊＊
解郁方Ⅱ组 6． 00
825． 49 ± 102． 49* 730． 42 ± 99． 40* 698． 96 ± 121． 13*
解郁方Ⅲ组 3． 00
723． 88 ± 108． 76 720． 08 ± 97． 27 691． 58 ± 119． 72
（ 1． Center of Biomedical Information，Beijing Youan Hospital，Capital Medical University，Beijing 100069，China； 2． Physiology Department of Ningxia Medical University，Yinchuan 750004，China）
组别
剂量 （ g·kg － 1 ）
MAO （ U·mg － 1 ·prot）
正常对照组
—
12． 15 ± 1． 84
模型组 吗氯贝胺 解郁方Ⅰ组 解郁方Ⅱ组
0． 004 0． 04 12． 00 6． 00
14． 42 ± 3． 17△△ 10． 42 ± 3． 17＊＊ 11． 98 ± 1． 78＊＊ 12． 03 ± 1． 37*
正常对照组 — 1 101． 20 ± 186． 85 848． 11 ± 52． 72 914． 09 ± 124． 82
模型组 0． 004 671． 58 ± 69． 99△△ 683． 83 ± 103． 62△△ 672． 18 ± 66． 16△△
文拉法新组 0． 04
985． 27 ± 141． 24＊＊ 777． 86 ± 61． 95＊＊ 819． 38 ± 128． 37＊＊
（ 左侧脑组织供测单胺递质用，右侧脑组织供测 MAO
用） ，分别称重，按 300 ～ 400 mg 脑组织加入 1 mL 预
冷的 PBS 溶液，玻璃匀浆器冰上匀浆，4 ℃ 离心 3 000
rpm 15 min，取上清液，－ 20 ℃ 冷冻保存待测。
2． 4 统计学处理 利用 SPSS 11． 5 统计软件，进行
Abstract： Objective To study the mechanism of antidepressant effect of Jieyufang． Methods To study the possible mechanism，the following methods had been carried out： the content of monoamine neurotransmitter was determined by enzyme － linked immunosorbent assay （ ELISA） ； The content of monoamine oxidase in the mouse brain was determined by spectrophotometry． Ｒesults In the Jieyufang groupⅠ，Ⅱthe content of 5 － HT，DA and NE in the brain increased significantly （ P ＜ 0． 01， P ＜ 0． 05） ； The content of MAO in the brain decreased significantly（ P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） ． Conclusion The mechanism of antidepressant may be associated with decrease the activity of MAO，increase the concentration of 5 － HT，NE，DA in the brain．
注： 与正常组比较，△△P ＜ 0． 01； 与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
3． 2 小鼠脑内 MAO 测定结果 结果见表 2。
4 讨论
抑郁症是一种以情感病态变化为主的精神障碍
疾病，患者情绪紊乱，甚至具有自杀倾向，被中医列
表 2 小鼠脑内 MAO 测定结果（ n = 10，x ± s）
号： 20071114） ，均由南京建成生物工程研究所提供。
1． 3 仪器 550 型酶标仪（ BIO 公司） 。1575 型洗
板机（ BIO 公司） ； DMS200 型紫外可见分光光度计
（ 美国 Varian 公司） ； VXH － 3 微型旋涡混合器（ BIO
公司生产） ； XK24 － 1060007 型电热恒温培养箱（ 上
单因素方差分析，组间差异采用 Dunnett' s 后检验，
数据以 x ± s 表示，以 P = 0． 05 作为检验水准。
3 结果
3． 1 小鼠脑内单胺类神经递质测定结果 结果见
表 1。
表 1 小鼠脑内单胺类神经递质测定结果（ n = 10，x ± s）
剂量
5 － HT
DA
NE
组别 （ g·kg － 1） （ ng·mg － 1脑组织） （ ng·mg － 1脑组织） （ ng·mg － 1脑组织）
药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2015 V ol． 34，N o． 1
解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响
韩 珍1 ，贺 弋2
（ 1． 首都医科大学附属北京佑安医院生物医学信息中心，北京 100069； 2． 宁夏医科大学生理学教研室，宁夏 银川 750004）
金、萱草花等中药组成。该方具有疏肝解郁安寐的
功效，白芍药直入肝经，柔肝疏肝以益其匮乏之气，
自然血生而火熄； 郁金行气化瘀、清心解郁、醒脑开
窍； 萱草花，又名金针菜，根据《本草纲目》记载，其
具有“宽 胸 膈，安 五 脏，安 寐 解 郁，清 热 养 心 ”的
作用。
虽然抑郁症的病理生理机制尚不清楚，但抑郁
解郁方Ⅲ组
3． 00
13． 12 ± 1． 80
注： 与 正 常 组 比 较，△△ P ＜ 0． 01； 与 模 型 组 比 较，* P ＜ 0． 05， ＊＊ P ＜ 0． 01
为“郁症”范畴，其病理机制为气机失调，内气及血，
导致肝气郁结，心神失养。在治疗方面历代医家多
主张治郁先治气，调气先治肝。解郁方是由白芍、郁
Key words： Depression； Jieyufang； Ｒeserpine model mouse； Monoamine neurotransmitter； Monoamine oxidase； Mechanism of action
抑郁症（ depression） 是临床最常见的精神疾患 之一，随着人们生活工作节奏的加快，抑郁症的发病 率日趋增加。国际卫生组织预测 2020 年抑郁症将成 为全球 第 2 位 威 胁 人 类 健 康、增 加 经 济 负 担 的 疾 患［1］。目前研究认为脑内单胺递质的功能紊乱与抑 郁症的多种症状有关，增加单胺递质水平是减轻抑郁 症的重要途径之一［2 ～4］。利血平模型作为一种有效 的抑郁模型，已被广泛应用于抑郁症的基础研究和各 种治疗方法的筛选［5］。本实验通过利血平模型，研究 解郁方对小鼠单胺类神经递质及单胺氧化酶（ monoamine oxidase，MAO） 含量的影响。
症的单胺递质学说已经得到了普遍的认同，查阅文
献目前国内的中药开发的药效学实验多以该学说为
wk.baidu.com理论指导。1965 年，Schildkraut 和 Bunney 提出抑
郁症的中枢 5 － 羟色胺（ 5 － HT） 和去甲肾上腺素能
（ NE） 改变的假说，认为抑郁症发病机制可能与中枢
神经突触所释放的神经递质 5 － HT 或 NE 的减少有
海跃进医疗器械厂） ； MM － 1 型微型混合器（ BIO 公
司生产） ； TG328A 型分析天平（ 上海天平仪器厂） ；
LXJ － IIB 型离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； 5 mL
玻璃匀浆器。
2 方法
2． 1 分组及给药 小鼠按性别、体重随机分为正常
对照组、模型组、阳性药物组和解郁方组。正常对照 组： 给予蒸馏水； 模型组： 利血平（ 0． 004 g·kg － 1 ） ； 阳性药物组： 吗氯贝胺（ 0． 04 g·kg － 1 ） ； 解郁方组： 分为Ⅰ、Ⅱ 和 Ⅲ 组 （ 12． 00、6． 00、3． 00 g · kg － 1 ） 。
关。研究证明，5 － HT 耗竭剂能使抑郁症状加剧， 且 5 － HT 降低程度与症状严重程度呈正比［7］。NE
参与学习、记忆、睡眠、焦虑以及奖赏系统的功能，在
抑郁症病人中，以上功能均有不同程度的紊乱。躁
每组 10 只小鼠，灌胃给药，吗氯贝胺组每天 2 次，其
余组每天 1 次，连续 21 d。 2． 2 造模 参见拮抗利血平实验［6］，末次给药 1 h 后，腹腔注射利血平 0． 004 g·kg － 1 。
2． 3 标本采集 实验结束后，实验动物断头处死，迅
速在冰台上剥离全脑，去小脑后平均分为左右两份
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限公司） ； 5 － 羟色胺酶联免疫检测试剂盒 （ 批号：
20071109） ； 去甲肾上腺素酶联免疫检测试剂盒（ 批
号： 20071109） ； 多巴胺酶联免疫检测试剂盒（ 批号：
20071109） ； 均为 ADL 公司产品； 单胺氧化酶检测试
剂盒（ 批 号： 20071112 ） ； 蛋 白 定 量 测 定 试 剂 盒 （ 批
1 材料 1． 1 动物 健康 ICＲ 小鼠，雌、雄各半（ 体重 18 ～ 22 g） ，宁夏医学院实验动物中心提供，动物合格证 号： SCXK（ 宁） 2005 － 0001，在实验室常规条件下饲 养，自然昼夜，所有实验在白天进行。 1． 2 药物及试剂 解郁方（ 由白芍、郁金、萱草花 等药物组成 ） ，临床用量为 0． 6 g·（ kg·d） － 1 （ 成人 体重按 60 kg 计算） ，由宁夏医学院中药教研室鉴 定，化学教研室煎制，贮存于 4 ℃ 冰箱中备用； 吗氯 贝胺（ 批 号： 071105，上 海 信 谊 百 路 达 药 业 有 限 公 司） ； 利血平 （ 批号： x070302，上海复旦复华药业有
关键词： 抑郁症； 解郁方； 利血平模型； 单胺类神经递质； 单胺氧化酶； 作用机理 中图分类号： Ｒ285． 5 文献标识码： A 文章编号： 2095 － 5375（ 2015） 01 － 0004 － 003
DOI:10.13506/j.cnki.jpr.2015.01.002
The effects of Jieyufang on the content of monoamine neurotransmitter and monoamine oxidase in the brain of depressive model mouse HAN Zhen1 ，HE Yi2
基金项目： 宁夏自然科学基金项目（ No． NZ0654） 作者简介： 韩珍，女，博士研究生，研究方向： 细胞生物学、肝纤维化的逆转、睡眠生理和抗抑郁研究，E － mail： yanyiziloulan@ sina． com
药学研究·Journal of Pharmaceutical Ｒesearch 2015 V ol． 34，N o． 1
摘要： 目的 研究解郁方抗抑郁作用的机理。方法 采用酶联免疫检测试剂盒测定小鼠脑组织中单胺类神经 递质含量； 分光光度计法检测小鼠脑组织中单胺氧化酶（ monoamine oxidase，MAO） 活性，来研究解郁方抗抑郁作用 的机制。结果 解郁方Ⅰ和Ⅱ（ 12． 00、6． 00 g·kg －1 ） 组均可显著升高小鼠脑内去甲肾上腺素、5 － 羟色胺、多巴胺 （ 分别为 P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） ，解郁方Ⅰ和Ⅱ组可显著降低 MAO 活性（ 分别为 P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） 。结论 解郁方 可能是通过抑制 MAO 活性，使突触间隙的单胺类神经递质含量升高，而起到抗抑郁作用。
解郁方Ⅰ组 12． 00
922． 75 ± 31． 73＊＊ 766． 03 ± 53． 14* 776． 98 ± 55． 52＊＊
解郁方Ⅱ组 6． 00
825． 49 ± 102． 49* 730． 42 ± 99． 40* 698． 96 ± 121． 13*
解郁方Ⅲ组 3． 00
723． 88 ± 108． 76 720． 08 ± 97． 27 691． 58 ± 119． 72
（ 1． Center of Biomedical Information，Beijing Youan Hospital，Capital Medical University，Beijing 100069，China； 2． Physiology Department of Ningxia Medical University，Yinchuan 750004，China）
组别
剂量 （ g·kg － 1 ）
MAO （ U·mg － 1 ·prot）
正常对照组
—
12． 15 ± 1． 84
模型组 吗氯贝胺 解郁方Ⅰ组 解郁方Ⅱ组
0． 004 0． 04 12． 00 6． 00
14． 42 ± 3． 17△△ 10． 42 ± 3． 17＊＊ 11． 98 ± 1． 78＊＊ 12． 03 ± 1． 37*
正常对照组 — 1 101． 20 ± 186． 85 848． 11 ± 52． 72 914． 09 ± 124． 82
模型组 0． 004 671． 58 ± 69． 99△△ 683． 83 ± 103． 62△△ 672． 18 ± 66． 16△△
文拉法新组 0． 04
985． 27 ± 141． 24＊＊ 777． 86 ± 61． 95＊＊ 819． 38 ± 128． 37＊＊
（ 左侧脑组织供测单胺递质用，右侧脑组织供测 MAO
用） ，分别称重，按 300 ～ 400 mg 脑组织加入 1 mL 预
冷的 PBS 溶液，玻璃匀浆器冰上匀浆，4 ℃ 离心 3 000
rpm 15 min，取上清液，－ 20 ℃ 冷冻保存待测。
2． 4 统计学处理 利用 SPSS 11． 5 统计软件，进行
Abstract： Objective To study the mechanism of antidepressant effect of Jieyufang． Methods To study the possible mechanism，the following methods had been carried out： the content of monoamine neurotransmitter was determined by enzyme － linked immunosorbent assay （ ELISA） ； The content of monoamine oxidase in the mouse brain was determined by spectrophotometry． Ｒesults In the Jieyufang groupⅠ，Ⅱthe content of 5 － HT，DA and NE in the brain increased significantly （ P ＜ 0． 01， P ＜ 0． 05） ； The content of MAO in the brain decreased significantly（ P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05） ． Conclusion The mechanism of antidepressant may be associated with decrease the activity of MAO，increase the concentration of 5 － HT，NE，DA in the brain．
注： 与正常组比较，△△P ＜ 0． 01； 与模型组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
3． 2 小鼠脑内 MAO 测定结果 结果见表 2。
4 讨论
抑郁症是一种以情感病态变化为主的精神障碍
疾病，患者情绪紊乱，甚至具有自杀倾向，被中医列
表 2 小鼠脑内 MAO 测定结果（ n = 10，x ± s）
号： 20071114） ，均由南京建成生物工程研究所提供。
1． 3 仪器 550 型酶标仪（ BIO 公司） 。1575 型洗
板机（ BIO 公司） ； DMS200 型紫外可见分光光度计
（ 美国 Varian 公司） ； VXH － 3 微型旋涡混合器（ BIO
公司生产） ； XK24 － 1060007 型电热恒温培养箱（ 上
单因素方差分析，组间差异采用 Dunnett' s 后检验，
数据以 x ± s 表示，以 P = 0． 05 作为检验水准。
3 结果
3． 1 小鼠脑内单胺类神经递质测定结果 结果见
表 1。
表 1 小鼠脑内单胺类神经递质测定结果（ n = 10，x ± s）
剂量
5 － HT
DA
NE
组别 （ g·kg － 1） （ ng·mg － 1脑组织） （ ng·mg － 1脑组织） （ ng·mg － 1脑组织）