高效液相色谱手性固定相研究进展

合集下载

以氨基酸为手性源制备手性固定相的研究进展

以氨基酸为手性源制备手性固定相的研究进展

以氨基酸为手性源制备手性固定相的研究进展摘要:手性氨基醇具有广泛用途,所以合成手性氨基醇仍是学者们未来的重要任务之一,手性分离的发展必定会促进手性药物的发展,而且也为手性新药的研制和开发提供了有效地分析手段,以氨基酸为手性源的手性固定相具有很重要的地位。

目前,我们还需要进一步对基于氨基酸类的手性固定相的研究,一方面要制备出合适的链结构;另一方面,也要找到好的搭载体,使其更好发挥作用。

因此,我们有理由相信,随着研究的深入,应用手性固定相来进行分离会有更广阔的应用前景。

基于此本文分析了以氨基酸为手性源制备手性固定相的研究。

关键词:氨基酸;手性源;固定相1、概述人工合成的手性聚合物与天然大分子相比,在结构和键的连结方式上更具多样性。

手性聚合物一般含有一个或多个手性中心,具有比较规整的高层次结构,通常表现出较高的手性识别能力,目前已手性固定相及手性分离膜等领域获得了广泛的应用,例如用螺旋聚甲基丙烯酸三苯甲基酯制备的高效液相色谱的手性固定相,对很多外消旋体都表现出了较强的手性识别能力。

目前,制备与天然大分子具有类似结构的聚合物,特别是氨基酸衍生的旋光性高分子已成为高分子材料领域的研究热点主要包括旋光性聚酰胺、旋光性聚酯以及旋光性聚酰胺酰亚胺等,这些高分子材料在手性分离、手性液晶、手性催化剂、非线性光学材料等领域具有广泛的应用价值。

氨基酸(Aminoacid)是蛋白质(protein)的基本成分,赋予蛋白质特定的分子结构形态,使它的分子具有生化活性,典型的生物大分子聚合物,不仅是生物重要的组成成分,而且是手性助剂和有机合成中的物质基础,以氨基酸为基础合成的聚合物也将显示一定的生物相容性以及可生物降解性。

利用氨基酸进行合成手性聚合物的研究从1960年开始[20],带有由于特有的不对称结构以及生物相容性能手性氨基酸侧基的聚烯烃在药物输送、生物降解材料,手性固定相、手性不对称催化合成以及金属离子吸附剂等方面具有潜在的应用价值,作为人体必需氨基酸,手性氨基酸有许多优异的特性,如它的稳定多肽α-螺旋构象,所形成的聚合物也可以通过分子内氢键形成稳定的螺旋结构,在医药、食品、等行业具有重要的应用前景。

非衍生纤维素高效液相色谱手性固定相的研究

非衍生纤维素高效液相色谱手性固定相的研究

装 柱 , 正相 色谱 条件 下 对 2 在 1种 手 性 化 合 物 进 行 拆分 , 有 1 并 3种手 性化 合 物 得 到 了不 同程 度 的分
离 , 究 结果 表 明该 手 性 固 定 相 具 有 良好 的 手 性 研 分 离 能力 。
效 液相 色谱 ( L 手 性 分 离 分 析 y( P C ,n t ci l o m (5 m x2 0 ho aor h H L ) a di hr l n 2 0 m . mm,. . w speae ne h rsueo 0 MP.n te a s acu id ) a rprdu drtepesr f a I 4 h
纤 维 素是 第 一 个 用 于手 性 分 离 的 多 糖 , 为 因 氨基 酸 在纸 色谱 得 到 了较 好 的分 离 。 由 于纤 维 素不 溶 于通 常 的溶 剂 , 因此 本 文 将 纤 维 素 溶 解 在
D .iI , MA LC 中 涂敷 在 硅 烷化 的 硅 胶 上 。采 用 湿 法
中 图 分 类 号 :6 7 7 0 5 . 文献标识码 : A
A t y o s ud n DM A- CIc lul s hi a t to r a e n H PLC - Li ・ el o e c r ls a i na y ph s s i ・
M A a AIPi g, Ch o, n ZHANG e , ENG M iP Ya, YUAN imi g L- n
Ke wo d : DMA. i 1c l l s y rs L C 一 el oe; hg — ro a c l u d c r mao a h ; e ia sai n r p a e; c i l c mp u d ; u ih p fr n e i i h o tg p y e m q r h r l tt a y h o s h r o o n s a

纤维素衍生物手性固定相高效液相色谱法分离盐酸川丁特罗对映体

纤维素衍生物手性固定相高效液相色谱法分离盐酸川丁特罗对映体
链 淀粉 手性 固定相 法 、 以羟丙 基 -一 糊精 为 流 动 环
( 纯度 均 ≥9 . %, 阳)。
1 2 色谱 条件 .
色谱 柱 :u e uo e1手性柱 ( 5 L xC l ls 一 l 2 0mm 4 6 x .
体无 分离 趋 势 。 当添 加 0 1 的 三 氟 乙酸 时 , 酸 .% 盐
相 添加 剂 的毛细 管 电泳 法 ( E) 和 反 相 高效 液 相 C
色谱 ( L 柱 前衍 生 化 法 H 。其 中 C 系统 稳 定 HP C) E 性 较差 , 平衡 时 间较 长 ; 前 衍 生 化 法操 作 繁 琐 , 柱 耗 时较长 , 不利 于快 速分 析 , 分离 效果 受手 性试剂 纯 且
c r ls a i na y p s hia t to r ha e;ta i t r d o hl rde; e an i m e i e r to r ntn e olhy r c o i n to rc s pa a i n
盐酸Jf 特罗 (rnitr l y r c lr e , l 丁 t t eo d o ho i ) 化 a n h d
添加适 当的流动 相添 加剂 以改 善峰形 、 高分离 度 。 提
对 酸性 物质 , 常加 入 三 氟 乙 酸 ; 碱性 物 质 , 4 常 对 A 加 r 入 二 乙胺 ’ 从 川 丁 特 罗 的 分 子 结 构 式 可 以看 。 出, 它的手 性 中心连 接 了一 个 仲氨基 , 苯环 上连 接 了

13 8・ 1


第2 9卷
a 4 m n o u n t mp r t r f2 ℃ .T e me h d i i p ea d r p d f rt e e a t — t2 6 a a d a c lm e e au e o 5 h t o ssm l n a i o h n n i o

高效液相色谱法手性分离二茂铁衍生物

高效液相色谱法手性分离二茂铁衍生物

高效液相色谱法手性分离二茂铁衍生物徐峰;万晓龙;王军锋;康经武【摘要】The method for the enantioseparation of ferroence derivatives,four derivatives with single chirality and three derivatives with double chiralities containing centre and face chirality , on chiral stationary phases,namely Chiralpak IC( cellulose-tris( 3,5-dichlorobenzene carba-mate))and Chiralpak IE3(amylose-tris(3,5-dichlorobenzene carbamate)),was investigated. We found that the three derivatives of the four chiral ferroence derivatives with single chirality can be baseline separated on Chiralpak IE3;another one can be baseline separated on Chiral-pak IC. Meanwhile,the three chiral ferroence derivatives with double chiralities can be baseline separated on Chiralpak IC. The research shows that the both kinds of chiral stationary phases exhibited high enantiomeric recognition capability to the enantiomers of the chiral ferroence derivatives. This two chiral stationary phases exhibited complementary selectivities in the enan-tioseparation of chiral ferroence derivatives. This study provides a reference method for the enantioseparation of chiral ferroence derivatives.%建立了4个单手性和3个双手性(含有手性中心和面手性)的二茂铁衍生物在Chiralpak IC(纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯))和 Chiralpak IE3(直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯))手性固定相上的高效液相色谱分离方法。

手性高效液相色谱法

手性高效液相色谱法

手性高效液相色谱法手性药物对映体在人体内与受体、酶等生物大分子互相作用,展现出复杂的对映体挑选性,进一步表现为不同的药理作用、代谢过程和毒性反应。

对于手性药物,可能其中一个对映体活性高、疗效好,为活性对映体(优对映体);另外的活性低甚至没有活性的为劣对映体。

因为劣对映体没有药效或药效较低,甚至可能产生严峻的不良反应,基于此,FDA 于1992年领先发布了手性药物指导原则,我国亦于2006年颁布了《手性药物质量控制讨论指导原则》。

为了评价手性药物的生物活性,监测对映体的光学纯度,建立和进展迅速精确的药物对映体分别办法具有重要的意义。

手性高效液相色谱法通常分为挺直法和间接法。

间接法又称手性衍生化试剂法(chiral derivatization reagent, CDR),是将对映体与手性光学试剂反应,生成一对非对映异构体之后以常规固定相分别,因此是对手性衍生物的非手性分别。

而挺直法则是采纳手性固定相法(chiral stationary phase, CSP)或将手性化合物加入到流淌相中,再用常规固定相分别的手性流淌相法(chiral mobile phase, CMP)。

手性固定相法因其用法简便快捷、重复性好、精确度高、应用范围广而倍受青睐。

一、手性色谱柱的分类目前,已商品化的手性固定相有100多种,按照手性固定相和溶剂的互相作用机制,Irving Wainer首次提出了手性色谱柱的分类体系:第1类:通过氢键、π-π作用、偶极-偶极作用形成复合物;第2类:既有1类中的互相作用,又存在包埋复合物。

此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱;第3类:基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。

这类手性色谱柱中最典型的是环糊精型手性柱,另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(苯基甲基甲基丙烯酸酯)形成的手性色谱柱也属于此类;第4类:基于形成非对映体的金属络合物,是由Davankv 开发的手性分别技术,也称为.手性配位交换色谱(CLEC);第5类:蛋白质型手性色谱柱,手性分别是基于疏水互相作用和极性互相作用得以实现的。

手性药物色谱拆分法研究发展

手性药物色谱拆分法研究发展

5.1 间接拆分法
[1]Zukowski J,De Biasi V,Berthod A. Chiral
等特点,并具在手性分离方面与高效液相色谱、
间接拆分法[8]虽需进行衍生化反应,但生 separation of basic drugs by capillary elec-
气相色谱相互补充,在光学纯药物的制备方面 成的非对映体异构体,物化性质不同,可用常规 trophoresis with carboxymethylcyclodextrins [J].J
的技术,它以高压电场为驱动力,以毛细管为分 - NHCO- 基团。苯环的取代基的性质,数目及位 [11]LI Bing,SHI Jie -hua,YANG Gen -sheng,.
离通道,依据样品中各组分间电荷及质量的差 置对手性化合物的拆分影响很大[11]。蛋白质类 Cellulose-based chiral stationary phase in high
副作用。因此手性药物拆分近年来引起人们的 D- 10- 樟脑磺酸胺作为手性离子对试剂添加到 是很广泛;GC 法对于药物的沸点要求严格,故
广泛关注。目前,手性药物的拆分主要有化学拆 流动相中,在硅胶 GF254 薄层板上分离了两种芳 GC 应用范围有限;CE 法和 TLC 法检测灵敏度
分法、结晶法、生物拆分法和色谱法等等,其中 香醇胺类药物对映体拉贝乐尔和倍它乐克,并 较低,有待研究提高发展;HPLC 法因手性固定
也有其局限性,如检测灵敏度不足,重现性差等 磺酰基 - 1,2- 二苯基乙二胺,研究了流动相中 对甲基苯磺酰基-1,2-二苯基乙二胺在卵类粘
[6]。
有机调节剂的种类和含量等色谱条件对拆分结 蛋白柱上的手性拆分[J].色谱,2003, 21(4): 407.

直链淀粉手性固定相高效液相色谱法拆分比索洛尔对映体

直链淀粉手性固定相高效液相色谱法拆分比索洛尔对映体

e
l

(0 2 4 )239 862 85


E
-
m
a
il

l if a E

n
g l 9 8 4 6 7 @ 16 3 il


c o r n

通 讯 联 系 人 :郭 兴 杰 教 授 博 士 生 导 师
, ,
T
e
l

(0 24 )2 39 86 2 8 5

m a
gx jh y z @ y
a
h
o o
p
r o
lo l
c a n
b
e
e
s e
p
r a
a
te d qu ic kly a n d e a s
ily
K
e
y
a m
y la
h ir
l
s
t a t io
y
ph
tio
n
a s e ;
h ig h
p
f r
o r m a n c e
liq u id
c
hr
o m
a
to gra phy
(HPLC )

b is

n c o r

c a

第 6期

芳, : 等 直链淀粉手性 固定相高效液相色谱法拆分比索洛尔对映体
・6 7 7・
1 实 验 部 分
1 1 仪 器 与 试 剂 .
表 2 流动 相 中 乙醇 比例 对 B P对 映 体 分 离 的 影 响 S
L 一0 C 1 A型 高 效 液 相 色 谱 仪 、 P -0 型 紫 外- S D 1A 可见 分光 检 测 器 ( 日本 岛 津公 司 ) A a tr色 谱 工 ; n sa

高效液相色谱中乙基纤维素手性固定相研究

高效液相色谱中乙基纤维素手性固定相研究

素 手性 固定 相 的报 道 。本 文制 备 了 乙基纤 维 素 手 性 固定相 , 在正相 、 相 以及 极 性有 机 溶剂 的 流 并 反
动相 条件下 , 1 对 5种手 性化 合 物 的拆 分 情况 进行 了探究 , 中 9种得 到 了不 同程 度 的分 离 , 其 研究 结 果表 明该手性 固定相 具有较 好 的手性拆 分能 力 。
色谱是最 普 遍使 用 的方 法 之 一 , 而其 中又 以手 性 固定相法 最 为 常 用 … 。在 众 多 手 性 固 定 相 中 , 各
种 多糖及其 衍 生 物 , 别 是 纤 维 素 和 直 链 淀 粉 的 特 衍 生物 因具 有很好 的手 性识 别 能 力 而得 到 了广 泛 研 究 。但 到 目前 为 止 , 们 还 未 见 乙基 纤 维 我
7 : 0的 甲醇作流 动相 , 速为 0 5 L mn, 03 流 . m / i 柱 温 3 ℃ , 测波 长 24 m。以 13 5一三叔 丁基 苯 O 检 5n ,, 作溶质, 测定 死 时间 。
2 结 果 与 讨 论
采 用涂 敷 型 乙基 纤 维 素手 性 固定 相 , 不 同 在 流 动相 条 件 下 , 1 手 性化 合 物 进 行拆 分 , 对 5种 化
加入 1mL四氢 呋 喃 , 5 常温 搅 拌 2 h 让 其 充 分 溶 4, 解 , 后将 其 均匀 涂敷 于 4 5 丙基 硅烷 化 硅胶 然 .g氨 表面 。
12 3 柱子 的填 充 ..
采 用 湿 法 装 柱 , 用 美 国 ahc 使 leh装 柱 机 和 2 0 m ×4 6 m 空 色谱 柱 , 乙 基纤 维 素 手 性 固 5m .m 取 定 相 40 , 2 m 0 1 .g 以 0 L9 :0的正 己 液 体 石 蜡 为 匀浆 液 , 约 4 M a压力 下 , 9 : 0的正 已 在 0 P 以 01

高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新

高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新

高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新概述高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)是一种重要的分离与检测技术,已经在广泛的科学领域中得到了广泛的应用。

本文将对高效液相色谱分离与检测技术的进展与创新进行综述,并探讨其在不同领域中的应用。

一、高效液相色谱的基本原理高效液相色谱是以液相作为固定相的分离技术。

其基本原理是将样品溶解在流动相中,通过与固定相之间的相互作用来实现样品的分离。

高效液相色谱的固定相种类繁多,不同种类的固定相可以实现对不同性质样品的选择性分离。

二、高效液相色谱的发展与创新1. 色谱柱技术的发展:随着材料科学与合成化学的不断进步,新型的色谱柱材料如亲水性、疏水性、离子交换、手性等材料相继出现。

这些材料可以提供更高的分离效率和选择性。

2. 检测器技术的创新:传统的高效液相色谱检测器主要有紫外检测器、荧光检测器和电化学检测器等。

随着科学技术的发展,新型的检测器如质量分析检测器(Mass Spectrometry, MS)和电喷雾检测器(Electrospray Ionization, ESI)等被引入到高效液相色谱中,提高了检测灵敏度和选择性。

3. 色谱分离模式的创新:除了传统的反相色谱分离模式,还出现了离子交换色谱、手性色谱、亲水色谱等新的分离模式。

这些分离模式可以对特定问题提供更好的解决方案。

三、高效液相色谱在不同领域中的应用1. 制药工业:高效液相色谱在制药工业中起着至关重要的作用。

它可以用于药物分析、药物代谢物分析和质量控制,以确保药物的质量和安全性。

2. 环境监测:高效液相色谱在环境监测领域中广泛应用,例如水质监测、土壤污染分析和空气污染物检测等。

它可以快速、准确地测定各种环境污染物。

3. 农业食品安全:高效液相色谱在农业食品安全领域中也发挥着重要作用。

它可以用于农药残留分析、食品添加剂检测和农产品质量控制等方面。

双手性选择单元手性固定相的研究进展

双手性选择单元手性固定相的研究进展

双手性选择单元手性固定相的研究进展崔冬晓;贾艳艳;李广庆;文爱东;王西芳【摘要】手性固定相(chiral stationary phase,CSP)作为手性色谱分离的核心技术,在手性化合物的识别和分离中得到广泛应用.以双手性选择单元结合作为CSP是近些年的研究热点,研究表明,两种手性选择单元相结合的CSP可增加手性识别位点,显著提高分离效果.本文介绍了近几年双手性选择单元手性固定相在手性分离中的研究进展,并对其发展前景进行了展望.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2016(034)009【总页数】4页(P831-834)【关键词】手性固定相;双手性选择单元;手性分离【作者】崔冬晓;贾艳艳;李广庆;文爱东;王西芳【作者单位】陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046;第四军医大学西京医院药剂科,陕西西安710032;第四军医大学西京医院药剂科,陕西西安710032;迪马科技公司,北京100029;第四军医大学西京医院药剂科,陕西西安710032;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳712046【正文语种】中文【中图分类】O658在医药、化工和特殊材料等众多领域,手性化合物得到广泛应用,而多数手性化合物的左旋体和右旋体的性能往往差异很大,给人们的研究及应用带来不便。

随着蛋白质组学、代谢组学、糖化学、中药学等研究领域的迅速发展,化学合成和天然获得的手性化合物大量涌现,因此,手性化合物的分离分析成为当今手性分析科学领域研究的重中之重[1-4]。

高效手性液相色谱(Chiral HPLC)作为分离、分析和制备手性化合物的先进方法之一,近年来得到长足发展,高效手性液相色谱对手性化合物的识别和分离关键依赖于手性固定相[5-13]。

目前,HPLC手性固定相最有效的手性选择单元为多糖类(包括纤维素、壳聚糖和环糊精等)和大环化合物(包括环肽类、大环抗生素等)等多手性中心物质[5-13]。

近期研究证实,将两种优势手性选择单元有机结合,形成具有“多重识别位点”(multi-recognition sites)的手性固定相(CSP),能显著提高手性化合物的分离分析效果[14]。

高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展

高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展

高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展一、概述高效液相色谱(HPLC)是一种广泛应用于药物分析的重要技术,具有快速、高效、灵敏度高和分辨率高等特点。

自20世纪70年代以来,随着色谱理论和仪器技术的不断发展,HPLC已成为药物分析领域中不可或缺的工具。

其利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异,通过高压泵将流动相推动通过装有固定相的色谱柱,实现样品中各组分的分离。

随后,通过检测器对分离后的组分进行检测,从而实现对药物成分的定性和定量分析。

近年来,随着药物分析需求的不断提高,HPLC在药物分析中的应用研究也取得了显著的进展。

在药物质量控制方面,HPLC可用于药物有效成分的含量测定、杂质含量的检测以及药物制剂中各组分的分离分析等。

HPLC还可应用于药物代谢产物的分析,为药物研发提供重要的参考信息。

在药品检验中,HPLC的应用不仅提高了检验的准确性和效率,还有助于实现药品检验的自动化和智能化。

同时,随着HPLC技术的不断发展,其在药物分析中的应用也将不断拓展和完善。

本文旨在综述HPLC在药物分析中的应用研究进展,为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。

1. 高效液相色谱技术简介高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种重要的色谱分析技术,广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等多个学科领域。

作为色谱法的一个重要分支,HPLC以液体为流动相,通过高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。

在柱内,各成分因与固定相发生作用的大小、强弱不同,而在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出,进入检测器进行检测,实现对试样的分析。

HPLC具有“四高一广”的特点,即高压、高速、高效、高灵敏度和应用范围广。

高压是因为流动相为液体,流经色谱柱时受到的阻力较大,需要高压泵来推动流动相通过色谱柱。

高效液相色谱的应用研究进展

高效液相色谱的应用研究进展

高效液相色谱的应用研究进展【摘要】从1903年,色谱的开始使用,各种色谱技术应运而生,其中高效液相色谱由于其分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广等优点,作为物质分离的重要工具,在各个方面都取得了很大的发展,并且出现了许多的新型色谱。

本文综述了变性高效液相色谱在生物遗传方面的应用,及高效液相色谱在医学方面的应用。

【关键字】HPLC(高效液相色谱) DHPLC(变性高效液相色谱)1.高效液相色谱概要色谱法是利用混合物中各组分在两相中分配系数不同,当流动相推动样品中的组分通过固定相时,在两相中进行连续反复多次分配,从而形成差速移动,达到分离的方法。

根据流动相的状态可分为气相色谱法和液相色谱法。

在液相色谱中,采用颗粒十分细的高效固定相并采用高压泵输送流动相,全部工作通过仪器来完成。

这种色谱称为高效液相色谱(1iighperformance liquid chromatography,HPLC)。

由于高效液相色谱法有分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广等优点,高效液相色谱成为最为常用的分离和检测手段,在有机化学、生物化学、医学、药物学与检测、化工、食品科学、环境监测、商检和法检等方面都有广泛。

另外,在高效液相色谱法的基础上不断发展,变性高效液相色谱法(DHPLC)随之兴起,广泛用于生物学、遗传学等领域。

2.高效液相色谱在生物学的应用变性高效液相色谱法(DHPLC)是在高效液相色谱法的基础上发展起来的一种新方法。

DHPLC采用高压闭合液相流路,将DNA样品自动注入并在缓冲液携带下流过DNA分离柱,通过缓冲液的不同梯度变化,在不同分离柱温度条件下,由荧光检测被分离的DNA样品,从而实现对DNA不同的分析它因使用的温度不同而有不同的应用价值:①在非变性温度(40℃~5O℃ )条件下对不同长度的双链DNA进行分离,用于定量反相PCR、长度多态性分析以及杂合性缺失(LOH)分析等;②在部分变性温度(51℃~75℃)条件下进行基因突变,单核苷酸多态性和CpG甲基化的检测;③在完全变性温度(70℃~8O℃)条件下对寡核苷[1]酸进行质量控制和纯化,RNA分离及已知位点基因型的分析等。

[教学设计]手性药物拆分的研究进展

[教学设计]手性药物拆分的研究进展

手性药物拆分的研究进展许多药物具有光学活性(opitical activeity)。

一般显示光学活性的药物分子,其立体结构必定是手性(chirality)的,即具有不对称性。

手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。

互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体(enantiomer)。

虽然对映异构体药物的理化性质基本相同,但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等,后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。

因此,对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。

鉴于此,美国食品药品监督管理局规定,今后研制具有不对称中心的药物,必须给出手性拆分结果,欧盟也提出了相应的要求。

因此,手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。

目前,利用酶法、超临界流体色谱(SFC)法、化学法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(capillary electrophoreisis,CE)法和分子烙印法拆分对映体,已成为新药研究和分析化学领域的重要课题。

笔者在本文综述了近年来利用上述方法拆分手性药物的研究进展。

1酶法酶的活性中心是一个不对称结构,这种结构有利于识别消旋体。

在一定条件下,酶只能催化消旋体中的一个对映体发生反应而成为不同的化合物,从而使两个对映体分开。

该法拆分手性药物已有较久的历史,反应产物的对映过剩百分率可达100%。

酶催化的反应大多在温和的条件下进行,温度通常在0~50℃,pH 值接近7.0。

由于酶无毒、易降解、不会造成环境污染,适于大规模生产。

酶固定化技术、多相反应器等新技术的日趋成熟,大大促进了酶拆分技术的发展。

脂肪酶、酯酶、蛋白酶、转氨酶等多种酶已用于外消旋体的拆分。

脂肪酶是最早用于手性药物拆分的一类酶,是一类特殊的酯键水解酶,具有高度的选择性和立体专一性,反应条件温和,副反应少,适用于催化非水相递质中的化学反应,在B 一受体阻滞药、非甾体类抗炎药和其他多种药物的手性拆分中都有广泛的应用。

β-环糊精类液相色谱固定相及其手性拆分应用研究进展

β-环糊精类液相色谱固定相及其手性拆分应用研究进展

环 糊 精 类 色 谱 固定 相 一 般 是 将 卢 C 或 其 一D
衍生物键合到硅胶基 质上 , 硅胶先经过 硅烷化试
剂 预 处 理 , 用 的硅 烷 化 试 剂有 一 常 氨丙 基 三 乙氧
基 硅烷 ( H 5 ) 一 水 甘 油 醚 氧 丙 基 三 甲氧 基 K 50 、 缩
硅烷 ( H5 0 和 T 甲基丙 烯酰 氧 基丙 基 三 甲氧基 K 6) .
硅 烷 ( H 7 ) -D经 过 修 饰 后 , 连 有 氨 基 、 K 50 。 C 常 羟 基 、 基 或 环 氧 基 官 能 团 , 与 硅 烷 化 硅 胶 键 烯 可
合 ; 有采 用 硅 烷 化 试 剂 将 — D 衍 生 化 , 在 无 也 C 再
硅胶 , 其余 的羟基分别采用萘基氨基 甲酸酯化、 乙 酰化 、 甲基 化 进 行 全 衍 生 , 分离 了 1 手 性 对 映 2种 体 。邱月 琴等 ¨ 采用异 氰 酸丙基 三 乙氧基 硅 烷做
第2 4卷第 8期 21 0 2年 8月
化 学 研 究 与 应 用
Ch mia s a c n p ia in e cl Re e rh a d Ap l t c o
Vo. 4 , . 1 2 No 8 Aug 201 ., 2
文章 编 号 :0415 (02 0 —190 10 .66 2 1 )816 -7
定相 , 手性化合物具有 良好 的拆分 能力 。本文介绍 了 环糊精 的结构 和性质 , 对 综述 了各种衍生 化 的卢 环糊 一
精 液相色谱键合 固定 相及其在手性化合物拆 分 中的应用 。 关 键词 :一 J 环糊精 ; B 高效液相色谱 固定 相 ; 性拆 分 ; 手 衍生化
中 图 分 类 号 :6 7 7 0 5 . 文 献 标 识 码 : A

高效液相色谱相关技术

高效液相色谱相关技术

RP-HPLC中流动相组成与其性质的关系
离子抑制色谱(Ion Suppression Chromatography)
RCOO- + H+
RCOOH
R-NH2 + H+
+ R-NH3
流动相:缓冲液+有机溶剂
离子对色谱(Ion-pair(ed) Chromatography, IPC)
R-aq + C+aq [RC]aq [RC]org
高效液相色谱相关技术
报告人:王俊德
中科院大连化物所研究员
内容目录
一、液相色谱进展 二、液相色谱分离模式 三、柱技术和柱选择 四、HPLC样品制备与制备液相色谱技术 五、HPLC定性定量分析 六、液相色谱/质谱联用技术
一、 液相色谱进展
简单回顾 1970年代初,LC复苏,出现HPLC。 1990年代,HPLC仪器销售额年增长超过两位数,接近
有机:A 合成高分子
B 天然高分子(多糖凝胶) Sephadex, Argarose, 纤维素和淀粉,Chitosan C 多孔碳
几何结构
全孔,6~10nm,30nm以上
无孔微球,1~2µ m 表面多孔
分子烙印聚合物(MIP)
MIP 原理
共价键型
非共价键型
N-Cbz-L-Tyr
N-Cbz-L-Tyr
4)整体柱(Monolithic column) 单体、致孔剂、引发剂、添加剂一起在色谱柱内聚合 反应 灌注的原理 毛细管、一般分析柱、粗短柱(色谱饼)
5)膜亲和色谱(MAC)
生物专一性,选择性过滤 膜材料:尼龙膜,聚砜膜,纤维素膜 间隔臂:双环氧化物,已二胺,戊二醛 配基:氨基酸,肽,蛋白质,核酸或碱基,染料等 MAC将膜分离的低压、高通量与AC的高选择性和高分 离度结合在一起。

高效液相色谱与手性分离

高效液相色谱与手性分离

对含有多个手性中心的药物使用含多糖类手性固定相的高效液相色谱法进行手性拆分摘要对含有多个手性中心的药物进行手性分离是一项具有挑战性的工作。

这篇文章介绍了用多糖类手性固定相对含有多个手性中心的药物进行分离。

并且,柱转换技术在这种化合物得分离中也被应用。

关键词: 回顾;对映体分离; 手性固定相, LC;多糖; 纳多洛尔; 吲多洛尔; 奈必洛尔;地尔硫卓目录1.介绍2.含两个手性中心的药物的手性分离实例3. 含多个手性中心(多于两个)的药物的手性分离实例4. 结论5. 参考文献1. 介绍手性是一个显著的生物学过程,一个生物活性分子的对映体通常具有不同的生物学特性。

生物学作用中的对映体选择性现象并不局限于药物学,它是所有生物活性试剂(杀虫剂、除草剂、香精香料、食物添加剂等)的一个共同特征。

来源于自然物质的药物通常是光学活性或纯形式的单一异构体。

然而,那些用化学方法合成的药物通常是根据不对称中心的数目由两个,四个或者更多异构体混合而成。

因此,立体选择性在手性药物的生物利用度、分配、与受体的相互作用、异构体活动中的代谢和消除过程中所产生的差异从不期望的毒性到毫无意义增大活性。

在过去的30年中,通过高效液相色谱法(HPLC)进行手性分离已经显得越来越重要。

这可以通过以下两个方面得出:(a)间接进行手性分离的方法,包括在色谱分析法中通过一个非手性柱用一个手性衍生物试剂合成非对映异构体;(b)直接进行手性分离的方法,包括用手性固定相(CSPs)将外消旋药物拆分成相应的对映体。

基于手性固定相(CSPs)的直接分离方法因其可以快速、合适的用于分离外消旋酸盐而深受分析和制备行业的喜爱。

自然形成和合成的手性固定相(CSPs)存在着广泛的多样性,绝大多数是用于商业(超过120种)。

这些手性固定相(CSPs)中的很多在应用方面具有局限性。

因此,多糖类固定相和其它固定相,如:化学键合的蛋白质、环糊精及其衍生物、Π-型和大环抗生素已经被证明是在高效液相色谱法进行手性药物的分离中最有用的固定相。

高效液相色谱间接拆分法的手性衍生化试剂研究进展

高效液相色谱间接拆分法的手性衍生化试剂研究进展
维普资讯
98 0
药 学 学 报 A t h r c uiaSnc 0 2,7( 1 :0 ca P amae t iia2 0 3 1 ) 9 8—9 2 c 1
高 效 液 相 色 谱 间接 拆 分 法 的 手 性 衍 生 化 试 剂 研 究 进 展
孙 贤祥
( 苏 石 油 化 工 学 院 化 【系 ,江 苏 常 州 2 3 1 ) 江 10 6
关键 词 : 性 衍 生 化 试 剂 ;对 图 分 类 号 :R 1 97 文献 标 识 码 :A 文章 编 号 :0 1 5 3—4 7 (0 2 1 —0 0 8 0 2 0 ) 1 9 8—0 5
现 代 药理 学研 究证 明 , 物 的手 性 与 药 效 有 密 药 切关系 , 药物 不 同光 学异 构体 进人 人 ( 或生 物 ) , 体 经 体 内受体 酶 、 载体 等 完 全 不 同 的分 子 处 理 所 引 起 的 药效 或 毒副 作 用 往 往 存 在 着 显 著 的 差 异 ~ 。随 着 人们 对 单一 光学 异构 体 高疗 效新 药 物产 品不 断增 长 的需 求 , 产 具有 高疗 效 低 副作 用 的光 学 异 构 体 新 生
酸对 映体 的手性 衍 生化 试 剂 。邻 苯 二 甲醛 和光 学纯
异 构体 的噻 吩 是拆 分 氨 基 酸 对 映 体 的 C R; 样 单 D 同

光学 异构 体 的氨 基 酸和邻 苯 二 甲醛也 可 作 为手性
噻 吩拆 分用 的 C R 这 样既 增 加 了 C R的 品种 , D 。 D 又 扩 大 了 C R 的 应 用 范 围 ;2 荧 光 C R 已 成 为 C R D () D D
足 的 进 展 , 现 有 以 下 特 点 : 1 利 用 衍 生 反 应 中 衍 表 ()

药物分析文献综述

药物分析文献综述

2016—20 17学年第1 学期文献综述名称高效液相色谱法手性固定相分手性药物研究进展专业2016级药物化学学号161320217姓名李松子导师柯美荣指导老师林子俺时间2016年12月19日高效液相色谱法手性固定相分手性药物研究进展摘要手性(chirality)是指化合物的分子式和结构式相同,因分子空间排列不同导致两个分子互为镜像和实物的现象。

手性药物(chiral drug)是指药物分子结构中引人手性中心后得到的一对互为实物与镜像的对映异构体(enantiomer)这些对映构体的理化性质基本相似,仅旋光性质有所差别。

目前在约2000种常用药物中有近500种药物以外消旋体的形式存在。

外消旋体药物中可能只有一种对映异构体有药效,其镜像分子却有毒副作用或药效相反或无药效:如左旋巴比妥酸盐抑制神经活动而右旋巴比妥酸盐却兴奋神经;右旋甲状腺素钠可降低血脂而左旋甲状腺素钠对心脏有毒副作用;抗菌药左旋氧氣沙星的药效高于其右旋体数倍对映异构体也对香料化学和农业化学方面有重要作用:如S —型的香芹酮有香菜味,而R-型却具有荷兰薄荷香味; 农药溴氰菊酯的8个异构体中,(3R,1R,S)异构体的杀虫活性是(3S, lS,R)的70多倍.手性药物的分离分析在生物和化学领域一直是研究热点。

色谱法利用固定相与外消旋体之间的作用力不同使流动相洗脱时各组分保留时间不同而实现分离的目的。

色谱法以其优良的识别能力成为目前应用最广泛的手性拆分方法,尤其在性药物的分离分析和纯度检测等方面.常用的手性色谱分离技术包括高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电色谱法(CEC)等根据侍分离化合物的分子结构选择合适的手性色谱非常重要。

在用HPLC法分离手性物质时,可以通过改变色谱柱的流动相和固定相来改变改善HPLC的分离效果。

根据手性固定相的不同来源,可分为天然、半合成和全合成三大类。

本文介绍国内外近几年手性固定相拆分手性药物的研究进展,包括几种经典类型及一些新型手性固定相。

手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展

手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展
手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展
摘要】自然界很多药物是手性药物,手性药物的开发已成为制药领域的必然趋势,其分析测定方法也得到快速发展。高效液相色谱法作为经典实用的分析测定方法,得到了广泛的运用。本文综合国内外文献,综述了手性药物高效液相色谱拆分方法研究进展,为手性药物的含量测定和生物分析提供思路。【关键词】手性药物高效液相色谱法拆分手性是自然界的本质属性之一,作为生命活动重要基础的生物大分子和许多作用于受体的活性物质均具有手性特征。对手性药物而言,两个对映体并非具有相同的药效。HPLC分离药物对映体可分为间接法和直接法,前者又称为手性试剂衍生化(CDR)法,后者可分为手性流动相添加剂(CMPA子内,而CMPA法和CSP法则是将不对称中心引入分子间。1 CDR法CDR法是将药物对映体先与高光学纯度衍生化试剂(CDR)反应形成非对映异构体,再进行色谱分离测定,适用于不宜直接拆分的样品。该法的优点是衍生化后可用通用的非手性柱分离,无需使用价格昂贵的手性柱,而且可选择衍生化试剂引入发色团提高检测灵敏度。金银秀等[1]采用手性衍生化试剂GITC对美西律进行柱前手性衍生化,建立了美西律对映体在人血清白蛋白中的测定方法。2 CMPA法CMPA法是将手性选择剂添加到流动相中,利用手性选择剂与药物消旋体中各对映体结合的稳定常数不同,以及药物与结合物在固定相上分配的差异,实现对映体的分离。此法的优点在于:不需对样品进行衍生化,可采用普通的色谱柱,手性添加剂可流出,也可更换,同时添加物的可变范围较宽,使用比较方便。目前常用的手性流动相添加剂有:环糊精(CD)及其衍生物、配位基手性选择剂、手性离子对添加剂、蛋白质、大分子抗生素。2.1配体交换型手性添加剂此类添加剂多为氨基酸及其衍生物与二价金属离子铜、锌、镍等结合,以适当浓度分布于流动相中,然后外消旋体共同形成非对映的配位络合物进行拆分。2.2环糊精添加剂常用的环糊精主要为β-CD,β-CD络合的化学计量关系通常为1:1,但是其它比例也存在,在添加CD的RP色谱中,存在两个平衡流动相中游离溶质和CD络合物在固定相上的吸附平衡,其影响因素包括有机溶剂的用量及酸度等。如杨青等[2]以C18为分析柱,将β-CD、2,6-二甲基β-CD、2,3,6-三甲基β-CD分别作为手性流动相添加剂,系统地研究了酮基布洛芬对映体在HPLC系统中的拆分。2.3手性离子对添加剂此方法为对映体与手性离子对试剂形成非对映离子对,利用其在固定相和流动相之间不同的分配比来分离,手性离子对必须具有3点作用模式。3 CSP法手性固定相(CSP)是由具有光学活性的单体固定在硅胶或其它聚合物上制成的,在拆分中CSP直接与对映体相互作用,而其中一个生成具有不稳定的短暂的对映体复合物,造成在色谱柱内保留时间的不同,从而达到分离的目的。3.1天然高分子手性固定相这种固定相主要有蛋白质类、环糊精类、多糖及其衍生物类、冠醚等。其中,以环糊精类目前应用较多,同时CD分子上的手性中心也能选择性地与对映体作用。目前,以β-CD应用最多。不同的环糊精的空腔大小不同,α-CD适于分离小分子药物对映体,γ-CD适于分离大分子药物,β-CD对形成包合物有最佳大小的空腔,适用于大多数对映体的位阻和电子特征,如酮咯酸氨丁三醇盐对映体,佐匹克隆对映体,萘普生乙酯对映体的分离[3]。冠醚具有亲水性内腔和亲脂性外壳,可键合在硅胶或聚苯乙烯基质上制成手性固定相。根据主-客化学原理,用于含有能够质子化的伯胺功能团的药物对映体的分离,将(+)-18-冠醚-6-2,3,11,12-四羧酸键合至氨基丙基硅胶上作手性固定相,不仅可以分离具有伯氨基的药物对映体,如肌肉松弛药物氟喹酮、抗疟药伯氟喹等。3.1.1合成高分子固定相主要包括聚丙烯酞胺、聚甲基丙烯酸醋等含光学活性中心的高分子物质。运用较多的是交联聚酞胺,其分离机理一般认为是对映体与高分子聚合物本身的手性空间结合,同时还受到聚合物分子量,溶剂pH值等因素的影响。3.1.2氨基酸型手性固定相该固定相是以硅胶为起始原料,硅烷化成梭基型键合物,最后与有光学活性的氨基酸反应制得。其机理是对映体与固定相的氢键形成不同的非对映体络合物而分离。适于分离α-氨基酸衍生物、α-氨基烃基磷酸衍生物、二肽等,缺点是价格较贵。3.2配体交换型固定相该固定相是以某种聚合物,如交联的氯甲基苯乙烯与手性氨基酸结合而成,同时,还需过渡金属离子的参与,如Cu2+等。被拆分物质通过金属络合物与固定相上的配位基发生配体交换,络合在固定相上。由于这种络合是可逆的,因此这种方法的分离效果较好,一般用来分离各种氨基酸。3.3蛋白质类固定相AGP是一种键合的蛋白类手性柱,特别适用于阳离子型化合物,手性选择性强。蛋白质手性固定相主要靠氢键及范德华力维持其稳定,可以通过调节流动相缓冲液的组成、PH值和温度来改变手性选择性。蛋白质手性柱的最大优点在于,可使对映体在非衍生形式下得到分离,同时由于采用水相流动相,因此水相样品可直接注射,其中α1-AGP柱尤其适合于对映体药物的分离。傅强等[5]研究了在卵类糖蛋白手性柱上影响钙离子拮抗剂尼卡地平对映体拆分的主要因素,建立了尼卡地平对映体的拆分方法。大环抗生素是近年来比较流行的手性选择剂,大环抗生素具多个手性中心,多个官能团及特定的三维空间结构,它的手性识别机理结合了环糊精、蛋白质、多糖的性质,这类手性固定相拥有较大的对映体选择性,优异的拆分效率和较短的分析时间等优点,使之成为继环糊精之后的常规分析级手性固定相。参考文献[1]金银秀,曾苏.柱前衍生化RP-HPLC测定人血清白蛋白中美西律对映体[J].中国药学杂志, 2007, 42(11):860-862. [2]杨青,唐瑞仁,曾莎莎.高效液相色谱手性流动相法拆分酮基布洛芬对映体[J].分析试验室, 2007, 26(8):84-86. [3]刁全平,侯冬岩,回瑞华,等.高效液相色谱法拆分酮咯酸氨丁三醇盐对映体[J].鞍山师范学院学报, 2005, 7 ( 6) : 58- 60.
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

收稿日期:2003-05-25作者简介:寿崇琦(1963-),男,山东省济南市人,济南大学化学化工学院教授,硕士研究生导师,中国科学院兰州化学物理研究所博士研究生。

高效液相色谱手性固定相研究进展寿崇琦1,张志良2,赵春宾2,邢希学2,李关宾1,陈立仁1(11中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃兰州 730000;21济南大学化学化工学院,山东济南 250022)摘要:对近年来高效液相色谱手性固定相的研究进行了综述。

重点介绍了手性固定相的分类、拆分机理和应用的新进展。

讨论了各类手性固定相优缺点,提出了目前存在的问题、今后的研究方向和重点。

关键词:高效液相色谱;手性固定相;拆分机理中图分类号:O658 文献标识码:A 文章编号:1004-4280(2004)01-0069-05随着生物工程和生物科学的发展,手性拆分和测定引起了人们的普遍关注。

尽管对映体间物理化学性质几乎完全相同,但它们的生化和药理作用却往往不同。

这是因为生物本身内部的核酸、蛋白质及多糖都具有与其功能相适应的结构,它们常常对扬长避短一化合物的两种对映体表现出不同的响应。

例如具有镇静作用的反应停(thalidomide ,酞胺哌啶酮),其有效成分是R 构型,而S 构型则具有致畸作用[1]。

据统计,常用的200种药物中,大约有120种至少含有一个手性中心。

而这些手性药物中有80%~90%以外消旋体形式在市场销售,存在巨大的潜在危险性[2]。

因此,对映体的拆分与识别对于生命科学和药物化学研究以及人类的健康具有十分重要的意义。

目前用于手性分离的方法主要有毛细管电泳法、薄层色谱法、亚临界及超临界流体色谱法、气相色谱法和液相色谱法[3]。

近年来,高效液相色谱法取得了令人瞩目的进展,已成为对映体拆分强有力的手段之一。

而其中所用的手性固定相的是能否进行手性分离的关键。

1 手性固定相的分类虽然液相色谱常被分为不同的分离模式,但实质上所有的分离模式都基于两个最基本的因素:即固定相的结构和组成,以及决定分离机理的固定相与流动相相互作用的性质。

因而手性固定相(CSP )的制备则是手性分离的关键。

目前所研究的HP LC -CSP 主要可分为下列几类[4]:1.1 蛋白质手性亲和固定相多数蛋白质CSP 的分离机理目前尚不十分清楚,但是蛋白质CSP 的手性识别能力可以归结为它们独特的空间立体结构特征[4]。

尤其是在对映体的手性识别过程中,三级结构所造成第18卷第1期2004年3月山 东 轻 工 业 学 院 学 报JOURNA L OF SHANDONG INSTIT UTE OF LIGHT INDUSTRY Vol.18No.1Mar.200407山 东 轻 工 业 学 院 学 报 第18卷的疏水性口袋、沟槽或通道对手性拆分具有十分重要的意义。

七十年代初已有人将牛血清白蛋白键合在琼脂糖上,制成液相色谱用手性填料,拆分了D L-色胺酸。

八十年代初,Allenmark[5]和Hermanss or[6]分别将BS A和α-酸性糖蛋(α-AG P)键合到微粒硅胶上制成HP LC用的CSP,商品名为Res olv osil和Enantio Pac。

Hermanss or[7]和Schill[10]等以Enantio Pac柱拆分了酸、胺和β-氨基醇类药物如萘普生、双异丙吡胺、麻黄素、可卡因、阿托平等几十种药物,拆分效果良好,分离系数(α)可达1.1~4.0,柱的稳定性好,对温度和有机溶剂有较好的耐受性,长期保存在异丙醇中(12个月),对拆分效果无明显影响。

Re2 s olv osil柱可用于拆分氨基及其衍生物、芳香亚砜、二苯乙醇及多种药如安定、华法林等。

在国内,张鹏[9]等用万古霉素制备的手性固定相用于对布洛芬手性对映体的拆分,也取得了不错的效果。

周华[10]等用L-脯氨酸衍生的衍生物作为高效液相色谱手性固定相,用于对4种N-3,5-二硝基苯甲酰-D L-氨基酸甲酯对映体色谱拆分,结果显示对映体选择性在1.04~1. 18之间。

兰州化学物理研究所的候经国[11]在这一方面也做了深入研究。

1.2 环糊精型手性固定相手性固定相拆分对映体的另一途径是将手性空穴键合到固定相表面,由此产生的客体-受体间的相互作用决定对映体的拆分效果。

最常用的是环糊精手性固定相,环糊精手性固定相的分离机理主要基于包含型络合过程,这一机理表示分子的非极性部分被吸引到非极性空穴中,当被分离的分子存在芳香基团时,由于芳香基团与糖苷键上氧原子的作用产生立体选择的趋向,而线性或无环的烷烃以随机方式占据环糊精的空穴。

Ward[12]将β-C D通过6~10碳的间隔基键合到微粒硅胶上,商品名CyclobondⅠ。

这种CSP象切去顶端的锥形圆筒,边缘有羟基,内部为疏水性的内腔,只有当分子的大小正好使非极性部分进入腔内,极性基团与边缘的羟基产生较强的作用才能拆分。

某些具有萘环和双环化合物可得到良好的拆分,如丹酰氨基酸、巴比妥类、乙内酰脲、金属茂等。

单环化合物如扁桃酸、酪氨酸、麻黄素等也可拆分,使用范围广,仅次于Pirkle型G SP。

流动相为甲醇-水或乙睛-水,γ-C D无拆分作用,α-C D仅对小分子有拆分作用。

唐课文[13]等合成了一种烷基化和硅烷化β-环糊糖手性固定相,用其分离了醇、酮、烯烃等一些对映体,取得了很好的效果。

辛梅华[14]等人将β-环糊精进行了乙酰化用于对肾上腺素类对映体的测定,也得到了不错的结果。

1.3 配体交换型固定相这类手性固定相拆分对映体与手性配体流动相的拆分机理相同,只是手性配体键合到固定相基质成为手性固定相而已。

其配体分子亦为具有手性活性的氨基酸如脯氨酸,金属离子多用Cu2+。

Davankov[15]将L-脯氨酸键合到树脂上,经吸附Cu(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)或Zn(Ⅱ)后,可拆分氨基酸对映体。

G ubity[16]将L-脯氨酸和L-缬氨酸通过间隔基键合到硅胶上,制成HP LC 用CSP,以CuS O4水溶液处理后即可用于氨基酸和二肽类的拆分。

此类CSP已有四种商品: Chiracel WH,W M和Chiral hypro-Cu,Val-Cu。

除上述氨基酸外,用为CSP键合基的尚有:L-1,2-二氨丙烷、β-羟基氨基酸、1-麻黄素、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-氮杂-2-环丁烷羧酸、L-酒石酸、L-2-哌啶酸、及(一)-反-1,2-环已二胺。

拆分化合物包括氨基酸、二肽、α-羟基酸及有关药物如α-甲基多巴、甲状腺激素等,α值1.10-8.0,配位基交换色谱的流动相多为水或磷酸、乙酸氨缓冲液,有时加入一定量的有机溶剂(乙腈)。

为防止铜离子的流失,在流动相中加入适当的CuS O4,此类CSP亦可用于制备性分离。

1.4 高聚物手性固定相HP LC 聚合物CSP 包括天然的聚糖类衍生物和合成的高分子手性聚合物。

聚糖类手性聚合物主要包括纤维素、淀粉的衍生物(乙酯、苯甲酸酯、氨基甲酸酯),作为HP LC 的CSP 广泛应用于对映体手性拆分,其中特别是苯基氨基甲酸酯衍生物具有较高的应用价值而广泛研究。

这类手性固定相的优点除了作为天然的光学活性物质容易得到外,它们的葡萄糖单元的羟基易被取代和官能团化,且该类CSP 的载样量大,在大规模制备级色谱应用上有很大潜力[17]。

1973年,Hesse 和Hagel 首先制备了微晶纤维素三醋酸酯(CT A ),研究表明:在多相条件下制备的CT A 具有较好的手性识别能力,这种手性识别能力来源于纤维素的晶体结构本身。

当微晶纤维素三醋酸酯溶解于溶剂并涂渍在硅胶上时,其手性识别能力不同于原来的微晶纤维素,对某些对映异构体的光学拆分洗脱顺序是完全相反的,比如Troger 碱,这种变化主要是由于在溶剂中的CT A 性能与微晶结构时的CT A 大不相同所致。

当各种纤维素酯、纤维素三苯甲酸酯及其衍生物涂渍在硅胶上时显示出较高的手性识别能力,根据三点作用原理,该类纤维素衍生物中最重要的手性作用位点是羰基,羰基与具有羰基的对映体通过偶极-偶极相互作用,与具有羟基或氨基的对映体发生氢键作用。

通常,在纤维素的衍生物中大都还引入苯基,这有利于提高手性识别能力,常见的纤维素三苯甲酸酯的苯坏上取代基团有:2-CH 3、3CH 3、4CH 3、4-OCH 3、4-C (CH 3)3、4-F 、4-CF 3、3,4-(CH 3)2、3,5-(CH 3O )2、3,5-Cl 2等。

在所有的纤维素衍生物中,3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯显示出优越的手性识别能力。

Okamato [18]等曾用3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯作固定相对510种旋光物质进行拆分,这就是说,大约有60%的旋光物质能在3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯上进行拆分。

直链淀粉与纤维素一样也是d -葡萄糖单元构成,但直链淀粉被认为d -葡萄糖单元α键上存在一个螺旋结构而致使其结构更有序;同时,直链淀粉衍生物的手性识别能力与纤维素衍生物存在很大的差别。

直链淀粉苯甲酸酯手性识别能力低,而三(3,5-二甲基苯氨基甲酸酯)即Chiralpak AD 对绝大部分对映体显示最高的手性能力,X -射线结果分析表明,直链淀粉三(苯基氨基甲酸酯)有一个左端4折螺旋线。

纤维素和直链淀粉手性识别能力不同的原因可能是由于葡萄糖单元构象不同,结构有序性存在差异。

Y ashima [19]等把直链淀粉的3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯衍生物区域选择性键合到硅胶上作为HP LC 手性固定相结果表明:6-位键合到硅胶上比2-、3-位键合具有较高的手性拆分能力,但键合型比涂敷型CSP 拆分能力低。

Vinegar 等认为将上述衍生物键合到硅胶上作为CSP 可采用四氢呋喃和氯仿作流动相,可克服涂敷型CSP 在此类流动相中溶解的问题。

Chankvetadze [20]等讨论了直链淀粉的二甲基-、二氯-和氯甲基苯基氨基甲酸酯CSP 的分离性能,表明直链淀粉的5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯比相应的二甲基和二氯衍生物手性识别能力高;在苯基的2-位引入甲基,增加键合NH 的比例,意味着增加吸着点的数目,同时降低了手性聚合物的规则性,但引入氯降低吸着点酸度,减弱对映体NH 基相互作用。

苯基氨基甲酸酯的2,5-甲基氯基衍生物优于相应的二甲基、二氯基衍生物,可能是上述作用平衡的结果;通过2-氯基与5-甲基比较表明NH 基的酸度对分子内的影响比作为吸着点与对映体相互作用更重要。

另一类手性聚合物是合成的高分子化合物,如三苯甲基丁烯酸酯类聚合物,因其螺旋结构而具手性。

聚合物CSP 的手性识别主要由于手性聚合物的高度有序结构,因此仅从聚合物的17第1期寿崇琦等:高效液相色谱手性固定相研究进展27山 东 轻 工 业 学 院 学 报 第18卷单体预测它们的性识别机理是困难的[18]。

相关文档
最新文档