实验设计(硕士)
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① 物品器材准备充分 有条不紊，避免随用随抓的坏习惯
② 无菌问题
.
③ 边做边思考 明白每一步所起作用 假如去掉此步，会有什么影响 假如改进此步，会有什么效果 技术改进与创新的基础
④ 加样要看清试剂 否则导致整个实验失败
.
⑤ 做上一步要想到下一步如何做 提前做好准备，避免手忙脚乱 如冰冻切片后固定，要提前配好固定液
3. 要有创新意识
学术思路创新
技术方法创新
研究有所发现和突破
4. 可行
理论—基础
实践—条件
.
三、实验设计三要素
1. 分组随机化——避免偏倚 2. 设置对照组
通过比较得结论，认识规律和特点 3. 实验的可重复性
样本量的问题 普遍规律：个别——一般
.
四、实验设计的内容
（一）课题研究设计 研究生开题报告、课题研究计划
.
（４）关于试剂配制问题
整个实验的关键
一旦试剂配制不当 会导致整个实验的失败 如：抗凝剂－凝血－有核细胞分离
.
① 选对试剂： 磷酸盐，Tris-HCl, 钠盐 是否含水，分子量是多少
② 浓度：原装试剂纯度与浓度 不一定是100% 如：盐酸，甲醛 稀释的倍数关系：抗体等
.
③ Ph值：适宜 AP-碱性（8.2） HRP－中源自文库（7.4） 多聚甲醛配制（>8.0）
实验设计
一、实验设计概论 （一）概念 （二）重要性及意义
二、实验设计原则 三、实验设计三要素 四、实验设计内容
（一）课题研究设计 （二）实验操作设计
1. 基本程序 2. 具体步骤和注意事项 五、计算机在科学研究中. 的应用
一、概论
（一）概念 实验设计: 是从事科学研究的设想和计划 是进行科学研究必须首先经过的步骤 也是能否达到研究目的的关键所在 包括课题研究设计和实验操作设计
.
（7）数据处理问题 要贯彻在研究工作的全过程
① 利用计算机进行分析处理 ② 在数据处理过程中，善于发现问题
反馈修正研究和设计中的不足 ③ 边实验边处理数据
不易遗漏和丢失数据 若待实验结束后再处理、整理数据往 往会发现重要数据. 的丢失
（8）在整个实验过程中 注意发现新现象和意想不到的结果
重大的发现往往在偶然中获得的 不应删改实验记录，一定要真实
（６）记录与归档 包括结果观察和实验方法两部分 应一并归档 边做边记录，避免归档时重整理
① 蓝黑或黑墨水记录 切忌用圆珠笔记录，否则，无法归档
② 打印原件归档
.
③ 实验记录的基本要求 真实、及时、准确、完整 谨防随意乱记和随意涂改 更不能伪造，编造数据
④ 实验记录的内容 实验的名称、目的、设计方案、时间 材料、方法、过程、观察指标 实验结果及分析等
④ 溶液： 水（最常用） 甲醇和乙醇等
.
⑤ 消毒、灭菌问题
是否要求无菌操作 高压灭菌
应用于能耐高温试剂，如盐溶液 过滤除菌
应用于不耐高温试剂，如蛋白制剂
.
⑥ 试剂储存问题 避免蛋白制剂的反复冻融 温度：室温，４℃，-20 ℃ -80 ℃，-180 ℃ 时间：有效期，半衰期
⑦ 过滤
.
（５）操作流程
.
五、计算机在科学研究中的应用
1. 查阅资料（internet) 2. 实验设计(words) 3. 实验记录（Excel, origin) 4. 建数据库（FoxPro, Access) 5. 统计分析(SPSS, SAS, origin) 6. 图表、投影和幻灯制作(PowerPoint) 7. 写文章(words) 8. 通讯交流(E-mail.)
⑥ 结果要妥善保管，及时记录 保密，丢失 阳性结果丧失 如荧光染色－及时照相，因结果不稳定
.
⑦ 根据需要设置对照实验 保证结果的科学性和可信性 1. 阴性对照 2. 阳性对照 3. 空白对照 4. 溶液对照：配试剂的溶液 5. 参比标准对照：用标准的药物做对照 6. 质控对照：控制实验稳定性对照
.
1. 选题方面 在充分调研了解某项目研究的目的和意 义、国内外研究动态的基础上， 立题 科学性、迫切性和实用性
.
2. 明确研究目标 从事科学研究要解决的问题，达到的目标
3. 确定研究内容 研究内容为研究的核心，内容为目标服务
4. 选定研究方法 据研究内容而定，方法为内容服务 不能为方法而方法
5. 解决关键技术 内容创新的关键，技术创新的主要内容。
（３）熟悉技术方法的有关知识 ① 原理： 明白为什么能用此方法解决问题 如PCR原理：DNA２n扩增 核酸分子杂交 探针标记 ② 步骤：不仅知道如何做 还知道为什么这么做 （how a. nd why)
.
③ 关键步骤：实验成败的关键 改建创新技术方法
④ 结果判定 阳性与阴性结果的判定与分析 真假阳性与意义 如何避免、克服和改进
.
6. 可行性分析 不仅要创新，而且可行，缺一不可 技术路线可行 研究方法可行
7. 工作基础 预实验 研究内容 研究方法
.
8. 条件保障 实验室建设 仪器设备情况
9. 课题组成员 人在科学研究中起决定作用 周密的实验，无人——无法进行
.
（二）实验操作设计
研究生一定要掌握 1. 基本程序 熟悉观察指标 确定研究方法 查阅 资料，熟悉该研究方法的各项内容 确 定实验流程 物品、器材准备 试剂 配制 实验操作程序实施 结果判定、 记录 数据处理
.
（二）重要性和意义 良好的设计是成功的一半 能否达到研究目标的关键所在 设计—按设计操作—结果—目标 蛋白检测技术：ELISA
Western Blot 免疫组化 放免检测 抗体芯片 免疫共沉淀
.
二、实验设计原则
1. 为目标服务
2. 简捷化的原则
用简单的方法能解决的问题不要用复杂的方法
以节省时间和经费
.
.
2. 具体步骤和注意事项
（1） 明确观察指标
了解课题研究的整体设计 关键是明确要解决的问题 明确研究内容 根据研究内容确定观察指标
.
（2） 选择合适的技术方法 简单、创新、可行
基因检测技术 PCR：扩增 杂交：膜杂交：Southern Blot Northern Blot 原位杂交 基因芯片：集成化 .
② 无菌问题
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③ 边做边思考 明白每一步所起作用 假如去掉此步，会有什么影响 假如改进此步，会有什么效果 技术改进与创新的基础
④ 加样要看清试剂 否则导致整个实验失败
.
⑤ 做上一步要想到下一步如何做 提前做好准备，避免手忙脚乱 如冰冻切片后固定，要提前配好固定液
3. 要有创新意识
学术思路创新
技术方法创新
研究有所发现和突破
4. 可行
理论—基础
实践—条件
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三、实验设计三要素
1. 分组随机化——避免偏倚 2. 设置对照组
通过比较得结论，认识规律和特点 3. 实验的可重复性
样本量的问题 普遍规律：个别——一般
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四、实验设计的内容
（一）课题研究设计 研究生开题报告、课题研究计划
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（４）关于试剂配制问题
整个实验的关键
一旦试剂配制不当 会导致整个实验的失败 如：抗凝剂－凝血－有核细胞分离
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① 选对试剂： 磷酸盐，Tris-HCl, 钠盐 是否含水，分子量是多少
② 浓度：原装试剂纯度与浓度 不一定是100% 如：盐酸，甲醛 稀释的倍数关系：抗体等
.
③ Ph值：适宜 AP-碱性（8.2） HRP－中源自文库（7.4） 多聚甲醛配制（>8.0）
实验设计
一、实验设计概论 （一）概念 （二）重要性及意义
二、实验设计原则 三、实验设计三要素 四、实验设计内容
（一）课题研究设计 （二）实验操作设计
1. 基本程序 2. 具体步骤和注意事项 五、计算机在科学研究中. 的应用
一、概论
（一）概念 实验设计: 是从事科学研究的设想和计划 是进行科学研究必须首先经过的步骤 也是能否达到研究目的的关键所在 包括课题研究设计和实验操作设计
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（7）数据处理问题 要贯彻在研究工作的全过程
① 利用计算机进行分析处理 ② 在数据处理过程中，善于发现问题
反馈修正研究和设计中的不足 ③ 边实验边处理数据
不易遗漏和丢失数据 若待实验结束后再处理、整理数据往 往会发现重要数据. 的丢失
（8）在整个实验过程中 注意发现新现象和意想不到的结果
重大的发现往往在偶然中获得的 不应删改实验记录，一定要真实
（６）记录与归档 包括结果观察和实验方法两部分 应一并归档 边做边记录，避免归档时重整理
① 蓝黑或黑墨水记录 切忌用圆珠笔记录，否则，无法归档
② 打印原件归档
.
③ 实验记录的基本要求 真实、及时、准确、完整 谨防随意乱记和随意涂改 更不能伪造，编造数据
④ 实验记录的内容 实验的名称、目的、设计方案、时间 材料、方法、过程、观察指标 实验结果及分析等
④ 溶液： 水（最常用） 甲醇和乙醇等
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⑤ 消毒、灭菌问题
是否要求无菌操作 高压灭菌
应用于能耐高温试剂，如盐溶液 过滤除菌
应用于不耐高温试剂，如蛋白制剂
.
⑥ 试剂储存问题 避免蛋白制剂的反复冻融 温度：室温，４℃，-20 ℃ -80 ℃，-180 ℃ 时间：有效期，半衰期
⑦ 过滤
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（５）操作流程
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五、计算机在科学研究中的应用
1. 查阅资料（internet) 2. 实验设计(words) 3. 实验记录（Excel, origin) 4. 建数据库（FoxPro, Access) 5. 统计分析(SPSS, SAS, origin) 6. 图表、投影和幻灯制作(PowerPoint) 7. 写文章(words) 8. 通讯交流(E-mail.)
⑥ 结果要妥善保管，及时记录 保密，丢失 阳性结果丧失 如荧光染色－及时照相，因结果不稳定
.
⑦ 根据需要设置对照实验 保证结果的科学性和可信性 1. 阴性对照 2. 阳性对照 3. 空白对照 4. 溶液对照：配试剂的溶液 5. 参比标准对照：用标准的药物做对照 6. 质控对照：控制实验稳定性对照
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1. 选题方面 在充分调研了解某项目研究的目的和意 义、国内外研究动态的基础上， 立题 科学性、迫切性和实用性
.
2. 明确研究目标 从事科学研究要解决的问题，达到的目标
3. 确定研究内容 研究内容为研究的核心，内容为目标服务
4. 选定研究方法 据研究内容而定，方法为内容服务 不能为方法而方法
5. 解决关键技术 内容创新的关键，技术创新的主要内容。
（３）熟悉技术方法的有关知识 ① 原理： 明白为什么能用此方法解决问题 如PCR原理：DNA２n扩增 核酸分子杂交 探针标记 ② 步骤：不仅知道如何做 还知道为什么这么做 （how a. nd why)
.
③ 关键步骤：实验成败的关键 改建创新技术方法
④ 结果判定 阳性与阴性结果的判定与分析 真假阳性与意义 如何避免、克服和改进
.
6. 可行性分析 不仅要创新，而且可行，缺一不可 技术路线可行 研究方法可行
7. 工作基础 预实验 研究内容 研究方法
.
8. 条件保障 实验室建设 仪器设备情况
9. 课题组成员 人在科学研究中起决定作用 周密的实验，无人——无法进行
.
（二）实验操作设计
研究生一定要掌握 1. 基本程序 熟悉观察指标 确定研究方法 查阅 资料，熟悉该研究方法的各项内容 确 定实验流程 物品、器材准备 试剂 配制 实验操作程序实施 结果判定、 记录 数据处理
.
（二）重要性和意义 良好的设计是成功的一半 能否达到研究目标的关键所在 设计—按设计操作—结果—目标 蛋白检测技术：ELISA
Western Blot 免疫组化 放免检测 抗体芯片 免疫共沉淀
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二、实验设计原则
1. 为目标服务
2. 简捷化的原则
用简单的方法能解决的问题不要用复杂的方法
以节省时间和经费
.
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2. 具体步骤和注意事项
（1） 明确观察指标
了解课题研究的整体设计 关键是明确要解决的问题 明确研究内容 根据研究内容确定观察指标
.
（2） 选择合适的技术方法 简单、创新、可行
基因检测技术 PCR：扩增 杂交：膜杂交：Southern Blot Northern Blot 原位杂交 基因芯片：集成化 .