樱桃不同砧木抗寒性比较.
4种甜樱桃砧木的抗寒生理特性研究
4种甜樱桃砧木的抗寒生理特性研究作者：陈秋芳陈冲马碧虎赵大俊程培红来源：《山西果树》2013年第06期摘要：以酸樱桃、大青叶、吉塞拉5号、毛樱桃4 种甜樱桃砧木为试材，测定在不同低温处理条件下各种砧木电导率、可溶性糖及丙二醛（MDA）的变化，评价砧木抗寒性。
结果表明，毛樱桃在低温胁迫条件下电导率、MDA含量均显著低于其他3种砧木，可溶性糖含量在-40～-35 ℃区间仍呈上升趋势。
3种抗寒指标的测定结果均表明，毛樱桃具有较强的抗寒性，吉塞拉5号次之，大青叶最弱。
关键词：甜樱桃；砧木；抗寒性甜樱桃是蔷薇科李属的一个种，是经济效益较高的树种之一[1]。
随着果农对甜樱桃果品价值认可度的提高，甜樱桃在果树生产中得到广泛推广。
前人对甜樱桃丰产、优质栽培技术已有较为详尽的研究报道，而对于樱桃砧木的抗寒生理研究报道得较少。
研究甜樱桃不同砧木的抗寒性对扩大甜樱桃种植区域意义重大。
本试验对山西省农业科学院果树研究所甜樱桃品种园的4种甜樱桃砧木（酸樱桃、大青叶、吉塞拉5号、毛樱桃）越冬期的抗寒生理生化特性进行了比较研究，通过对不同砧木枝条电导率、可溶性糖和丙二醛含量在不同低温胁迫条件下的测定，分析各不同砧木之间的抗寒性差异，为进一步筛选甜樱桃抗寒砧木提供理论依据。
1 材料与方法试验在山西省农科院果树研究所（地处山西省太谷县）进行，试材酸樱桃、大青叶、吉塞拉5号和毛樱桃，均采自本所樱桃品种园5年生砧木树上。
树势中庸，管理水平一般。
2013年1月14日在树体进入深休眠时剪取各砧木植株外围1年生直径大约0.3 cm左右枝条。
采回先用自来水冲洗干净，再用去离子水冲洗，滤纸吸干，剪成3～4 cm 长的小段，装入保鲜袋中，在0 ℃条件下保存备用。
将试材放入人工气候箱中逐渐降温至-20 ℃、-25 ℃、-30 ℃、-35 ℃、-40 ℃（5 ℃/h），分别处理8 h，低温处理完成后，取出试材在4 ℃冰箱中恢复2 h，室温下恢复1 h，以保存在0 ℃条件下的试材为对照。
不同樱桃品种及砧木抗寒性评价
不同樱桃品种及砧木抗寒性评价作者：赵慧尹砾田长平孙庆田来源：《山东农业科学》2019年第07期摘要：本试验以7个甜樱桃品种和7个樱桃砧木为材料，通过测定露天冬季低温条件下不同树体一年生枝条的SOD、POD、CAT活性和相对电导率、MDA含量，并利用隶属函数法对樱桃抗寒性进行综合评价。
结果表明：参试甜樱桃品种的抗寒能力依次为：独立日>福晨>俄罗斯8号>保加利亚4号>美早>黑珍珠>福星。
参试樱桃砧木抗寒能力依次为：毛樱桃>东北山樱>烟樱 4号>兰丁2号>SZ-1>烟樱2号>烟樱1号。
关键词：樱桃;品种;砧木;抗寒性;隶属函数法;综合评价中图分类号：S662.5文献标识号：A文章编号：1001-4942（2019）07-0037-04樱桃（Prunus avium L.）素有“北方春果第一枝”的美誉，是落叶果树中露地栽培成熟期最早的果树之一，近年来随着鲜果市场上甜樱桃售价升高，各地樱桃栽培面积也日益扩大[1]。
由于樱桃喜温、不耐寒，容易发生冻害，因此栽培中对樱桃抗寒品种和抗寒砧木的选择至关重要。
目前关于苹果[2]、梨[3]、杏[4]、葡萄[5]、柑橘[6]、桃[7]抗寒性研究报道较多，有关樱桃树体抗寒性的研究多采用电导法和恢复生长法以及检测相关生理指标来进行，该类方法测定的抗寒性生理指标较多且所表映的抗寒性强弱比较复杂[8]。
目前，科研工作者对植物寒害产生的机制进行了大量研究。
张春山等[9]明确冻害会直接作用于质膜，破坏质膜结构，进而造成质膜通透性增大导致细胞内离子外渗，通过测定细胞电解质渗出率即可反映细胞受冻害程度。
李合生[10]认为MDA是具有细胞毒性的物质，对质膜有毒害作用，主要破坏细胞膜系统，在植株遭遇逆境伤害时含量增加，是反映细胞质膜损伤的重要指标。
马正君等[11]通过对不同葡萄品种抗氧化酶活性的比较，对品种的抗寒能力进行评价，并得出抗寒性强的品种酶活性相对高于抗寒性弱的品种，抗寒性强的品种保护酶活性随处理温度的降低下降较小。
不同樱桃品种及砧木抗寒性评价
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山 东 农 业 科 学 第 ５１卷
行了大 量 研 究。 张 春 山 等［９］明 确 冻 害 会 直 接 作 用于质膜，破坏质膜结构，进而造成质膜通透性增 大导致细胞内离子外渗，通过测定细胞电解质渗 出率即可反映细胞受冻害程度。李合生 认 ［１０］ 为 ＭＤＡ是具有细胞毒性的物质，对 质 膜 有 毒 害 作 用，主要破坏细胞膜系统，在植株遭遇逆境伤害时 含量增加，是反映细胞质膜损伤的重要指标。马 正君等 ［１１］通过 对 不 同 葡 萄 品 种 抗 氧 化 酶 活 性 的 比较，对品种的抗寒能力进行评价，并得出抗寒性 强的品种酶活性相对高于抗寒性弱的品种，抗寒 性强的品种保护酶活性随处理温度的降低下降较 小。吴瑕等［１２］认为樱桃自然休眠过程中，枝条的 ＭＤＡ含量呈先增加后降低的变化趋势，ＳＯＤ活性 先升高后下降，枝条韧皮部厚度与其电导率呈负 相关。Ｎｉｙａｚ等［１３］研究发现樱桃树体在抗寒过程 中，脯氨酸含量、过氧化物酶 （ＰＯＤ）活性和超氧 化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的变化与其相对电导率和 丙二醛含量的变化相反。基于此，本试验选择不 同樱桃品种和砧木的枝条，通过测定其在寒冷条 件下的相对电导率、丙二醛（ＭＤＡ）含量以及超氧 化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化 氢酶（ＣＡＴ）活性等指标，再采用隶属函数法对不 同樱桃的抗寒性进行评价，以期为抗寒品种及砧 木的选育提供依据。
（１．ＹａｎｔａｉＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｙａｎｔａｉ２６５５００，Ｃｈｉｎａ；２．ＹａｎｔａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｔａｉ２６４００５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｉｎｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｓｅｖｅｎｓｗｅｅｔｃｈｅｒｒｙｖａｒｉｅｔｉｅｓａｎｄｓｅｖｅｎｃｈｅｒｒｙｒｏｏｔｓｔｏｃｋｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｍａ ｔｅｒｉａｌｓ．ＴｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＳＯＤ，ＰＯＤ ａｎｄＣＡＴ，ｒｅｌａｔｉｖｅｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔｏｆａｎｎｕａｌｂｒａｎｃｈｅｓｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅｅｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｕｎｄｅｒｏｐｅｎ－ａｉｒａｎｄｌｏｗ－ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｉｎｗｉｎｔｅｒ，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｃｏｌｄ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｃｈｅｒｒｙｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｌｙｂｙｍｅｍｂｅｒｓｈｉｐｆｕｎｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ ｔｈｅｃｏｌｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｓｗｅｅｔｃｈｅｒｒｙｖａｒｉｅｔｉｅｓｃｏｕｌｄｂｅｓｏｒｔｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｓ：Ｄｕｌｉｒｉ＞Ｆｕｃｈｅｎ＞ ＥｌｕｏｓｉＮｏ．８＞ ＢｕｌｇａｒｉａＮｏ．４＞Ｍｅｉｚａｏ＞Ｈｅｉｚｈｅｎｚｈｕ＞Ｆｕｘｉｎｇ．Ｔｈｅｏｒｄｅｒｏｆｔｈｅｃｏｌｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｃｈｅｒｒｙｒｏｏｔｓｔｏｃｋｓｉｎｔｈｅ ｔｅｓｔｗａｓ：Ｍａｏｙｉｎｇｔａｏ＞Ｄｏｎｇｂｅｉｓｈａｎｙｉｎｇ＞ＹａｎｙｉｎｇＮｏ．４＞ＬａｎｄｉｎｇＮｏ．２＞ＳＺ－１＞ＹａｎｙｉｎｇＮｏ．２＞Ｙａｎｙ ｉｎｇＮｏ．１．
车厘子（甜樱桃）砧木详解，樱桃果农要重视
车厘子（甜樱桃）砧木详解，樱桃果农要重视适地适树，适地适砧，是从事果树栽培最基本的问题。
在甜樱桃种植中，砧木的了解不可不学习。
因为砧木的种类多，适应性不一样。
因此种植樱桃的朋友更加需要了解砧木的特性。
常见砧木的应用地区大青叶：胶东半岛、其它吉塞拉：山东泰安、陕西、山西马哈利：陕西、大连考特：山东临朐ZY-1：郑州、陕西本溪山樱：大连其他：樱砧王、大叶大、Y1（四倍体）、兰丁（Landing）1号，2号，3号，中国樱桃（大青叶等）嫁接树生长旺，树体高大，进入结果期较迟，在pH8.0以上的土壤上易出现黄化现象，抗寒力较差。
中国樱桃吉塞拉系列吉塞拉系有17种，其中5个比乔砧矮化50%。
与马扎德砧木相比，吉塞拉无性系砧木矮化效果相当明显，树体大小为马扎德砧的45%-70%。
丰产性能比马扎德砧木高20%--120%。
早实性明显，可提早3年收回所有投资。
果实大，抗樱桃细菌性、真菌性和病毒病害，包括根癌病、细菌性溃疡病(流胶病、洋李矮缩病毒病和樱属环斑坏死病毒病。
对土壤适应性强，能够适应粘土，固地性好。
抗寒性极强。
其中吉塞拉5为标准的矮化砧，其嫁接树的树冠只有标准乔化砧马扎德的45%—50% ,要求很好的土壤肥力和水肥管理水平，否则易出现早衰需立柱支撑其突出优点是早果性极好。
吉塞拉6属半矮化砧，其矮化性和早果性优于ZY-1，但对土壤类型的适应能力不如ZY-1，也要求相当高的水肥管理水平。
吉塞拉系矮化砧木具使树体矮化开张、早实丰产、抗病性强、适应性广等优点，在我国大樱桃矮化密植栽培，特别是保护地栽培中具有广阔的应用前景。
但是吉塞拉砧木甜樱桃矮化栽培存在很多问题，突出表现为负载量过大、叶果比失调、树势衰弱、盛果期年限缩短、甚至早衰。
因此，应采取精细化管理措施，如定植前深翻施有机肥改土、起垄栽培，从定植开始即加强肥水投入。
充分利用无果幼树期生长势强的特点，采取短截等方法促发分枝，加快整形和提早结果。
开始结果后立即采用短截等精细修剪、加大肥水供应，以促发新枝，调节负载量和树势，增大叶果比，维持中庸偏强树势，提高果实品质。
3个甜樱桃半矮化砧木品种抗寒性研究
3个甜樱桃半矮化砧木品种抗寒性研究作者：徐海鸿王瑾武彬来源：《现代农业科技》2017年第15期摘要对引种试栽甜樱桃半矮化砧木品种吉塞拉6号、马哈利CDR-1和兰丁2号一年生枝电导率进行测定，同时进行冻害分级。
结果表明，3种砧木经不同梯度温度的低温胁迫后，枝条组织电解质渗透率呈现“缓慢—迅速—缓慢”的“S”形变化，其半致死温度（LT50 ℃）在-35～-26 ℃之间，抗寒力强弱依次为马哈利CDR-1>吉塞拉6号>兰丁2号。
关键词甜樱桃半矮化砧木；品种；抗寒性；电解质渗透率；半致死温度中图分类号 S662.5 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）15-0067-01甜樱桃具有上市早、价格高、食味好等特点，深受消费者青睐，近20年来在我国飞速发展。
目前，甜樱桃栽培总趋势是矮化、标准化、机械化，核心技术是利用矮化砧木进行密植丰产栽培[1]。
为此，先后引入3个甜樱桃半矮化砧木品种，由伊宁市景辉园林有限公司经济林种苗基地负责试栽，按照苗木培育技术规程进行管理，并按时观察其生长发育状况。
为促进甜樱桃产业的发展，现对引进的3个甜樱桃半矮化砧木品种的抗寒性进行了测定。
现将结果总结如下。
1 材料与方法1.1 试验材料供试甜樱桃半矮化砧木共3个，分别为吉塞拉6号[2]，从山东农业大学群星果品科技示范园引入；马哈利CDR-1[3]，从陕西农林科技大学三原大樱桃示范园引入；兰丁2号，从北京市农林科学院林业果树研究所北京京林创新园艺科技有限公司引入。
1.2 试验方法1.2.1 采样。
供试材料取自新疆伊犁州直伊宁市景辉园林有限公司引进砧木品种定植圃，树龄3年，树体生长良好。
于2016年12月末在树体外围选取一年生的粗度基本一致的枝条，将其剪成长短一致的小段，分组标明后用塑料袋包住置于冰箱冷藏室储存[4-5]。
1.2.2 低温处理。
试验共设8个温度处理，升温和降温处理的速度均为4 ℃/h，每降到所规定的温度后持续12 h，后取出枝条在室温条件下放置2 h，从中留1/2第2天进行分级。
樱桃不同砧木抗寒性比较资料
樱桃不同砧木抗寒性比较05级生科2班周有文指导教师：呼丽萍摘要：为了掌握樱桃不同砧木抗寒性的差异，采用人工低温胁迫法，在-16℃的条件下对6种樱桃砧木1 年生休眠枝条胁迫12h，测定其相对电导率等8项生理指标。
结果显示6个测试砧木的相对电导率为47.45%~81.85%，可溶性糖含量为2.297mg/g~8.451mg/g，游离脯氨酸含量为 2.387μg/g~4.847μg/g，丙二醛的含量为15.621μg/g~29.938μg/g，超氧化物歧化酶酶活为12.677U/g~171.478U/g，过氧化氢酶酶活为4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g，过氧化物酶的酶活为0.127△O.D./mg/min ~0.586△O.D./mg/min，经方差分析表明：6种砧木的8项测定指标差异均达极显著水平，以马扎德(Mazzard)抗寒性最好，北京砧木、莱阳矮樱桃、毛樱桃次之，四川砧木和考特(colt)较差。
关键词：樱桃；砧木；生理指标；抗寒性Comparison on the Cold Resistance of Different Cherry RootstocksZhou Youwen(School of Life Science and Chemistry, TianShui Normol Unversity, Tianshui, Gansu ,741001) Abstract:The use of artificial methods of indoor low-temperature stress, six kinds of 1-year-old dormant shoots of cherry rootstocks were treated under the low temperature -16 ℃for 12h, and determinated its relative conductivity of eight indicators, etc. The relative conductivity was 81.85%~47.45%, soluble sugar content was 2.297mg/g~8.451mg/g, free proline content was 2.387μg/g~4.847μg/g, malondialdehyde content was 15.621μg/g~29.938μg/g, superoxide dismutase (SOD) activity was 12.677U/g~171.478U/g, catalase (CAT) activity was 4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g, peroxidase (POD) activity was 0.127△O.D./mg/min~0.586△O.D./mg/min, indicators above reach significant levels by the analysis of variance. The results showed that: amongst the six kinds of stock, Mazzard has the best cold tolerance ability, followed by Beijing rootstock, Laiyang dwarf cherries, Prunus tomentosa, and Sichuan and Court rootstock (colt)were the worst.Key words: cherry rootstocks; physiological indicators; cold resistance抗寒性是植物对低温寒冷环境长期适应中通过本身的遗传变异和自然选择获得的一种抗寒能力。
不同类型天山樱桃的抗寒性初步研究
黑龙江农业科学2023(11):83-88H e i l o n g j i a n g A gr i c u l t u r a l S c i e n c e s h t t p ://h l j n y k x .h a a s e p.c n D O I :10.11942/j.i s s n 1002-2767.2023.11.0083叶丽努尔㊃哈德勒,刘璇,王玉萍,等.不同类型天山樱桃的抗寒性初步研究[J ].黑龙江农业科学,2023(11):83-88.不同类型天山樱桃的抗寒性初步研究叶丽努尔㊃哈德勒,刘 璇,王玉萍,满 好,周 龙(新疆农业大学园艺学院,新疆乌鲁木齐830052)摘要:为促进天山樱桃的进一步开发利用,以矮生和乔化两种类型天山樱桃的一年生枝条为试验材料,通过人工模拟低温胁迫处理(-20,-25,-30,-35和-40ħ),测定其相对电导率㊁可溶性糖㊁可溶性蛋白㊁脯氨酸及丙二醛含量等生理指标,以相对电导率结合L o g i s t i c 方程测算半致死温度(L T 50),进一步通过组织褐变法和恢复生长法,综合评价各参数与耐寒度间的关系,从而评价不同类型天山樱桃的抗寒性㊂结果表明,随着低温胁迫强度的增加,枝条的电导率㊁可溶性糖含量明显升高,当温度达到-40ħ时,两者的相对电导率均超过50%,矮生型天山樱桃枝条的半致死温度为-36.81ħ,乔木状天山樱桃枝条的半致死温度为-39.91ħ,可见两种类型天山樱桃的抗寒性顺序依次为乔木状天山樱桃>矮生型天山樱桃㊂关键词:天山樱桃;低温胁迫;抗寒性;生理指标收稿日期:2023-05-21基金项目:自治区高校基本科研业务费项目(X J E D U 2022-Z 004);自治区大学生创新创业项目(S 202310758063)㊂第一作者:叶丽努尔㊃哈德勒(2001-),女,本科生,从事果树抗寒生理研究㊂E -m a i l :1161589133@q q .c o m ㊂通信作者:周龙(1976-),男,博士,教授,从事果树种质资源和栽培生理方面的研究㊂E -m a i l :z h o u l o n g2004@126.c o m ㊂ 近年来,我国樱桃产业发展迅猛,其中甜樱桃因其果实外观鲜艳㊁口感较佳,而且富含维生素㊁蛋白质和钙㊁磷㊁铁等各种微量元素,因此营养价值也较高,而深受消费者的青睐[1]㊂但是由于甜樱桃抗寒性差,所以在我国的分布范围窄,集中分布在秦岭淮河以南的区域㊂为了扩大甜樱桃的栽培区,生产上多采用抗寒性强的砧木材料㊂天山樱桃作为新疆野果林特有的野生果树,具有极强的抗旱㊁抗寒以及抗病虫害能力,可作为李属及樱亚属砧木材料[2]㊂目前,对天山樱桃的研究工作仍然重点聚焦于花粉萌发特征[3]㊁遗传和表型多样性[4]㊁群落特征[5]等方面,而有关天山樱桃生态适应性的研究甚少,进一步明确天山樱桃的生态适应性,对于野生种质资源的开发利用有很高的科研价值和实践意义[6]㊂温度是天气因素中改变植物地理分布的主要原因,温度胁迫是植物栽培中常常出现的一个气候灾害,会影响到各种经济作物及其它多种植物,温度会影响植株的生长代谢,导致植株的生理指数发生改变,造成植株的生长发育受到一定的损害,严重的可致死[7]㊂相对电导率的改变能够反映植物细菌细胞壁的破坏程度,是能够反映各种树木抗逆能力的指数,同时也用作耐寒能力强弱的一个指数应用㊂根据相对电导率结合L o gi s t i c 方程推算某种植物的半致死温度,是果树抗寒性研究必不可少的方法[8]㊂李纪元等[9]发现电导法在评价黑木相思和灰木相思的抗寒性上有很好的准确性㊂何开跃等[10]通过对福建柏山低温胁迫的长期观察证实,M D A 浓度随着温度的降低而逐步增加㊂严寒静等[11]对栀子的调查研究发现,当温度逐渐下降时栀子叶内可溶性糖含量逐月增加,在温度最低的一月其可溶性糖含量是温度最高的九月的1.6倍㊂高志红等[12]对果梅的研究发现,低温胁迫下其枝条内可溶性蛋白含量和可溶性糖含量与抗寒性呈明显正相关,可用作检测种质抗寒性的重要指标㊂姜卫兵等[13]对无花果的长期研究表明,耐寒力越高的品种游离脯氨酸含量越是处于更高水平,而耐寒力较弱的种类则处在较低水平㊂S u k u m a r a n 等[14]提议以相对电导率为50%时的环境温度作为组织半致死温度,而近年来专家们普遍认为半致死温度(L T 50)可作为衡量某个物种抗寒性强弱比较精确的指数[15]㊂而耐寒能力也是植物最主要的抗性能力之一,当植物遭受逆境胁迫时,其生态改变过程是相当复杂的,且受到了许多因子的复合作用,因此仅仅依靠一两个指标很难去反映植物抗寒性的真实情况㊂不同类型天山樱桃的抗寒性具有差异,需对比分析乔木状天山樱桃和矮生型天山樱桃两种类型的抗寒性差异㊂天山樱桃为野生果树,作为不同类型天山樱桃在野外生境不同的情况下枝条发育情况㊁营养状态均不相同,如何准确进行评价是本项目研究的关键㊂本研究用多个指标对两种类型的天山樱桃的抗寒力进行研究,更具科学性和可靠性[16]㊂拟通过野外采样和试验基地采样相结合,室内人工模拟低温研究和室38黑 龙 江 农 业 科 学11期外自然越冬相结合的方式,拟合外部形态指标㊁生理指标等全面进行探讨和研究,综合予以评价㊂1 材料与方法1.1 材料在西天山野果林采集野外乔木状天山樱桃和矮生型天山樱桃的一年生休眠枝,在新疆农业大学园艺学院干旱区特色果树中心重点实验室进行材料处理㊂在实验室中,吸干表面的水分,存于4ħ冰箱备用㊂采用人工冷冻降温的方法,放置在冰箱中的温度控制范围是-20,-25,-30,-35和-40ħ,而每个温度的持续时间约为12h ㊂1.2 方法1.2.1 组织褐变观察 参照牛立新等[17]的研究结果㊂每个温度下选择3条洁净的一年生枝条,采用刀片横切成0.2c m 厚的薄片,并放置在解剖镜下观测枝条横切面的受冻变褐情况㊂采用褐变部分所占比例的方法,测定褐变面积㊂褐变面积(%)=(S 1/S 2)ˑ1001.2.2 相对电导率的测定 参照王文举等[18]的方法,将低温处理下的枝条采用刀片横切成0.2c m厚的薄片,称取0.3g ,装在45m L 的离心管中,再加入20m L 去离子水溶液,室温条件下封口浸提20h ,用D D S -307A 输出电导仪测出最初电导值C 1,用蒸馏水对照电导值C 0,将其放在煮沸浴中30m i n ,冷至常温后再测出最终的电导值C 2㊂如此反复计算3次,取平均值㊂相对电导率(%)=(C 1-C 0/C 2-C 0)ˑ1001.2.3 半致死温度的测定 根据苏李维等[19]的方法,用L o gi s t i c 方程组加以拟合环境温度(t )和相对电导率(y ),求出相对电导率的拐点温度,即为低温半致死温度(L T 50)㊂L o g i s t i c 方程:y =k /(1+a e -b t)1.2.4 生理指标的测定 参照武汉伊莱瑞特生物公司相关试剂盒使用说明测定其可溶性糖㊁可溶性蛋白㊁游离脯氨酸(P r o )㊁丙二醛(M D A )含量㊂可溶性葡萄糖含量的测定:称取0.1g 低温胁迫处理后的植物组织块,剪碎后加入乙醇并匀浆,后倒入有盖离心管中,再用80%乙醇冲洗研钵并转移到同一E P 管中,终体积定容为1.5m L ,50ħ水浴20m i n ,封口膜缠紧,且间隔2m i n 振荡混匀一次,冷却后12000r ㊃m i n -1离心10m i n,取上清液备用㊂在E P 管中依次加入0.025m L 样本㊁0.075m L 蒸馏水和0.030m L 工作液,再缓慢加入0.250m L 浓硫酸作为测定管,在E P 管中依次加入0.100m L 蒸馏水㊁0.030m L 工作液和0.025m L 浓硫酸作为空白管,混匀后,放入沸水浴中10m i n ,冷却至室温后,取200μL 转移至96孔板中,于620n m 读取吸光值㊂ΔA=A 测定-A 空白可溶性糖含量(m g ㊃g -1)=[(ΔA+0.0103)ː2.0899ˑV 1]ː(W ˑV 1ːV )ˑD =0.718ˑ(ΔA+0.0103)ːW ˑD可溶性蛋白质浓度(C pr )的测定:称取0.1g 低温胁迫处理的植物组织块,加入提取液后沐浴匀浆,12000r ㊃m i n -1离心10m i n,取上清㊂在E P 管中加入0.005m L 样本,混匀,于60ħ保温30m i n ,全部转移到96孔板,于562n m 处测定吸光值㊂ΔA=A 测定-A 空白C pr 鲜重(m g ㊃g -1)=[(ΔA+0.0046)ː0.188ˑ0.01]ː(V 1ːV ˑD )=1.06ˑ(ΔA+0.0046)ːW ˑD脯氨酸含量的测定:称取0.1g 低温胁迫处理后的植物组织块,剪碎后加入1m L 的提取液,匀浆后离心15m i n ,取上清用提取液稀释10倍,取稀释后的样本㊂取2m L 提取液,加入10m L试管中作为空白管㊂取2m L10μg㊃m L -1标准品,加入10m L 试管中作为标准管,取2m L 待测样本,加入10m L 试管中作为测定管,混匀,沸水浴30m i n ,流水冷却,加4m L 甲苯,振荡,静置10m i n,取上清液至离心管中后离心10m i n,吸取上层红色甲苯溶液,于520n m 处测定各管吸光度㊂脯氨酸含量(μg ㊃g -1)=(ΔA 1ːΔA 2)ˑc ˑV ːW ˑf丙二醛含量(M D A )的测定:称取0.1g 低温胁迫处理后的植物组织块,剪碎后加入提取液,沐浴匀浆后离心15m i n ,取上清液0.1m L ㊂取8个不同浓度的标准品各0.1m L ,分别加入对应的1.5m LE P 管中作为标准管,取0.1m L 待测样本,加入1.5m LE P 管中作为测定管,再向各管中加入0.6m L 工作液,混匀后E P 管口用保鲜膜扎紧,并扎一个小孔,95ħ以上水浴40m i n,取出后流水冷却,2000g 离心10m i n ㊂取0.25m L上清液加入酶标板,532n m ,测定O D 值㊂M D A (n m o L ㊃g -1)=(ΔA 532-b )ːa ˑf ː(m ːv )式中:b 为标曲的截距;a 为标曲的斜率;f 为样本加入检测体系之前的稀释倍数;m 为植物组织样本质量(g);v 为样本处理过程中加入试剂五抽提应用液的体积(m L )㊂1.2.5 恢复生长情况调查 取不同低温处理采集的天山樱桃枝条样品,分别放置在装有三分之二蒸馏水的150m m 的三角瓶密封后,存放于约4811期 叶丽努尔㊃哈德勒等:不同类型天山樱桃的抗寒性初步研究25ħ的室内,进行光照处理,每3d 换水1次,换水时修剪掉枝条基部便于更好地吸收水分,每天记录1次芽的萌发情况,统计萌芽率㊂1.2.6 数据分析 试验数据采用E x c e l 2019进行计算和作图,并用O r i g i n2021软件对L o gi s t i c 方程y =k /(1+a e -b t)进行拟合,若拟合度(r)显著时,再计算L T 50,从而分析判断温度和相对电导率之间的关系,最后综合比较分析两种类型天山樱桃的抗寒性㊂2 结果与分析2.1 不同类型天山樱桃的相对电导率和半致死温度由图1可知,两种类型天山樱桃枝条相对电导率随着处理温度的降低均呈现缓慢上升的趋势,且矮生型天山樱桃始终显著高于乔木状天山樱桃,并在-40ħ时达到最大值㊂其中矮生型天山樱桃相对电导率在-40~-30ħ时上升幅度最大,乔木状天山樱桃相对电导率在-40~-35ħ时上升的幅度最大㊂在相同温度下,矮生型天山樱桃的相对电导率均大于乔木状天山樱桃的相对电导率,在-35~-20ħ时,矮生型天山樱桃和乔木状天山樱桃的相对电导率均在50%以下,当温度达到-40ħ时,两者的相对电导率均超过50%㊂根据在不同温度处理下测定的两种类型天山樱桃的相对电导率求出其L o g i s t i c 方程㊁拟合度及低温半致死温度,结果如表1所示,不同温度胁迫下,乔木状的天山樱桃半致死温度为-39.91ħ,而矮生型天山樱桃休眠枝条的半致死温度为-36.81ħ,两种类型天山樱桃的方程相关系数分别为0.94269和0.95422㊂图1 低温胁迫下天山樱桃枝条相对电导率的变化表1 低温胁迫下的天山樱桃枝条半致死温度(L T 50)品种L o gi s t i c 方程拟合度L T 50/ħab矮生型天山樱桃Y =100/(1+4.44356e -0.04052t )0.95422-36.814.443560.04052乔木状天山樱桃Y =100/(1+5.22048e-0.04141t )0.94269-39.915.220480.041412.2 不同类型天山樱桃的组织褐变不同类型天山樱桃的休眠枝条对低温胁迫反应后的横切面的褐变现象如图2所示㊂枝条木质部㊁韧皮部及髓部在-30~-20ħ处理时颜色鲜绿,说明尚未经受到低温的胁迫,随着处理温度的进一步下降,两个类型天山樱桃枝条的组织褐变程度渐重,尤其是在木质部表现明显,出现褐色,处理温度-40ħ时木质部㊁韧皮部出现大面积的褐变现象,而且表现出矮生型(图2A )的褐变面积大于乔木状天山樱桃(图2B )㊂A.矮生型天山樱桃;B .乔木状天山樱桃㊂图2 低温胁迫下天山樱桃枝条的褐变情况2.3 低温处理对两种类型天山樱桃枝条生理指标的影响2.3.1 脯氨酸 由图3可知,随着温度的降低,两个类型天山樱桃枝条的脯氨酸含量都呈现先增加后减少再增加的趋势,在-20ħ和35ħ条件下,两种类型天山樱桃枝条脯氨酸含量无显著差异,-25,-30和-40ħ条件下,两种类型天山樱桃抗寒性表现出显著差异,乔木状天山樱桃枝58黑 龙 江 农 业 科 学11期条脯氨酸含量显著高于矮生型天山樱桃,在不同的低温胁迫处理下,乔木状天山樱桃枝条的脯氨酸含量均比矮生型天山樱桃枝条的脯氨酸含量高㊂温度在-40~-35ħ时,乔木状天山樱桃枝条的脯氨酸含量上升幅度最大,增加了214.92μg ㊃g -1;矮生型天山樱桃枝条的脯氨酸含量增加幅度最小,仅增加了56.94μg ㊃g -1㊂在温度下降过程中,两种类型天山樱桃间脯氨酸含量变化差异明显㊂图3 低温胁迫下天山樱桃枝条脯氨酸含量的变化2.3.2 可溶性糖 由图4可知,两种类型天山樱桃枝条的可溶性糖含量随着处理温度的下降而持续上升,两种类型天山樱桃枝条可溶性糖含量始终无显著差异㊂-20ħ时,乔木型天山樱桃枝条的可溶性糖含量较矮生型天山樱桃枝条低㊂但随着处理后温度的持续下降,两种型天山樱桃枝条可溶性糖含量迅速增加,至-40ħ时达高峰程度,且乔木状天山樱桃枝条的可溶性糖含量超过了矮生型天山樱桃㊂图4 低温胁迫下天山樱桃枝条可溶性糖含量的变化2.3.3 丙二醛 由图5可知,-35~-25ħ条件下,矮生型天山樱桃枝条丙二醛含量始终显著高于乔木状天山樱桃㊂在-40和-20ħ条件下,两种类型天山樱桃枝条丙二醛含量无显著差异,温度在-30~-20ħ时,两种类型天山樱桃枝条的丙二醛含量均上升,矮生型天山樱桃枝条的丙二醛含量上升幅度最大;温度在-35~-30ħ时,两种类型天山樱桃枝条的丙二醛含量均下降,乔木状天山樱桃枝条的丙二醛含量下降幅度最大;温度在-40~-35ħ时,矮生型天山樱桃枝条的丙二醛含量下降,乔木状天山樱桃枝条的丙二醛含量迅速上升㊂丙二醛含量最高的是矮生型天山樱桃枝条㊂图5 低温胁迫下天山樱桃枝条丙二醛含量的变化2.3.4 可溶性蛋白质 由图6可知,随着处理温度的降低,两种类型天山樱桃枝条可溶性蛋白质含量整体有上升趋势㊂-25~-20ħ和-35ħ条件下,两种类型天山樱桃枝条可溶性蛋白质含量均无显著差异,在-40和-30ħ条件下,两种类型天山樱桃枝条可溶性蛋白质含量出现显著差异,温度在-30ħ时,矮生型天山樱桃可溶性蛋白质含量达到最大值且显著高于乔木状天山樱桃㊂当温度为-25~-20ħ时,两种类型天山樱桃的可溶性蛋白质含量均迅速升高;当温度为-30~-25ħ时,矮生型天山樱桃的可溶性蛋白质含量缓慢上升,乔木状天山樱桃的可溶性蛋白质含量则缓慢下降;当温度为-35~-30ħ时,矮生型天山樱桃的可溶性蛋白质含量缓慢下降,乔木状天山樱桃的可溶性蛋白质含量又上升;当温度为-40~-35ħ时,两种类型天山樱桃的可溶性蛋白质含量匀下降㊂在整个温度下降过程中,矮生型天山樱桃的可溶性蛋白质含量均比乔木状天山樱桃的可溶性蛋白质含量高㊂图6 低温胁迫下天山樱桃枝条可溶性蛋白质含量的变化2.4 低温胁迫后两种类型天山樱桃枝条恢复生长情况由表2和图7可以看出,随着处理温度的降低,两种类型天山樱桃枝条恢复生长能力减弱,两种类型天山樱桃枝条的萌芽率均随着温度的降低而逐步下降㊂当温度降低至-30ħ时,两种类型天山樱桃枝条的萌芽率都降低在50%以内,矮生6811期 叶丽努尔㊃哈德勒等:不同类型天山樱桃的抗寒性初步研究型天山樱桃枝条萌芽率为20.05%,乔木状天山樱桃枝条萌芽率为20.12%,说明已经有部分芽体遭到破坏,乔木状天山樱桃枝条仍处于展叶期,矮生型天山樱桃枝条只处于绿尖期,当温度下降至-35ħ时,两种类型天山樱桃休眠枝条的萌芽率均只有在20%以下,矮生型天山樱桃枝条萌芽率为9.52%,乔木状天山樱桃枝条萌芽率为17.38%,但乔木状天山樱桃枝条萌芽数量仍高于矮生型天山樱桃枝条,当温度在-40ħ时两种类型天山樱桃枝条均没有萌发㊂随着处理温度的降低,乔木状天山樱桃(图7B )恢复生长的能力相对于矮生型天山樱桃(图7A )的恢复生长能力更强㊂表2 低温胁迫下天山樱桃休眠枝条的萌芽率供试枝条萌发率/%-20ħ-25ħ-30ħ-35ħ-40ħ矮生型天山樱桃55.9050.2920.059.520乔木状天山樱桃59.3851.4820.1217.38A.矮生型天山樱桃;B .乔木状天山樱桃㊂图7 低温胁迫下天山樱桃枝条恢复生长的情况3 讨论3.1 天山樱桃相对电导率和抗寒性关系逆境条件下,植株内的各种渗透调控产物大量堆积,从而赋予植株渗透调控的能力[19-20]㊂当树木枝条遭受低温胁迫时,细胞的质膜透性就会变大,进而产生电解质的外渗㊂本研究发现不同低温胁迫下,两种类型天山樱桃枝条的相对电导率随着温度的降低呈直线上升趋势,温度在-40~-35ħ时,两种类型天山樱桃枝条的相对电导率均超过了50%以上,可以进一步利用L o gi s t i c 方程计算得出两种类型天山樱桃枝条的半致死温度为-36.81和-39.91ħ㊂多数研究表明当相对电导率达到50%以上时多数植物已经遭受到不可逆的伤害,关于这一点魏鑫等[21]在越橘品种㊁马小河等[22]在酿酒葡萄的研究上也得出相同的结论㊂3.2 天山樱桃生理指标和抗寒性关系用作植物细胞内渗透调节的可溶性糖㊁可溶性蛋白㊁丙二醛和脯氨酸等在逆境情况下不断积累,有植物细胞渗透调节的功能,而这种化合物也被认为和耐寒性有关[23]㊂本研究发现两种类型天山樱桃的可溶性糖含量由于温度的不断下降整体呈现不断增加趋势㊂这一方面,在常绿阔叶的灌木富贵草[24]㊁观光木[25]的研究结果与本研究一致㊂天山樱桃本身就是极耐寒的品种,枝条内积聚了丰富的可溶性糖,可溶性糖是植株内主要的渗透保护物质,具有降低原生质冰点缓冲细胞脱水的作用,其含量与抗寒性呈正相关㊂本研究仅对两种不同类型天山樱桃进行了人工模拟低温胁迫下的抗寒性研究,为获得更加准确可靠的数据,仍需要通过连续多年的观测和田间表现进行验证试验㊂生理生化指标的测定及形态结构的观察只是对抗寒性的初步研究,未来还需要在抗寒基因的挖掘㊁功能鉴定等多方面进行深入研究㊂全面评价天山樱桃的生态适应性,为这一野生种质资源的开发利用提供理论依据㊂4 结论通过对人工低温处理条件下不同类型天山樱桃枝条组织褐变和恢复生长情况的观测,拟合L o gi s t i c 方程和脯氨酸㊁可溶性糖㊁可溶性蛋白㊁丙二醛等生理指标对抗寒性进行综合评判,乔木状的天山樱桃半致死温度为-39.91ħ,矮生型天山樱桃休眠枝条的半致死温度为-36.81ħ,且矮生型天山樱桃枝条相对电导率始终显著高于乔木状天山樱桃㊂在-40ħ条件下,矮生型天山樱桃枝条的脯氨酸含量达到271.11μg ㊃g -1,乔木状天山樱桃枝条的脯氨酸含量高达495.11μg ㊃g -1,乔木状天山樱桃枝条脯氨酸含量始终显著高于矮生型天山樱桃㊂矮生型天山樱桃枝条的可溶性糖含量为21.63m g ㊃g -1,乔木状天山樱桃枝条的可溶性糖含量为21.43m g ㊃g -1㊂矮生型天山樱桃枝条的丙二醛含量为50.12n m o L ㊃g -1,乔木状天山樱桃枝条的丙二醛含量为45.65n m o L ㊃g -1,矮生型天山樱桃枝条丙二醛含量始终显著高于乔木状天山樱桃㊂矮生型天山樱桃枝条的可溶性蛋白质含量为16.56m g ㊃g -1,乔木状天山樱桃枝条的可溶性蛋白质含量为10.75m g ㊃g -1,温度在-40ħ时,矮78黑 龙 江 农 业 科 学11期生型天山樱桃可溶性蛋白质含量达到最大值且显著高于乔木状天山樱桃㊂认为两种类型天山樱桃均有强的抗寒能力,半致死温度在-40~-35ħ之间,经综合判断乔木状天山樱桃抗寒力较强于矮生型天山樱桃㊂参考文献:[1] 张力思.甜樱桃的起源㊁分布及栽培现状[J ].北方果树,2000(4):31.[2] 彭妮,周龙,王超,等.天山樱桃种子萌发特性研究[J ].经济林研究,2015,33(3):145-149.[3] 王超,周龙,彭妮,等.天山樱桃花粉特性研究[J ].新疆农业大学学报,2013,36(6):449-453.[4] 李春侨,周龙,陆彪,等.天山樱桃种质资源表型多样性研究[J ].西北农业学报,2018,27(1):91-97.[5] 冯琳骄,褚佳瑶,高林,等.新疆伊犁和塔城地区天山樱桃群落特征与植物区系的比较[J ].经济林研究,2021,39(3):156-164.[6] 李春侨,周龙,陆彪,等.天山樱桃野生居群遗传多样性S S R分析[J ].经济林研究,2017,35(3):44-49.[7] L Y O N S JM.C h i l l i n g i n j u r yi n p l a n t s [J ].A n n u a l R e v i e wo f P l a n tP h y s i o l o g y a n d P l a n t M o l e c u l a rB i o l o g y ,1973,24:445-448.[8] 林艳,郭伟珍,徐振华,等.大叶女贞抗寒性及冬季叶片相对电导率变化研究[J ].天津农业科学,2012,18(5):145-149.[9] 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r e l a t i v e c o n d u c t i v i t y ,s o l u b l e s u g a r ,s o l u b l e p r o t e i n ,p r o l i n e a n dm a l o n d i a l d e h y d e c o n t e n tw e r e m e a s u r e db y a r t i f i c i a l s i m u l a t e d l o wt e m pe r a t u r e s t r e s s t r e a t m e n t (-20,-25,-30,-35,-40ħ).T h e s e m i -l e t h a l t e m p e r a t u r e (L T 50)w a s c a l c u l a t e db y r e l a t i v e c o n d u c t i v i t y c o m b i n e dw i t hL o g i s t i c e q u a t i o n .T h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e ne a c h p a r a m e t e ra n dc o l dr e s i s t a n c e w a sc o m p r e h e n s i v e l y e v a l u a t e db y t i s s u eb r o w n i n g m e t h o da n dr e c o v e r yg r o w t h m e t h o d ,a n de v a l u a t et h ec o l dr e s i s t a n c eo fd if f e r e n t t y p e so f C .t i a n s c h a n i c a P o j a r k .T h er e s u l t ss h o w e dt h a tw i t ht h e i n c r e a s eo f l o wt e m p e r a t u r es t r e s s i n t e n s i t y ,t h ec o n d u c t i v i t y a 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不同砧木甜樱桃品种早大果的抗寒性鉴定
不同砧木甜樱桃品种早大果的抗寒性鉴定
陈秋芳;王敏;何美美;田建保
【期刊名称】《中国果树》
【年(卷),期】2008()2
【摘要】采用自然鉴定法和电导法对山樱桃、大青叶、吉塞拉5号嫁接的甜樱桃品种早大果的抗寒性进行了鉴定、比较。
结果表明,吉塞拉5号砧的早大果冻害率最低,抗寒性最强。
3个处理在不同低温下的电解质渗出率存在明显差异,吉塞拉5号砧的早大果与其他2个处理间差异明显。
3个处理的抗寒性由强到弱顺序为:吉塞拉5号砧>山樱桃砧>大青叶砧。
【总页数】3页(P18-20)
【关键词】甜樱桃;砧木;早大果;抗寒性
【作者】陈秋芳;王敏;何美美;田建保
【作者单位】山西省农业科学院果树研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S688.4;S662.5
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大樱桃主要有哪些砧木,各有什么特点
大樱桃主要有哪些砧木，各有什么特点大樱桃主要砧木有：考特、马扎德樱桃、马哈利樱桃、草樱桃、青肤樱、毛把酸等。
(1)考特：是英国杂交育成的第一个甜樱桃半矮化砧。
用它嫁接的甜樱桃，树体缩小，结构紧凑，花芽分化早，丰产，果实品质好。
考特的分蘖生根能力很强，易于通过扦插或组织培养繁殖，其砧苗根系发达，抗风力强。
与甜樱桃的亲和力很强，抗病与抗寒力较强。
适于在潮湿土壤中生长，对f旱反应敏感，不宜在背阴和干燥条件下栽培。
(2)马扎德樱桃：是产于欧洲西部的甜樱桃野生种。
通常用种子繁殖砧苗，在粘重土上反应良好，生长旺盛，树势强健。
与甜、酸樱桃的亲和力均强。
用马扎德樱桃作砧木嫁接的树体高大，长寿，产量高，较耐瘠薄和寒冷，抗根腐病。
树冠大，但进入盛果期晚。
根系浅，易感细菌性根癌病、树脂病和枝枯病。
我国大连、北京及河北昌黎有少量应用。
(3)马哈利樱桃：原产于欧洲中部。
根系发达，抗旱但不耐涝，适于轻壤土中栽培。
在粘重土中生长不良。
抗寒力强。
马哈利樱桃多用种子繁殖，种子发芽率高，砧苗生长健壮，播种当年可供芽接。
与甜樱桃的亲和力较强。
结果早，果实大，丰产。
(4)草樱桃：是山东省烟台市从中国樱桃中选育出的一种优良甜樱桃砧木。
树体为小乔木或丛状灌木，根的萌蘖力极强，易进行分株或扦插繁殖。
草樱桃毛根发达，适应性强，与多数甜樱桃嫁接亲和力强。
嫁接株长势健旺，丰产，高抗根癌病。
适于沙壤或砾质壤土中生长，不适于粘重土壤。
其根系分布浅，遏强风易倒伏。
草樱桃有大叶和小叶两种。
大叶草樱桃叶大而厚，枝条粗壮，节间短，分枝少，扦插成活率较低，宜用带根的分蘖繁殖。
小叶草樱桃叶片小而薄，枝条较细，粗根小，扦插成活率较高．嫁接株长势不及大叶草樱桃。
目前多采用大叶草樱桃繁殖大樱桃苗木。
(5)青肤樱：又叫青叶樱。
为日本甜樱桃的主要砧木。
在我国大连等地也有采用。
青肤樱扦插成活率高，所以，一般用扦插法繁殖。
与甜樱桃亲和力强，嫁接株生长良好。
作甜樱桃的硬肉品种砧木效果更好。
樱桃不同砧木抗寒性比较
樱桃不同砧木抗寒性比较05级生科2班周有文指导教师：呼丽萍摘要：为了掌握樱桃不同砧木抗寒性的差异，采用人工低温胁迫法，在-16℃的条件下对6种樱桃砧木1 年生休眠枝条胁迫12h，测定其相对电导率等8项生理指标。
结果显示6个测试砧木的相对电导率为47.45%~81.85%，可溶性糖含量为2.297mg/g~8.451mg/g，游离脯氨酸含量为 2.387μg/g~4.847μg/g，丙二醛的含量为15.621μg/g~29.938μg/g，超氧化物歧化酶酶活为12.677U/g~171.478U/g，过氧化氢酶酶活为 4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g，过氧化物酶的酶活为0.127△O.D./mg/min ~0.586△O.D./mg/min，经方差分析表明：6种砧木的8项测定指标差异均达极显著水平，以马扎德(Mazzard)抗寒性最好，北京砧木、莱阳矮樱桃、毛樱桃次之，四川砧木和考特(colt)较差。
关键词：樱桃；砧木；生理指标；抗寒性Comparison on the Cold Resistance of Different Cherry RootstocksZhou Youwen(School of Life Science and Chemistry, TianShui Normol Unversity, Tianshui, Gansu ,741001) Abstract:The use of artificial methods of indoor low-temperature stress, six kinds of 1-year-old dormant shoots of cherry rootstocks were treated under the low temperature -16 ℃for 12h, and determinated its relative conductivity of eight indicators, etc. The relative conductivity was 81.85%~47.45%, soluble sugar content was 2.297mg/g~8.451mg/g, free proline content was 2.387μg/g~4.847μg/g, malondialdehyde content was 15.621μg/g~29.938μg/g, superoxide dismutase (SOD) activity was 12.677U/g~171.478U/g, catalase (CAT) activity was 4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g, peroxidase (POD) activity was 0.127△O.D./mg/min~0.586△O.D./mg/min, indicators above reach significant levels by the analysis of variance. The results showed that: amongst the six kinds of stock, Mazzard has the best cold tolerance ability, followed by Beijing rootstock, Laiyang dwarf cherries, Prunus tomentosa, and Sichuan and Court rootstock (colt)were the worst.Key words: cherry rootstocks; physiological indicators; cold resistance抗寒性是植物对低温寒冷环境长期适应中通过本身的遗传变异和自然选择获得的一种抗寒能力。
甜樱桃砧木点评与选择！
甜樱桃砧木点评与选择！甜樱桃嫁接苗，育苗时既要选择好接穗品种，也要选择好砧木品种。
甜樱桃砧木品种很多，如何选择?现将甜樱桃砧木优良品种的优缺点、适应范围加以点评，供参考。
(1)山樱。
山樱砧为甜樱桃乔砧，山樱砧大樱桃树生长快，树体强健，盛果期长，不易衰弱，高产稳产，嫁接中庸开张品种，易早产早丰，长期稳定高产;山樱砧根系发达，主根粗壮，侧根多，须根多，细长根多，分布深，固地性好，吸收量大，抗旱、抗风力强;山樱砧适应范围广，极抗寒，在－40℃的黑龙江北部能正常生长。
山樱砧是大连、河北、北京等地甜樱桃的主要砧木，也是日本甜樱桃的主要砧木。
大连现有9.5%以上甜樱桃砧木为山樱。
缺点:一是“小脚”，但只要在砧木近地表处嫁接就可以避免;二是有根瘤病，但在酸性土壤、不易涝的地块建园可以减轻;三是理论上结果较晚，只要采取早果措施，同样3年结果，5年丰产。
点评:山樱生长健壮，经济寿命长，长期稳定高产，抗寒抗旱，适应性强，是我国南北方甜樱桃广泛通用的优良砧木，北方甜樱桃露地栽培的主要砧木，大棚栽培表现也良好。
不同地区、地势、土质、品种都可采用。
(2)马扎德。
马扎德是甜樱桃乔砧，马扎德砧大樱桃成树高大，树势强健，长寿，高产，盛果期长;根系发达，较耐瘠薄，耐旱耐湿，较耐寒，在黏重土中表现良好，较抗根腐病。
缺点:一是幼树长势强、树冠大，进入结果期较晚;二是易得根瘤病和枝枯病。
点评:马扎德砧甜樱桃树体强健，经济寿命长，是欧美应用最早、时间最长、最普遍的优良主要砧木，美国占7%，我国也在引入试用。
(3)大青叶(大叶草樱)。
草樱有大叶、中叶、小叶之分，大叶草樱也叫大青叶，能作甜樱桃砧木，是从中国樱桃中选出的叶片较大的一种，是山东常用的甜樱桃乔砧。
大青叶砧甜樱桃树势强健，树冠扩大快，寿命长;根系发达，粗根多，须根也多，根系分布较深;较耐干旱，耐瘠薄;根瘤病少，没有小脚病。
最适于沙壤土或砾质壤土。
需要注意的是，草樱中的小青叶根系浅、毛根多、粗根少、易倒伏、长势弱、抗逆性差、寿命短，不宜作甜樱桃砧木，不能误将小青叶当作大青叶。
3个甜樱桃半矮化砧木品种抗寒性研究
３ ７ ． １ ３ ％， 当温 度 降 至一 ３ ６℃时 ， 兰 丁 ２号 电解 质渗 透 率升 高
况。 为 促 进甜 樱桃 产 业 的发 展 ， 现 对 引 进 的 ３个 甜 樱桃 半 矮
化砧 木 品种 的抗 寒性 进 行了 测定 。 现将 结果 总 结如 下 。
１ 材 料 与 方 法 １ ． １ 试 验 材 料
一
的 电 解 质渗 透 率分 别 为 ３ ４ ． ９ ７ ％和 ３ ２ ． ２ ２ ％， 当温 度 降 低 至
至９ ０ ． ２ ２ ％， 吉塞 拉 ６号和 马哈 利 Ｃ Ｄ Ｒ一 １的电解 质渗 透 率分 别为 ６ １ ． ３ ３ ％和 ６ １ ． １ ３ ％。 由此 表 明 ， 兰丁 ２号 、 吉 塞拉 ６号 和 马 哈利 Ｃ Ｄ Ｒ 一 １间 的抗寒 性有 较大 的差 别 。
供 试 甜 樱 桃 半 矮 化砧 木 共 ３个 ， 分 别 为 吉 塞 拉 ６号圄， 从 山东 农业大 学群 星果 品科技示 范 园引入 ； 马 哈利 Ｃ Ｄ Ｒ 一 １ 『 ３ 】 ，
口， 置 于 水浴 锅 中煮 ２ ０ｒ ａｉ ｎ ， 取 出 后 晾 至 室温 ， 再 测终 电 导 值（ Ｓ ２ ） ， ４次 重复 ， 计 算 电解 质渗 透 率 。 计算 公 式如 下 ：
替
咚
憾
的枝 条 ， 将 其 剪成 长短 一 致 的小 段 ， 分 组标 明后 用塑 料 袋包
住 置于 冰箱 冷 藏室 储存 。
大樱桃砧木品种有哪些，如何选择适宜的砧木？
大樱桃砧木品种有哪些，如何选择适宜的砧木？目前我国大樱桃生产中所用的砧木大致可分为两类，即原产于我国的本地砧木及由国外引进的外来砧木。
前者像我国樱桃（小樱桃、草樱桃）、毛樱桃、大青叶、东北的山樱、中华矮樱桃等，后者像考特、马哈利、吉塞拉系列等。
砧木的种类不同，其性状状各不相同，对于栽培品种的影响是不一样的。
砧木嫁接栽培品种后，适应性、丰产性、早产性、抗逆性都有很大差异，适宜的砧木品种其亲和力好，繁殖容易，对土地条件，气候特点等有较强的适应性，对根瘤病有高度抗性，而且能提高樱桃产量和品质，促进早结果、早丰产。
生产中应对当地条件，栽培方式合理选择砧木，以提高生产效益，下面小编对部分常见樱桃砧木性状简单的整理下，以便各位朋友友购苗时有自己的观点，谨防上当受骗！大樱桃砧木品种1、中国樱桃（小樱桃，草樱桃）草樱桃是中国樱桃的一个品种，为灌木或者乔木，树势强，树姿开张，树干灰色，光滑，新梢浅黄绿色，节间短，叶阔卵圆形质地薄，表面粗糙，复锯齿。
草樱桃除播种法外繁殖，亦可用扦插，压条等法繁殖，草樱桃砧木耐瘠薄，干旱，对根瘤病有较高抗性，对土壤的适应性也强，与大樱桃的嫁接亲和力较强，但根系浅，不耐涝耐寒性较差。
2、毛樱桃毛樱桃耐寒，抗旱，耐瘠薄，该砧木与大樱桃接和亲和力差，是大樱桃抗寒性较强的砧木之一！3、大青叶乔化砧木大青叶是山东烟台地区从当地中国樱桃中选育出来的一个砧木品种，该砧木是当前优势突出的大叶中国樱桃优良品系。
此砧木可用于育苗，也可压条繁殖，高抗根癌病，经济寿命长。
用大青叶做砧木的成龄大樱桃树，其花束状结果枝连续结果能力强。
盛果期长，丰产、稳产，嫁接亲和力强，无小脚现象，又极强的抗寒能力，在当地已经多年使用。
山东烟台是我国最早栽培大樱桃的地区，当地为沿海海洋性气候，多为丘陵山地沙性土壤，大青叶在当地表现适宜，成为当地普遍使用的砧木品种。
但随着我国大樱桃栽培区域的向西部扩展，大青叶这种砧木苗也被引出烟台地区，其脱离原生地后适应性差的缺点随即表现出来。
樱桃树的砧木介绍及嫁接方法，真好！
樱桃树的砧⽊介绍及嫁接⽅法，真好！⼀、背景介绍樱桃于春末夏初即可上市，是长江流域和淮北地区果实成熟最早的⼀种果树。
果实⽣长期短，从开花⾄采收仅需40～60天，⽥间管理⼯作较轻，⽣产成本较低。
果实⾊泽艳丽，味美可⼝，富含铁质，除鲜⾷外，可供甜⾷点缀或⾼级宴会⽤，还可加⼯成糖⽔罐头、蜜饯、果脯、果汁等制品。
特别是其中的甜樱桃，果⼤，⾁厚，硬度⼤，尤适于加⼯，国内外市场需求量⼤，售价⾼，⽽⽬前国内栽植⾯积⼩，在淮北地区有较⾼的开发价值。
俗话说“樱桃好吃树难栽，不⽤苦⼯花不开”。
⼆、嫁接时间:⼤樱桃⼀年中适宜的嫁接时间：⼀是春季嫁接（3⽉下旬前后），时间半⽉左右。
可采⽤板⽚梭形芽接和劈接法；⼆是⽉中、下旬嫁接。
⼀般采⽤板⽚条状芽接法，或T字形芽接法，此期的芽接苗当年可出圃；三是秋季嫁接，从8⽉下旬到9⽉份。
⼀般采⽤板⽚条状芽接法。
各个时期采⽤的嫁接⽅法，以及影响组织形成的条件，温度、湿度和光照等是主要的外界因素。
当温度过⾼（超过28摄⽒度）或过低（低于15摄⽒度）时，愈伤组织不能形成，嫁接成活率低，如烟台市芝罘区调查，9⽉中旬前后嫁接苗，凡未成活的，多数接⾯愈合不好，产⽣流胶，⼟壤湿度过⼤，接⼝会产⽣流胶，影响成活。
凡在嫁接期进⾏浇⽔的，成活率低，⼀般嫁接期⼟壤含⽔量保持在16%左右为适宜。
所以，嫁接期⼀定不要浇⽔。
为了防⽌⼟壤⼲旱，可在嫁接前1周浇1次透⽔，嫁接后半⽉内不浇⽔。
实践证明，受炎热⾼温、强光直射的嫁接苗难以成活。
所以嫁接部位⼀定要避开光照直射⽅位，在背光⾯嫁接较好。
三、砧⽊介绍1、草樱桃树。
草樱桃树为⼩乔⽊，适应性强，根蘖萌发⼒强，最主要的⼀点就是嫁接亲和⼒好。
枝条能产⽣⽓⽣根，易扦插繁殖。
嫁接苗⽣长健壮，丰产，不过也有缺点，那就是易倒伏，不抗旱。
在⽤草樱桃作为甜樱桃砧⽊时，嫁接部位要低，可以增加其抗旱能⼒和减少倒伏。
2、⼭樱桃。
属⼤乔⽊，苗⽣长块，当年即可嫁接，嫁接成活率极⾼，达到了九成。
中国樱桃樱桃砧木特点
2023-11-08•概述•生物学特性•砧木选择目录•栽培技术•应用前景01概述定义中国樱桃是一种分布广泛的果树，具有适应性强、生长快、结果早的特点，是优良的砧木选择。
重要性中国樱桃作为砧木，对于提高接穗品种的适应性和产量具有重要作用，同时还能提高接穗品种的品质和抗逆性。
定义与重要性分布中国樱桃主要分布于亚洲、欧洲和北美洲等地区，其中亚洲地区的分布最为广泛。
品种中国樱桃的品种很多，其中较为常见的有莱阳矮樱桃、太谷樱桃、短把大鹰嘴等。
分布与品种02生物学特性中国樱桃砧木具有较快的生长速度，能够快速地适应环境和繁殖。
生长速度对环境的适应性耐寒性中国樱桃砧木具有较强的适应性，能够在不同的土壤和气候条件下生长。
中国樱桃砧木具有较强的耐寒性，能够在较低的温度下生存。
03生长特性0201中国樱桃砧木一般会在春季开花，具体时间因品种和气候条件而异。
开花时间中国樱桃砧木的花期相对较短，一般只有几天到一周左右。
花期长度中国樱桃砧木的开花频率较高，每年都会多次开花。
开花频率开花特性中国樱桃砧木一般会在春季结果，具体时间因品种和气候条件而异。
结果特性结果时间中国樱桃砧木的结果期相对较短，一般只有几周到一个月左右。
结果期长度中国樱桃砧木的结果量较大，能够产生较多的果实。
结果量03砧木选择中国樱桃的砧木能够适应多种类型的土壤，包括沙土、壤土和黏土，从而在不同的土壤条件下都能正常生长。
适应土壤中国樱桃的砧木对气候的适应性较强，能在多种气候条件下保持稳定的生长和产量。
适应气候适应性强抗逆性强抗病性强中国樱桃的砧木具有较强的抗病能力，能够抵抗一些常见的病害，从而减少病害对植株生长和产量的影响。
抗寒性强中国樱桃的砧木具有较强的抗寒能力，能够在较低的温度下保持正常的生理活动，从而适应不同的气候条件。
中国樱桃的砧木具有较高的产量，通过合理的栽培和管理措施，能够实现较高的果实产量。
稳产中国樱桃的砧木能够保持稳定的产量，即使在不利的环境条件下也能保持一定的产量水平。
哪些树可以嫁接在樱桃树上？这四种树再适合不过了
哪些树可以嫁接在樱桃树上？这四种树再适合不过了一、适合嫁接在樱桃树上的四种树1、毛樱桃野樱桃有的地方叫梅桃，山豆子，常生于山野外坡地，沿埂岸，灌木丛等地。
用作砧木嫁接樱桃，特点是嫁接的樱桃苗植株抗逆性强，生长健壮旺盛，吸肥水能力强，成活率高，适应性广泛，不易感樱桃根腐病，根癌病等顽疾。
且丰产稳产性良好。
2、草樱桃也是山野上常生的一种野生灌木或小乔品种。
有的果树嫁接苗圃场地，把它作一种商业砧木进行销售的。
其品种典型的特征是其嫁接苗根系发达，苗木长得快而旺，嫁接苗亲和力好，无不适症状表现。
嫁接植株能早产丰产。
樱桃作砧木嫁接樱桃苗也有其缺点。
主要表现为不抗寒，对低温忍耐力差。
在粘性土壤中生长不良，易患根癌病。
还有就是砧木根系相比其他品种来说，根系较浅，易被强风吹倒伏。
3、中华矮樱也是一种商业砧木品种。
其特点是适应性强，根系发达粗壮，分布深固性好不易倒伏，嫁接苗木亲和力好成活率高，无不适症状表现，能早产丰产稳产高产。
适于搞矮化蜜植栽培。
但也有其不可掩饰的缺点。
那就是部分嫁接苗成品生长一段时间后，有小脚的现象存在，而且嫁接苗易患根癌病，有时田间发病还较重。
4、泊来樱一般在农业主管部门技术服务有推广。
其共性是适应性广，能早产丰产稳产，抗寒性抗病性优于其他前面品种。
其缺点是不耐贫。
若在贫瘠之地栽培樱桃嫁接苗易出现早衰现象。
二、樱桃树嫁接后如何管护1、剪砧嫁接成活的苗木萌芽前，在接芽以上0.2厘水处剪断砧苗茎干。
然后按15--20厘米株距、50--60厘米行距移栽。
2、除萌剪砧移栽后的芽接苗，砧芽先萌发。
在砧芽萌发时，要按时抹除砧木上的萌芽，来促使接芽萌发生长。
此后，还要连续除萌3-.4次。
接芽萌发后，选择保留1个健旺新梢。
3、绑缚当新梢长10厘米时，在苗木近旁插一支柱。
川麻绳或塑料薄膜带将新梢绑缚固定在支柱上，以防风折新梢。
此后，随着新梢生长，每隔24厘米绑缚一道。
4、肥水萌芽后每隔20天连续追施3次速效氮肥。
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樱桃不同砧木抗寒性比较05级生科2班周有文指导教师：呼丽萍摘要：为了掌握樱桃不同砧木抗寒性的差异，采用人工低温胁迫法，在-16℃的条件下对6种樱桃砧木1 年生休眠枝条胁迫12h，测定其相对电导率等8项生理指标。
结果显示6个测试砧木的相对电导率为47.45%~81.85%，可溶性糖含量为2.297mg/g~8.451mg/g，游离脯氨酸含量为 2.387μg/g~4.847μg/g，丙二醛的含量为15.621μg/g~29.938μg/g，超氧化物歧化酶酶活为12.677U/g~171.478U/g，过氧化氢酶酶活为 4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g，过氧化物酶的酶活为0.127△O.D./mg/min ~0.586△O.D./mg/min，经方差分析表明：6种砧木的8项测定指标差异均达极显著水平，以马扎德(Mazzard)抗寒性最好，北京砧木、莱阳矮樱桃、毛樱桃次之，四川砧木和考特(colt)较差。
关键词：樱桃；砧木；生理指标；抗寒性Comparison on the Cold Resistance of Different Cherry RootstocksZhou Youwen(School of Life Science and Chemistry, TianShui Normol Unversity, Tianshui, Gansu ,741001) Abstract:The use of artificial methods of indoor low-temperature stress, six kinds of 1-year-old dormant shoots of cherry rootstocks were treated under the low temperature -16 ℃for 12h, and determinated its relative conductivity of eight indicators, etc. The relative conductivity was 81.85%~47.45%, soluble sugar content was 2.297mg/g~8.451mg/g, free proline content was 2.387μg/g~4.847μg/g, malondialdehyde content was 15.621μg/g~29.938μg/g, superoxide dismutase (SOD) activity was 12.677U/g~171.478U/g, catalase (CAT) activity was 4.987mgH2O2/g~12.693mgH2O2/g, peroxidase (POD) activity was 0.127△O.D./mg/min~0.586△O.D./mg/min, indicators above reach significant levels by the analysis of variance. The results showed that: amongst the six kinds of stock, Mazzard has the best cold tolerance ability, followed by Beijing rootstock, Laiyang dwarf cherries, Prunus tomentosa, and Sichuan and Court rootstock (colt)were the worst.Key words: cherry rootstocks; physiological indicators; cold resistance抗寒性是植物对低温寒冷环境长期适应中通过本身的遗传变异和自然选择获得的一种抗寒能力。
果树对零下低温主要来自两个方面的适应性变化，一是细胞膜体系稳定性的提高，二是脱水能力加强和避免细胞内结冰。
多年来，前人从不同侧面对果树抗寒性进行了深入研究，取得了很大进展[1]。
宋洪伟等[2]对114个苹果品种资源的抗寒性进行了研究，发现田间枝条的自然冻害主要不是发生在极端低温出现的1月份，而是在气温回升的2月份以后，各品种随休眠的解除和气温的逐渐升高，抗寒性逐渐降低。
刘威生等[3]发现36个李品种的抗寒性表现出丰富的多样性，且多数李品种对低温的适应能力较强，起源地的生态条件与品种的抗寒性密切相关。
同样，杏品种资源[4]、葡萄野生种质资源[5]等树种的抗寒性也有人研究。
因此，对果树种质资源抗寒性的研究可以为优良品种的区域化栽培和抗寒育种提供理论依据。
果树的抗寒性是指果树作物对寒害的抵御能力，是果树的重要生物学特性[6]。
这一性状不仅影响果树的区划和分布，同时对于人们指导农业生产，合理的引种、育种及栽培管理，减少自然灾害造成的损失等方面具有重要意义。
目前，甜樱桃的栽培也面临这样的问题。
甜樱桃又称大樱桃，富含糖和铁质，色泽艳丽，风味优美是北方落叶果树中成熟最早的树种，近年来随着栽培效益的提高，其栽培面积日益扩大。
由于樱桃喜温，不耐寒[7]，容易发生冻害，因此选育适宜的抗寒砧木显得尤为重要。
为此，本文对6种大樱桃砧木的抗寒性进行比较及对抗寒性生理指标进行筛选。
1材料与方法1.1试验材料试验材料取自天水师范学院植物园的6种砧木，分别为莱阳矮樱桃、马扎德、考特(colt)、北京砧木、毛樱桃、四川砧木。
1.2试验处理与方法试验共设6个处理，即每品种为一个处理，重复3次。
方法：于砧木萌芽前(3月上旬)将6种砧木的枝条分成相等的4份，其中一份置室外(10℃)为对照.，其余3份作为重复。
将枝条剪成40cm左右的长度，枝条末端进行蜡封。
处理温度从4℃~ -16℃，降温速度为4℃/h,达到后-16℃维持12h，然后逐步升温，升温速度亦为4℃/h，至4℃时进行测定各项生理指标。
1.3测定的指标与方法1.3.1质膜透性测定称取5 g冷冻处理后直径为0.5 cm的一段枝条，放入锥形瓶中，加入50mL 蒸馏水，25℃下浸泡12 h，中间不断摇动。
12 h 后摇匀，用DDS-307A型电导仪测定电导。
然后封口，在沸水中煮30 min，冷却到室温( 25℃)后摇匀，再测终电导。
相对电导率(%) =(初电导-蒸馏水电导率)/(终电导-蒸馏水电导率)×100%[8]。
1.3.2超氧物歧化酶(SOD)活性测定(1)酶液提取：每处理取粗度较一致的枝段，剪碎混匀，称1g，分别加入10 mL 磷酸缓冲液，冰浴研磨后，转入离心管，10000 r/min，离心15 min，上清液即为酶液。
(2) SOD活性的测定：以SOD抑制剂NBT(氮蓝四唑)在光下还原程度来确定SOD 的活性大小。
活性单位以抑制NBT光化还原的50%为 1 个酶活性单位表示。
对照是以缓冲液代替酶液。
SOD活性计算公式：SOD活性=(A CK-A E)*V*2/(A CK*W*V t)式中：SOD总活性以每克鲜重酶单位表示；比活力单位以酶单位/mg蛋白表示；A CK—照光对照管的光吸收值；A E—样品管的光吸收值；V—样液总体积(cm3)；V t—测定时样品用量(cm3)；W－样重(g)。
1.3.3过氧化氢酶(CAT)活性的测定取剪碎的样品2.5g加入磷酸缓冲液(pH7.8)少量，研磨成匀浆，转移到50ml 容量瓶中，将研钵冲洗干净，冲洗液转至容量瓶中，并用同一缓冲液定容，4000×g 离心10min，上清液为酶粗提液。
取50ml三角瓶4个(两个测定，两个对照)，测定加入酶液2.5ml，对照为煮死酶液2.5ml；再加入2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计算时间，于30℃恒温水浴中反应10min，立即加入10%H2SO4 2.5ml。
然后用0.1mol/L KMnO4滴定，至出现粉红色(30 min内不消失)为终点。
酶活性用每克鲜重样品在10min内分解H2O2毫克数表示。
酶活性(mgH2O2/gFW)=(对照KMnO4滴定ml数- 酶反应后KMnO4滴定ml数)*酶提取液总量(ML)*1.7/[反应所用酶液量(ml)*样重(g)[9]。
1.3.4过氧化物酶(POD)活性测定及同工酶分析1.3.4.1过氧化物酶(POD)活性测定将样品剪碎，称取1g，加入酶提取液(0.1M pH8.5Tris-HCl缓冲液)5ml和少量石英砂，在研钵中磨碎，然后再次加入5ml酶提取液稀释。
转入离心管在10000r/min 的速度下离心15min，上清液贮于冰箱中待用。
测定前，将酶液稀释400倍。
吸1ml酶液，加入2ml联苯胺醋酸－醋酸钠缓冲剂，在28～32℃水浴中保温5分钟。
测定时，加入1ml 0.1M过氧化氢，立即摇匀，并转入比色皿中，用分光光度计在波长580nm下测定光密度的变化。
从加入过氧化氢起计时，每15s读数一次。
取第15～45s之间的光密度变化，计算样品中过氧化物酶活性[9]。
其计算公式：E=O.D.(45-15)*2*总稀释倍数/样品质量(mg)，E单位为△O.D./mg F.W./Min。
1.3.4.2过氧化物酶同工酶分析用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术分离POD同工酶[9]。
按7%的分离胶进行配制，先用刻度吸管准确地吸取30%Acr-0.8%Bis4.5ml和1MTris-HCl(pH8.8)15ml，再加入1%过硫酸铵溶液0.5ml和TEMED 20μl，摇匀后，将凝胶加入凝胶板模具内，上面加一水层，在25～30℃的地方进行聚胶，约1h。
浓缩胶按3%进行配制，吸去分离胶上层的水层,用刻度吸管准确吸取30%Acr-0.8%Bis 1.0ml和1M Tris-HCl(pH6.8)1.0ml，再加入重蒸水7.7ml加入1%过硫酸铵溶液0.5ml和TEMED 20μl，立即灌注隔层胶(凝胶板需要迅速加入蓖子)，其中加一水层，约1h可聚合好。
样品制备：每克鲜样加3.0ml 0.1mol/L的磷酸缓冲液(pH＝7.0)，研磨，用纱布粗过滤，滤液离心：4000r/min，(0±2)℃，取上清液作供试酶液。
用10伏/厘米预电泳三分钟后，用微量进样器吸取样品液分别每管加入50微升。
染色：将脱下的凝胶，用去离子水冲洗凝胶板后，放入长方型白瓷盘中染色。
将配好的染色液倒入白瓷盘内凝胶板上，37℃保温30min，酶带呈紫红色。
取出漂洗后，7%醋酸中保存、照相。
参照全妙华[10]介绍的方法计算相对迁移率Rf 值，迁移率(Rf)=酶带迁移距离/溴酚蓝迁移距离。
并应用Vaughan[11]的方法计算酶谱距离(酶谱相似性系数)，即酶谱距离=两分类群不相同酶带数/两分类群酶带总数，最后计算相似率。