细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示 , 细胞内DNA和RNA的原位显示

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大学细胞生物学考试(习题卷19)

大学细胞生物学考试(习题卷19)第1部分：单项选择题，共227题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]下面有关核仁的描述错误的是（）。

A)核仁的主要功能之一是参与核糖体的生物合成B)rDNA定位于核仁区内C)细胞在M期末和S期重新组织核仁D)细胞在G2期，核仁消失答案:D解析:2.[单选题]下列关于小分子穿膜运输的描述，错误的是A)一般来说，相对分子量越小，穿膜的速率越快B)一般来说，水溶性越强，穿膜越容易C)带电荷的分子或离子难以穿膜D)非极性的小分子往往很容易穿膜答案:B解析:3.[单选题]恶性肿瘤容易扩散，跟哪一种细胞黏附分子的功能丧失有关?()A)钙黏蛋白B)选择素C)免疫球蛋白超家族D)整联蛋白E.以上都不是答案:A解析:4.[单选题]真核细胞中核糖体大亚基是由（）组成A)1个23S rRNA、1个5S rRNA 和30多种r蛋白B)1个23S rRNA、1个5.8S rRNA 和50多种r蛋白C)1个28S rRNA、1个5.8S rRNA 和30多种r蛋白D)1个28S rRNA、1个5.8S rRNA、1个5S rRNA和50多种r蛋白答案:D解析:5.[单选题]糖脂在细胞膜上是如何分布的？（）A)全部分布在胞质面B)全部分布在非胞质面C)胞质面和非胞质面都有分布D)在细胞膜上无分布答案:B解析:6.[单选题]牛脊神经节切片所观察的神经节细胞外围分布有（）D)被囊细胞答案:D解析:7.[单选题]用磷脂酶处理完整的人类红细胞，以下哪种膜脂容易被降解（）A)磷脂酰胆碱B)磷脂酰乙醇胺C)磷脂酰丝氨酸D)鞘磷脂答案:A解析:8.[单选题]下面哪一个成分不是叶绿体电子传递链的成分？（）[中山大学2017研]A)NADP＋B)泛醌C)质体蓝素（PC）D)细胞色素b6/f答案:B解析:9.[单选题]冰冻蚀刻技术主要用于（）。

[南开大学2011研]A)电子显微镜B)光学显微镜C)原子力显微镜D)激光共聚焦显微镜答案:A解析:主要电镜制样技术包括：超薄切片技术、负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜三维重构技术和扫描电镜技术等。

第二章细胞生物学的研究技术和方法

第二章细胞生物学的研究技术和方法一、选择题：1.在光学显微镜下所观察到的组织或细胞结构一般称为A.显微结构B.超微结构C.亚显微结构D.分子结构2.研究细胞的超微结构一般要利用下列哪种技术A.光学显微镜技术B.电子显微镜技术C.X射线衍射技术D.离心技术3.利用不同性质有机染料可对细胞中不同成分选择性染色，下列哪种结果有误A.碘液可使口腔上皮细胞的细胞质和细胞核呈深浅不同的棕黄色B.吉姆萨染液可使细胞核或染色体呈紫红色或桔红色C.甲基绿可使RNA分子呈蓝绿色D.派洛宁可使RNA分子呈红色4.适于观察无色透明活细胞显微结构的光学显微镜是A.相差显微镜B.暗视野显微镜C.荧光显微镜D.偏振光显微镜5.光学显微镜的分辨率（最小分辨率）可达A. 0.1?mB. 0.2?mC. 0.3?mD. 0.4?m6.关于电子显微镜，下列哪项有误A.组织或细胞在透射电镜观察前均需做超薄切片B.分为透射式和扫描两类C.分辨率最高可达0.2nmD.利用电子束作照明源7.关于透射式电子显微镜，下列哪项叙述是错误的A.适于观察细胞的外表形貌B.以电子束作为光源C.电子透过标本后在荧光屏上成像D.分辨率较高8.关于扫描电子显微镜，下列哪项有误A.20世纪60年代才正式问世B.景深长，成像具有强烈立体感C.电子扫描标本使之产生二次电子，经收集放大后成像D.适于观察细胞的内部构造9.福尔根反应（Feulgen reaction）是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内A.蛋白的分布与定位B.脂肪的分布与定位C.酸性磷酸酶的分布与定位D. DNA的分布与定位10.研究组织或细胞显微结构的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术11.研究细胞超微结构的主要技术A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术12.分离细胞内不同细胞器的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术13.利用放射性同位素标记物能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是A.放射自显影技术B.免疫荧光镜技术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术14.用荧光染料标记的抗体处理细胞后在荧光显微镜下对细胞中特殊分子进行定位属于A.放射自显影技术B.免疫荧光镜检术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术15.直接取材于机体组织的细胞培养称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆16.当体外培养的细胞增殖到一定密度后以1：2以上的比例转移到几个容器中进行再培养,称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆17.模拟体内的条件使细胞在体外生存、生长和繁殖的过程称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆18.分离出单个细胞在适当的条件下使之增殖成均一的细胞群体称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆19.体细胞杂交又称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞融合20.适于观察细胞内超微结构的显微镜是A.透射电镜B.扫描电镜C.荧光显微镜D.倒置显微镜21.从血液中分离收集血细胞一般利用A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机22.从破碎的细胞中分离收集线粒体一般所需的仪器是A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机23.要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的A.切片B.滴片C.涂片D.装片24小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成细胞的（）来进行观察。

动物细胞的基本形态观察和显微测量

思考题
1．述光镜下肝细胞活体染色的线粒体的形态结构？
2．试描述光镜下软骨细胞液泡系的形态结构？
细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
教学目标及其基本要求：
1、教学重点：
（1）掌握微丝的染色方法。
（2）了解光镜和电镜下的微丝基本形态和结构。
2、基本要求：
（1）掌握微丝的染色方法。
（2）了解光镜和电镜下的微丝基本形态和结构。
3.了解细胞的染色方法
4.显微测微尺的使用
教学难点
1.蟾蜍的处死及取材
2.血涂片的制备
3.侧微尺的使用
教学方法
注意理论和实际相结合，将实验课内容与理论课内容密切联系，调动学生的积极性，要求每个学生都亲自动手，分组操作。
教学手段（挂图、幻灯、多媒体……等）
细胞形态观察照片、，板书等。
使用的教材及参考资料
3.细胞的基本形态观察。2小时
1)原理
2)观察方法与结果：
a)制备观察蟾蜍脊髓前角运动神经细胞
b)蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察
c)蟾蜍肝脏压片的制备与观察
d)蟾蜍血涂片及人血涂片的制备与观察
e)人口腔上皮细胞观察
4.测微尺的使用。30分钟
教学重点及难点
教学重点
1.使学生了解如何利用显微镜观察细胞
2.掌握几种制片方法：压片和涂片。
（3）了解细胞松弛素B对微丝的作用及原理。
（4）了解考马斯亮蓝染料在细胞生物技术中的应用。
教学内容提要及时间分配
1.教师：
（1）讲述和提问微丝的作用及组装，细胞松弛素B的作用（15分钟）。
（2）讲解实验的具体操作和注意事项，正常对照在实验中的作用及Triton，M-缓冲液，戊二醛的作用（15分钟）。

生物化学重点笔记(基本知识)

生物化学重点绪论一、生物化学的的概念：生物化学（biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学，它是介于化学、生物学及物理学之间的一门边缘学科。

二、生物化学的发展：1．叙述生物化学阶段：是生物化学发展的萌芽阶段，其主要的工作是分析和研究生物体的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物。

2．动态生物化学阶段：是生物化学蓬勃发展的时期。

就在这一时期，人们基本上弄清了生物体内各种主要化学物质的代谢途径。

3．分子生物学阶段：这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能之间的关系。

三、生物化学研究的主要方面：1．生物体的物质组成：高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等组成，此外还含有一些低分子物质。

2．物质代谢：物质代谢的基本过程主要包括三大步骤：消化、吸收→中间代谢→排泄。

其中，中间代谢过程是在细胞内进行的，最为复杂的化学变化过程，它包括合成代谢，分解代谢，物质互变，代谢调控，能量代谢几方面的内容。

3．细胞信号转导：细胞内存在多条信号转导途径，而这些途径之间通过一定的方式方式相互交织在一起，从而构成了非常复杂的信号转导网络，调控细胞的代谢、生理活动及生长分化。

4．生物分子的结构与功能：通过对生物大分子结构的理解，揭示结构与功能之间的关系。

5．遗传与繁殖：对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究，也是现代生物化学与分子生物学研究的一个重要内容。

第一章蛋白质的结构与功能一、氨基酸：1．结构特点：氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位。

构成天然蛋白质分子的氨基酸约有20种，除脯氨酸为α-亚氨基酸、甘氨酸不含手性碳原子外，其余氨基酸均为L-α-氨基酸。

2．分类：根据氨基酸的R基团的极性大小可将氨基酸分为四类：①非极性中性氨基酸(8种)；②极性中性氨基酸(7种)；③酸性氨基酸(Glu和Asp)；④碱性氨基酸(Lys、Arg和His)。

二、肽键与肽链：肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而形成的共价键(-CO-NH-)。

医学细胞生物学实验课的目的和要求

前言一、医学细胞生物学实验课的目的和要求医学细胞生物学实验课是医学细胞生物学教学的重要组成部分，它既与医学细胞生物学课堂讲授的理论部分密切联系，同时又有它独特的目的和要求：1. 实验是科学理论的实践与论证，通过实验，使学生从感性认识加深对课堂所获得的理性知识的认识和理解。

2. 通过光学显微镜的使用，临时标本的制作、细胞培养等技术操作，使学生掌握医学细胞生物学的基本实验方法和技能。

3. 通过实验，培养同学观察、比较、分析、综合等科学思维方法、独立工作能力和实事求是的科学态度。

4. 通过实验，使学生获得书写细胞生物实验报告、绘图、制表等方面的基本知识和技能训练。

二、医学细胞生物学实验报告的写作实验报告是科学研究的记录，同学们必须学会客观地、真实地记载实验过程和结果。

实验报告的形式一般可分以下三种：1. 文字报告：要求学员将观察所得和实验结果客观地用文字给以准确、详细的描述和记录。

文字力求简洁明了，条理清楚。

2. 绘图: 绘图是医学细胞生物学实验中常用的报告形式之一, 它既是根据所观察标本的真实记录和研究资料, 又可通过描绘学习更精细观察描述。

医学生物学实验绘图不同于一般艺术性绘图。

医学细胞生物学绘图的基本要求: ①绘图前应对标本加以仔细观察研究，并在正确的理解后方可动手绘制。

图中各种结构的大小应与实物成比例，力求准确，明暗之处以点疏密表示，切勿以铅笔涂施阴影；②绘图要求洁净明了，整齐有序，图的位置大小，要求分配适宜，线条力求匀整；③图绘好后，各部结构要用铅笔详细标注名称，标注的方法是：由所标注的部位引出直线，并将其名称注于线的末端，所引的线条应与报告纸上下沿平行，书写字应当横排，字迹要求端正。

3. 制表：将观察所得或实验结果，设计一表格，将有关结果逐项填入，表示其相应关系。

三、实验室规则1. 做好课前预习：实验课前，要认真阅读实验指导及与教材的有关内容，明确实验目的、要求和注意事项，了解实验内容、方法和步骤。

实验九细胞内蛋白质的分布与显示

实验九
细胞内蛋白质的显色与分布
(必做，综合性实验，4学时）
实验目的

ห้องสมุดไป่ตู้
掌握原位显示细胞内酸性、碱性蛋白质的方法并了解细胞内蛋白质的一般分布
实验原理
酸、碱性蛋白质的显示及分布

组织经三氯乙酸处理后可将核酸（DNA &RNA）抽提掉，细胞内保留下组蛋白和其它蛋白，组蛋白为碱性蛋白，其它蛋白呈酸性为酸性蛋白。蛋白质为两性电解质，在较其等电点为碱性环境中，蛋白质本身带阴电荷，在较其等电点为酸性环境中，蛋白质本身带阳电荷，组蛋白的等电点约8.5，酸性蛋白的等电点约4.6—6.75，固绿为酸性染料，其色素离子带阴电荷，在pH 2.2时，组蛋白和酸性蛋白均带阳电荷，均可以与固绿色素离子结合而着色。在pH8.0时，组蛋白带有阳电荷，仍然可以与固绿色素离子结合着色，而酸性蛋白带有阴电荷，不能与固绿的色素离子结合，不能显色。
缓冲液(pH2.2) 洗30s 制片镜检
缓冲液(pH8.0) 洗30s 制片镜检
实验结果
• 经固绿（pH2.2）染色后,细胞质和细胞核均呈绿色 • 经固绿(pH8.0) 染色后,只有细胞核被染成绿色
固绿染色法示细胞内总蛋白
固绿染色法示细胞内碱性蛋白
实验报告要求
摘要及关键词
前言材料和方法结果与分析参考文献

实验材料及试剂
仪器：显微镜水浴锅材料：洋葱鳞茎试剂：10%甲醛； 5%三氯乙酸； 0.1%固绿（pH2.2和pH8.0）；磷酸缓冲液（ pH2.2和pH8.0）；蒸馏水

实验流程
洋葱鳞茎内表皮
10% 甲醛固定 15 min
蒸馏水洗3次（吸去水) 5%三氯乙酸 90oC 15min 用蒸馏水轻缓洗涤至无气味 0.1% 固绿染色5min （pH2.2） 0.1%固绿染色5min （pH8.0）

东南大学农学院2021级《细胞生物学》考试试卷(802)

东南大学农学院2021级《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. G蛋白偶联受体中，霍乱毒素使G蛋白α亚基不能活化，百日咳毒素使G蛋白α亚基持续活化。

（）答案：错误解析：霍乱毒素，使α亚基丧失GTP酶的活性并处于持续活化状态；百日咳毒素抑制Gi的活性。

2. 组蛋白与DNA之间的相互作用依赖于核苷酸的特异序列。

（）答案：错误解析：组蛋白与DNA之间的相互作用主要是结构性的，基本不依赖于核苷酸的特异序列。

3. 体外细胞培养很容易被微生物所污染，因此细胞工程所有的实验都必须在无菌条件下进行，所有的实验器械和试剂都是以相同的方式消毒灭菌。

（）答案：错误解析：细胞工程实验用到的灭菌方式有高压蒸汽灭菌，高温灭菌，以及过滤等方法。

不同的器材试验器械和试剂所需要的灭菌方式不尽相同，例如：玻璃品类压缩空气的器皿可以通过高压蒸汽烘干，金属可以通过灼烧的方法进行高温灭菌。

4. 经过流式细胞仪分离出来的细胞不能继续培养。

（）答案：错误解析：如果染色过程不影响细胞活性，经流式细胞仪分离出来的细胞可以继续培养。

5. 基因扩增的结果是某些特定基因的拷贝数增加。

（）答案：正确解析：基因扩增是指细胞中某些基因的拷贝数专一性地大量增加的现象。

6. 核孔复合物中的环孔颗粒是由8对组蛋白质组成。

（）答案：错误解析：组蛋白是组装染色体的蛋白质，不会存在于核孔。

7. 细胞内新合成的多肽链如果带有信号序列，它就被运送到细胞外成为分泌蛋白；如果不带有信号肽，就留在细胞内。

（）答案：错误解析：蛋白分选的接收机分选序列多种多样，所决定的蛋白质的最终去向不一，如含N端信号肽的多肽将分泌至细胞外，而含有核定位信号的蛋白将进入细胞核。

2、名词解释（40分，每题5分）1. 细胞生物学（cell biology）答案：细胞生物学是指由从细胞的显微结构、超微结构和大分子的各级水平研究细胞的各级结构与功能的关系，探索细胞生长、发育、分化、繁殖、遗传、变异、代谢、衰亡及进化等各种生命现象规律的。

07级实验二：DNA和RNA和过氧化物酶原位显示 (恢复)

方法：方法：
骨髓涂片，要求涂薄骨髓涂片， 0.5%硫酸铜溶液固定分钟 0.5%硫酸铜溶液固定0.5分钟硫酸铜溶液固定0.5 玻片晾干后，37° 玻片晾干后，37°C 水浴锅联苯胺混合染液染色3 染色3分钟 1%番红染液复染1分钟 1%番红染液复染番红染液复染1 细水冲，细水冲，晾干后镜检
请班长安排今天做清洁的同学，谢谢。做完实验后，清理好自已的桌面，交实验报告后才能离开。
对于同学们参与这次教学活动的考核，对于同学们参与这次教学活动的考核，本着客观、公正的原则，着客观、公正的原则，主要依据选题的合理性和难度，展示方案的完整性、合理性、理性和难度，展示方案的完整性、合理性、正确性，演讲的实际效果，正确性，演讲的实际效果，由任课教师评出优秀及良好项目，作为平时成绩加分。出优秀及良好项目，作为平时成绩加分。
方法：方法：（1）制备蟾蜍血涂片要求血膜较薄，要求血膜较薄，充分晾干 70%酒精固定5 （2）70%酒精固定5分钟玻片晾干或用吹风吹干后，（3）玻片晾干或用吹风吹干后，染 15分胞内过氧化物酶的原位显示 • 原理：原理：过氧化物酶能将联苯胺氧化为蓝色或棕色产物，蓝色或棕色产物，由此显示细胞内过氧化物酶的存在和分布。过氧化物酶的存在和分布。
细胞内DNA、RNA 实验二细胞内、及过氧化物酶的原位显示实验目的：实验目的：了解原位显示细胞内DNA、了解原位显示细胞内、 RNA、过氧化物酶的方法；熟悉血、过氧化物酶的方法；液涂片、骨髓涂片及固定染色方法。液涂片、骨髓涂片及固定染色方法。
实验内容：实验内容：
一、细胞内DNA和RNA的原位显示细胞内DNA和RNA的原位显示原理：原理： DNA和 RNA因聚合程度的不同 DNA 和 RNA 因聚合程度的不同，可被甲基绿— 可被甲基绿 —哌洛宁混合染液染成不同的颜色，DNA聚合程度高聚合程度高，同的颜色，DNA聚合程度高，被甲基绿染成蓝绿色；RNA聚合程度低聚合程度低，绿染成蓝绿色；RNA聚合程度低，被哌洛宁染成红色。哌洛宁染成红色。

实验报告脂类的化学——苏丹三染色

一．实验目的1.熟悉脂类的显示技术。

2.了解脂类在细胞中的分布。

二．实验原理脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质，根据其性质可以分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂等。

很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。

脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。

脂肪不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此制作脂类标本一般不用石蜡切片，而用冰冻切片或者铺片法以保存脂类，固定多用甲醛类固定液。

其染色方法有脂溶性染料显示法、化学显示法和特异染色法等。

脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。

60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。

丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。

用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。

常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。

用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片，但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片，明胶包埋冰冻切片，铺片法。

本实验中使用的脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV或者苏丹黑等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。

苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。

苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪。

当它与含有脂类的标本接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂结构中使其显色。

三．实验仪器及试剂1.仪器解剖盘，解剖剪，镊子，盖玻片，载玻片，显微镜，胶头滴管2.试剂苏丹Ш染液，甲醛钙溶液，70%乙醇溶液，蒸馏水3.材料小白鼠一只四．实验步骤1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中。

剪开腹腔，用镊子提起小肠将盖玻片紧贴于肠系膜，并在其下放置一载玻片，用剪将连同载玻片和其上粘着的肠系膜取下。

细胞化学与组织化实验一~实验四

一、实验目的
掌握细胞内碱性蛋白的鉴别方法并了解碱性蛋白在细胞内的分布。
学会制作血涂片并掌握制作技巧。
细胞化学与组织化实验一~实验四
二、实验原理
由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同，在pH值不同的溶液中，蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下，整个蛋白质所带负电荷多，则为酸性蛋白质；带正电荷多，则为碱性蛋白质。据此，可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后用不同pH值的固绿染液分别染色，细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。
细胞化学与组织化实验一~实验四
A液（0.2mol/L乙酸液）：冰醋酸1.2ml加蒸馏水100ml 。 B液（0.2mol/L乙酸钠液）：NaAc.3H2O 2.72g加蒸馏水至１00毫升。取A液３０毫升＋B液70毫升＋蒸馏水300毫升。 6)6%淀粉肉汤:牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,NaCl 0.5g,可溶性淀粉６.0g，蒸馏水１00ml，煮沸灭菌，４℃保存，使用时热水浴融化。
4．使用药品、试剂和各种药品注意节约，爱护器材。洗涤和使用仪器时应仔细，防止损坏仪器。严格遵守仪操作规程，在未知正确操作程序时，不要独自使用，须在老师的指导下进行。
细胞化学与组织化实验一~实验四
5．实验废弃物、毒害性实验材料应倾倒在指定地点，统一处置。 6．实验时一律穿工作服，不允许穿拖鞋进实验室，以免溅落的腐蚀性药品或掉下的玻璃器皿伤及裸露的皮肤。 7．节约水、电、气，燃气灯应随用随关。最后离开实验室时，要将室内检查一遍，关好水、电、气，锁好门窗。 8．实验室内一切物品，未经本室负责教师批准，严禁携出室外。借物必须办登记手续。 9．实验结束，将实验记录交指导教师审阅并做好室内清洁工作。
细胞化学与组织化实验一~实验四

大学细胞生物学考试(习题卷44)

大学细胞生物学考试(习题卷44)说明：答案和解析在试卷最后第1部分：单项选择题，共88题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]可以自由通过核孔的是（）A)亲核蛋白B)核糖体小亚基C)核苷酸D)mRNA2.[单选题]关于肿瘤细胞的增殖特征，下列说法不正确的是（）。

A)肿瘤细胞在增殖过程中，不会失去接触依赖性抑制B)肿瘤细胞都有恶性增殖和侵袭、转移的能力C)肿瘤细胞和胚胎细胞某些特征相似，如无限增殖的特性D)肿瘤细胞来源于正常细胞，但是多表现为去分化3.[单选题]属于中着丝粒染色体的是A)1号染色体B)2号染色体C)21号染色体D)Y染色体4.[单选题]体外培养的成纤维细胞通过（）附着在培养瓶上。

A)黏着斑B)黏着带C)桥粒D)半桥粒5.[单选题]无论是糖脂还是糖蛋白，其糖基侧链都分布在质膜的（）。

A)PS面B)ES面C)EF面D)PF面6.[单选题]间隙连接蛋白基因在S期的哪一时期复制A)S期的早期B)S期的中期C)S期的晚期D)S期的早期或中期7.[单选题]Caspase家族编码产物的作用正确的是（）C)蛋白酪氨酸激酶活性D)促进细胞凋亡8.[单选题]中间纤维之所以没有极性是因其组装至（）时便已经没有极性。

A)单体B)二聚体C)四聚体D)八聚体9.[单选题]在《酸性蛋白和碱性蛋白分布》的实验中，酸性和碱性蛋白应分别染色在（）。

（实验）A)酸性蛋白在细胞浆，碱性蛋白在细胞核B)均在细胞浆C)碱性蛋白在细胞浆，酸性蛋白在细胞核D)均在细胞核10.[单选题]构成染色体的基本单位是（）。

[中国科学院大学2016研]A)核小体B)组蛋白C)螺线管D)超螺线管11.[单选题]初级溶酶体与次级溶酶体的区别在于（）。

A)初级溶酶体不含作用底物B)初级溶酶体不含水解酶C)初级溶酶体中的水解酶不成熟D)初级溶酶体不含作用产物12.[单选题]对于中间纤维的组装，下列说法错误的是( )A)首先由中间纤维单体以平行且相互对齐的方式形成双股超螺旋二聚体B)二聚体再以反向平行和半分子交错的方式组装成四聚体C)四聚体又进一步以反向平行方式形成八聚体的原纤维D)最终由四根原纤维互相缠绕形成中间纤维13.[单选题]在核孔的位置，内外核膜（）A)重叠B)融合C)接触D)交叉14.[单选题]关于紧密连接下列描述错误的是( )A)常与黏着连接及桥粒共同连接复合体B)应用冷冻复型技术,电镜下观察呈现一条点线C)可被胰蛋白破坏D)起着将上皮细胞联合成整体的机械作用15.[单选题]在减数分裂S期DNA并不完全复制，大约还有（）DNA是在偶线期合成的。

答案系统解剖学试题

9.有关免疫组织（细胞）化学技术的表述中，哪一项是错误的（ C ）
A.以抗原抗体结合反应为基础，显微镜下查知细胞内某抗原的技术
B.显微镜下见不到抗原抗体反应
C.用可见标记物标记的抗体与抗原反应，即可直接确定抗原所在
D.用可见标记物标记的抗体与抗原反应，镜下见到的标记物所在，即间接证实抗原所在
D.不断排除细胞产生的有害代谢产物
E.必要的电解质和适宜的渗透压
9.电镜标本中电子密度高的结构是（ABD ）
A.被重金属盐所染的部位
B.照片上图象较黑的部位
C.物体本身较淡而周围染色较暗的部位
D.在荧光屏上显得较暗的部位
4.人体的四大基本组织为（上皮）,（结缔）,（神经）和（肌）。
5.光学显微镜下所见的结构称（光镜结构）,电子显微镜下所见的结构称（超微结构）。
6.光镜的放大倍率是（0.2um ），电镜的放大倍率是（0.2nm ）。
7.电镜技术常采用重金属盐电子染色增加超微结构黑白反差，被重金属盐浸染显深色的结构称（电子密度高），浅色结构称（电子密度低）。
(七)、思考题
1. 如何用石蜡切片术制备组织切片？
（1）石蜡切片术是最常用的技术，包括石蜡包埋切片与苏木精、伊红染色法两部分。（2）其基本程序包括：取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片与烤片、染色、脱水、透明、封片。
二、答案与题解
(一)、填空题
1.微细结构相关功能
D.脂肪 E.蛋白质
2.扫描电镜术主要用于观察（C ）
A.生物膜内部结构
B.细胞器的内部结构
C.组织和细胞的表面结构
D.细胞内的多糖

大一上学期实验二.酸碱蛋白显示教学课件

实验二
细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示
一、目的要求
㈠掌握血涂片的制作方法。㈡掌握酸性蛋白、碱性蛋白显示的原理。㈢了解上述化学成分显示的方法。㈣熟悉上述化学成分在细胞中的分布。
二、实验原理
利用化学试剂与细胞内蛋白质产生有色的沉淀反应，可对蛋白质进行定性、定位。
➢蛋白质的基本组成单位是氨基酸，它们同时具有氨基和羧基。细胞内不同蛋白质分子中所带的碱性基团和酸性基团的数量不同，在不同PH溶液中，整个蛋白质所带静电荷多少也不同。如整个蛋白质所带的负电荷多，就为酸性蛋白；带正电荷多，就为碱性蛋白。
注意事项
■ 在制作血涂片的过程中要用力均匀，避免来回推拉及刮片．好的血涂片在显微镜下观察到的细胞应成单层均匀排列。
■ 抽提核酸是该实验中的关键。核酸带负电荷，如未被提取，显示碱性蛋白时，核内不能染色，或整个切片染成蓝绿色，水洗或进入酒精即褪色。
■ 染液pH必须控制在要求范围，从而使其他蛋白质染色极微。
四、观察结果
酸性蛋白与碱性内遍布绿色，细胞核内绿色稀少。
碱性蛋白染色时，蟾蜍红细胞核为绿色。
显示细胞内酸性蛋白
显示细胞核内碱性蛋白
五、实验报告结果部分的书写要求
1、说明细胞内酸性蛋白和碱性蛋白染色原理。 2、根据实验情况说明酸性蛋白与碱性蛋白在细胞
2. 将涂片作好标记放在70％乙醇中固定5分钟，室温晾干。
3．放入5％三氯醋酸中60℃ 20分钟，抽提出核酸。 4．清水冲洗多次（3分钟以上），以冲去残留的三氯
醋酸。 5．滤纸吸干玻片上水分。 6. 一张片放入0.1％碱性固绿 (pH8.0～8.5) 中染色
30分钟, 另一张片放入0.1％酸性固绿 (pH2.0～ 2.5)染色5分钟。 7．清水冲洗，镜检。

2025年高考化学练习与答案 (9)

2025年高考化学练习与答案(9)1．编码某蛋白质的基因有两条链，一条是模板链（指导mRNA合成），其互补链是编码链。

若编码链的一段序列为5＇—ATG—3＇，则该序列所对应的反密码子是（）A．5＇—CAU—3＇B．5＇—UAC—3＇C．5＇—TAC—3＇D．5＇—AUG—3＇2．如图所示为基因控制蛋白质的合成过程，①～⑦代表不同的结构或成分，I和Ⅱ代表过程。

下列叙述正确的是（）A．过程I为解旋，③表示RNA解旋酶B．模板①转录产生④时存在U-A配对C．一个RNA只能结合一个⑤D．该生物能边转录边翻译属于原核生物3．根据下表提供的信息，可以确定色氨酸的密码子是（）CDNAGmRNA GtRNA A氨基酸色氨酸A．UGG B．TGG C．ACC D．UCG4．某基因编码精氨酸的序列发生了一对碱基替换，导致终止密码子提前出现，校正基因表达出能携带精氨酸的校正tRNA，可识别该终止密码子，弥补突变的结果。

下列叙述正确的是（）A．tRNA由两条核苷酸链通过氢键结合形成B．mRNA和校正tRNA都是基因转录的产物C．翻译过程中mRNA读取tRNA上的密码子D．终止密码子在编码精氨酸的同时让翻译终止5．下图表示某真核生物细胞中基因表达的过程，下列有关叙述正确的是（）A ．X 表示RNA 聚合酶，能催化磷酸二酯键的形成B ．图2中核糖体沿着mRNA 从3’端向5’端移动C ．与图1相比，图2中特有的碱基配对方式是A-UD ．图2过程可形成肽键，该过程需要水的参与6．基因可以控制蛋白质的合成，而细胞中不同基因控制合成蛋白质的效率是有差异的。

图示为真核细胞的核基因表达过程，下列有关分析正确的是（）A ．生物的基因均为具有遗传效应的DNA 片段B ．图中mRNA 分子的加工和翻译分别发生在细胞核和细胞质C ．翻译时核糖体沿着mRNA 的3'端向5'端移动读取密码子序列D ．蛋白质A 的量高于B,源于A 基因转录时核苷酸链的延伸更快7．人体染色体上某基因的转录起始区域的一条DNA 链的部分序列为5'-ATGGAAACCGAG-3'，该片段决定的氨基酸依次为甲硫氨酸（起始）—天冬氨酸—苏氨酸—谷氨酸……，表中为部分密码子及其决定的氨基酸。

甲基绿——派洛宁法显示细胞内DNA、RNA的分布实验报告山东大学

科目细胞生物学实验题目甲基绿——派洛宁法显示细胞内DNA、RNA的分布甲基绿——派洛宁法显示细胞内DNA、RNA的分布【实验目的】1.学会制作血涂片；2.熟悉甲基绿——派洛宁法显示核酸的原理与操作步骤；3.观察DNA、RNA在细胞中的分布。

【实验原理】1、电离作用：脱氧核糖核酸和核糖核酸都有磷酸基，又有碱基，故为两性电解质。

在一定的条件下，可以电离而带电荷，因此都有一定的等电点。

甲基绿、派洛宁为两种碱性染料，在水中电离后，都产生带阳电荷的离子，常与带负电荷的磷酸根形成盐键。

甲基绿电离后，在五价氮处产生二个正电荷，碱性较强，易与双链DNA分子（胞核等电点pH3.8～4.2）进行极性吸着而结合，使DNA显示绿色；派洛宁电离后仅产生一个正电荷，碱性较甲基绿弱，与单链RNA （胞质等电点pH4.6～5.2）吸附结合，使RNA显示红色。

2、聚合作用：甲基绿对聚合高的DNA有亲和力，派洛宁对聚合低的RNA有亲和力。

因此，甲基绿选染DNA，而派洛宁选染RNA。

【甲基绿——派洛宁法实验步骤】1．取蟾蜍（蟾蜍破髓，仰位剪去下颌、舌头）制备血涂片，干燥后滴加70%的乙醇溶液固定10分钟，晾干。

2．滴染色液于血膜上，染15分钟。

（或在染色缸中）3．蒸馏水冲洗，去染液。

4．向染色液血膜滴加95%乙醇溶液分色、同时倾斜载片弃液体，晾干。

5. 观察。

甲基绿—派洛宁染液配制试剂：0.2mol/l醋酸缓冲液（PH4.8）A液：冰醋酸1.2ml+蒸馏水至100mlB液：醋酸钠（NaAc·3H2O）2.72克溶于100ml蒸馏水中使用时，A液与B液按2：3比例混合。

甲基绿—派洛宁染液A液:2克甲基绿加0.2mol/l醋酸缓冲液至100ml。

B液:1克派洛宁Y加0.2mol/l醋酸缓冲液至100ml。

临用时，A液于B液5：2混合。

甲基绿派洛宁法试剂配制（改良Cook，1974）（一）2%甲基绿水溶液：甲基绿（methyl green）1g蒸馏水加至50ml用三氯甲烷抽提，方法详后。

细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示细胞内DNA和RNA的原位显示

6. 盖玻片、吸水纸等扔到垃圾桶中。
（弃入水槽中会引起下水道堵塞）
理（为什么？）
[结果观察]
酸性蛋白
碱性蛋白
DNA和RNA的
[作业]
1. 请回答细胞化学法在本次实验中的应用。 2. 通过本次实验学到哪些基本操作技能？ 3. 请描述本次实验的显微观察结果。
[小结]
• 评价本次实验的得失 • 本次实验需要巩固的概念
细胞化学法 • 本次实验需要掌握的实验技能
1. 血涂片制作方法 2. 染色的规范操作方法 3. 洗涤方法（流水冲洗） 4. 正确的镜检方法（显微观察技术）
2. 甲基绿和派洛宁是互不混淆、互不影响的两种染色剂，由于其自身分子结构的特点，它们可与两种聚合程度不同的核酸竞争性结合，从而同时显示细胞内DNA和RNA 的分布部位。
[实验用品]
✓ 95%乙醇 ✓ 三氯醋酸 ✓ 甲基绿-派洛宁 ✓ 0.1%酸性固绿 ✓ 0.1%碱性固绿
[操作流程]
暴露
第二次实验
Ⅰ 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示 Ⅱ 细胞内DNA和RNA的原位显示
[实验目的]
1.掌握酸、碱性蛋白以及DNA和RNA在细胞内的分布情况；
2.了解酸、碱性蛋白以及DNA和RNA显色反应的原理和方法。
[实验原理]
1. 由于不同蛋白质分子所带酸性基团和碱性基团数量不同，生理条件下，整个蛋白质带负电荷多则为酸性蛋白，带正电荷多则为碱性蛋白。可用不同pH值的固绿染色，即可显示细胞内酸性蛋白或碱性蛋白。核酸的存在会影响实验结果用三氯醋酸处理
值日生工作：
1、检查显微镜
2、清点检查器材
3、清洁公共实验区、打扫卫生
镜检后作业与工作
1. 完成实验报告；

生物显微技术复习题

生物显微技术复习题复习题（一）1.简述制作石蜡切片制作的基本步骤。

答：（1）取材（2）固定（3）洗涤（4）脱水（5）透明（6）透蜡与包埋（7）切片（8）贴片(展片、捞片)（9）染色（10）封片2.固定的意义和目的有哪些？答：（1）意义：在制作切片的过程中，取材后应将组织材料立即固定，才能进行制片，固定是制片极为重要的一步。

（2）目的：○1使各成分凝固和沉淀下来；○2防止自容和腐败；○3使不同成分产生不同的折光率，便于显微镜观察；○4硬化组织,便于切片；○5媒染—使细胞易于着色。

3.（1）最常用的单纯固定液是哪种？答：甲醛和乙醇。

（2）解析Bouin氏液、Zebker氏液的成分？答：○1Bouin氏液：饱和苦味酸水溶液75ml、甲醛水溶液25ml、冰醋酸5ml；○2Zebker氏液：升汞5g、重铬酸钾2.5g、蒸馏水100ml、冰醋酸5ml。

（3）Bouin氏液固定后，为了加速清除固定后组织块上的黄色，可在洗涤液中加入少量氨水或＿＿。

4.最常用的脱水剂是酒精，最常用的透明剂是二甲苯。

5.包埋前透明和染色后透明的目的各是什么？答：(1)包埋前透明:将脱水剂替换出来，使石蜡能顺利进入材料中。

（2）染色后透明:脱去组织中的水，防止封片时出现雾状膜。

6.软蜡和硬蜡的熔点范围各是多少？一般包埋时使用的石蜡的熔点是多少？答:（1）软蜡：42~45℃、45~50℃；硬蜡：52~54℃、54~60℃（2）动物材料常用的石蜡熔点为52-56ºC；植物材料为54-60ºC。

复习题（二）1.一般制作石蜡切片时切片厚度是多少？答：4~10微米。

2.为什么切片要进行染色?答：使组织或细胞的某一部分染上与其他部分不同深度的颜色或不同的颜色，产生不同的折光率，便于利用光学显微镜进行观察。

3.封固的目的是什么？常用的封固剂有哪些？主要适用于哪些情况？答：（1）封固的目的：便于保存和观察；（2）常用的封固剂：○1含水封固剂：如甘油，甘油明胶和Apath糖浆等，用于未染色的材料、脂肪染色、异染染色等。

生物化学：第五章核酸参考答案

第五章核酸1、比较DNA和RNA在化学组成、分子结构和生物功能上的特点。

答：(1) 化学组成上，DNA主要由脱氧核糖、磷酸和碱基组成；RNA由核糖、磷酸和碱基组成。

DNA和RNA共有的碱基为腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）；此外，胸腺嘧啶（T）只存在于DNA中，而尿嘧啶（U）只存在于核糖核酸中。

(2) 分子结构上，DNA是由两条DNA单链构成的，遵循碱基互补配对原则(碱基间的氢键作用为Watson-Crick氢键)，形成双螺旋结构，其中碱基位于内侧，磷酸和脱氧核糖位于外侧。

螺旋的横截面直径为2.0 nm，每条链相邻的两个碱基平面之间的距离为0.34 nm，每十个核苷酸形成一个螺旋；而RNA是一条单链，碱基不遵守数量比例，但可以形成碱基互补配对区，折叠成茎-环结构，而非互补的RNA以发夹、凸环形式突出来。

此外，它的配对也不像DNA那么严格。

(3) 生物功能上， DNA是生物体内的主要遗传物质，承载着生物体的主要遗传信息；RNA根据功能的不同主要分三类，即tRNA（转运RNA）, rRNA（核糖体RNA）, mRNA（信使RNA）。

mRNA是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的DNA所转录；tRNA是mRNA上碱基序列（即遗传密码子）的识别者和氨基酸的转运者；rRNA是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。

2、为什么pH变化对DNA、RNA结构和性质有很大的影响？答：(1) 核酸是两性物质，既有酸性基团（磷酸基）也有碱性基团（碱基）。

核酸分子中，磷酸是个中等酸，而碱基是个弱碱，因而等电点会比较低。

PI DNA约为4-4.5，而PI RNA约为2-2.5，导致二者等电点差异的主要原因是核糖上2位羟基的存在与否，RNA中2位羟基的存在，产生邻基效应，导致分子的酸性增强。

二者等电点方面的不同，导致了溶解度等性质的不同。

(2) DNA和部分RNA中存在互补的碱基对，碱基对之间通过氢键连接。

此外，DNA和RNA的碱基有所不同。