三七提取方法
正交试验法优选三七提取工艺
R 0. 549 0. 079 0. 059
7. 698
提取率 () 99. 95 99. 97 100. 22 97. 67 98. 47 99. 64 92. 86 93. 74 93. 52
表 6
方 差分析表
方差来源 A B C
误差
方差平方和 0. 500 0. 010 0. 006 0. 01
7. 0 6. 6
3 3 1 7. 6 10
25
10
9. 0 9. 7
4 4 3 12 4. 2
40
4. 0
10. 0 6. 1
5 5 5 15 2. 6
45
2. 0
5. 0 3. 2
从均匀 设 计 结 果表 明 , 试验 号 为 3 的组 合 较 好 , 以 LHPC占 1. 5 , CM S-N a占 0. 5 为佳 。 3 小结与结论 3. 1 该制备工艺以 丸剂水 分百 分数 、崩解 时限 和成丸 难易 为考察指标 , 优选 制备 工艺 。 因 为软材 的含 水量少 , 则 难成 丸 , 软材 的含水量 高 , 则难干 燥 , 导 致丸剂 水分百 分数偏 大 ,
因素影响不 大 。 由提 取率 可知 当乙 醇浓 度为 60% ～ 75%, 结果差不多 。 3 生药的含量测定
取三七粉末约 2 g, 精密称 定 , 加 60%乙醇 25 m L, 加热
回流提取 3次 , 每次 1 h, 滤 过 , 滤 液置 100 m L 量瓶中 , 加适 量乙醇和水使含醇量为 50%, 摇匀 , 滤过 , 取续 滤液 , 作为供
10, 成 丸难以评分 , 以软材黏性好 , 易拉 条 、丸均 匀 , 丸 外观圆
整均匀 、色泽一致 为 10 分 , 其 它与 之相比 评分 , 选 择最 适宜
三七成分的提取分析
三七皂苷成分的提取分析，《药典》上采用的回流提取方法［3］，该方法存在周期较长、成分损失大、提取率不高等缺点［4］。
同回流法相比，超声提取法具有提取时间短、提取率高、提取成分完全、污染少及设备简单等特点［4］。
近年来超声提取技术的发展为药材样品的大批量快速提取分析提供了方便，适合于皂苷［5］、黄酮［6］、生物碱［7］等成分的提取。
关于三七皂苷成分提取的报道很多，但其多采用比色法测定三七总皂苷含量为指标进行提取工艺优化［8 ～10］，未见采用HPLC 同时测定三七中主要皂苷成分含量为指标，来优选三七的超声提取工艺。
本文采用HPLC 同时测定三七中4 种主要皂苷成分，比较了超声提取法和回流法对三七皂苷成分的提取效果，并采用正交试验，考察甲醇浓度、超声时间、溶剂体积对皂苷成分提取效果的影响，以确定最佳提取工艺，为三七药材样品大批量质检提供提取方法。
三七超微粉体物理特性及有效成分的提取
采用响应曲面优化得到三七多糖的最佳提取工艺：提取温度，提取时间液料比人分别测定不同粒度的三七粉在该工艺条件下的多糖提取率，粒度的逐渐减小多糖提取率呈现先增大后减小的趋势，从而得出球磨粉碎的三七微粉多糖提取率最大。
β-谷甾醇乙醇浓度90%，液料比12 1 m L/g，超声温度为55 ℃，超声时间19 min．在此工艺下，景天三七中β-谷甾醇提取率约为0．152% ．
采用超声波乙醇回流法从三七中提取黄酮类物质，对所提取的黄酮进行鉴别，并用分光光度法测定样品中总黄酮的含量为，其纯度和产率均较高。
超声提取三七总皂苷的工艺流程
超声提取三七总皂苷的工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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选择优质的三七根茎作为原料。
三七提取工艺流程
三七提取工艺流程
三七提取物的制作流程，其实也不复杂，基本上就是这几步：
第一步，选料。
我们得挑些优质的三七干燥根，还得把杂质去掉。
第二步，提取浓缩液。
把选好的三七放进提取设备里，开始提取。
第三步，浓缩浸膏。
把提取出来的液体合并在一起，然后在适当的温度下浓缩，直到它变得像膏状一样。
第四步，喷雾干燥。
把浓缩好的浸膏用喷雾干燥的方式处理，控制好温度和湿度，就可以得到干膏粉了。
第五步，粉碎过筛。
把干膏粉粉碎一下，再通过80目筛筛分，这样能得到更细的粉末。
第六步，混合。
把筛分好的细粉混合均匀，这样产品的品质就稳定了。
第七步，检验。
对混合好的产品进行质量检查，确保它符合标准。
第八步，包装。
把检查合格的产品包装好，方便保存和运输。
这整个过程下来，就得到了三七提取物。
当然，具体的操作和设备可能会根据实际情况有所调整，但大体流程就是这样。
一种从三七中提取三七总皂甙的方法[发明专利]
![一种从三七中提取三七总皂甙的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3be469af33687e21ae45a991.png)
专利名称：一种从三七中提取三七总皂甙的方法
专利类型：发明专利
发明人：钟德品,卢照凯,谢冬养,谷业新,盘秋梅,应启实,赵明东
申请号：CN201510639501.9
申请日：20150930
公开号：CN105125609A
公开日：
20151209
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种从三七中提取三七总皂甙的方法，包括以下步骤：1)取三七用60～
75v％乙醇提取，将提取液过滤，取滤液备用；2)往滤液中加入活性炭脱色，过滤，得到澄清液；3)将澄清液浓缩后，上硅胶柱层析，水洗柱至无色，然后用正己烷和氯仿的混合溶剂进行洗脱，收集正己烷和氯仿洗脱液；4)将正己烷和氯仿洗脱液再次上硅胶柱层析，用正己烷和甲醇的混合溶剂进行洗脱，收集正己烷和甲醇洗脱液，回收溶剂，干燥，即为三七总皂甙。
本方法可以大大提高三七总皂甙的收率和纯度，经检测，收率可达5.0％以上，纯度可达97.5％以上。
申请人：桂林三宝药业有限公司
地址：546600 广西壮族自治区桂林市荔浦篓园工业区158号
国籍：CN
代理机构：桂林市持衡专利商标事务所有限公司
代理人：石晓玲
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三七提取工艺优选
使用丙戊酸镁片 。
用丙戊酸 镁治疗双相障碍躁狂 ７ ６ ，显效率 为 ５ ．％， ８例 ９５
三七提取工艺优选
效率镁盐比钠盐 明显优 （ ＜Ｏ０ ） Ｐ ．５ 。
要好 ， 特别是显效率比丙戊酸钠高 。 肖波作了丙戊酸镁与丙戊
酸钠单盲交叉治疗部分性发作 的疗效％，丙戊酸 镁显效率比丙戊酸 ８２ ５ ３７ ０
钠 明显高 （ ＜Ｏ０ ） Ｐ ． ；总有效率丙戊酸镁组 ７ ．％，丙戊酸钠 ５ ４１
效率 ６ ．％，总有效率为 ８．％；比唐敦立总结 ２ ５４ ６ ７ Ｏ篇用丙戊 酸钠治疗癫痫 １９ １ ７例 ，显效率 ５ ．％，总有效率 ８ ． ７４ １ ％疗效 ７
用丙戊酸镁治疗偏头痛 ５９ １ 例控制 率为了 ６． 显效率 ２ ％， ５
以上 为 ８ ． 总有效率为 ９ ． 用丙戊酸钠治疗偏 头痛 ７５ １３ ％， ４８ ％； ５ 例， 控制率为 ２ ．％， ９２ 显效率 以上为 ６ ． 总有效率为 ８．％， １ ％， ３ ７５ 丙戊酸镁 治疗偏头痛 的疗效 比丙戊酸钠好， 特别是控制 率、 显
８３ 偏 头痛 疗效 的差 别 ．抗
效判 定，即显效 ：发作减少 ７ ％以上；有效：发作减少 ５ ％ ５ ０ 以上；效差：发作减少 ２ ～ ０ ５ ５ ％；无效：发作减少 ２ ％以下。 ５
从小剂量开始服药 （５ ｇ ｇ ） 逐渐增加剂量至控制癫痫发 １ｍ ／ ． ， ｋｄ
作或血药丙戊酸浓度超过 １ ∥ｍｌ ２ ，副作用不能耐受 。一般 成人 日剂量不超过 １ ｇ ． ，儿童最大剂量不超过 ４ ｍｇｋ ．，显 ８ Ｏ ／ｇ ｄ
正交法优化三七提取工艺的研究
正交法优化三七提取工艺的研究【摘要】目的优选三七的最佳提取工艺。
方法以三七皂苷R1和人参皂苷Rg1为指标进行正交试验，采用胶束毛细管电色谱法测定含量，优化影响三七提取工艺的条件。
结果 4倍量70%乙醇回流提取2次，每次1.5h，乙醚、正丁醇统一处理所得提取液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的含量最高。
结论试验结果可为三七提取工艺的确定提供实验依据，该优化工艺可为工业生产提供参考。
【关键词】三七；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；胶束毛细管电色谱Study on process for extraction of Panax notoginseng by orthogonal experiments【Abstract】 Objective To optimize the conditions for the extraction of Panax notoginseng.Methods Conditions for the extraction were studied by orthogonal experimental design as guided by the content of notoginsenoside R1 and ginsenosides Rg1 present in theextract.Results The optimum condition for the extraction ofP.notoginseng was to circumfuse the herb in 70% alcohol for 1.5h twice，then collect an amount corresponding to 4 times of the quantity ofP.notoginseng. The most content of ginsenosides Rg1 and notoginsenoside R1 in Panax notoginseng was determinate by MEKC after the collection was treated with ether and n-butanol.Conclusion The experimental results can be used for confirming process for extraction of Panax notoginseng and offering references for it’s industrial production.【Key words】 panax notoginseng； notoginsenoside R1；ginsenoside Rg1； capillary electrophoresis中药三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根，皂苷类是其主要药效成分。
三七茎叶皂苷提取工艺 固液萃取法
三七茎叶皂苷提取工艺固液萃取法1范围本文件规定了三七茎叶皂苷固液萃取法的提取流程、设施设备、原料质量、提取工艺、提取物质量、包装、贮存和运输等。
本文件适用于三七茎叶皂苷的提取。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB2762食品安全国家标准食品中污染物限量GB5749生活饮用水卫生标准GB14881食品安全国家标准食品生产通用卫生规范GB/T24395食品工业用吸附树脂GB31640食品安全国家标准食用酒精DB53/T055.5三七茎叶质量标准3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。
3.1三七茎叶Panax notoginseng stems and leaves五加科人参属植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen地上部分除花序外的干燥品。
3.2固液萃取solid-liquid extraction根据相似相溶原理，利用溶剂使固体物料中的可溶性物质溶解于其中再加以分离的提取方法。
4提取流程4.1提取各流程卫生应符合GB14881的规定。
4.2提取流程为：粉碎→提取→浓缩→分离纯化→干燥→包装→储藏。
5设施设备5.1提取浓缩设备温度可控，过滤精度200目以上，具备减压或常压浓缩功能。
5.2层析柱及树脂填料5.2.1大孔树脂层析柱常压，可控制流量。
5.2.2树脂填料大孔吸附树脂D101型，且符合下列要求：——交换容量≥4.2mmoL/g；——粒度0.3mm～1.25mm；——湿真密度1.05g/mL～1.09g/mL；——含水量50%～60%；——质量应符合GB/T24395的规定。
5.3干燥设备具备真空或喷雾干燥功能，温度可控。
6原料质量6.1三七茎叶符合DB53/T055.5的要求。
6.2乙醇应符合GB31640的规定。
三七有效成分的提取技术
radices pseudoginseng三七为临床常用中药, 具有广泛的药理作用, 因此, 三七的复方制剂品种甚多, 常以生粉入药, 存在服用量较大, 使用不便等不足。
为了探索合理的生产工艺, 尽可能提取有效成分, 笔者以三七所含人参皂苷Rg 1 为考查指标, 对三七的不同提取工艺进行了比较研究, 现报告如下。
1. 探头式超声提取三七有效成分的工艺研究目的采用单频探头式超声(25 kHz) 技术对三七有效成分进行提取。
方法选择乙醇体积分数、物料粒径、提取固液比、提取温度、提取时间5 个因素进行正交实验。
结果影响三七药材中人参皂苷Rg1 的提取率的因素依次为: 乙醇体积分数＞物料粒径＞固液比＞提取时间＞提取温度, 优化工艺参数为: 乙醇体积分数95%,物料粒径80 ~100 目, 固液比1 颐15, 提取时间40 min, 提取温度40 益。
在此条件下, 人参皂苷Rg1 的提取率是69.38%。
结论本研究将为三七工业化生产工艺参数的选择提供实验依据。
据文献[7] 报道, 三七中人参皂苷Rg1 回流提取优化条件为: 药材加体积分数60%乙醇浸泡1郾0 h, 回流提取2 次, 每次2. 0 h, 第1 次加醇量为药材的10 倍量, 第二次加醇量为药材的8 倍量。
在此条件下计算得人参皂苷Rg1 的提取率是60. 75% 。
本研究采用探头式超声提取三七中人参皂苷Rg1 的提取率达到69. 38% 。
对比文献[7] 结果可知, 相对乙醇回流提取, 探头式超声提取三七中人参皂苷Rg1 具有提取时间短、溶剂用量少、提取率高等优点。
2. 正交试验法研究三七提取工艺目的优选三七的最佳提取工艺。
方法: 采用正交试验法,以提取液中三七总皂苷含量为考察指标, 对影响三七提取工艺的因素进行了研究。
结果实验设计三因素中提取方式有显著影响。
结论三七的最佳提取工艺为用75%乙醇浸渍三七24 h后，以每公斤每分钟1〜3 mL 速度渗漉, 收集相当于三七10 倍量的渗漉液。
5种提取三七基因组 DNA 方法的比较
5种提取三七基因组 DNA 方法的比较白雪嵩;赵昶灵;陈中坚;翁晨;王文亚【摘要】用高盐低pH值法、尿素法、CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法、SDS （十二烷基磺酸钠）法、PVP（聚乙烯吡咯烷酮）法提取一年生三七叶的基因组DNA，用紫外分光光度法测定提取的DNA浓度，用琼脂糖凝胶电泳法测定提取的DNA质量。
结果表明：用 CTAB 法提取的基因组 DNA 含量、得率最高，分别为41．4343～43．2336μg/mL、114．8295～127．2824μg/g，且D260nm/D280 nm均在标准值范围内，D260 nm/D230 nm小于1．9，有RNA污染；SDS法、PVP法、尿素法也可以提取基因组DNA，但含量较低；高盐低pH值法提取的DNA浓度最低，电泳图基本看不到明显条带。
将这5种方法进行对比，最终确定CTAB法为三七基因组DNA的最佳提取方法。
【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】3页(P54-56)【关键词】三七;基因组DNA;提取方法;比较【作者】白雪嵩;赵昶灵;陈中坚;翁晨;王文亚【作者单位】云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明 650201;云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明650201;云南省文山市苗乡三七实业有限公司，云南文山 663000;云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明 650201;云南农业大学农学与生物技术学院，云南昆明 650201【正文语种】中文【中图分类】S567.23+6.01三七(Panax notoginseng)别称田七、金不换，为五加科人参属植物，《本草纲目拾遗》中记载：“人参补气第一，三七补血第一，味同而功亦等，故称人参三七，为中药之最珍贵者”，可见三七是一种重要而名贵的药材[1]，扬名中外的中成药“云南白药”和“片仔癀”即以三七为主要原料制成。
三七味甘、微苦，性温，归肝、肾经，具有止血、散瘀、消肿、止痛等功效。
一种三七挥发油提取方法[发明专利]
![一种三七挥发油提取方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/a865eeb0be23482fb5da4ca2.png)
专利名称：一种三七挥发油提取方法专利类型：发明专利
发明人：胡燕
申请号：CN201710001291.X
申请日：20170103
公开号：CN106753801A
公开日：
20170531
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种三七挥发油提取方法，包括以下步骤：（1）取新鲜三七，除去泥沙，洗净，用含有0.1‑0.4wt%明矾的水溶液浸泡1‑2小时，清水冲洗干净；（2）将步骤1洗净的三七切片，加入30‑60v%乙醇加热至沸腾并保持0.5‑3小时，收集馏分，注意补充乙醇溶液，合并馏分；（3）将步骤2的馏分，加入石油醚萃取，收集石油醚相，加入无水硫酸钠脱水，将石油醚相减压浓缩，得到淡黄色油脂，即为三七挥发油。
本发明的制备三七挥发油的方法利用乙醇溶液进行加热提取，提取得到的三七挥发油具有提取比率高，然后经过萃取处理，所得到的三七挥发油纯度好的特点，满足进一步的研究应用的要求。
申请人：成都景睿生物科技有限公司
地址：610213 四川省成都市天府新区华阳镇新街新疆石油花园1幢1层
国籍：CN
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煎煮法提取三七总皂苷的工艺流程
煎煮法提取三七总皂苷的工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!煎煮法提取三七总皂苷的工艺流程如下：1. 原料准备，选用优质的三七药材，去除杂质和非药用部分，洗净晾干备用。
不同净制工艺对三七质量的影响
不同净制工艺对三七质量的影响三七是一种常用的中药材，其具有很高的药用价值。
随着人们对药材质量的不断要求，越来越多的制药企业开始采用净制工艺来提高三七的质量。
不同的净制工艺对三七的质量有着不同的影响，下面将针对几种常见的净制工艺进行分析。
一、清水煮制法清水煮制法是一种比较传统的净制工艺，其基本原理就是用清水将三七浸泡一段时间后，再用清水煮制。
这种净制工艺可以有效地去除三七中的杂质，但同时也会降低三七中的一些有效成分含量，如总黄酮、三七皂苷等。
而且清水煮制法还存在一定的安全隐患，如果清水未煮沸就将三七浸泡在其中，就有可能导致三七中残留有微生物等有害物质。
二、蒸馏法蒸馏法是一种较为先进的净制工艺，其基本原理是将三七放在蒸馏器中进行蒸馏，用蒸汽将三七中的有机物和微生物等有害物质溶解出来，从而达到去除杂质的目的。
相对于清水煮制法来说，蒸馏法对三七本身的化学成分影响较小，不会削减三七中的有效成分含量。
而且蒸馏法能够有效地去除三七中的有害物质，也避免了清水煮制法中的安全隐患。
然而，蒸馏法也存在一定的技术难度和设备投入成本高的问题。
三、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种新型的净制工艺，其基本原理是将三七放入超临界流体环境中进行萃取，利用该流体对三七中的有效成分具有较强的溶解能力，从而达到提取和净化的目的。
相对于传统的净制工艺来说，超临界流体萃取法能够更好地保持三七中的有效成分含量，同时去除三七中的杂质和有害物质，具有更好的安全性和疗效。
但是，超临界流体萃取法的实施过程较为复杂，需要一定的技术水平和设备条件。
四、微波辅助提取法微波辅助提取法是一种新兴的净制工艺，其基本原理是将三七放入微波辐射下，利用微波辐射对三七中的有效成分进行加速溶解，从而提高提取效率和产品品质。
这种净制工艺具有操作简便、效率高、成本低等优点，能够实现对三七中有效成分的快速提取和净化。
但是，微波辅助提取法还处于发展初期，其安全性和稳定性需要更长时间的验证。
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2方法与结果[ 2～4] 2. 1超声提取法正交试验、验证和提取方法
超声波提取方法称取三七粗粉20 g ,经正交选择,用75%的乙醇超声提取3次,每次2 h 。
提取后回收乙醇,剩余提取液用蒸馏水稀释,使提取液中乙醇含量不超过0. 5%,再用中空纤维膜过滤器进行超滤,获取2 000分子量以下的超滤液( 三七皂苷的分子量在2 000以下) ,浓缩,上D 101大孔吸附树脂柱,用水洗至流出液无色,改用75%的乙醇洗脱,收集75%的乙醇洗脱液[ 6, 7] ,减压浓缩,真空干燥得三七总提取物( 测总皂苷、人参皂苷Rb 1、Rg 1 的含量)
水煎煮方法称取三七粗粉20 g ,选择煎煮时间、用水倍量、煎煮次数三因素,应用L 9( 33) 正交试验表实施方案,优选出最佳提取工艺: 10倍量的水煎煮2次,每次1 h 。
水提取液用中空纤维膜过滤器进行超滤,以下按2. 1. 3项获取2 000分子量以下的超滤液开始同法操作。
乙醇回流提取方法称取三七粗粉20 g ,选择回流时间、乙醇浓度、回流提取次数三因素,应用L 9 ( 33) 正交试验表实施方案,优选出最佳提取工艺: 75%的乙醇回流提取2次,每次1 h 。
提取后回收乙醇,剩余提取液用蒸馏水稀释,使乙醇含量不超过0. 5%, 再用中空纤维膜过滤器进行超滤,以下按2. 1. 3项获取2 000分子量以下的超滤液开始同法操作。
提取工艺的得率比较
用上述三种提取方法, 即水煎煮法、乙醇回流法、超声提取法三法的最佳工艺提取。
三七有效成分不同提取方法结果比较
提取方法三七总皂苷提取率(%)占总皂苷含量(%) 人参皂苷Rg 1 人参皂苷Rb 1权重值
水煎煮法83. 29 10. 74 44. 12 88. 3
乙醇回流法80. 07 14. 08 55. 18 89. 47
超声提取法101. 12 16. 43 59. 59 97. 24
3含量测定3. 1三七总皂苷的含量测定3. 1. 1对照品溶液的制备精密称取三七总皂苷对照品5 mg ,用无水乙醇定容至50 mL容量瓶中, 做对照品溶液。
3. 1. 2供试品溶液的制备[9] 称取样品适量,用无水乙醇定容在10 mL容量瓶中,用0. 45 μm滤膜过滤,弃去初滤液,选择续滤液。
3. 1. 3线性关系考察精密称取对照品溶液0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0、2. 0、4. 0 μL ,分别注入具塞试管中,去塞,水浴蒸去乙醇,每只试管分别精密加入新配制的5%香草醛冰醋酸溶液0. 2 mL , 高氯酸0. 8 mL ,摇匀,置60 ℃水浴中加热15 mi n , 取出,用冷水迅速冷却,加冰醋酸溶液5 mL ,摇匀, 在560 nm处测吸收度A,以吸收度A为纵坐标(Y) ,浓度C为横坐标(X) ,绘制标准曲线,得回归方程, Y=0. 013 66X+0. 007 4, r=0. 999 0, 结果表明,三七总皂苷在3. 3 ～66. 67 μg /mL内线性关系良好。
3. 1. 4稳定性试验取供试品溶液0. 1 mL ,按3. 1. 3项中从加5%香草醛冰醋酸比色法显色后操作,在560 n m 处每隔一段时间测定吸收度 A ,在显色10 mi n后A趋于稳定,时间约为1 h内无变化,因此采用5%香草醛冰醋酸比色法显色,测定时间应在 1 h内完成。
结果: 1 h内稳定,与文献报道一致。
3. 1. 5回收率试验取已知总皂苷含量的样品9 份,精密称定,分别准确加入1. 2、1. 5、1. 8 mL对照品溶液( 0. 585 mg /mL) ,照3. 1. 3项下方法作加样回收试验, 分别测定其含量, 得平均回收率为99. 18%, RS D=0. 92%。
3. 2人参皂苷Rg 1 的测定 3. 2. 1色谱条件色谱柱:Ag i l e n tT c -C 18 ( 5 μm , 4. 6 mm×250 mm); 检测器为紫外检测器; 流动
相: 乙腈-水( 40：60); 流速: 0. 6 mL /mi n ; 检测波长: 203 n m; 柱温: 室温; 进样量: 20 μL 。
3. 2. 2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg 1 标准品9. 01 mg ,用水定容至100 mL容量瓶中, 作为对照品溶液。
3. 2. 3供试品溶液的制备精密称取三七提取物
4. 13 mg ,用水定容至10 mL容量瓶中,用0. 45
μm滤膜过滤,弃去初滤液,备用续滤液,作为供试品溶液。
3. 2. 4线性关系考察取对照品溶液适量, 用0. 45 μm的微孔滤膜过滤分别量取2、4、8、12、16、20 mL ,置25 mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度, 摇匀,取20 μL进样,以浓度C为横坐标(X) ,峰面积值为纵坐标(Y) 进行线性回归,得回归方程为Y =5 516. 018 9X+28 804. 693 2, r=0. 999 9,结果表明,人参皂苷Rg 1 在0. 180 2 ～1. 802 mg范围内线性关系良好。
3. 2. 5精密度试验取3. 2. 2项下溶液于测定条件下进样20 μL ,重复进样6次,色谱峰RS D= 1. 64%。
3. 2. 6稳定性试验取3. 2. 3项下溶液分别于0、2、4、6、8、12、24 h ,进样20 μL ,色谱峰的RS D为1. 54%,表明样品在24 h内稳定。
3. 2. 7重现性试验取5份三七总皂苷粗品,按3. 2. 3项供试品溶液的制备方法制备,分别依法测定,得RS D为1. 66%,表明本试验重现性良好。
3. 2. 8回收率试验称取同一已知含量样品9份, 分3组,每组分别准确加入1. 2、1. 5、1. 8 mL对照品溶液( 0. 554 mg /mL) ,按3. 2. 4项下方法制备加样回收试样, 分别测定其含量, 得平均回收率为98. 6%, RSD=1. 34%。
3. 3人参皂苷Rb 1 的含量测定3. 3. 1色谱条件色谱柱:Ag i l e n tTc C 18( 5 μm , 4. 6 mm×250 mm); 检测器为紫外检测器; 流动相: 乙腈-水( 40：60); 流速: 0. 6 mL /mi n; 检测波长: 203 n m; 柱温: 室温; 进样量: 20 μL 。
3. 3. 2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rb 1 标准品13. 25 mg ,用水定容于100 mL容量瓶中,作为对照品溶液。
3. 3. 3供试品溶液的制备精密称取三七提取物3.
16 mg ,用水定容至10 mL容量瓶中,用0. 45 μm滤膜过滤,弃去初滤液,备用续滤液,作为供试品溶液。
3. 3. 4线性关系考察取对照品溶液适量用0. 45 μm微孔滤膜过滤,分别量取2、3、5、7、10 mL ,置25 mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,取20 μL进样,以浓度C 为横坐标(X) ,峰面积值为纵坐标(Y)进行线性回归, 得回归方程为Y= 274 461. 77X-146 545. 33, r=0. 999 8, 结果表明,人参皂苷Rb 1 在1. 06 ～5. 31 μg范围内线性关系良好。
3. 3. 5精密度试验精密称取3. 3. 2项下的对照品溶液,重复进样6次,色谱峰的RSD为1. 43%。
207药学实践杂志2009年第27卷第3期
3. 3. 6稳定性试验取3. 3. 3项下供试品溶液,分别于0、2、4、6、8、12、24 h 进样, 测得RS D为1. 21%,表明样品在24 h内稳定。
3. 3. 7重现性试验用同种方法提取5份三七总皂苷粗品,按3. 3. 3项供试品溶液的制备方法制备, 分别依法测定,得RS D= 0. 48%,说明本试验重现性良好。
3. 3. 8回收率试验称取同一已知含量样品9份, 分三组,每组分别准确加入1. 2、1. 5、1. 8 mL对照品溶液( 0. 598 mg /mL) ,按3. 3. 4项下方法制备加样回收试样, 分别测定其含量, 得平均回收率为99. 3%, RS D=1. 06%。
4讨论
4. 1将样品上大孔吸附树脂后,以水洗脱至无色澄清,先后用30%、50%、70%、95%的乙醇洗脱,并分别收集洗脱液,制成供试品溶液,发现75%乙醇的洗脱液色谱峰的强度最大, 故选择水洗后, 再用75%的乙醇洗脱。
4. 2三七总皂苷的含量采用分光光度法进行测定时,应注意控制加热温度和加热时间,当温度高于60 ℃长时间加热时,糖类吸收干扰显著,总皂苷的测定以60 ℃,加热15 mi n为宜,三七总皂苷显色在1 h内稳定,故显色后均要求1 h 内测定。
4. 3本研究认为超声提取法最好:①方法简捷,只需6 h即可完成全部提取过程。
②提取率高,总皂苷提取率可达到99%以上,杂质减少,剂量减小,使用提取物体积最小,故本试验方法的提取物适于做现代制剂如缓释片、速崩片等。