2020届高考生物一轮复习专题26基因工程课件
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基因工程-高三高考生物一轮复习考点突破教学PPT课件
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考点梳理
考点例析
课堂自测
第1课 基因工程
结束
◎考点一 基因工程的工具 1.限制性核酸内切酶(简称:限制酶)——“分子手术刀” (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化。 (2)特点:能够识别双链 DNA 分子某种特定核苷酸序列,并且使每一条 链特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 (3)切割后末端的种类:黏性末端和平末端。 2.DNA 连接酶——“分子缝合针” (1)作用:将双链 DNA 片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核 苷酸之间的磷酸二酯键。 (2)种类:按来源可分为 E·coli_DNA 连接酶(来自大肠杆菌)和 T4DNA 连 接酶(来自 T4 噬菌体)。 3.载体——“分子运输车” (1)条件:能在受体细胞中复制并稳定保存;具有一个至多个限制酶切割 位点;具有标记基因。
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第1课 基因工程
结束
3.将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术 感受态细胞法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到 将含有目的基因的 Ca2+处理细胞→
感受态细胞→
Ti 质粒的 TDNA 上 表达载体提纯→取 重 组 表 达 载 体
第十二单元 现代生物科技专题
结束
最新考纲
考纲解读
备考建议
基因工程的诞生(Ⅰ) 基因工程的原理及技术(Ⅱ) 基因工程的应用(Ⅱ) 蛋白质工程(Ⅰ) 植物的组织培养(Ⅱ) 动物的细胞培养与体细胞克隆 (Ⅰ) 细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ) 动物胚胎发育的基本过程与胚胎 工程的理论基础(Ⅰ) 胚胎干细胞的移植(Ⅰ) 胚胎工程的应用(Ⅱ) 转基因生物的安全性(Ⅰ) 生物武器对人类的威胁(Ⅰ) 生物技术中的伦理问题(Ⅰ) 简述生态工程的原理(Ⅱ) 生态工程的实例(Ⅰ)
人教版高中生物一轮复习课件 基因工程
DNA聚合酶或热稳定 DNA聚合酶(Taq酶)
磷酸二酯键
脱氧核 苷酸
将单个脱氧核苷酸依次 连接到DNA单链末端
DNA(水解)酶
磷酸二酯键
DNA
将DNA片段水解为单个 脱氧核苷酸
解旋酶 RNA聚合酶
碱基对之 间的氢键
磷酸二酯键
DNA
核糖核苷 酸
将双链DNA分子局部解 旋为单链,形成两条长链 将单个核糖核苷酸依次连 接到RNA单链末端
(2)DNA连接酶 ①作用:将限制酶切割下来的DNA片段_拼__接__成__新__ 的DNA分子,恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷 酸之间的 磷酸二酯键 。
②类型
常用类型 来源 特点
E·coli DNA连接酶 __大__肠__杆__菌__
只缝合_黏__性__末__端__
T4 DNA连接酶 T4噬菌体
农杆菌转化 法
常用方法 基因枪法、(单子叶)
花粉管通道法 (被子)
动物 _显__微__注__射__法__
微生物
感受态细胞法 (用Ca2+处理)
受体细胞 体细胞或受精卵
_受__精__卵___
原核细胞
组织培养
将目的基因插入Ti质 将含有目的基因的 Ca2+处理细胞→_感_
粒的T-DNA 上→转 表达载体提纯→取 受态 细胞→重组 转化 入 农杆菌 →导入植 卵(受精卵)→显微注 表达载体DNA分子
第33讲
基因工程
【目标要求】
1.基因工程的诞生。 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)。 3.基因工程的应用。 4.蛋白质工程。 5.实验:DNA的粗提取与鉴定。
考点一 基因工程的操作工具
考点二 基因工程的基本操作程序
2024届高考一轮复习生物课件(人教版):基因工程的基本工具和基本操作程序
4.目的基因的检测与鉴定
拓展 提升科学思维
PCR是一项根据DNA半保留复制的原理,在体外提供参与DNA复制的各 种组分与反应条件,对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。在 该过程中,引物非常关键,回答下列有关引物的问题: (1)什么是引物? 提示 引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。 (2)PCR技术为什么需要引物? 提示 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3′端延伸DNA链。
拓展 提升科学思维
构建基因表达载体时,需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的DNA
片段和载体。
已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是
,限制性内切
核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是
,根据图示分析回答下列问题:
(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形 成黏性末端的过程。
提示 限制性内切核酸酶Ⅰ: 限制性内切核酸酶Ⅱ:
本质
DNA
DNA
mRNA
mRNA
位置 目的基因上游 目的基因下游 mRNA首端 mRNA尾端
RNA聚合酶识 别和结合的部 功能 位,驱动基因 转录出mRNA
翻译的起始 使转录在所需要
信号(编码氨 的地方停下来
基酸)
翻译的结束信 号(不编码氨 基酸)
3.将目的基因导入受体细胞
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法 农杆菌转化法、花__粉__管__通__道__法__ 显微注射法 Ca2+ 处理法
(6)若一个DNA分子在PCR中经过n轮循环,理论上需要消耗多少个引物? 第n轮循环需要消耗多少个引物数? 提示 经过n轮循环需要消耗引物数为(2n+1-2)个,第n轮循环需要消耗 的引物数为2n个。
2023届高三生物一轮复习课件:基因工程
或其他数量的核苷酸组成。
6.切割结果:切口有两种:黏性末端和平末端 当限制酶在它识别序列的_中__轴__线__两__侧__将DNA分子的两条链分别切 开时,产生的是黏__性__末__端____; 当限制酶在它识别序列的_中__轴__线__处__切开时,产生的是_平__末__端_;
EcoRⅠ SmaⅠ
不会对人畜有害的原理?①Bt抗虫蛋白只在某类昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性,而人畜的胃液 呈酸性 ②人畜的肠道细胞没有特异性受体。 一、目的基因的筛选与获取 1.何为目的基因?P76用于改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因,主要指编码蛋白质的基因 库是由mRNA逆转录形成的,只包含真核细胞基因结构中外显子的序列,可在不同物种之间交流;
物细胞 哺乳 不的到溶丝解状。沉淀物、
方案: ①4℃冰箱静置后取 上清液 ②离心后取上清液
2mol/L的 NaCl溶液, 2只试管
二苯胺 沸水浴加热 蓝色
加①体低积温相放等置、几预分冷钟酒的精作(用体?积分数95%)静置,得白色丝状物 提②取搅方拌案时:应轻缓、并沿一个方向的原因?
①抑用制玻核璃酸棒水沿解一酶个的方活向性搅,拌进,而卷抑起制丝D状NA物降,解并;用抑滤制纸DN吸A分取子上面运 动的,水使DNA易形成沉淀析出;低温有利于增加DNA分子柔韧性,
6
●1.基因表达载体的构建目的? ●2.基因表达载体组成? ●3.基因表达载体各组成部分的作用? ●4.转化的概念? ●5.将目的基因导入受体细胞的方法及适用范围?
7
1.在培养有些转基因植物时,常用农杆菌转化法,农杆菌的作用是什么? 2.原理? 3.采用农杆菌转化法导入目的基因时,为什么目的基因可以整合到染色体的DNA 上? 4.目的基因插入染色体DNA上的目的是什么? 5.两次拼接、两次导入 6.转基因的植物细胞如何获得最终的新品种?
高三生物一轮复习基因工程课件
多细胞生物的检测,将每个受体细胞单独培 养并诱导发育成完整个体,检测这些个体是否摄 入目的基因,摄入的基因是否表达(是否表现出 相应的性状)。淘汰无变化的个体,保留有相应 变化的个体进一步培养、研究。 例:用棉铃饲喂棉 铃虫,如虫吃后不出现 中毒症状,说明未摄入 目的基因或摄入目的基 因未表达。如虫吃后中 毒死亡,则说明摄入了 抗虫基因并得到表达。
• 步骤一:目的基因的提取 3)根据已知的氨基酸序列合成DNA法 : 根据已知蛋白质的氨 蛋白质的氨基酸序列 基酸序列,推测出相应的 推测 信使RNA序列,然后按 mRNA的核苷酸序列 照碱基互补配对原则,推 推测 测出它的结构基因的核苷 结构基因的核苷酸序列 酸序列,再通过化学方法, 化学合成 以单核苷酸为原料合成目 目的基因 的基因。
基因工程的成果在实际生产、生活中的应用有哪些?
医药卫生 基因诊断:用同位素或荧光分子制备DNA探针,利用DNA
分子杂交的原理检验被试样品的遗传信息
利用转基因的工程菌等生产基因工程药品
基因治疗:用健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞
培育优良品质的转基因作物或抗逆性转基因作物 农牧业 培育优良品质的转基因动物
(三)基因操作的基本步骤
• 上述三种目的基因提取的方法有何优缺点?
优点 鸟枪法 操作简便 广泛使用 专一性强 缺点 工作量大,盲目,分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦,mRNA 很不稳定,要求的技 术条件较高
反转录法
根据已知氨基酸 专一性最强 仅限于合成核苷酸对 较少的简单基因 合成DNA法
重播
DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏 性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。
• 什么叫黏性末端?
高三生物一轮复习课件选修基因工程 PPT
三、基因治疗曙光初照
• 基因诊断:
也称为DNA诊断或基因探针技术,即在 DNA水平分析检测某一基因,从而对特定 得疾病进行诊断。
探针制备:放射性同位素(如32P)、荧光 分子等标记得DNA分子;
原理:利用DNA分子杂交原理;
• 基因诊断技术在什么方面发展迅速?
在诊断遗传性疾病方面发展迅速。目前 已经可以对几十种遗传病进行产前诊断。
• 基因探针:
基因探针就就是一段与目得基因或DNA互 补得特异核苷酸序列。她包括整个基因,或 基因得一部分;可以就是DNA本身,也可以 就是由之转录而来得RNA。
1)将细菌用CaCl2处理,以增大细菌细胞壁得通透 性。
2)使含有目得基因得重组质粒进入受体细胞。
3)目得基因在受体细胞内,随其繁殖而复制,由于 细菌繁殖得速度非常快,在很短得时间内就能获得 大量得目得基因。
目得基因与载体得结合过程,实际上就 是不同来源得基因重组得过程。
步骤三:目得基因导入受体细胞
目得基因进入受体细胞内,并且在受体细 胞内维持稳定和表达得过程,称为转化。
什么叫显微注射技术?
用口径为1μm得DNA注射器,将大量得 目得基因片段注入到受精卵得核内,然后 把经过注射得受精卵移植到另一只雌性 动物得子宫内,使受精卵发育为转基因动 物。
1、 限制性核酸内切酶——“分子手术刀”
限制酶主要就是从原核微生物中分离纯化 出来得。能识别双链DNA得某种特定核苷酸序 列,并且使每一条链中特定部位得两个核苷酸之 间 得磷酸二酯键断开。
特点:特异性。
即一种限制酶只能识别一种特定得核苷酸 序列,并且能在特定得切点上切割DNA分子。
大肠杆菌(EcoRΙ)得一种限制酶能识别 GAATTC序列,并在G和A之间切开。
2020高考生物一轮复习:第十一单元专题二十六 基因工程(共71张PPT)
基因工程的应用与蛋
白质工程 一、基因工程的应用 用转基因改良植物的品质。
重 点
1.植物基因工程:培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利
2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品的品质、 用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供 体。
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
3.基因治疗与基因诊断 基因治疗
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
四、PCR技术
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
五.体内DNA复制与PCR技术的比较 DNA复制 解旋方式 区 场所 解旋酶催化
PCR技
DNA在高温作用
细胞内(主要在细胞核内) 细胞外(主要在PC
酶
温度条件
解旋酶、DNA聚合酶等
细胞内温和条件 DNA分子
热稳定DNA聚合
方法2 基因工程操作程序的分析 C考法帮·考向全扫描
考向1
考向2
基因工程的基本工具
基因工程的基本操作步骤
考向3
考向4
基因工程的应用
蛋白质工程
考纲要求 考情精解读
命题规律
核心素养聚焦
命题分析预测
考纲要求 1.基因工程的诞生Ⅰ;
2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)Ⅱ ;
3.基因工程的应用Ⅱ;
4.蛋白质工程Ⅰ。
基因工程操作程序的分
方法1 基因工程操作工具 的分析 方法解读 1.图解法辨析黏性末端和平末端 DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常 有两种形式——黏性末端和平末端(如图所示)。
生物 第十一单元 现代生物科 技专题
2.表格法辨析限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关
酶
种类 限制酶 DNA连接酶 项目 作用底物 DNA分子 DNA分子片段
高三一轮基因工程共27页PPT资料
目的 人工种子;
培育;③检测有毒物质;
④生产药物、杀虫剂等;④生理、病理、药理学
⑤转基因植物的培育 的研究
3.下列有关细胞工程的叙述中,不. 正确的是
( D)
A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
(2019·江苏高考,20-A)
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶
处理
植物细胞
动物细胞 微生物细胞
农杆菌转化法、基
常用
显微注射技 感受态细胞法
因枪法、花粉管通
方法
术
(用 Ca2+处理)
道法
受体 受精卵、体细胞 受精卵
细胞
原核细胞
(4)目的基因的检测与鉴定:
1.下列有关基因工程的叙述中,不.正确的是(双选)( BC ) A.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用
未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是______________ __未_处__理__的_大__肠__杆_菌__吸__收__质_粒。(外源 DNA)的能力极弱
细胞工程
1.植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备过程比较
步骤 植物体细胞杂交过程 原生质体的制
(2011·浙江高考,6-B)
B.应用DNA 探针技术可以检测转基因抗冻番茄植株中
目的基因的存在及其完全表达(2011·四川高考,5-D)
C.用限制性核酸内切酶可以切割烟草花叶病毒的核酸
(2010·浙江高考,2-A)
D.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得
能产生人干扰素的菌株
(2010·全国卷Ⅱ, 5-B)
基因B
C.利用DNA 聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
高三一轮复习:基因工程正式ppt课件
达到治疗疾病的目的。病人细胞中既有缺陷基因,也有
正常基因。
高考总复习.生物
二、 植物基因工程与动物基因工程的成果
外源基因类型及举例
成果举例
抗虫转基 因植物
抗虫基因:Bt毒蛋白基 因、蛋白酶抑制剂基因、 淀粉酶抑制剂基因
抗虫水稻、抗虫棉、 抗虫玉米
抗病转基 因植物
抗病毒基因:病毒外壳 蛋白基因、病毒的复制 酶基因抗真菌基因:几 丁质酶基因
3.PCR技术扩增目的基因
高考总复习.生物
(3)PCR技术扩增目的基因 ①原理:_D_N__A_复__制___。 ②过程 第一步:变性:_D__N_A__解__链__;第二步:复性:引物结合到 互补DNA链;第三步:延伸:在热稳定DNA聚合酶作用下, 从引物起始合成互补链。 2.基因表达运载体的构建 (1)目的:使目的基因在受体细胞中_稳__定__存__在___,并且可以 _遗_传__至__下_一__代_,使目的基因能够__表__达__和_发__挥_。作用 (2) 组 成 : 目__的__基__因____ + __启__动__子____ + ___终__止__子___ + __标__记__基__因__
三、将目的基因导入受体细胞
生物 种类
植物细胞
动物细胞
常用 农杆菌转化 显微注射技
方法 法
术
受体 细胞
体细胞
受精卵
高考总复习.生物
微生物细胞
感受态细胞 法
原核细胞
转化 过程
将目的基因 插入Ti质粒 的TDNA上→ 农杆菌→导 入植物细胞 →整合到受 体细胞的
将含有目的 基因的表达 载体提纯→ 取卵(受精卵 )→显微注射 →受精卵发 育→获得具 有新性状的
用是( )C
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3.(2015重庆理综,6,6分)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是 ( ) A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 答案 C 由于人肝细胞中胰岛素基因不能表达,所以无法利用肝细胞mRNA反转录获得胰岛 素基因,A项错误;表达载体的复制启动于复制原点,胰岛素基因的转录启动于启动子,B项错误; 抗生素抗性基因是标记基因,作用是检测受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有胰岛素基 因的受体细胞筛选出来,C项正确;启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位,是转录的起点,而终 止密码子位于mRNA上 ,在翻译中起作用,D项错误。
3.(2017北京理综,5,6分)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1), 拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。 下列操作与实验目的不符的是 ( )
A.用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒 B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞 C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞 D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上 答案 C 本题主要考查基因工程的相关知识。由于C基因两端及质粒上均存在限制酶EcoR Ⅰ的酶切位点,因此,可采用限制酶EcoR Ⅰ 和DNA连接酶构建重组质粒;用含C基因的农杆菌 侵染菊花愈伤组织(即农杆菌转化法),可以将C基因导入细胞;由于质粒上存在潮霉素抗性基 因(标记基因),因此,可以在培养基中添加潮霉素,筛选被转化的菊花细胞,C符合题意;可用分子 杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上。
答案 D 基因工程中需将含有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞,A正确;通过接种病原 体,可在个体生物学水平上对转基因的植株进行抗病性鉴定,B正确;在花粉离体培养过程中,生长素 与细胞分裂素的比例影响脱分化与再分化过程,调整培养基中生长素与细胞养获得的若干再生植株均为单倍体,D错误。 素养解读 本题借助育种相关知识,考查考生运用所学知识,分析某些生物学问题、作出合理判断 的能力;试题通过抗甲、乙病害的植物新品种的培育,体现了科学思维素养中的演绎与推理要素。
高考生物 (北京市选考专用)
专题二十六 基因工程
五年高考
A组 自主命题·北京卷题组
1.(2019北京理综,4,6分)甲、乙是严重危害某二倍体观赏植物的病害。研究者先分别获得抗 甲、乙的转基因植株,再将二者杂交后得到F1,结合单倍体育种技术,培育出同时抗甲、乙的植 物新品种。以下对相关操作及结果的叙述,错误的是 ( ) A.将含有目的基因和标记基因的载体导入受体细胞 B.通过接种病原体对转基因的植株进行抗病性鉴定 C.调整培养基中植物激素比例获得F1花粉再生植株 D.经花粉离体培养获得的若干再生植株均为二倍体
答案 D 图1中,两种限制性核酸内切酶的酶切位点不同,说明两种限制性核酸内切酶识别的 核苷酸序列不同,A正确。图2中,两种酶的酶切产物都为DNA片段,都可用于构建重组DNA,B 正确。结合图1的酶切位点图,判断两种酶切DNA后得到的DNA片段数;再结合泳道①②电泳 结果知,泳道①是用SalⅠ处理得到的酶切产物,C正确。能被限制性核酸内切酶酶切的DNA片 段仍为双链DNA,D错误。 知识拓展 为什么现代基因工程不使用同一种限制酶? 为防止载体或目的基因发生自身环化,我们常用不同的限制酶分别处理目的基因和载体,使目 的基因两侧及载体各自具有两个不同的末端。 素养解读 本题通过陌生情境的实验探究的形式考查辨认、比较的理解能力。突出体现科 学思维与科学探究。
4.(2015北京理综,5,6分)在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中,不需 要的是 ( ) A.用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B.用选择培养基筛选导入目的基因的细胞 C.用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融合 D.用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽 答案 C 用农杆菌转化法获得的转基因细胞需经植物组织培养获得转基因个体,不需要经 过原生质体融合过程,C错误。
B组 统一命题、省(区、市)卷题组
考点1 基因工程的工具与操作程序
1.(2019江苏单科,16,2分)下列生物技术操作对遗传物质的改造,不会遗传给子代的是 ( ) A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌 B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株 C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛 D.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗 答案 D 本题以基因工程为信息载体,考查考生运用所学知识,对某些生物学问题进行解 释、推理得出正确结论的能力;试题通过基因工程技术遗传性分析,体现了对科学思维素养中 的分析与判断要素的考查。 胰岛素基因表达质粒导入大肠杆菌,获得的工程菌可将胰岛素基因遗传给子代,A不符合题意; B、C培育的转基因植物和转基因动物的每个细胞均含有目有基因,后代可表现转基因性 状,B、C不符合题意;将转入目的基因的淋巴细胞回输患者体内后,患者的生殖细胞不含目的 基因,故子代不表现转基因性状,D符合题意。
2.(2018北京理综,5,6分)用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,酶切 位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是 ( )
图1 酶切位点图
图2 电泳结果示意图 A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
2.(2015广东理综,25,6分)如图为培育转基因山羊生产人β-酪蛋白的流程图。
下列叙述正确的是(双选) ( ) A.过的胚胎进行移植 C.过程③可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体 D.过程④人β-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译 答案 AC 胚胎移植一般选桑椹胚或囊胚期胚胎进行移植,不能选用原肠胚,B错误;基因的转录发 生在细胞核内,D错误。