沼泽红假单胞菌
沼泽红假单胞菌
沼泽红假单胞菌的生物学特性与研究进展摘要：沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有原始光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物，是一类以光为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。
在生物学分类中，属于真细菌纲、红螺菌目、红螺菌科、红假单胞菌属。
当前广泛应用于以下几个方面：①高浓度工农业有机废水的处理及资源化；②水质净化剂，水产养殖的水质调控及促进健康生长；③高营养饲料添加剂；④农业生产中的高效活性菌肥。
本文针对沼泽红假单胞菌的生物学特性、发酵条件或培养的情况（培养基、培养条件）、生化特征、生理特性、应用及研究进展进行先关阐述。
关键字：光合细菌沼泽红假单胞菌生物学特性生理生化实验研究进展光合细菌：光合细菌(PhotosyntheticBacteria，简称PSB)是自然界最广泛存在的比较古老的、能进行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生物的总称，具有原始光能合成体系，能在厌氧条件下进行不放氧的光合作用，是水体兼性厌氧层中主要的初级生产者，并在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用。
它包括有红螺菌科(Phodospirillaceae)、着色菌科(Chromati-aceae)、绿杆菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chlo-roflexaceae)4科。
光合细菌广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥、土壤、极地或温泉(包括高热水体)以及高盐、高有机质含量等不同生态环境中，它可以光能异养、化能异养、光能自养方式生活，存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型，能利用多种基质。
光合细菌细胞内含有细菌色素(如类胡萝卜素、菌绿素)、卟啉类化合物、泛醌等多种有效的自由基清除物质，可保护细胞膜、DN等自身细胞的重要组份不受损伤。
光合细菌具有多重代谢方式，尤其在对高浓度有机废水的净化处理中，表现出负荷低、效率高及投资少的优点；在禽畜养殖方面，光合细菌可作为一种饲料蛋白补充，还可以起到益生菌的作用。
频道微课沼泽红假单胞菌扩培技术一手掌握，以后可以考虑自己来
频道微课沼泽红假单胞菌扩培技术一手掌握，以后可以考虑自己来o文/图中国水产频道6月16日晚19:30湖北生物科技职业学院周鑫军老师受中国水产频道小编的邀请在直播间跟大家进行了《沼泽红假单胞菌扩培及应用》的交流。
水产前沿微信课堂升级了！▪第一是你随时随地都可以进直播间看讲课的内容，不用担心会错过进去之前的内容；▪第二是它没有人数限制，只要你想听就都没有问题；▪第三当你听到嘉宾讲得好时可以随时给嘉宾打赏。
这次我们发起这个课堂，一个是希望能够让大家更多了解沼泽红假单胞菌，二是发扬水产人互帮互助精神，多多支持高先富同学，课后周老师已表示将打赏部分全部捐赠给高先富，目前款项已经转达！今晚我们将以图片+讲解的方式进行交流。
感谢水产前沿，感谢中国水产频道，感谢主持人以及各位同仁们给我这次机会和大家进行交流。
先说一下小高（高先富），小高是2015年11月份到武汉参加我们华中农业大学和我们公司共同举办的渔药、鱼肥、饲料销售人员的培训班，我们在一个班上认识的，他很好学也很敬业，这次不幸查出了白血病，当天我知道后给他捐了2000块钱，也鼓励他挺过去。
但是目前还远远不够，也希望各位同仁们能够继续帮他。
这期讲讲水产养殖业常用活菌制剂简易扩培技术及应用原理这个专题。
首先讲讲沼泽红假单胞菌，它属于光合细菌。
一、沼泽红假单胞菌简介：市场上常用的光合细菌实际上有很多种，从微生物学的角度上讲，光和细菌是一大类能够进行光合作用的原核生物的总称。
它分为产氧的光合细菌和不产氧的光合细菌两大类。
我们从微生物学的分类角度上把产氧的光合细菌（主要是蓝细菌）或者称之为蓝藻和原绿藻在分类学上是属于藻类的，也就是讲在微生物的领域里面有一部分的藻类也被划分为微生物了，这和水产的浮游植物和浮游动物是有区别的。
我们这里所说的光合细菌是指能够在厌氧光照条件下进行不产氧的光合作用的原核生物。
通常来讲分为4个科，红螺菌科、着色菌科、绿菌科、区绿菌科，主要特征含有光和色素，叫菌绿素，能够在厌氧光照条件下进行光合生长而且不产氧。
沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究
沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究作者：颜纲邹宁高乐天来源：《农业灾害研究》2022年第07期摘要沼泽红假单胞菌是应用较为广泛的一种光合细菌，在污水处理、农业种植、畜牧与水产养殖等领域都有较多应用。
在自然培养条件下优化培养基配方，对培养条件中对影响细菌生长的因素进行探究。
最终确定最佳C源乙酸钠添加浓度为10 g/L，最优N、P源为复合肥2（N：P：K=15：15：15），最佳添加浓度为0.5 g/L。
细菌适宜生长的培养条件为温度25℃以上、光照强度 4 000 lx以上、pH值范围为7.5～8.0。
在植物病害防治实验中，结果表明：沼泽红假单胞菌对枣锈病病原菌、根腐病病原菌、褐腐病病原菌、叶霉病病原菌具有显著的抑制效果。
关键词沼泽红假单胞菌;培养优化;植物病害防控中图分类号：X703 文献标识码：B 文章编号：2095–3305（2022）07–0028–03沼泽红假单胞菌（Rhodopseudom-onas palustris），红螺菌科，红假单胞菌属，属于光合细菌中紫色非硫细菌属的代表菌种之一，也是目前应用较广泛的光合细菌之一。
王兰等[1]利用沼泽红假单胞菌和纤细红螺菌、球形红假单胞菌的混合菌液处理虾池养殖废水，4 d后发现混合菌体对养殖废水中的COD、氨氮的去除率分别达到了72.59%、89.2%。
崔艺久等[2]对沼泽红假单胞菌的培养基和培养条件进行了优化以获得类胡萝卜素，在培养7d 后，类胡萝卜素最大产量达2.863 mg/g。
杨素萍等[3]探究了沼泽红假单胞茜Z菌株光合产氢的主要影响因素，研究结果表明：在标准状况下，菌株的最大产氨速率可达19.4 mL/（L·h）。
易力等[4]从洛河水域分离筛选得到2株光合细菌，分别为沼泽红假单胞菌、万尼氏红微菌，这2种菌对模式菌株金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有较好的抑制作用，且沼泽红假单胞菌对大肠杆菌的抑制效果优于万尼氏红微菌，后者对金黄色葡萄球菌的抑制效果优于前者。
沼泽红假单胞菌注意事项
沼泽红假单胞菌注意事项1. 沼泽红假单胞菌是一种常见的细菌，生活在湿地、沼泽和水稻田等潮湿环境中。
在研究和处理沼泽红假单胞菌时，需要注意以下几点。
2. 实验操作时，应确保严格的无菌条件，以防止其他微生物的污染。
使用高温高压消毒器进行培养器皿和培养基的消毒是一个好的选择。
3. 沼泽红假单胞菌在温度和湿度较高的环境中生长最好。
通常在30°C到37°C的温度下培养，保持适当的湿度。
4. 沼泽红假单胞菌对光线敏感，因此在培养时，应尽量避免直接阳光照射到培养物上，最好放置在遮光布下。
5. 在培养基的选择上，常用的有牛肉膏培养基、大肠杆菌培养基和麦康凯培养基等。
选择合适的培养基可以促进红假单胞菌的生长和繁殖。
6. 沼泽红假单胞菌对氧气有一定的耐受能力，可以在有或无氧环境中生长。
在研究和培养沼泽红假单胞菌时，可以选择合适的培养条件，以满足不同研究需求。
7. 由于沼泽红假单胞菌是一种革兰氏阴性菌，肽聚糖和革兰氏染色是常用的检测方法。
可以使用显微镜观察细菌的形态特征，并进行染色以便于观察。
8. 沼泽红假单胞菌在实验室中可以用于生化试验，如碳源利用实验、酶活性测定等。
这些实验可以提供沼泽红假单胞菌的生理特征和代谢活性信息。
9. 对于研究红假单胞菌的抗菌素敏感性，可以进行抗生素敏感试验。
常用的方法有纸片扩散法和微量稀释法等。
10. 在研究和处理沼泽红假单胞菌时，应遵循实验室安全操作规程。
注意个人防护，避免接触细菌悬浮液和培养基，避免摄入和入侵伤口。
实验结束后，及时进行培养器皿和试剂的消毒处理。
沼泽红假单胞菌培养条件研究
沼泽红假单胞菌培养条件研究摘要:对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的培养条件及培养基配方进行了研究。
新筛选的培养基配方具有成分少、易配制、价格低的特点。
试验结果表明,沼泽红假单胞菌(B9)是一株较耐低营养的微耗氧的菌株,在500~5000lx光照下能良好生长,最适的生长温度为30e,培养周期为4d。
关键词:光合细菌;沼泽红假单胞菌;培养条件A Study on Conditions of Culture of Photosynthetic BacteriaAbstract:This paper studied on conditions and prescriptions of culture of photosynthetic bacteria with Rhodopseudomonas palustrisB9.New media is low cost and very simple. The results showed that suitable conditions of PSB were at 30e,4000~5000lx and 4days.Kew words:photosynthetic bacteria; Rhodopseudomonas palustris; conditions and prescriptions of culture随着光合细菌在水产养殖、污水净化等领域的应用,对光合细菌菌剂的需求量增加,本试验对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的主要培养条件进行研究,为光合细菌菌剂生产提供可靠依据。
1材料与方法1.1菌种光合细菌(PSB)沼泽红假单胞B9菌株,由沈阳农业大学微生物教研室光合细菌课题组分离提供。
活菌数测定方法,见参考文献[4]。
1.2营养条件对PSB生长的影响按照表1设计培养基配方,配制培养基。
EDTA和微量元素配制成母液。
分装500mL滴流瓶,每瓶400mL,胶塞封口, 121e,灭菌30min。
沼泽红假单胞菌的研究分解
ndwater Pump and Treat
小组成员： 指导老师：
目录
CONTENTS
01 研究背景 Research Background
03 实际应用 Practical Application
02 作用机理 Function mechanism
04 前景展望 Future Prospect
体和降低水中硫化物的作用。 ➢ 反应式为：2H2S+CO2=（CH2O）菌体+H2O+2S
10
作用机理
能量代谢途径
沼泽红假单胞菌等光合细菌胞内具有能光合作用的载色体，这些载色体为球状或胞状， 由细胞膜分化而成，直径约在60-100nm之间，包含着大量类胡萝卜素和叶绿素，能进行光 合磷酸化反应和光氧化还原反应。
5
作用 机理
作用机理
25%
50%
75%
90%
脱氮原理
物理化学脱氮法成本 高，且不利于管理， 生物脱氮法是目前水 处理中常用的一种比 较经济有效的方法。
除磷原理
污水中的磷无论是氧 化态还是还原态都不 能变成气态进入空气 中，一般只能运用生 物学或者化学的方法 将其沉降后分离除去。
含硫化合物代谢
利用各种有机物作为 电子供体，将硫酸盐 作为最终电子受体把 硫酸盐还原为硫化物。
含硫化合物代谢
在好氧黑暗或厌氧光照条件下 ➢ 沼泽红假单胞菌以光作为能源，利用各种有机物作为电子供体，将硫酸盐作为最终电子受体，
把硫酸盐还原为硫化物。 ➢ 然后再以硫化物和CO2分别作为氢源和碳源，进行光合作用，通过光合磷酸化获得能量。
含硫化合物代谢
在好氧黑暗或厌氧光照条件下 ➢ 沼泽红假单胞菌可直接降解有机质，还原CO2和硫化氢，使自身得以增值，同时达到净化水
沼泽红假单胞菌
沼泽红假单胞菌沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛自然界的微生物，是一类易广能为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。
在生物学分类中属于真细菌纲、红螺菌目红螺菌科、红假单细胞菌属。
当前广泛应用于以下几个方面，○1高浓度工业有机废水的处理及资源化；○2水质净化剂，水产养殖的调控及促进健康生长；○3高营养饲料添加剂；○4农业生产中的高效活性菌肥。
沼泽红假单胞菌，别名：红假菌，是研究和应用较为广泛地一种光合细菌，属于外硫红螺菌科红假单细胞菌属，年幼单个的细胞呈杆状到卵形偶见稍弯，细胞直径0.6-0.9um,极生鞭毛运动或不运动，生长有极性，不对称出芽分裂。
革兰氏染色阴性。
厌氧液体培养物最初呈淡红色，后来变成红至褐红色，老培养物为暗棕红色。
好氧培养物无色到粉红色。
光能异氧菌，兼性好氧。
可以在光下营厌氧生活，或在黑暗下好养生长。
大多数菌种能长在洋菜平板或斜面上，虽然最初分离时，许多菌株表现对氧敏感，能在有简单的有机底物和碳酸氢钠及以对-氨基苯甲酸盐为生长素的无机盐培养基上生长。
有的菌株还需要加入生物素。
酵母膏有明显刺激生长的作用。
PH范围，5.5-8.5；脂肪酸在PH7.0以下会抑制生长。
最是生长范围30-37℃。
作为碳源或光合作用的电子供体的底物，乙醇，脂肪酸，C4二羧酸，氨基酸，苯甲酸盐，环己烷羧酸，甲酸盐，分子氢和硫代硫酸盐只能在少量酵母膏时才能利用。
不利用单糖类和糖醇类，硫化物。
光合色素为叶绿素a、h和胡萝卜素。
最佳生长方式是利用各种有机化合物作碳源和电子供体进行光照厌氧。
厌氧条件下以氢、硫代硫酸硫酸钠、硫化氢等做电子供体可光自养生长。
G+Cmol%为64.8-66.4.并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点可用于水质净化、污水处理、饲料级微生物添加剂等。
在琼脂培养基上培养，菌落形态为草帽性或圆形，表面光滑，少隆起，边缘整齐，棕红色显微镜下观察形态为短杆状或卵圆形，款0.5um-0.9um，长1.2um-2.0um，无芽孢无荚膜，单极鞭毛，可运动。
沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性
沼泽红假单胞菌的分类鉴定和生理特性摘要采用改良的Hungate厌氧培养技术一滚管法,从淀粉厂的污泥中,分离得到一株革兰氏阴性,弯曲杆状,出芽繁殖,既能在光照厌氧,也能在黑暗好氧条件下生活的光能异养型Y6菌株.经形态观察、生理特性的测定,确证Y6菌株为沼泽红假单胞菌(Rhodopseudpmonaspalustris).关键词:紫色非硫光合细菌,沼泽红假单胞菌,厌氧培养技术利用光合细菌净化高浓度有机废水,己是废水生物处理法中的一个重要方法.它具有有机负荷高,占地面积小,投资费用少,动力消耗低,除氮效果好和耐盐能力强等优点.同时,产生的菌体污泥是优质的饲料和肥料,可加以综合利用.因此,近几年来用光合细菌法(PSB)净化废水正受到人们的广泛重视.目前,用于有机废水净化的光合细菌,主要是紫色非硫细菌红螺菌科(Rhodo‘Pi({llaceac)的一些菌株·这些菌一般均为兼性光合细菌·应用于有机废水净化的菌株,要求对有机质有较强的代谢能力和较高的耐受性,对不良环境因素,如温度、pH和盐度等有较强的适应性.为了进一步开展紫色非硫细菌在净化有机废水中的应用研究,我们从淀粉厂污泥中分离到一株光能异养型Y6菌株.经初步测试,表明具有利用基质广泛、生长速度快、耐受有机质浓度较高等特点.经鉴定确认,Y‘菌株为沼泽红假单胞菌(Rhodo脾udomonas尸alustr哟.现将分离鉴定结果和某些生理特性报导如下.材料和方法.1菌株来源Y6菌株从济南市槐荫区淀粉厂污水排放沟污泥中分离获得..2培养基vanNiel培养基〔‘〕Molisch琼脂培养基〔2〕YP琼脂培养基〔,〕RCVBN培养基〔3〕,3菌种分离和纯化*收稿口期:1990一l!一16第3期于温旭等:紫色非硫光合细菌的研究·345·取污泥样品在VanNiel培养基中富集培养,30℃,Zo00Lx光照厌氧培养3一4天后,培养基呈绛红色.再经4次连续转接培养,使光合细菌的生长在富集液中占绝对优势,然后采用改良Hungat。
沼泽红假单胞菌的研究
作用机理
能量代谢途径
沼泽红假单胞菌等光合细菌胞内具有能光合作用的载色体，这些载色体为球状或胞状， 由细胞膜分化而成，直径约在60-100nm之间，包含着大量类胡萝卜素和叶绿素，能进行光 合磷酸化反应和光氧化还原反应。 在好氧光照条件下 起初菌体细胞内缺少这种载色体，但是它们能快速形成，为菌体提供物质、能量代谢条 件。 在好氧黑暗条件下 通过三羧酸循环进行有机酸代谢，在厌氧光照条件下，它能把有机酸异化反应、氧化还 原同化反应和光氧化还原反应这三者进行结合，改变代谢途径，使菌体能够更加灵活的对不 同种类的有机物进行代谢吸收和讲解
22
实际应用
03 在工业水处理中的应用
利用假单胞菌降解TNT废水，有研究发现在最佳外加氮源（KNO3）浓度为 0.1g/L时，沼泽红假单胞菌降解TNT废水的最佳组合为：TNT浓=50mg/L， 温度=30℃，pH=7，接种量为108个/mL。 在不同条件下对活性大红的脱色效果研究表明在最佳条件下，光照厌氧条件 下的脱色效率远高于光照好氧条件下的脱色效率，脱色率浓度。
4
研究背景
光和细菌的简介
光合细菌作为一种最原始的具有光能合成体系的原核生物，不仅能在光源作为能源 的条件下利用有机物进行光合作用，还能进行固氮固碳脱氢等作用
光和细菌的分类
在《伯杰式细菌系统手册》中，光合细菌划分为蓝色红菌门和红螺菌目两类，其中 后者又可以划分为不同的菌科，包含有红假单胞菌属、红螺菌属和红微菌属。
23
前景 展望
前景展望
广泛应用于废水的净化
01
如高浓度有机废水、重金属废水、养殖废水等，其存在于废水中时，能大量同化氮磷并降解废 水中的有机物，降低高浓度有机废水毒性，调节水体pH，使废水得以净化，同时不带来二次 污染，且能改善水质质量。
光合细菌菌剂中沼泽红假单胞菌计数方法
光合细菌菌剂中沼泽红假单胞菌计数方法
光合细菌菌剂中沼泽红假单胞菌的计数方法一般采用传统的细菌计数方法，如限量稀释法结合平板计数法。
具体步骤如下：
1. 首先，将光合细菌菌剂样品进行适当稀释。
可以选择将一定体积的菌液与等体积的生理盐水或缓冲液混合，制备适当稀释液。
2. 将稀释液取一定体积（如0.1 mL），均匀涂布在含有适宜培养基（如富含有机物、适合沼泽红假单胞菌生长的培养基）的琼脂平板上。
3. 将涂布好的琼脂平板进行孵育，一般在适当的温度下（如30℃）培养一定时间（如24小时）。
4. 孵育结束后，观察琼脂平板上形成的菌落。
沼泽红假单胞菌的菌落通常为红色或橙色。
5. 使用显微镜进行菌落计数。
可以选择随机选取几个菌落，在显微镜下进行计数并计算平均数。
注意事项：
- 在进行计数前，要确保稀释液与琼脂平板均匀混合。
- 在进行涂布时要注意操作的无菌性，以避免其他细菌的污染干扰计数结果。
- 在进行计数时，要根据实际情况选择适当的倍数稀释，并在计算结果时进行相应的稀释倍数校正。
以上是光合细菌菌剂中沼泽红假单胞菌计数方法的一种常用步骤，具体操作细节可能会因实验需求、样品特性和设备不同而有所差异。
因此，在具体实验中，最好参考相关研究文献或咨询相关专业人士，以确保计数结果的准确性和可靠性。
沼泽红假单胞
光合细菌（沼泽红假单胞）工艺流程前言：光合细菌具有原始光能合作体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌总称。
细胞杆形，0.6-2.5微米×0.5-5.0微米，极生鞭毛运动或不运动；生长有极性，不对称出芽分裂。
革兰氏阴性；片层状光合内膜位于细胞膜下且与之平行；光合色素为叶绿素a、b 和类胡萝卜素。
利用各种有机化合物作碳源和电子供体行光照厌氧生长。
厌氧条件下以氢、硫代硫酸钠、硫化氢等作电子供体、也可光自养生长。
光合细菌在水产养殖上的应用可以作为：养殖水水质净化剂；饲料添加剂；用于鱼、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。
一、菌种培养基1. A TYP琼脂2. 磷酸氢二钾 1.0g3. 硫酸镁0.5g4. 酵母提取物10.0g5. 蒸馏水1000ml6. pH7.0-7.2二、沼泽红假单胞的培养条件1. 营养条件：以各种有机化合物作碳源，厌氧条件下以氢、硫代硫酸钠、硫化氢等作电子供体在光照厌氧生长。
营养元素的全面合理的配制，是沼泽红假单胞高产培养的关键，经特殊加工而成的沼泽红假单胞发酵剂（培养基），符合光合细菌生长繁殖所需的营养要求，无毒无副作用，使用安全，而且保质期较长。
2. 环境条件：有了营养全面的沼泽红假单胞细菌培养基，只是满足了其生长的内在条件，并不能培养出沼泽红假单胞菌液；还需要有适宜细菌生长的环境条件，才能培养出优质的菌液。
环境条件具体有以下几个方面：（1）培养介质：从经济实用的角度考虑，含菌量低的清洁淡水、地下水，为最佳水源；蒸馏水及纯净水，可用于提纯菌种。
（2）酸碱度（pH）值：7.5-8.5最佳（适应范围6-10）。
（3）水硬度：pH值中性时10度以下。
即调节pH值至8.0左右时，培养介质中的乳白色沉淀物不宜过多。
（4）温度：25度-34度最佳（适应范围15-40度）。
（5）光照强度：3000Ix-4000Ix最佳。
即每25kg菌液需用60瓦左右的钨丝灯进行光照，当然，太阳光最好且不需成本。
沼泽红假单胞菌 光合细菌 水剂产品质量暂行标准
沼泽红假单胞菌光合细菌水剂产品质量暂行标准1998-8-4农牧函[1998]30号沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准1.主题内容与适用范围本标准规定了沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品的质量指标、试验方法、检验规则、标志包装、运输、储存的要求。
本标准适用于沼泽红假单胞菌类(光合细菌)水剂的生产。
2.引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
在标准出版时，所示版本均为有效，所有标准都会被修订，使用标准的各方应探讨、使用下列标准最新版本的可能性。
GB 13079-91饲料卫生标准GB 13091-91饲料中沙门氏菌的检验方法GB 8381-87饲料中黄曲霉素B1的测定方法GB 13079-91饲料中总砷的测定方法GB 13080-91饲料中铅的测定方法GB 10648-93饲料标签3.技术要求3.1微生物指标3.1.1菌落形态本品稀释后在琼脂培养皿上培养，菌落形态为草帽形或园形，表面光滑，少隆起，边缘整齐，棕红色。
3.1.2菌体形态显微镜下观察，本产品菌体形态为短杆状或卵园形，宽0.5-0.9微米，长1.2-2.0微米，无芽孢，无荚膜，单极鞭毛，可运动。
3.1.3革兰氏染色阴性3.2感观指标本品为红色悬浮液体，带培养基发酵味，长时间静置红色悬浮菌体会逐渐下沉，振荡后可恢复悬浮液状，无臭味。
3.3光合细菌含量总菌数不低于30亿个/ml活菌数不低于20亿个/ml 3.4理化指标酸度PH6.5-7.0电导率6-8ms/cm 3.5光谱指标光吸收植A660>1.5 A490>2.5 A805>1.7 A860>1.9 3.6卫生指标沙门氏菌无黄曲霉素B1 Mg/Kg<0.02总砷(AS)Mg/Kg<0.5铅Mg/Kg<2.0 4.试验方法4.1试剂和溶液除特别注明外，试验中所用试剂为分析纯试剂，水为蒸馏水或相应程度的水，溶液为水溶液。
沼泽红假单胞菌的研究分解PPT课件
PA研究RT O背N景E
研究背景
PART ONE
最早在19世纪60年 代，就有学者将光合 细菌应用于有机废水
的处理。
PART TWO
光合细菌因自身无毒 及降解有机物能力强 等特点被认为是最有 发展前景的生物菌剂
之一
PART THREE
利用微生物处理废水 改善废水水质、降低 水中有机物含量成为 一个新的研究方向。
利用各种有机物作为 电子供体，将硫酸盐 作为最终电子受体把 硫酸盐还原为硫化物。
能量代谢途径
利用细菌胞内具有能 光合作用的载色体来 完成能量的代谢。
7
作用机理
脱氮原理
光合细菌在厌氧条件下，通过水解胞外蛋白酶，将水中有机氮转为氨基酸，氨基酸通过脱氨 基作用转变成氨氮，随后与水体中的氨氮一起进入菌体中，被光合细菌同化利用，供菌体生 长繁殖。具有反硝化活性的光合细菌可以利用污水中的NO2-或NO3-作为最终电子受体，利 用简单有机物作为供氢体，进行反硝化作用。
5
PA作用RT TW机理O
作用机理
25%
50%
75%
90%
脱氮原理
物理化学脱氮法成本 高，且不利于管理， 生物脱氮法是目前水 处理中常用的一种比 较经济有效的方法。
除磷原理
污水中的磷无论是氧 化态还是还原态都不 能变成气态进入空气 中，一般只能运用生 物学或者化学的方法 将其沉降后分离除去。
含硫化合物代谢
4
研究背景
光和细菌的简介
光合细菌作为一种最原始的具有光能合成体系的原核生物，不仅能在光源作为能源 的条件下利用有机物进行光合作用，还能进行固氮固碳脱氢等作用
光和细菌的分类
在《伯杰式细菌系统手册》中，光合细菌划分为蓝色红菌门和红螺菌目两类，其中 后者又可以划分为不同的菌科，包含有红假单胞菌属、红螺菌属和红微菌属。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
沼泽红假单胞菌
沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛自然界的微生物，是一类易广能为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。
在生物学分类中属于真细菌纲、红螺菌目红螺菌科、红假单细胞菌属。
当前广泛应用于以下几个方面，○1高浓度工业有机废水的处理及资源化；○2水质净化剂，水产养殖的调控及促进健康生长；○3高营养饲料添加剂；○4农业生产中的高效活性菌肥。
沼泽红假单胞菌，别名：红假菌，是研究和应用较为广泛地一种光合细菌，属于外硫红螺菌科红假单细胞菌属，年幼单个的细胞呈杆状到卵形偶见稍弯，细胞直径0.6-0.9um,极生鞭毛运动或不运动，生长有极性，不对称出芽分裂。
革兰氏染色阴性。
厌氧液体培养物最初呈淡红色，后来变成红至褐红色，老培养物为暗棕红色。
好氧培养物无色到粉红色。
光能异氧菌，兼性好氧。
可以在光下营厌氧生活，或在黑暗下好养生长。
大多数菌种能长在洋菜平板或斜面上，虽然最初分离时，许多菌株表现对氧敏感，能在有简单的有机底物和碳酸氢钠及以对-氨基苯甲酸盐为生长素的无机盐培养基上生长。
有的菌株还需要加入生物素。
酵母膏有明显刺激生长的作用。
PH范围，5.5-8.5；脂肪酸在PH7.0以下会抑制生长。
最是生长范围30-37℃。
作为碳源或光合作用的电子供体的底物，乙醇，脂肪酸，C4二羧酸，氨基酸，苯甲酸盐，环己烷羧酸，甲酸盐，分子氢和硫代硫酸盐只能在少量酵母膏时才能利用。
不利用单糖类和糖醇类，硫化物。
光合色素为叶绿素a、h和胡萝卜素。
最佳生长方式是利用各种有机化合物作碳源和电子供体进行光照厌氧。
厌氧条件下以氢、硫代硫酸硫酸钠、硫化氢等做电子供体可光自养生长。
G+Cmol%为64.8-66.4.并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点可用于水质净化、污水处理、饲料级微生物添加剂等。
在琼脂培养基上培养，菌落形态为草帽性或圆形，表面光滑，少隆起，边缘整齐，棕红色显微镜下观察形态为短杆状或卵圆形，款0.5um-0.9um，长1.2um-2.0um，无芽孢无荚膜，单极鞭毛，可运动。
革兰氏染色阴性。
一、实验目的
应用沼泽红假单胞菌的生理生化和生态学的特点，从自然环境中分离沼泽红假单胞菌，并掌握微生物分离纯化的基本方法。
二、实验原理
将待分离的菌落接种于培养基，然后进行反复的纯化，最后观察菌落的形态，按照细菌鉴定手册鉴定；按所需碳源、氮源、磷酸盐、酵母膏等因素进进行正交设计，优化出最佳的培养基配方，分离与纯化得到一株红红螺茵科沼泽红假单胞菌
三、实验器材和用品
○1生长培养基
丙酸钠3.0g
硫酸铵2.0g
磷酸二氢钾0.5g
磷酸氢二钾0.5g
硫酸镁0.2g
氯化钠0.5g
氯化钙0.1g
酵母膏1.0g
水1000ml PH自然厌氧光照培养，光照强度2000lx，温度29-31度
○2分离培养基
酵母膏3.0
蛋白胨5.0
氯化钠2.0
硫酸镁0.5
琼脂8g- 20g
水1000ml pH自然，厌氧光照培养，光照强度2000lx，温度29-31度
○3富集培养基
丙酸钠1.0g
硫酸铵1.0
磷酸二氢钾0.5g
磷酸氢二钾0.5g
硫酸镁0.2g
氯化钠0.5g
酵母膏0.1g
水1000ml PH5.5到8.5富集培养厌氧光照培养，光照强度2000lx，温度29-31度
A.革兰氏染色试剂
a)草酸铵结晶紫染液
A液：结晶紫(crystal violet) 1.0g
95%酒精20ml
B液：草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g
蒸馏水80ml
混合A、B二液，静置48小时后使用。
b)2、卢戈氏(Lugol)碘液（革兰氏碘液）
碘片1.0g
碘化钾2.0g
蒸馏水300ml
先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。
3、95%的酒精溶液。
4、沙黄复染液
沙黄0.25g
95%的酒精10ml
蒸馏水90ml
将沙黄溶于乙醇中，再用蒸馏水稀释。
c)1%NaOH溶液、1%HCl、液体石蜡、0.9%NaCl
d)5ml的移液管、玻璃棒、试管5个、250ml的锥形瓶2个、培养皿10个、电
磁炉、高压灭菌锅、37度恒温培养箱、接种环、酒精灯无菌操作箱、电子天
平、100ml量筒、100ul移液枪
四、试验方法
A、取下水道污水按20%接种于约500ml灭菌的富集培养基的滴流瓶中，用灭菌的胶塞封口，28度下光照（1000lx）厌氧培养。
到培养液棕红色时，再以同样方式转接一次使待分离菌占优势。
再装有固体富集培养基的克氏瓶中划线，盖上灭菌胶塞用固体石蜡封口，同样条件下培养十五天。
得单菌落。
再以同样的方法分离纯化获得纯培养。
B、取材并稀释：取下水道污水10ml加入到灭菌后的试管○1中，在试管○2○3分别加9ml灭菌后的0.9%NaCl溶液，从试管○1中取1ml加入到○2中，震荡后再从○2中取1ml加入到○3中。
倒平板：按无菌操作要求，在洁净工作台或在火焰旁操作，取融化并冷却至不烫手的固
体培养基（约500C），倒入无菌培养皿，倒量以铺满皿底为限（15-20ml），平放待其
冷却凝固，备用。
涂布：用接移液枪分别从试管○1○2○3取100um分别接种到分离培养基上用石蜡密封并标记，
至于，光照强度为2000lx，温度为29-31度厌氧培养24h，
镜检：挑取形态为草帽性或圆形，表面光滑，少隆起，棕红色边缘整齐单个菌落做镜检。
操作如下
涂片固定。
3.2 草酸铵结晶紫染1-2分钟。
3.3 自来水冲洗。
3.4 加碘液覆盖涂面染约1分钟。
3.5 水洗，用吸水纸吸去水分。
3.6 加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，25-30秒后水洗，吸去水分。
3.7 复红染色液（稀）染2分钟后，自来水冲洗。
干燥，镜检。
纯培养：再分别挑取格革色阴性杆菌或卵圆形菌加入到已分装好的富集培养基中并做标记
4生化试验：再挑取不同营养肉汤中的菌液分别进行生化试验通过伯杰细菌手册
辨别出沼泽红假单胞菌，并进行标记
5、富集培养：将标记的沼泽红假单胞菌接种到营养肉汤中进行培养并保纯
五、实验结果
六、注意事项
○1、防止污染。
分离培养的整个过程要严格无菌操作。
培养基和一切用具必须彻
底灭菌；操作时必须靠近火焰；操作完毕后，禁止再让培养基接触外界空气。
○2注意厌氧操作。