沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准

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作者：摘自：日期：1998-08-04

中华人民共和国农业部通知

农牧函[1998]30号

各省市、自治区、直辖市畜牧（农牧）厅（局）、饲料工业办公室：

根据农业部有关饲料添加剂审批的规定，经审核，批准北京市奇威生物工程研究所研制的沼泽红假单胞

菌（光合细菌）水剂为水产养殖用新饲料添加剂。试产期二年，试产期实行产品保护。试产期内该产品的生

产监督按我部发布的质量暂行标准执行。

一九九八年八月四日

附件

沼泽红假单胞菌（光合细菌）水剂产品质量暂行标准

1．主题内容与适用范围

本标准规定了沼泽红假单胞菌（光合细菌）水剂产品的质量指标、试验方法、检验规则、

标志包装、运输、储存的要求。

本标准适用于沼泽红假单胞菌类（光合细菌）水剂的生产。

2．引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。在标准出版时，所

示版本均为有效，所有标准都会被修订，使用标准的各方应探讨、使用下列标准最新版本

的可能性。

GB 13079－91饲料卫生标准

GB 13091－91饲料中沙门氏菌的检验方法

GB 8381－87 饲料中黄曲霉素B1的测定方法

GB 13079－91饲料中总砷的测定方法

GB 13080－91 饲料中铅的测定方法

GB 10648－93饲料标签

3．技术要求

3．1微生物指标

3．1．1菌落形态

本品稀释后在琼脂培养皿上培养，菌落形态为草帽形或园形，表面光滑，少隆起，边缘整

齐，棕红色。

3．1．2菌体形态

显微镜下观察，本产品菌体形态为短杆状或卵园形，宽0.5-0.9微米，长1.2-2.0微米，无

芽孢，无荚膜，单极鞭毛，可运动。

3．1．3革兰氏染色阴性

3．2感观指标

本品为红色悬浮液体，带培养基发酵味，长时间静置红色悬浮菌体会逐渐下沉，振荡后可

恢复悬浮液状，无臭味。

3．3光合细菌含量

总菌数不低于30亿个／ml

活菌数不低于20亿个／ml

3．4理化指标

酸度PH6.5-7.0

电导率6－8ms/cm

3．5光谱指标

光吸收植A660＞1.5

A490＞2.5

A805＞1.7

A860＞1.9

3．6卫生指标

沙门氏菌无

黄曲霉素B1 Mg/Kg ＜0.02

总砷（AS） Mg/Kg ＜0.5

铅 Mg/Kg ＜2.0

4．试验方法

4．1试剂和溶液

除特别注明外，试验中所用试剂为分析纯试剂，水为蒸馏水或相应程度的水，溶液为水溶液。

4．1．1光合细菌培养液

5.5g磷酸二氢钠，1.5gDL苹果酸，2g乙酸钠，2g氢氧化钠，1g氯化铵，0.25g氯化镁，0.05g氯化钙溶于1升蒸馏水，再

加入本产品生产中用的生长因子溶液和微量元素溶液各1ml，搅拌均匀，测定pH应于6.5至7.0之间。

4．1．2 60％蔗糖溶液

4．1．3琼脂粉

4．2仪器设备

常规实验和仪器和设备

4．2．1分光光度计：有10mm比色池，可在340－900nm处测量吸光度。

4．2．2 1600倍光学显微镜

4．2．3电动离心机（4000转／分）

4．2．4酸度计：精度0.01PH

4．2．5电导仪：DDS－11型（或同等精度其它型号）

4．3取样

需备20ml具塞磨口无色透明的三角瓶为样品瓶，洗净后置烘箱120℃干燥灭菌，用清洁并灭菌后的25ml移液管（或吸管）随机在5桶产品中各取25ml左右置于样品瓶中混和，将靡口塞盖严，用胶布封住，贴上标签注明厂名、产品名，批号。取样日期、生产日期。

按和以上相同方法取样200ml置于一干燥灭菌洁净的200ml白塑料瓶中，注明标签（内容同上）密封后留存。

4．4检验方法

4．4．1微生物检验

4．4．1．1菌落形态检验：用含1.2％琼脂的光合菌用培养液，除菌处理后，在无菌环境中，充平皿板，厚约3－5mm。凝固后取光合菌液做平板划线，将平皿厌氧培养光照3－5天，室温30℃，3－5天后长出红色菌落，观察菌落形态。

4．4．1．2原菌液用培养液稀释100倍，取一滴置载片上（盖盖片）在高倍镜下（16×40）观察菌形态大小及运动状态。4．4．1．3培养中的菌液一滴做涂片，自然干燥，酒精灯火焰固定，经初染（结晶紫），媒染（路氏碘液），脱色（95％乙醇），复染（番红染液）后，油镜（16×100）观察，菌体呈红色。

4．4．2感观检验

量取样品500ml，置三角瓶中，用肉眼观察颜色，用嗅觉检察嗅味。长期静置已有沉淀的产品应先振荡或搅拌10－20秒后再取样。

4．4．3含量测定

4．4．3．1总菌数测定：样品充分振荡后取0.5ml用水稀释到200ml灭菌水中，搅匀后从中取数微升充板入血球计数板的计数池中（每大格0.1mm3，置600倍显微镜下观察，同时用红血球计数法记菌数，将25个小格的每格菌数平均值乘1亿为每毫升总菌数。

4．4．3．2活菌数测定：将4．4．3．1节中稀释的菌液再稀释100000倍，取1ml加到10ml培养液中，混合均匀后加入20g/1000ml 浓度琼脂溶液10ml，置平皿中凝固，加玻璃盖在25－30℃温度，无菌环境下，60瓦白炽灯照射，距灯泡12cm，1－2天后观察计数菌落数，以下式计算：

每毫升样品中的活菌数＝菌落计数／25×1亿

4．4．4理化指标测定

4．4．4．1酸度测定

以不低于0.01PH值精度的酸度计，直接于20ml样品中测量。

4．4．4．2电导率测定

以DOS－IIA型（或同等精度其它型号）电导仪直接于20ml样品中测量。

4．4．5光谱指标测定

取0.5ml样品置3ml容积，1cm光径比色杯中，加入2ml蒸馏水，以蒸馏水为对照，在可见分光光度计中读取660nm、490nm、