实验报告(20200623003340)

免疫检验技术

实践报告

实践一直接凝集试验

一、玻片凝集试验（（细困鉴定）

（一）实验目的

1,学会细菌玻片凝集试验的操作和结果判断。

2,理解抗原抗体反应的特异性，能做出正确的检验报告。

（二）实验原理

与被检的未知细菌进行凝集试验，如出现特异性凝玻片凝集试验是用已知的诊断血清，

集，可确定被检细菌的种属或型别。

（三）实验材料

1,待检细菌：

2，试剂：诊断血清：

3,器材：玻片、接种环、酒精灯

四）实验结果记录

反应物反应现象结果判断

（凝集或不凝集）（阳性或阴性）（五）实验报告

（六）实验讨论

1,志贺菌抗体与伤寒沙门菌能发生凝集吗？为什么？

2,做玻片凝集试验时，应怎样操作才能使凝集现象明显，利于结果的判断?

报告者: 报告日期:

、试管凝集试验（肥达反应常量法）

（一）实验目的

1,学会试管直接凝集试验的操作方法，熟练使用吸量管移液并进行连续二倍稀释。

2,能够正确进行首管血清喜事度的计算。

3,能够准确判断试管凝集试验的各级凝集程度和凝集效价，并准确报告结果。

（二）实验原理

肥达试验是用伤寒沙门菌的H （鞭毛）和0 （菌体）以及甲型（A）、乙型（B）副伤寒沙门菌的诊断菌液与病人血清做凝集试验，对伤寒、副伤寒作辅助诊断。如果需要，有些地区可增加丙型（C）副伤寒沙门菌等其他沙门菌的诊断菌液。

（三）实验材料

1,诊断菌液

2,待检血清

3,器材：小试管、刻度吸管、试管架等

（四）实验结果记录

（五）实验报告

（六）实验讨论

1,如何进行血清的连续二倍稀释?

2,如果首管血清要求是1：15稀释，稀释

3ml，应该如何进行稀释? 后的总液量是

3,试管直接凝集反应，是稀释抗原还是稀释抗体？为什么?

4,应如何观察试管凝集反应的结果？

报告者：报告日期:

、大孔反应板法（肥达反应微量法）

（一）实验目的

（二）实验原理

（三）实验材料

1，待检血清

2,试剂:

3,器材：大孔反应板、吸量管、盖玻板

（四）实验结果记录

（五）实验报告

（六）实验讨论

报告者: 报告日期: 实践二环状沉淀试验（CRP检测）

（一）实验目的

（二）实验原理

（三）实验材料

1,肺炎球菌C多糖（诊断试剂）

2,待检血清

3，小试管、毛细滴管、试管架等。

（四）实验结果记录

（六）实验讨论

应怎样进行环状沉淀试验的结果观察?

报告者: 报告日期:

实践三免疫比浊测定法（IgG定量测定）

（一）实验目的

熟悉免疫比浊测定法的原理、方法及结果判断。

（二）实验原理

本试验以透射比浊法检测人血清IgG。在反应系统中保持抗IgG （抗体）过量时，所形

成的免疫复合物与IgG （抗原）的量呈正相关，而形成的浊度与入射光的衰减呈正相关，测定吸光度A值可反映液相中的IgG量。通过参照标准曲线得知待测血清红IgG含量。

（三）实验材料

1，待检血清、标准血清、人IgG参考品

2,聚乙二醇-氟化钠溶液

3,其他试剂：羊抗人IgG抗血清、生理盐水、蒸馏水等

4，器材：分光光度计721、水浴箱、微量移液器、刻度吸管、试管等

（四）操作方法

1,系列参考管用生理盐水稀释人IgG参考标准品，使其浓度分别为 5.5g/L、11.0 g/L、22.0 g/L、44.0 g/L （浓度可根据不同制剂变动）。取上述IgG参考标准液各10卩I分放于4 个试管中；另取生理盐水10卩I，放于第5

支试管中，作为空白对照。分别做好标记。

2,血清测定管将待检血清和标准血清均做1：10稀释（0.1ml待检/标准血清+0.9ml生理盐水），混匀。各取10卩I分放于预先标记的试管中。

3,抗体准备用PEG-NaF溶液稀释羊抗人IgG抗血清（按商品效价稀释）。

4,抗原抗体反应向上述参考管、空白管、标准管、待测管中分别加入稀释抗血清 1.0ml,

混匀后置37C水浴30分钟。

5,比浊用分光光度计进行测定，使用340nm波长，用生理盐水空白管校正零点。逐次

测定各参考管、标准管和待测管，准确读取和记录各自的A值。

七）实验讨论

报告者：报告日期：

实践四单向琼脂扩散试验（IgG 定量检测）一）实验目的

二）实验原理

（三）实验材料

1，1.0%琼脂凝胶

2，参考血清：

3，特异性抗血清：

4，待检血清

5，其他：载玻片、三角烧杯、试管、移液管、微量加样器、有盖搪瓷盘、打孔器、温箱等。

（五）实验报告

（六）实验讨论

报告者：报告日期:

实践五双向琼脂扩散试验、对流电泳

、双向琼脂扩散试验

一）实验目的

二）实验原理

（三）实验材料

1，1%琼脂

2，待测抗原（抗体）、已知抗体（抗原）

3，其他物品：载玻片、打孔器、带盖搪瓷盘、滴管等

（四）实验结果记录

五）实验报告

六）实验讨论

、对流电泳

（一）实验目的

（二）实验原理

（三）实验材料

1,缓冲液PH8.6醋酸-巴比妥钠

2,1%琼脂

3,抗体：

4,抗原：

5,电泳仪、打孔器、载玻片、加样器等

（四）实验结果记录

报告者

报告日期：