5-5挥发油类制剂的分析

气相色谱法 闪蒸-毛细管气相色谱法-----直接分析 裂解-毛细管气相色谱法-----直接分析 气相色谱-质谱联用 气相色谱-红外光谱联用 例：六应丸中丁香酚的测定----毛细管气相色谱法 柴胡注射液中挥发油成分测定---常规柱气相色 谱法 小儿解表冲剂中挥发油成分的测定----气相色谱法
(二)薄层色谱扫描法 用于含量较高的含挥发油中药制剂 的分析 例：丁香半夏丸中丁香酚的测定 （三）蒸馏法
定性分析
（三）气相色谱法 是挥发油成分微量分离和鉴定较理想的方法 例：复方柴胡注射液
五、挥发油成分的定量分析
（一）气相色谱法 色谱柱：填充柱、毛细管柱（分离效果好） 色谱柱：填充柱、毛细管柱（分离效果好） 固定相： 固定相：需注意极性和最高使用温度 检测器：热导检测器、氢焰离子检测器（FID） 检测器：热导检测器、氢焰离子检测器（FID） 氢气、氮气、 载 气：氢气、氮气、氦气 柱温的选择： 必须高于固定液的熔点， 柱温的选择： 必须高于固定液的熔点，不能高于固定液 的最高使用温度。 的最高使用温度。 柱长和内径：柱长2 m,内径 内径3 柱长和内径：柱长2-6m,内径3-6mm, 分离度与柱长的平方根成正比 进样速度和进样量： 秒以内， 进样速度和进样量：1秒以内，
分离方法： 分离方法：
化学分离法： 化学分离法：利用各组分的结构或官能团进 行分离。 行分离。 碱性成分、酸性成分、醇类成分、 碱性成分、酸性成分、醇类成分、醛酮成分 其他成分： 其他成分： 不饱和萜：形成结晶性加成物分离； 不饱和萜：形成结晶性加成物分离； 奥类和醚类：浓酸提取，加水析出分离； 奥类和醚类：浓酸提取，加水析出分离； 酯类：精密分馏和色谱分离。 酯类：精密分馏和色谱分离。
薄荷醇(脑)： 白色或块状或针状结晶，bp212℃,α5º。微溶于水 ，易溶于乙醇、乙醚、氯 仿等有机溶剂，挥发油的主要成分(5085%)，具有驱风、矫味、消炎和局部止 痛作用。 薄荷醇的含量决定了薄荷油的质量优劣
测定中药制剂中薄荷挥发油成分的方法主 要是气相色谱 要是气相色谱
例：银翘解毒片、四季润喉片中薄荷脑的 银翘解毒片、 测定 救心油中薄荷脑、 救心油中薄荷脑、樟脑的测定 ----气相色谱 付利叶变换红外联用 气相色谱-付利叶变换红外联用 气相色谱
六、应用实例
1.含薄荷中药制剂的分析 薄荷挥发油:全草含量1%以上 薄荷挥发油:全草含量1%以上 1% 性状：无色或淡黄色液体，有薄荷香气， 性状：无色或淡黄色液体，有薄荷香气， 溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂； 溶于乙醇、乙醚、氯仿等有机溶剂； 物理常数：bp:204α： 18-24º 物理常数：bp:204-211℃ α：-18-24 化学组成：单萜及含氧衍生物、 化学组成：单萜及含氧衍生物、非萜类化合物
显色剂：
茴香醛-浓硫酸---105℃烤，显不同颜色 茴香醛-浓硫酸---105℃ ---105 2%高锰酸钾----黄色斑点 高锰酸钾---2%高锰酸钾----黄色斑点 荧光溴试剂-----紫外灯下黄色荧光（乙烯基） -----紫外灯下黄色荧光 荧光溴试剂-----紫外灯下黄色荧光（乙烯基） 碘化钾-冰乙酸-淀粉----蓝色斑点（过氧化物） ----蓝色斑点 碘化钾-冰乙酸-淀粉----蓝色斑点（过氧化物） 对二氨基苯甲醛试剂--- 奥类室温显深兰色， 对二氨基苯甲醛试剂--- 奥类室温显深兰色，其 前体80 80℃ 前体80℃烤显兰色 异羟圬酸铁试-----漆红色斑点（酯和内酯） -----漆红色斑点 异羟圬酸铁试-----漆红色斑点（酯和内酯） 二硝基苯肼试剂-----荧光斑点（ -----荧光斑点 2，4-二硝基苯肼试剂-----荧光斑点（醛、酮）
显色剂：
0.3%邻联二茴香胺-冰醋酸-----呈各色（醛、酮） 0.3%邻联二茴香胺-冰醋酸-----呈各色（ 邻联二茴香胺 -----呈各色 三氯化铁试剂-----绿色或蓝色斑点（ -----绿色或蓝色斑点 三氯化铁试剂-----绿色或蓝色斑点（酸） 氨基安替比林-铁氰化钾试剂-----橙红色至深红 4-氨基安替比林-铁氰化钾试剂---橙红色至深红 色斑点（ 色斑点（酸） 硝酸铈铵试剂-----黄色背景下棕色斑点（ -----黄色背景下棕色斑点 硝酸铈铵试剂-----黄色背景下棕色斑点（醇） 钒酸铵（ 羟基喹啉试剂---------蓝灰色背景 钒酸铵（钠）-8-羟基喹啉试剂-----蓝灰色背景 下淡红色（ 下淡红色（醇） 溴钾酚绿试剂-----黄色斑点（有机酸） -----黄色斑点 溴钾酚绿试剂-----黄色斑点（有机酸）
2. 含丁香中药制制的分析
丁香：含挥发油14%-21%，主要成分丁香酚， 丁香：含挥发油14%-21%，主要成分丁香酚， 14% 丁香油含丁香酚85%~90% 丁香油含丁香酚85%~90% 定量分析方法： 定量分析方法： 气相色谱法-------如 气相色谱法----如：牙痛水中丁香酚的测定 薄层色谱扫描法-------如 薄层色谱扫描法----如：丁香半夏丸中丁香酚的 测定 紫外分光光度法---------康齿宁乳膏中丁香酚的测 紫外分光光度法-----康齿宁乳膏中丁香酚的测 定
四、挥发油类成分的定性分析
（一）化学反应法 （二）薄层色谱法 （三）气相色谱法
Fra Baidu bibliotek
定性分析
(一)化学反应法 鉴别： 鉴别：根据含挥发油各组分的结构和功能基的 化学性质 与氢卤酸加成、 含双键 ---- 与氢卤酸加成、高锰酸钾退色 与羟胺反应成羟腭酸； 含内酯 ---- 与羟胺反应成羟腭酸；与三氯 化铁呈现颜色 例：二妙丸中苍术的鉴别 丸剂粉末2 乙醚10 丸剂粉末2g ---- 乙醚10 ml ---- 振 ----取上清 ml----加高锰酸钾2 取上清2 ----加高锰酸钾 摇10 min ----取上清2ml----加高锰酸钾2 ----振摇 min---振摇1 ----红色消失 滴----振摇1min----红色消失
定量方法：归一化法、内标法、 定量方法：归一化法、内标法、外标法 影响定量准确的因素： 影响定量准确的因素： A.样品的稳定性和代表性 B.进样系统的影响 C.色谱柱系统的影响 D.检测系统及操作条件的影响 预处理：原料药材----水蒸气蒸馏—有机 预处理： 原料药材----水蒸气蒸馏— ---- 水蒸气蒸馏 溶剂提取— 溶剂提取—硅胶层析 中药制剂-------多用有机溶剂提取 中药制剂----多用有机溶剂提取
（二）薄层色谱法
色谱条件----依据极性大小分离 色谱条件----依据极性大小分离 ---挥发油类含各化合物极性大小： 挥发油类含各化合物极性大小： 烃（萜）< 醚 < 酯 < 醛、酮 < 醇、酚 < 酸 薄层板： 薄层板：常用硅胶或氧化铝 展开剂：常用正己烷和石油醚-----分离极性小挥发油 展开剂：常用正己烷和石油醚---分离极性小挥发油 单萜烃、倍半萜） （如：单萜烃、倍半萜） 正己烷和石油醚加入适量乙酸乙酯-----分离极性较 正己烷和石油醚加入适量乙酸乙酯---分离极性较 大的挥发油 其他： 乙醚、四氯化碳、氯仿、 其他：苯、乙醚、四氯化碳、氯仿、乙酸乙酯
无色或淡黄色透明油状液体， 无色或淡黄色透明油状液体，具有特殊颜 色。 大多具有芳香气味， 大多具有芳香气味，主要来源于芳香族的 含氧物。 含氧物。 有挥发性，能随水蒸气蒸馏出来。 有挥发性，能随水蒸气蒸馏出来。 有固定的物理常数，用于质量鉴定。 有固定的物理常数，用于质量鉴定。 bp:70α：+97-117º bp:70-300℃ α：+97-117
第五节 挥发性成分的分析
概述 挥发油的组成 挥发油的理化性质 挥发油的提取分离 挥发油制剂的定性鉴别 挥发油制剂的含量测定 挥发性成分分析实例
一、概述
挥发油（ oil） 挥发油（volatile oil） ：存在于植物 体中的一类具有挥发性、芳香气味、 体中的一类具有挥发性、芳香气味、能 随水蒸气蒸馏出来的油状液体的总称， 随水蒸气蒸馏出来的油状液体的总称， 也称( oil)精油 精油。 也称(essential oil)精油。 分布： 分布：极为广泛 生理活性： 止咳、 平喘、 发汗、 解表、 生理活性 ： 止咳 、 平喘 、 发汗 、 解表 、 祛痰、驱风、镇痛、杀虫、抑菌、 祛痰、驱风、镇痛、杀虫、抑菌、矫味
二、挥发油的理化性质
溶解性：难溶于水，易溶于有机溶剂； 溶解性：难溶于水，易溶于有机溶剂； 溶于高浓度的乙 醇，当温度降低到一定 程度有固体( 析出； 程度有固体(脑)析出； 滤去“ 后为“脱脑油” 素油” 滤去“脑”后为“脱脑油”或“素油” 空气、光线会使之氧化变质， 空气、光线会使之氧化变质，应棕色瓶 密闭低温保存。 密闭低温保存。
挥发油的提取和分离： 三、挥发油的提取和分离：
提取方法： 提取方法：
水蒸气蒸馏法： 水蒸气蒸馏法：通法 溶剂提取法： 溶剂提取法：通法 压榨法：适用于质地软、含量高的药材。 压榨法：适用于质地软、含量高的药材。 吸收法：适用于对热敏感的贵重挥发油。 吸收法：适用于对热敏感的贵重挥发油。 破刺法：适用于质地软、含量高的药材。 破刺法：适用于质地软、含量高的药材。 超临界流体萃取法：适用于对热不稳定、 超临界流体萃取法：适用于对热不稳定、 易受热分解的挥发油。 易受热分解的挥发油。
例：通宣理肺丸
样品液制备： 丸剪碎----研细---挥发油测定器--样品液制备：2丸剪碎----研细---挥发油测定器------研细---挥发油测定器 加水、石油醚----加热回流2 ----加热回流 加水、石油醚----加热回流2h ---放冷----醚层 放冷----醚层---放冷----醚层-样品液 紫苏叶细粉0.7 -----上法提取 0.7g 对照液制备 :紫苏叶细粉0.7g-----上法提取 ----对照品液 ----对照品液 样品液、对照品液各10ul---硅胶G 10ul---硅胶 薄层鉴别 : 样品液、对照品液各10ul---硅胶G板点 ---石油醚 乙酸乙酯展开---石油醚样 ---石油醚-乙酸乙酯展开---茴香醛105 105℃ -----相同颜色斑点 茴香醛105℃烘5min -----相同颜色斑点
3.含冰片中药制剂的分析 3.含冰片中药制剂的分析
冰片：龙脑，溶于醇、氯仿、乙醚，有升华性 冰片：龙脑，溶于醇、氯仿、乙醚， 来源： 来源： 梅片-----又称梅花脑、 梅花冰片， -----又称梅花脑 梅片-----又称梅花脑、 梅花冰片，龙脑香科 龙脑香的树干碎片 蒸馏冷却所得结晶 艾片----艾片----- 菊科 艾纳香的叶 蒸馏冷却所得 结晶称为艾粉， 结晶称为艾粉，精制 后为艾片 冰片----- 合成冰片， 冰片----- 合成冰片，松节油为原料合 syntheticum药典收载 药典收载） 成（Borneolum syntheticum药典收载）
组成
萜类化合物：单萜、倍半萜及含氧衍生物
O
HOC
O
O
OH
H OH
O
樟脑 (刺激剂,强心剂) 刺 强
π -氧化樟脑 氧
对-氧化樟脑 氧
龙脑 (发汗,兴奋,解痉) 发 兴 解
非萜类化合物： 芳香族：多数为C6-C3，如桂皮醛等 脂肪族：如甲基正壬基甲酮等 其他：如挥发性生物碱川芎嗪等
二、挥发油的理化性质
分离方法： 分离方法：
冷冻法：低温（0℃或-20℃）析出固体。 冷冻法：低温（0℃或 20℃）析出固体。 分馏法：利用沸点差异进行分离。 分馏法：利用沸点差异进行分离。液体混合物沸点相差 100℃以上， 在100℃以上，可将溶液重复蒸馏多次即可达到分离的 目的；沸点相差在25 以下，则需采用分馏柱， 25℃ 目的；沸点相差在25℃以下，则需采用分馏柱，沸点 相差越小，则需要的分馏装置越精细。 相差越小，则需要的分馏装置越精细。 单萜（双键） 三烯>二烯> 单萜（双键）：三烯>二烯>一烯 含氧单萜（官能团）： ）：醚 含氧单萜（官能团）：醚<酮<醛<醇、酯<酸 沸点：单萜烯,150 200℃,35-70℃ 1333.2Pa ,150℃,35 沸点：单萜烯,150-200℃,35-70℃/1333.2Pa 单萜含氧物,200 230℃,70 100℃/1333.2Pa ,200℃,70单萜含氧物,200-230℃,70-100℃/1333.2Pa 倍半萜,230 300℃,80-110℃/1333.2 ,230℃,80 /1333.2Pa 倍半萜,230-300℃,80-110℃/1333.2Pa