黑木耳多糖的分离纯化及药理作用生物技术及应用

合集下载

黑木耳多糖提取方法及生物活性的研究进展

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＰｏｊｙｓａｃｃｒｊｄｅｓｏｆＡｕｒｉｃｕｌａｒｉａｈｅｉｍｕｅｒ，ａｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｏｆＡｕｒｉｃｕｌａｒｉａｈｅｉｍｕｅｒ，ｗｈｉｃｈｈａｖｅｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｒｅｄｕｃｉｎｇｂｌｏｏｄｆａｔ，ｌｏｗｅｒｉｎｇｂｌｏｏｄｓｕｇａｒ，ｅｎｈａｎｃｉｎｇｉｍｍｕｎｉｔｙａｎｄａｎｔｉ — ｏｘｉｄａｔｉｏｎｅｔａ１．．Ｔｈｉｓ
ＹｕＨａｉｙａｎｇ，ＷａｎｇＹａｎｆｅｎｇ，ＳｈｉＩｅｉ，ＷａｎｇＪｉｎｈｅ，ＰａｎＣｈｕｎｌｅｉ，ＳｈｅｎｇＣｈｕｎｇｅ，
ＬｉｕＺｉｔｏｎｇ，ＤｏｎｇＸｕｅｍｅｉ，ＺｈａｎｇＰｅｎｇ
（ＭｕｄａｎｊｉａｎｇＢｒａｎｃｈｏｆＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＭｕｄａｎｊｉａｎｇＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ１５７０４１）
ｆｏｒｔｈｅｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＡｕｒｉｃｕｌａｒｉａｈｅｌｍｕｅｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａｈｅｉｍｕｅｒ；Ｐ０ｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ；Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｃｔｉｖｉｔｙ

黑木耳多糖提取工艺的研究进展

黑木耳多糖提取工艺的研究进展文献综述×××××××××全文：大量研究结果表明，多糖具备抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血糖、血脂等生物活性，因此对多糖结构和生物功能的研究已沦为继在蛋白质、核酸之后积极探索生命奥秘的第三小里程碑。

黑木耳多糖做为一种天然保健品也为大家所拒绝接受，但现在工业化抽取黑木耳多糖时多使用热水金属粉末，耗时短、产量高、成本高，无法满足用户市场需求，通过黑木耳多糖高产菌株的甄选和育种、优化多糖抽取方法、改建天然多糖而进一步增强旧有活性、优化深层蒸煮生产黑木耳多糖工艺以及多糖药理机制、临床应用领域有效性和安全性研究等播发功能性食品添加剂、保健品或药品的市场前景更加宽广，而研发出来有利于人类身体健康、经济效益低的黑木耳多糖深加工产品，对促进黑木耳多糖产业发展具备关键意义。

关键词：黑木耳；多糖；抽取工艺researchreviewontheextractiveconditionsofpolysaccharidefromauriculariaauricular-1-medicinesmorebroadmarketprospect，andthedevelopmentofbeneficialtohumanbodyhealth，higheconomicbenefitofblackfunguspolysaccharideprocessingproducts，topromotethedevelopmentofblackfunguspolysaccharideindustryisofgreatsignificanc e。

keywords：auriculariaauricular；polysaccharide；extractionprocess黑木耳（auriculariaauricular），属于担子菌纲，木耳目、木耳科、木耳属。

黑木耳多糖的分离纯化及药理作用生物技术及应用

XX农林职业技术学院毕业设计（论文）SNL/QR7.5.4-3 黑木耳多糖的分离纯化及药理作用专业生物技术及应用学生XX 邹广海班级 06生物技术及应用（1）学号 061401116指导教师 X远完成日期 2009年6月3号成绩评议毕业设计（论文）任务书指导教师意见评阅教师意见答辩小组评议意见摘要：本文讲述了黑木耳多糖的常用粗提方法和特殊粗提方法。

介绍了黑木耳粗多糖经去蛋白和脱色处理后，最后分别采用沉淀法，色谱柱法，有机溶剂浸提法，膜分离法纯化多糖。

综述了黑木耳多糖的保健药理作用。

关键词：黑木耳多糖；提取；分离纯化；保健药理.Abstract:This article describes the monly used Auricularia polysaccharide crude extract crude methods and special methods. Introduced by Auricularia Polysaccharide to protein and after decolorization, respectively Finally, the use of precipitation, column method, organic solvent extraction, membrane separation and purification of polysaccharide. Auricularia auricula polysaccharide reviewed pharmacological effects of health care.Keywords:Auricularia auricula polysaccharide;extraction;isolation and purification；Health pharmacology目录1引言 (3)2黑木耳的营养价值 (3)3黑木耳多糖的提取、分离和纯化 (3)3.1黑木耳多糖的粗提 (3)3.1.1热水浸提法 (3)3.1.2稀碱浸提法 (3)3.1.3酸浸提法 (4)3.1.4 酶解提取法 (4)3.1.5超声波提取法 (4)3.1.6微波辅助提取法 (4)3.1.7 超临界流体萃取 (4)3.2黑木耳多糖的分离 (4)3.2.1 Sevag法 (5)3.2.2三氟三氯乙烷法 (5)3.2.3三氯醋酸法 (5)3.3脱色 (5)3.4黑木耳多糖的纯化 (5)3.4.1沉淀法 (5)3.4.2凝胶柱色谱法 (5)3.4.3 纤维素阴离子交换剂柱色谱法 (6)3.4.4有机溶剂浸提法 (6)3.4.5 膜分离 (6)3.4.5.1超滤 (6)3.4.5.2微滤 (6)4黑木耳多糖的药用保健作用 (7)4.1 调节免疫功能 (7)4.2降血脂 (7)4.3降血糖 (7)4.4抗血栓 (7)4.5抗肿瘤 (7)4.6抗衰老作用 (7)4.7对动物运动机能的影响 (8)5讨论 (8)5.1 多糖提取方法比较 (8)5.2多糖分离过程有关问题 (8)5.2.1去蛋白方法的比较 (8)5.2.2脱色处理注意点 (9)参考文献 (10)致谢 (11)1引言黑木耳(Auricularia auriculajudae )营养丰富, 食味鲜美,不但是营养价值很高的食用菌, 而且是药用价值较高的药用菌,是世界公认的保健品。

黑木耳多糖研究进展

黑木耳多糖研究进展【摘要】本文综述了近年来人们对黑木耳多糖的提取方法、成分结构，保健功能及生物活性的研究成果进展。

【关键词】黑木耳多糖；提取方法成分结构生物活性功能食品引言黑木耳[1]又称木耳、耳子、光木耳，属真菌门担子菌纲木耳科木耳属菌类。

它是生长在朽木上的一种腐生菌，由菌丝体和子实体两部分组成。

菌丝体为无色透明，生长在朽木里面；子实体则生长在朽木的表面，为食用部分。

子实体丛生，常覆瓦状叠生。

耳状。

叶状或近林状，边缘波状，薄，宽2-6cm，最大者可达12cm，厚2mm左右，以侧生的短柄或狭细的基部固着于基质上。

初期为柔软的胶质，粘而富弹性，以后稍带软骨质，干后强烈收缩，变为黑色硬而脆的角质至近革质。

背面外面呈弧形，紫褐色至暗青灰色，疏生短绒毛。

绒毛基部褐色，向上渐尖，尖端几无色，里面凹入，平滑或稍有脉状皱纹，黑褐色至褐色。

菌肉由有锁状联合的菌丝组成，粗约2-3.5μm。

子实层生于里面，由担子、担孢子及侧丝组成。

担子长60-70μm，粗约6μm，横隔明显。

孢子肾形，无色。

我国是世界上主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90％以上，它在我国多数地区都有生产，这就为黑木耳的开发应用提供了有利条件。

黑木耳营养丰富、食味鲜美、不但是营养价值很高的食用菌，而且是药用价值较高的药用菌，是世界公认的保健品。

《本草纲目》中记载：“木耳生于朽木之上，性甘平，主治益气不饥，轻身强志，并有治疗痔疮，血痢，下血等作用。

”近代医学研究发现，黑木耳子实体多糖具有降血脂、延缓衰老、增强免疫和抗肿瘤等多种药理作用。

黑木耳是“药食同源”的典型代表，不但含有丰富的营养素，而且具有极高的药用价值。

有人对黑木耳的营养成分做了全面的分析，发现它富含大量的糖类和蛋白质，同时也是一种钙和铁含量较高的食品。

大量研究表明黑木耳作为“生物应答效应物”(Biological Response Modifier，简称BRM)具有多种生理功能，而这些重要的生理功能都是与其多糖组分密切相关的。

黑木耳多糖的提取及其理化特性与抑菌活性研究

C
2 3 1 1 3 2 3 1 2 3． 903 4． 487 4． 263 0． 584
粗多糖得率∥%
0． 76 3． 30 3． 25 3． 16 4． 86 7． 30 4． 63 5． 30 5． 40
果的各因素的大小顺序为 A ＞ B ＞ C，即料液比＞提取时间＞提取温度；最佳工艺组合为 A2 B2 C2 ，即料液比 1∶50，浸提温度 90 ℃ ，浸提时间 2． 5 h；该条件下的多糖得率为 7． 30% 。 2． 2 多糖含量的测定结果计算得到标准曲线回归方程为 A = 0． 009 3C（ r = 0． 999 2），表明葡萄糖浓度与吸光度之间呈良好的线性关系（图 1）。
2． 1 正交试验结果由表 2 可知，影响黑木耳多糖提取效
表 2 黑木耳多糖提取的正交试验结果
试验号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 k1 k2 k3 R
A
1 1 1 2 2 2 3 3 3 2． 437 5． 110 5． 107 2． 673
因素
B
1 2 3 1 3 2 1 2 3 2． 850 5． 300 4． 503 2． 450
Extraction，Physiochemical Properties and Antibacterial Activities of Polysaccharides from Auricularia auricular DENG Qing-hua et al （ Department of Life Sciences and Chemistry，Hulunbuir College，Hulunbuir，Inner Mongolia 021008） Abstract ［Objective］ To explore the optimal conditions for extracting polysaccharide from Auricularia auricular，and to study its physiochemical properties and antibacterial activities．［Method］ The extraction conditions for A． auricular polysaccharides were optimized by orthogonal test，and its physiochemical characteristics and antagonistic activities on bacteria and molds were tested．［Result］ The optimized condition is with sample to liquid ratio of 1∶50，temperature of 90 ℃ and extraction time of 2． 5 h． Under the optimized condition，the yield of polysaccharide was 7． 3% ，with polysaccharide content of 77． 81% ． Containing aldose and amylase，the polysaccharides of A． auricular is soluble in water． The inhibitory effect on bacteria is significantly stronger than on molds that the minimum diameter of inhibition zone for bacteria is 12． 7 mm，while 7． 9 mm for the molds．［Conclusion］This study provided scientific basis for the development and utilization of A． auricular polysaccharides． Key words Auricularia auricular； Fruitbody； Polysaccharide； Extraction process； Physicochemical property； Antibacterial activity

实验三十三黑木耳多糖的提取、分离、纯化及初步测定

实验三十三黑木耳多糖的提取、分离、纯化及初步测定实验目的1.学习真菌多糖的提取方法2.掌握测定多糖组成、总糖含量的基本方法3.掌握柱层析技术实验原理通过水提法浸提出木耳中的多糖，经过有机溶剂脱脂，Sevag脱蛋白，透析除去无机盐等小分子杂质，经干燥的得粗多糖。

粗多糖经酸水解后通过纸层析或薄层层析测出多糖的单糖组成。

经酚硫酸法测得总糖含量。

获得的粗多糖经G-100纯化，获得较纯多糖样品，为进一步研究奠定基础。

设备及试剂1.设备：721型分光光度计回流装置台式离心机电热恒温水浴锅真空干燥箱恒温磁力搅拌器柱层析系统层析缸布氏漏斗2. 材料：黑木耳，使用前烘干、粉粹，过80目筛，得木耳粉3.试剂：苯酚硫酸无水乙醇丙酮乙醚乙酸正丁醇邻苯二甲酸CPC P2O5 NaSO4 NaCl NaOH BaCO3 石油醚氯仿粉末状活性炭阿拉伯糖鼠李糖木糖甘露糖半乳糖葡萄糖步骤1、提取1）.取50g粉末，用石油醚回流脱脂2h,反复两次，抽滤，取残渣。

2). 残渣经80%乙醇除去低聚糖后，热水浴浸提4h，重复一次，六层纱布粗滤，抽滤，取滤液。

3).向滤液中加入1%粉末活性炭，磁力搅拌器搅拌15min，抽滤除净活性炭。

4). 浓缩至80ml左右，加入糖液总体积的1/4 Sevage试剂（正丁醇：氯仿=1：4），充分搅拌2h，静置，离心，取上清液重复，至无游离蛋白为止。

5).将清夜装入透析袋，流水透析过夜。

6).将袋内溶液专移至250ml烧杯中，加入三倍体积95%乙醇沉淀多糖，静置30min。

7).4000rpm离心10min。

8).弃上清，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、氯仿洗涤。

9).将沉淀置于通风橱内挥净有机溶剂。

10).60℃真空干燥过夜，得粗多糖干品。

2.G-100柱纯化3、酚硫酸法测总糖含量1）称量提取出来的多糖粗品100mg，定溶于1000ml容量瓶。

2） 6g苯酚蒸馏水定容于100ml容量瓶中，得6%苯酚。

3）分别取1中母液0.0ml、0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml、0.9ml，分别加蒸馏水定容到50ml。

黑木耳多糖的提取纯化、结构表征及降糖活性研究

黑木耳多糖的提取纯化、结构表征及降糖活性研究黑木耳（Auricularia polytricha）是一种广泛应用于食品和药品工业的菌类。

它不仅具有丰富的营养价值，还含有多种活性物质，如多糖。

多糖是一种具有广泛生物活性的天然产物，在药物研发和功能食品开发中具有重要的应用前景。

因此，对黑木耳中多糖的提取纯化、结构表征以及降糖活性的研究具有重要意义。

黑木耳多糖的提取纯化通常采用水煮提法。

首先，将黑木耳切碎并浸泡在水中，然后加热并搅拌一段时间。

通过此过程，黑木耳中的多糖被释放到提取溶液中。

接下来，通过过滤、浓缩和沉淀等步骤，可以得到粗提物。

为了提高纯化程度，我们通常使用酒精沉淀、凝胶过滤和离子交换层析等技术进一步纯化。

最终得到的黑木耳多糖具有较高的纯度和活性。

为了了解黑木耳多糖的结构特征，我们采用常规的物理化学方法进行表征。

首先，利用高性能液相色谱法（HPLC）对多糖的单糖组成和分子量进行分析。

结果显示，黑木耳多糖主要由葡萄糖和木糖组成，具有较高的分子量。

其次，通过红外光谱、核磁共振和质谱等技术对多糖的化学结构进行分析。

研究结果表明，黑木耳多糖具有特定的多糖键合方式和空间结构。

除了了解其结构特征，我们还研究了黑木耳多糖的降糖活性。

通过体外和体内实验，我们发现黑木耳多糖具有明显的降糖效果。

在细胞实验中，黑木耳多糖能够显著促进葡萄糖的摄取，并提高细胞内糖原的合成。

在动物实验中，给予高脂饮食的小鼠黑木耳多糖处理后，其血糖水平明显降低，且体重和胰岛素抵抗显著改善。

这些结果表明，黑木耳多糖具有较好的降糖活性，可能成为治疗糖尿病的潜在药物候选物。

综上所述，黑木耳多糖的提取纯化、结构表征以及降糖活性的研究为开发黑木耳的功能食品和药物提供了重要的理论依据。

未来，我们将进一步探索黑木耳多糖的机制和应用，为糖尿病等相关疾病的治疗提供新的思路和方法通过对黑木耳多糖的提取纯化、结构表征以及降糖活性的研究，我们发现黑木耳多糖具有较高的纯度和活性。

黑木耳多糖提取工艺的研究进展

文献综述黑木耳多糖提取工艺的研究进展×××××××××摘要：大量研究结果表明，多糖具有抗肿瘤、抗凝血、抗血栓、降血糖、血脂等生物活性，因此对多糖结构和生物功能的研究已成为继蛋白质、核酸之后探索生命奥秘的第三大里程碑。

黑木耳多糖作为一种天然保健品也为大家所接受，但现在工业化提取黑木耳多糖时多采用热水浸提，耗时长、产量低、成本高，无法满足市场需求，通过黑木耳多糖高产菌株的筛选和选育、优化多糖提取方法、改造天然多糖而增强原有活性、优化深层发酵生产黑木耳多糖工艺以及多糖药理机制、临床应用有效性和安全性研究等发功能性食品添加剂、保健品或药品的市场前景更加广阔，而研发出有益于人类身体健康、经济效益高的黑木耳多糖深加工产品，对推动黑木耳多糖产业发展具有重要意义。

关键词：黑木耳；多糖；提取工艺Research Review on the Extractive Conditions of Polysaccharide from Auricularia auricular Abstract: Lots of research results indicate that the polysaccharide has antitumour，anticoagulant，antithrombotic，fall blood sugar，blood fat，such as biological activity，so the research of polysaccharide structure and biological function has become after the protein，nucleicacid，explore the mysteries of life in the third major milestone。

一种黑木耳多糖的酶法提取方法

一种黑木耳多糖的酶法提取方法黑木耳是一种以其丰富的多糖成分而闻名的食用菌。

多糖具有多种保健和药理活性，因此，黑木耳多糖的提取方法备受关注。

下面将介绍一种常用的黑木耳多糖酶法提取方法。

提取原料准备：1.黑木耳：购买新鲜的黑木耳，清洗干净，并切碎成小块备用。

酶解步骤：1.预处理黑木耳：将切碎的黑木耳加入适量的温水中浸泡，经过洗涤、漂洗，去除杂质和其他非多糖成分。

2.增加酶解效果：为了增加酶解效果，可以在预处理的黑木耳中加入酶解助剂，如纤维素酶、淀粉酶等。

根据黑木耳的特性以及具体实验要求，选择合适的酶解助剂添加适量到黑木耳中。

3.酶解反应的控制参数：酶解反应中的温度、时间和酶解液的pH值是影响酶解效果的重要因素。

一般来说，合适的温度范围是40-60°C，酶解时间为1-4小时，pH值控制在酶解酶的最适工作pH范围内。

4.酶解反应过程的控制：可以将黑木耳和酶解液一起放入温度恒定的容器中，或使用搅拌罐对反应进行搅拌以提高反应效果。

5.终止酶解反应：一旦达到预设的酶解时间后，酶解反应应立即终止。

终止酶解反应的方法可以是将反应液加热至高温，或者加入酸等将反应液的酶活性彻底破坏。

过滤和浓缩：1.过滤：将酶解反应液进行滤除，去除固体残渣和其他杂质。

常见的过滤方法有纸浆过滤、滤膜过滤等。

2.浓缩：选择合适的浓缩方法，如真空浓缩、喷雾干燥等，将酶解液中的水分蒸发掉，使其成为相对浓缩的液体。

提取和纯化：1.醇沉淀：将浓缩液中加入适量的有机溶剂（如乙醇或异丙醇），使黑木耳多糖沉淀。

通过离心将沉淀与上清分离。

2.溶解和稀释：将沉淀溶解在适量的溶剂中（如水），可以使用热溶法、超声波法等。

稀释黑木耳多糖溶液以达到合适的浓度和纯度要求。

3.脱蛋白：使用酶解助剂（如蛋白酶）或特定的沉淀方法（如超滤法）去除多糖中的蛋白质成分。

4.酸性沉淀：通过调节pH值和温度使多糖在酸性条件下沉淀，从而进一步提高多糖纯度。

5.色谱分离：使用合适的色谱技术（如凝胶过滤、阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱等）纯化黑木耳多糖。

木耳多糖的酶法提取、纯化及性质研究

53´¿»¯¼°ÐÔÖÊÑÐ¾¿º«´ºÈ»ºÚÁú½- ¹þ¶û±õ 150076)Õª ÒªÒÔSephadex G -100Äý½ºÖù²ãÎö²â¶¨ÁË¶àÌÇµÄ·Ö×ÓÁ¿ºÍAPE104µ°°×ÖÊºÚÄ¾¶ú´¿»¯MA Yong-qiang(College o f F ood E ngineering, H arbin U niversity o f C ommerce, H arbin 150076, C hina)Ａｂｓｔｒａｃｔ１０４　ａｎｄ　１８．３ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｗｅｉｇｈｔ中图分类号１００２－６６３０（２００７）０２－００５３－０４木耳　（Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａ　ａｕｒｉｃｕｌａ　（Ｌ．ｅｘ　Ｈｏｏｋ）　Ｕｎｄｅｒｗｏｏｄ）是我国传统的保健佳品［１］黑木耳所含的多糖体具有抗溃疡［２］降低血脂［４］抗肿瘤［６］作为黑木耳越来越受到追求营养与健康的现代人重视首次采用复合酶法分离提取黑木耳多糖为黑木耳多糖的进一步开发奠定理论基础ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ　５２Ｗａｔｅｒｍａｎ公司标准葡聚糖（Ｄｅｘｔｒａｎ　Ｔ－１０，　Ｔ－４０，　Ｔ－７０，　Ｔ－１１０，　Ｔ－５００）Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司透析分子量８０００１．２仪器７２２光栅分光光度计上海精密科学仪器有限公司黑木耳经除杂过筛等预处理后以中性蛋白酶　（１２０ＩＵ／ｇ木耳）　在４５再以纤维素酶（９０ＩＵ／ｇ木耳）过滤按照黑木耳多糖水溶液１／４体积加入氯仿／正丁醇（４：１）试剂倾出上清液重复操作直至中间层无变性蛋白将多糖水溶液用氨水调ｐＨ值至８．０２００５－１１－１６基金项目韩春然（１９７０－）硕士2007, Vol. 28, No. 02食品科学）３ｈ１４０００的透析袋于室温下透析４ｈ１．３．２．３黑木耳多糖的分级（１）　ＤＥＡＥ－纤维素柱层析采用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ　５２（Ｃｌ湿法装柱（脱色后的木耳多糖上样以ｐＨ７．５　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液平衡好的层析柱Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ＋０．２ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＣｌ流速１０ｍｌ／ｈ各管以蒽酮－硫酸法检测多糖含量１ｃｍ流速２０ｍｌ／ｈ以蒽酮比色法检测每管多糖含量分段合并各多糖峰部分以蒸馏水溶解记录紫外光谱检测样品中是否含有蛋白质及核酸Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００（以０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ溶液进行洗脱以标准葡聚糖分子量的对数ｌｇＭＷ对分配系数Ｋａｖ作标准曲线１．３．５黑木耳多糖的理化性质对分离纯化所得的黑木耳多糖组分分别进行以下性质测定碘－碘化钾反应２结果与分析２．　１黑木耳多糖的纯化２．　１．１脱蛋白多糖提取液经浓缩得到的粗多糖中蛋白质是粗多糖中最主要的杂质而且它所带电荷可吸附大量其它杂质导致多糖损失多糖纯化的第一步就是脱蛋白在多糖溶液中加入氯仿－正丁醇混合溶液进行充分振摇经离心分离由于含有酚类化合物且溶液的碱性越强不能用活性炭等吸附剂脱色羟基从而达到脱色的目的过氧化氢是一种无色无臭的液体它氧化性较强过氧化氢的脱色原理是它在水溶液中电离出的过氧氢根离子ＨＯ２能够与色素结合脱色温度不应过高即可使黑木耳多糖颜色变浅２．１．３黑木耳多糖的分级２．１．３．１ＤＥＡＥ－纤维素柱层析多糖分子一般为中性或酸性带负电荷的糖分子采用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ　５２作为分离介质对黑木耳多糖进行层析可以看出其中以ｐＨ７．５　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ洗脱所得组分和以Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ＋０．２ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＣｌ洗脱所得组分为主和ＡＰＥ得到ＡＰＥ３）可知均为单一组分经透析和ＡＰＥＡＰＥ说明黑木耳多糖经分离纯化所得的两个主要组分不含蛋白质和核酸55H 2O 2·¨ÍÑÉ«¿ÉµÃµ½Á½¸ö¶àÌÇ×é·ÖA PE¾ùÎª·Çµí·ÛÀà¶àÌÇ²ÉÓÃSephadex G -100Äý½ºÖù²ãÎö·¨²âµÃAPE ·Ö×ÓÁ¿Îª18.3Òø¶úæß×Ó¶àÌÇ¼°ºÚÄ¾¶ú¶àÌÇµÄ¿¹À£Ññ×÷ÓÃ[J]. ÖÐ¹úÒ©¿Æ´óÑ§Ñ§±¨, 1987, 18(1): 45-47.[3]³ÂÒÀ¾ü, ÏÄ¶ûÄþ, ÍõÊçÈç, µÈ. ºÚÄ¾¶úÒø¶ú¶àÌÇºÍÒø¶úæß×Ó¶àÌÇµÄ½µÑªÖ¬×÷ÓÃ[J]. ÖÐ¹úÒ©¿Æ´óÑ§Ñ§±¨, 1989, 20(6): 344-347.[5]ÖÜ»ÛÆ¼, ÒóÏ¼, ¸ßºìÏ¼, µÈ. Òø¶ú¶àÌÇºÍºÚÄ¾¶ú¶àÌÇµÄ¿¹¸ÎÑ×ºÍ¿¹Í»±ä×÷ÓÃ[J]. ÖÐ¹úÒ©¿Æ´óÑ§Ñ§±¨, 1989, 20(1): 51-53.[6]ÆëµÂÉú, ÓÚÑ×ºþ. ºÚÄ¾¶ú¶àÌÇ¿¹Ö×Áö×÷ÓÃµÄÊµÑéÑÐ¾¿[J]. »ªÖÐÅ©Òµ´óÑ§Ñ§±¨, 1994, 13(2): 160-163.[7]Æë»ÛÁá, ÎºÉÜÔÆ, Íõ¼ÌÂ×, µÈ. Sevage ·¨È¥³ý°×¼°¶àÌÇÖÐµ°°×µÄÑÐ¾¿[J]. Ìì½ò»¯¹¤, 2000, (3): 20-21.表１黑木耳多糖的部分理化性质Ｔａｂｌｅ　１Ｐａｒｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　Ａｕｒｉｃｕｌａｒｉａａｕｒｉｃｕｌａ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ斐林试剂反应碘－碘化钾反应双缩脲反应三氯化铁反应ＡＰＥ１０．８０．６０．４０．２０管数ＯＤ０５１０１５２０２５３０３５４０图２ＡＰＥ　Ｉ的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　ＣＬ－４Ｂ柱层析图Ｆｉｇ．２Ｅｌｕｔｉｏｎ　ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　ＡＰＥ　Ｉ　ｏｎ　Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　ＣＬ－４Ｂ　ｃｏｌｕｍｎ１．５１．００．５０．０管数ＯＤ０５１０１５２０２５３０３５４０图３ＡＰＥ　ＩＩ的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　ＣＬ－４Ｂ柱层析图Ｆｉｇ．３Ｅｌｕｔｉｏｎ　ｐｒｏｆｉｌｅ　ｏｆ　ＡＰＥ　ＩＩ　ｏｎ　Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　ＣＬ－４Ｂ　ｃｏｌｕｍｎ波长（ｎｍ）Ａ２００２５０３００３５０４００１．００．０图４ＡＰＥ　Ｉ的紫外吸收光谱Ｆｉｇ．４Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＡＰＥ　Ｉ　ａｔ　２００　ｔｏ　４００　ｎｍ１．００．５０．０波长（ｎｍ）ＯＤ２００２５０３００３５０４００图５ＡＰＥ　ＩＩ的紫外吸收光谱Ｆｉｇ．５Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＡＰＥ　ＩＩ　ａｔ　２００　ｔｏ　４００　ｎｍ以蓝色葡聚糖测得凝胶柱的外水体积Ｖ０为１１ｍｌ测得ＡＰＥ１０４的洗脱体积为１５ｍｌ１０４为白色粉末为灰白色粉末２．０５８４ｘ＋５．６７８Ｒ２＝０．９９１１ＫａｖｌｇＭＷ６．０５．５５．０４．５４．０３．５００．２０．４０．６０．８１．０都溶于水乙酸乙酯ＡＰＥ双缩脲反应说明ＡＰＥ蛋白质及多酚类物质黑木耳多糖的酶法提取、纯化及性质研究作者：韩春然，唐娟，马永强， HAN Chun-ran， TANG Juan， MA Yong-qiang作者单位：哈尔滨商业大学食品工程学院,黑龙江哈尔滨,150076刊名：食品科学英文刊名：FOOD SCIENCE年，卷(期)：2007，28(2)被引用次数：3次1.杨庆尧食用菌生物学基础 19822.薛惟建.王淑如.陈琼华银耳多糖、银耳孢子多糖及黑木耳多糖的抗溃疡作用[期刊论文]-中国药科大学学报 1987(01)3.陈依军.夏尔宁.王淑如黑木耳、银耳及银耳孢子多糖延缓衰老作用[期刊论文]-现代应用药学 1989(02)4.申建和.陈琼华木耳多糖、银耳多糖和银耳孢子多糖的降血脂作用[期刊论文]-中国药科大学学报 1989(06)5.周慧萍.殷霞.高红霞银耳多糖和黑木耳多糖的抗肝炎和抗突变作用[期刊论文]-中国药科大学学报 1989(01)6.齐德生.于炎湖黑木耳多糖抗肿瘤作用的实验研究 1994(02)7.齐慧玲.魏绍云.王继伦Sevage法去除白及多糖中蛋白的研究 2000(03)1.会议论文张钟.高智谋.章战华野生黑木耳多糖的提取及特性研究2006本文在对野生黑木耳与栽培黑木耳的蛋白质、脂肪、总糖等营养成分及多糖含量分析比较的基础上,对野生黑木耳多糖的提取、纯化、理化性质、单糖组分等进行了研究,并对野生黑木耳多糖对实验性高脂血症小鼠的降脂作用进行了实验观察。

黑木耳多糖的提取及抗氧化活性的研究

黑木耳多糖的提取及抗氧化活性的研究
黑木耳是一种常见的食用菌，其富含多种营养成分，其中黑木耳多糖是一种非常重要的生物活性物质。

目前，越来越多的研究表明黑木耳多糖具有很多生物学功能，如抗氧化、抗肿瘤、降血压、降血脂等，因此其在食品、医药等领域具有广泛的应用前景。

本文主要介绍黑木耳多糖的提取方法及其抗氧化活性的研究。

首先，我们采用常规的水提醇沉法提取黑木耳多糖。

具体步骤如下：将黑木耳粉末加入水中，加热至80℃，保持一定时间，然后离心沉淀，用95%乙醇洗涤，最后得到黑木耳多糖。

通
过紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱等手段对黑木耳多糖进行了表征。

接下来，我们对黑木耳多糖的抗氧化活性进行了研究。

实验结果表明，黑木耳多糖具有很好的抗氧化活性。

我们采用DPPH
自由基清除法和还原力法对其进行了测定。

DPPH自由基清除
法是一种常用的抗氧化活性测定方法，该方法利用DPPH自
由基与抗氧化剂发生反应，从而测定其抗氧化能力。

还原力法是另一种常用的抗氧化活性测定方法，该方法利用还原剂还原Fe3+到Fe2+，从而测定其抗氧化能力。

实验结果表明，黑木
耳多糖在浓度为1mg/mL时，其DPPH自由基清除率和还原力分别为63.2%和0.32。

综上所述，黑木耳多糖具有很好的抗氧化活性，在食品、医药等领域具有广泛的应用前景。

本文所采用的提取方法简单易行，适用于黑木耳多糖的大规模生产。

未来的研究还可以进一步探究黑木耳多糖的其他生物学功能及其作用机制，为其在食品、医药等领域的应用提供更为可靠的理论依据。

黑木耳多糖的提取_纯化及降血脂作用的研究_韩春然

收稿日期：２００６－０２－０６基金项目：黑龙江省教育厅重大项目资助（Ｎｏ．１０５１１２００６）作者简介：韩春然，女，１９７０年出生，副教授
１材料和方法
１．１试验动物Ｗｉｓｔａｒ大鼠（２００±２０）ｇ，雄性，６个月，由黑
龙江省肿瘤医院动物室提供。１．２主要材料和仪器
将黑木耳粗多糖经Ｓｅｖａｇｅ法脱蛋白、Ｈ２Ｏ２法脱色后，上样于ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ５２（Ｃｌ－）（ "１０× ３００ｍｍ）层析柱，分别用ｐＨ７．５Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ＋０．２ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ＋０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ阶段洗脱，流速１０ｍＬ／ｈ，分部收集洗脱液（５ｍＬ／管），以蒽酮－硫酸法检测多糖含量。
组１６．３％，阳性对照组２３．６％，但各组体重间在同一时期没有显著差异（ｐ＜０．０５）。高脂血组动物体重的增加与对照组没有显著差异，这可能是由于试验动物年龄较大，从而造成高脂对照组进食量低于对照组，体重增加不明显。
表１黑木耳多糖对大鼠体重（ｇ）的影响
Ｔａｂｌｅ１ＥｆｆｅｃｔｏｆＡｕｒｉｃｕｌａｒｉａａｕｒｉｃｕｌａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｏｎｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔ（ｇ）ｏｆＷｉｓｔａｒｒａｔｓ
２５０．５７ ±２９．１９
２７１．２９ ±３９．３７
２８６．１４ ±４３．８１
注：表中数据为体重平均值±标准偏差。
２．３黑木耳（ＡＰＥＩ）多糖对大鼠血清ＴＧ、ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ的影响
血清总胆固醇和甘油三酯的含量是高脂血症的重要指标。低密度脂蛋白是将肝脏合成的胆固醇转运到全身组织的主要形式，血浆低密度脂蛋白水平与动脉粥样硬化呈明显的正相关，被认为

黑木耳多糖的提取方法及生物活性的研究进展

的最佳工艺，即黑木耳的实体干粉与水比为１：５０，９０ｃ《＝水浴中抽提３．５ｈ，后用７０％乙醇提取液醇析，此法所需浸提剂蒸馏水经济易取，但需多次浸提，相对其他方法提取率较低，费时、费工。魏红等研究
等提供参考依据，从而促进黑木耳的产业的发展。
热水浸取的最佳工艺条件为：液料比７０，１００℃提取
４ｈ，提取２次，ｐＨ为７．０，多糖提取率为３２．２４％，且粗多糖样品中多糖的含量为６４．２３％，该条件超微粉碎能够有效提高
ＡＰＰ的溶出率，在相同工艺条件下，黑木耳超微粉的多糖提取率均高于粗粉，并确定超微粉多糖的最佳提取条件。刘大纹等利用超微粉碎技术结合超声波
一
３０，ＡＰＰ提取率为１４．２８％。范金波等¨ 使用超声波辅助酶法提取ＡＰＰ，复合酶酶解时间６６ｍｉｎ、液料比５４、超声波功率１３０Ｗ、复合酶温度为５５ｃＩ＝、复合酶ｐＨ为５．０，ＡＰＰ得率达到２２．２５％，此法可以借鉴。
活性成分，近年来，有关黑木耳的研究主要集中在
ＡＰＰ上，并已证实ＡＰＰ具有降低血糖和血脂、抗凝
浸提法是一种常用的ＡＰＰ传统提取法。林敏
等 …在陈艳秋热水浸提法研究基础上，探索出ＡＰＰ

酶解法提高黑木耳多糖提取效率

酶解法提高黑木耳多糖提取效率酶解法提高黑木耳多糖提取效率一、黑木耳多糖概述黑木耳是一种常见且营养丰富的食用菌，在众多营养成分中，黑木耳多糖具有极高的研究价值。

黑木耳多糖属于大分子化合物，其结构复杂多样，包含多种单糖组成成分，如葡萄糖、甘露糖、木糖等，并且这些单糖通过不同的糖苷键连接形成复杂的多糖链。

这种独特的结构赋予了黑木耳多糖诸多优异的生理活性。

1.1 黑木耳多糖的生理活性黑木耳多糖具有多种显著的生理活性。

在免疫调节方面，它能够刺激机体的免疫系统，增强免疫细胞的活性，提高机体的抵抗力，有助于预防和对抗各类疾病。

抗氧化活性也是其重要特性之一，它可以有效清除体内过多的自由基，减轻自由基对细胞和组织的氧化损伤，从而延缓衰老过程，预防多种慢性疾病的发生。

此外，黑木耳多糖还具有降血脂、降血糖的作用，对于调节人体的血脂和血糖水平，预防心血管疾病和糖尿病等代谢性疾病具有重要意义。

它还在抗肿瘤、抗凝血、抗血栓以及保护肝脏等方面展现出潜在的药用价值，为开发新型药物和功能性食品提供了广阔的前景。

1.2 传统提取方法及其局限性传统的黑木耳多糖提取方法主要有水提法、碱提法等。

水提法是较为常用的方法之一，其原理是利用水作为溶剂，在一定温度和时间条件下，将黑木耳中的多糖溶解出来。

然而，水提法存在提取率相对较低的问题，往往需要较长的提取时间和较高的提取温度，这不仅消耗大量的能源，还可能导致多糖的部分降解，影响其活性。

碱提法虽然在一定程度上能够提高提取率，但碱性条件容易对多糖的结构造成破坏，改变其化学性质，进而影响其生理活性。

而且，碱提法后还需要进行复杂的中和处理步骤，增加了工艺的复杂性和成本。

这些传统提取方法的局限性促使人们寻求更高效、温和且能保持多糖活性的提取方法，酶解法应运而生。

二、酶解法的原理与优势酶解法是一种基于生物酶催化作用的提取技术，在黑木耳多糖提取中具有独特的原理和显著的优势。

2.1 酶的种类及作用机制用于黑木耳多糖提取的酶主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶等。

黑木耳多糖提取、功能及应用研究进展

黑木耳多糖提取、功能及应用研究进展孔祥辉;于德水;陈鹤;张介驰【摘要】黑木耳(Auricularia auricular)又名黑菜,桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸等,属真菌门担子菌亚门木耳科木耳属.木耳性平味甘,入胃、大肠经,具有养血益胃、润燥润肺、活血止血、润肠作用,主要活性成分是多糖,其抑制肿瘤、增强免疫力、抗氧化、止咳化痰及降血脂等功能已被大量研究证实.文章综述了黑木耳多糖提取、结构分析、功能及在食品、保健等领域的应用研究进展,有助于黑木耳多糖类产品开发应用.【期刊名称】《黑龙江科学》【年(卷),期】2018(009)022【总页数】2页(P12-13)【关键词】黑木耳多糖;提取纯化;结构分析;功能特性;产品开发;应用前景【作者】孔祥辉;于德水;陈鹤;张介驰【作者单位】黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院微生物研究所,哈尔滨150010;黑龙江省科学院高技术研究院,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】R284.2黑木耳(Auricularia auricular)又名黑菜、桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸等，属真菌门担子菌亚门木耳科木耳属。

木耳性平味甘，入胃、大肠经，具有养血益胃、润燥润肺、活血止血、润肠作用，主要活性成分是多糖，其抑制肿瘤、增强免疫力、抗氧化、止咳化痰及降血脂等功能已被大量研究证实[1,2]。

本文就木耳多糖提取方法、结构分析、功能特性及在食品、医疗、保健等领域的开发应用的最新研究进展进行综述，为黑木耳多糖的开发利用奠定基础。

1 黑木耳多糖提取、分离纯化和结构分析1.1 黑木耳多糖提取目前对黑木耳多糖的传统提取技术为热水浸提法[3]及稀碱浸提法[4]，工业化提取多集中在热水浸提法；现代提取技术有生物酶法[5]、超声波辅助提取法[6]、微波辅助提取法[7]、超微粉碎法[8]及利用多种方法协同复合提取法，如生物酶法联合微波提取法[9]、超声波联合复合酶法[10]等。

黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的制备、表征及其体外降胆固醇作用分析

黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的制备、表征及其体外降胆固醇作用分析黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的制备、表征及其体外降胆固醇作用分析摘要：本文采用化学还原法制备了黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子，并对其进行了表征。

通过体外实验发现，黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子可以显著降低人体内的胆固醇水平，具有良好的应用前景。

关键词：黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子；制备；表征；降胆固醇；应用前景1. 引言随着人们生活水平的提高，高胆固醇已成为严重威胁人类健康的一种疾病。

因此，开发一种有效降低胆固醇的方法具有重要意义。

近年来，纳米技术在医药领域得到广泛应用，纳米粒子具有比传统药物更好的生物利用度和生物活性，因此被广泛应用于药物制备中。

黑木耳多糖和麦角甾醇是两种常见的天然产物，具有较好的生物活性。

本文采用化学还原法制备了黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子，并对其进行了表征。

通过体外实验发现，黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子可以显著降低人体内的胆固醇水平，具有良好的应用前景。

2. 实验方法2.1 材料黑木耳多糖、麦角甾醇、氢氧化钠、氢氧化铜、硼氢化钠、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、乙醇。

2.2 制备黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子将1g黑木耳多糖溶解于200ml去离子水中，搅拌至完全溶解。

将1g麦角甾醇加入黑木耳多糖溶液中，搅拌至均匀混合。

将0.1mol/L氢氧化钠溶液滴加入混合液中，并继续搅拌30min。

将0.1mol/L氢氧化铜溶液滴加入混合液中，继续搅拌30min。

将5%硼氢化钠溶液滴加入混合液中，继续搅拌30min。

将聚乙烯吡咯烷酮（PVP）加入混合液中，并继续搅拌30min。

最后，将混合液用乙醇洗涤，离心分离得到黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子。

2.3 表征使用透射电镜（TEM）观察黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的形态和大小。

使用紫外-可见吸收光谱（UV-Vis）分析黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的吸收光谱。

使用动态光散射仪（DLS）分析黑木耳多糖-麦角甾醇纳米粒子的粒径和分布。

富硒黑木耳中硒多糖的提取工艺及营养成分测定分析报告

富硒黑木耳中硒多糖的提取工艺及营养成分测定分析报告【关键词】富硒黑木耳；硒多糖黑木耳是我国珍贵的药用和食用真菌，味道鲜美，营养丰富，近年来，有关黑木耳的较强的富硒能力，可通过菌丝体使无机硒吸收转化富集于子实体中，黑木耳硒多糖是一种免疫激活剂，能通过活化WK细胞阻止癌细胞增生，该产品具有具有增强免疫功能，抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗辐射，降血脂等多种活性，因此，进行黑木耳多糖的研制，对于开发高附加值食用菌系列产品，开拓国内外市场，振兴经济，具有重要经济效益，对防病治病，抗肿瘤研究，提高人们免疫功能，具有重大的社会效益。

本项研究是应用生物工程方法，以富硒黑木耳为原料，提取黑木耳硒多糖并确定最佳提取工艺的条件，并对其进行营养成分测定及生物学特性、毒理学、药理学等进行研究。

1富硒黑木耳中硒多糖的提取工艺1.1试验材料：原料：富硒黑木耳。

试剂：95%乙醇、氯仿、戊醇、正丁醇a--苯酚试剂。

仪器：冷冻干燥机、离心机。

1.2试验方法及设计：工艺流程：富硒黑木耳干燥品一粉碎（12目筛）一加水浸泡一加热一煎煮（三次）一过滤一浓缩一过滤一醇析一离心得沉淀物一加蒸馏水溶解一醇析一离心得沉淀物一除蛋白（seavg法）一醇析一减压干燥一硒多糖成品操作方法：将富硒黑木耳干燥品粉碎成粗粉，（过1 2目筛）加20倍量水，浸泡过夜，加热煎煮三次，每次2小时，过滤，滤液合并，浓缩至含黑木耳lg ／ml比例，静置过夜，过滤，加90%乙醇，使含醇量达60%，静置24小时以上，离心分离出沉淀物。

沉淀物加蒸馏水溶解（稍加热），浓度达lg／ml黑木耳，加90%乙醇使醇浓度达55%，同上离心处理，然后用sevag法除蛋白5--6次，（用氯仿、戊醇按4:1比例混合后，加至样品中振摇，样品中的蛋白质与混合液形成凝胶，可用离心法除去）。

沉淀物用乙醇反复洗涤，最后一次溶解后，加醇沉淀浓度达50%，分离沉淀物后，减压干燥，得硒多糖成品。

提取率22. 5%，用苯酚一硫酸法测定硒多糖中多糖含量为71. 86g%，用2、3——二氨基萘荧光分光比色法，测硒含量为18. 67ug/g。