海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究

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贝类多糖的生物活性及其制备技术研究进展

贝类多糖的生物活性及其制备技术研究进展
p lschr e MMP 、 贻 贝 多糖 ( tu d l o ac ai , y d )紫 My lseu ̄ i
淋 巴结巨噬细胞 酸性酯酶的活性。周 永灿 等 以不同含量的珍珠贝多糖 ( P ) C P 投喂合浦珠母贝
( i td a es )5—7 Pn aam nni 1 c i 5d实 验 后 发 现 , 浦 合 珠 母贝 的血 细胞 总量 及 各种 血 细 胞 的数 量 、 胞 细 吞 噬能力 、 血清对 细 菌 的凝集 、 菌和 杀菌活 力等 抑 都有 不 同程 度 的增 加 。 1 12 促进 T B 淋 巴 细胞 增 殖 A h u 等 .. 、 co r 报道 牡蛎 ( yt ) O sr 中提 取 的多 糖能 够 提高 总 T细 e 胞 百分 比和 T辅助 细胞 百 分 比 , 使得 辅 助 细胞 并 与 T抑制 细胞 比值 明 显增 高 , 有 丝分 裂 原 引起 对
大部分的贝类多糖都具有免疫抑癌作用 , 其 抗 肿瘤 功能是 贝类功 能性 食 品和抗 肿瘤药 物 的主
要 特点 , 几乎遍 及 非 特异 性 免 疫 和特 异 性 免疫 应
答 的 多个环节 。
1 1 1 激 活 巨噬细胞 , 高其吞 噬 功 能 . . 提 A ah d ci
富的生命 大分 子 聚合物 之一 。与 蛋 白质 、 脂肪 、 核 酸 等其 它生物 大 分 子相 比 , 多糖 具 有更 强 的亲 水
的 T淋 巴细胞增 殖 C n o A及 B淋 巴细胞 增 殖 L S P 也有 明显 的增强 作 用 , 而 对 整 个免 疫 系统 均有 从 正 向调节作 用 。 1 1 3 增 强 N 细 胞 活 性 和 抑 制 肿 瘤 生 长 . . K
p lschr e ME ) , 者 以珍 珠 贝 多糖 ( o — o ac ai , P 等 后 y d C n c apei o sch r e C P 为 代 表 。 贝 类 多 h t a pl acai , P ) re y d

贝类多糖的生物活性研究现状及其药用价值

贝类多糖的生物活性研究现状及其药用价值

贝类多糖的生物活性研究现状及其药用价值程知庆;沈和定;姚理想;刁亚【摘要】论述近年来贝类多糖生物活性的研究进展.多糖的抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、降血糖、降血脂等生物活性具有较广阔的开发和应用前景.同时,简要概述贝类多糖的药用价值.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)024【总页数】3页(P17-19)【关键词】贝类多糖;生物活性;药用价值【作者】程知庆;沈和定;姚理想;刁亚【作者单位】上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306;上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306;上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306;上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306【正文语种】中文【中图分类】S986.2生物体内活性物质的研究是研制功能药物、保健食品和生物制品的基本前提。

多糖作为主要活性物质之一,是一种由10个以上的单糖通过脱水缩合形成糖苷键聚合而成的高分子糖链。

多糖被发现参与许多生物学过程,如细胞-细胞通讯,胚胎发育,细菌或病毒感染以及体液免疫和细胞免疫。

近年来,对多糖的研究涉及多个领域如临床医药、生物燃料、化妆品、营养保健品等[1]。

多糖的多种生物学功能活性及多糖资源的开发与利用成为人们近代研究的热点。

贝类多糖是能调节细胞和机体“生老病死”的一类重要生物大分子,其中以一种含氨基的酸性黏多糖为主。

根据其不同来源,可分为海洋贝类多糖、淡水贝类多糖和陆生贝类多糖[2]。

贝类多糖因成分复杂,结构多变,导致其生物学活性存在差异[3]。

研究表明,贝类多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血糖血脂等生物活性。

笔者综合近年关于贝类多糖的研究,对贝类多糖的生物学活性及其药用价值进行概述。

1 贝类多糖的生物学活性1.1 抗肿瘤活性多糖抗肿瘤活性一直是生物学活性研究的重点,也是新药开发的研究热点。

海洋生物多糖的提取与应用研究

海洋生物多糖的提取与应用研究

海洋生物多糖的提取与应用研究海洋生物多糖是一种源自于海洋中生物体的糖类物质,具有多种生物活性和药用价值。

在近年来的研究中,人们发现海洋生物多糖具有广泛的应用前景,如食品工业、医药领域以及化妆品行业等。

本文将从提取、性质及应用几个方面进行探讨,以展示海洋生物多糖在不同领域中的重要作用。

一、海洋生物多糖的提取方法1. 酶法提取:利用特定酶类作用于海洋生物体中的多糖分子,从而使其分离出来。

这种方法具有高效、快速的特点,适用于多糖含量较高的海洋生物。

2. 溶剂法提取:利用溶剂(如水、甲醇等)与海洋生物体中的多糖产生反应,从而使其溶解出来。

这种方法简单易行,适用于多糖含量较低的海洋生物。

3. 超声波法提取:通过超声波的机械作用,使海洋生物体中的多糖分子破碎并溶解出来。

这种提取方法具有高效、无污染的特点,适用于多糖含量较高的海洋生物。

二、海洋生物多糖的性质研究海洋生物多糖具有多种特殊性质,如生物活性、稳定性和可降解性等。

其生物活性主要体现在抗菌、抗氧化、抗病毒等方面,这些活性使得海洋生物多糖在医药领域具有广泛的应用前景。

同时,海洋生物多糖的稳定性和可降解性使其在食品工业和化妆品行业中也具备应用潜力。

三、海洋生物多糖在医药领域中的应用研究1. 抗肿瘤作用:研究表明,某些海洋生物多糖具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

这些多糖可以通过调节肿瘤相关的信号通路,有效抑制肿瘤的生长和扩散。

2. 免疫增强作用:部分海洋生物多糖可以刺激机体免疫系统,增强免疫功能。

这些多糖可以增加免疫细胞的活性和数量,提高机体对疾病的抵抗力。

4. 生物活性多糖的提取与开发:通过对海洋生物多糖的提取和开发,可以获得更多具有生物活性的多糖物质。

这些物质可以作为药物的原料,或用于疾病的预防和治疗。

四、海洋生物多糖在食品工业中的应用研究1. 食品保鲜:海洋生物多糖具有良好的保湿、抗菌和抗氧化性能,可以作为食品保鲜剂的添加剂,延长食品的保鲜期。

扇贝性腺多糖提取物的抗氧化及免疫调节活性

扇贝性腺多糖提取物的抗氧化及免疫调节活性

扇贝性腺多糖提取物的抗氧化及免疫调节活性宋荪阳;孙黎明;朱蓓薇;牛海玲;杨静峰【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2012(033)005【摘要】通过酶解法制备扇贝性腺多糖提取物(SGP),研究其抗体外氧化及免疫调节活性。

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼DPPH体系反应、Fenton反应和还原反应测定SGP的抗氧化活性;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定SGP对活性氧叔丁基脂氢过氧化物(tB00H)致细胞氧化损伤及淋巴细胞增殖活性的调节作用;分光光度法测定SGP对补体活性的影响。

结果表明:SGP具有DPPH自由基清除能力(IC50=9.92mg/mL)和羟自由基清除能力(IC50=7.31mg/mL)及还原能力(AC20=7.74mg/mL);0.2μg/mL的SGP可明显改善tBOOH致RAW264.7细胞的氧化损伤作用,还可显著提高脾淋巴细胞的增殖活性及补体经典途径活性。

【总页数】4页(P248-251)【作者】宋荪阳;孙黎明;朱蓓薇;牛海玲;杨静峰【作者单位】大连工业大学食品学院,辽宁大连116034/国家贝类加工技术研究分中心,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,辽宁大连116034/国家贝类加工技术研究分中心,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,辽宁大连116034/国家贝类加工技术研究分中心,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,辽宁大连116034/国家贝类加工技术研究分中心,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,辽宁大连116034/国家贝类加工技术研究分中心,辽宁大连116034【正文语种】中文【中图分类】TS254.9【相关文献】1.裙带菜孢子多糖的体内抗氧化和免疫调节活性 [J], 奚倩;赫丹;韩众鑫;余洋定;孙黎明;赵雅娉;张警予;启航2.扇贝边多肽提取物的制备及抗氧化性能 [J], 韦月平3.紫球藻胞外多糖抗氧化和免疫调节活性的研究 [J], 石全见;孙利芹;周妍;王长海4.裙带菜多糖的结构及抗氧化、免疫调节活性 [J], 游丽君;黄诗铭;郑桂青;赵振刚;韩锐;孟赫诚5.樟树不同器官中多糖抗氧化、\r免疫调节活性的研究 [J], 吴静;胡居吾;熊伟;王慧宾;BAE Young-soo;吴磊因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究

海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究

海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究癌症是当前严重危害人类健康、威胁人类生命的主要常见病之一, 并且逐渐全球化。

天然生物来源的抗肿瘤活性药物具有广谱、高效、毒副作用小的特点, 在抗癌药物的研发中占有非常重要的地位, 其中, 多糖类物质因生物活性广泛,而成为了医学领域国内外专家学者普遍关注的焦点之一。

海洋是生命的起源地, 高盐、高压、低温、光照不足的特殊环境使海洋生物体内的多糖与陆生生物相比具有很大的差别, 因此, 海洋抗肿瘤活性多糖的研究尤其引人瞩目。

扇贝是重要的海洋生物资源之一, 营养价值高且含有多种生物活性成分, 在海洋抗癌药物研究中具有很好的应用和开发前景。

本研究以海湾扇贝为原料, 进行扇贝多糖的提取和纯化, 并对其抗肿瘤活性进行研究, 为扇贝多糖的进一步研究及应用奠定基础。

主要研究结果如下: (1)海湾扇贝粗多糖的提取工艺研究: 采用热水、二次浸提法提取海湾扇贝粗多糖, 通过单因素试验和响应曲面法试验设计对海湾扇贝粗多糖提取工艺进行优化,确定了最佳提取工艺条件为浸提温度90℃、液固比50.0mL/g、浸提时间180min, 在此条件下海湾扇贝粗多糖的平均提取率约为57.7mg/g。

(2)海湾扇贝粗多糖纯化和分离技术研究: 对海湾扇贝多糖的蛋白质脱除方法进行比较, 结果表明75%乙醇沉淀结合TCA法处理能较好地去除多糖中的蛋白质, 脱除率可以达到91.80%。

DEAE-52纤维素离子交换层析分离结果表明海湾扇贝多糖由中性多糖和酸性多糖两部分组成, 其中, 酸性多糖为其主要成分,但酸性多糖的具体组成和结构还需要进一步研究。

(3)海湾扇贝多糖体外抗肿瘤效果及机制研究: 采用MTT比色法检测海湾扇贝多糖对体外培养的不同肿瘤细胞的增殖抑制作用, 利用光学显微镜、扫描电子显微镜、透射电子显微镜及流式细胞仪观察、分析其对不同肿瘤细胞的细胞形态、显微结构、超微结构及细胞周期的影响。

结果表明, 海湾扇贝多糖对体外培养的肿瘤细胞具有直接的细胞毒性作用, 能够抑制体外培养的小鼠黑色素瘤细胞株B16F10、人卵巢上皮癌细胞株SKOV3和人肝癌细胞株HepG2的生长;经20.0mg/mL海湾扇贝多糖处理后, 三种肿瘤细胞的细胞形态、显微结构和超微结构均发生了改变, 表现为细胞皱缩、透明度降低、细胞密度降低、膜结构改变、核结构改变、核内染色质固缩等, 并可对细胞周期产生不同程度的阻抑作用, 说明海湾扇贝多糖可通过对肿瘤细胞的直接作用而发挥抗肿瘤的效果。

4种海洋贝类多糖提取和保湿性研究_邓一清

4种海洋贝类多糖提取和保湿性研究_邓一清

摘 要:以马氏珠母贝(Pinctada martensii)、企鹅珍珠贝(Pteria penguin)、翡翠贻贝(Perna viridis)和近江牡
蛎(oyster)的内脏团为原料提取、纯化多糖,与甘油、聚乙二醇 400(PEG-400)、丙二醇和 1,3-丁二醇四种常规
保湿剂进行比较。结果表明,在相对湿度为 44%时,前 12h 吸湿率顺序为:马氏珠母贝< 近江牡蛎<企鹅珍珠贝<
第3期
邓一清等:4 种海洋贝类多糖提取和保湿性研究
87
马氏珠母贝(Pinctada martensii)、企鹅珍珠贝 (Pteria penguin)、翡翠贻贝(Perna viridis)和近 江牡蛎(oyster)是我国南方海水养殖的主要贝类 品种。马氏珠母贝是我国培育海水珍珠的当家品 种,企鹅珍珠贝是养殖附壳珍珠的理想母贝,采珠 后的贝肉大多用于烹饪食品,都存在没有高值化利 用的问题[1]。近江牡蛎和翡翠贻贝多糖在抗肿瘤、 免疫调节、抗凝血、抗血栓、抗病毒、降血糖、降 血脂、抗氧化剂衰老和抗炎的活性等方面都已有报 道[2-3]。但是在贝类多糖的保湿方面,主要集中在藻 类多糖的研究上,对贝类多糖的研究极少,只有李 伟等在其专利上对比了牡蛎多糖和甘油的保湿 性[4],缺乏深入系统的研究。
0.02
0.00 0
10
马氏珠母贝 翡翠贻贝 丙二醇
20
30
时间/h
企鹅贝
甘油
PEG-400
40
50
牡蛎 1,3-丁二醇
图 2 相对湿度 44%条件下多糖和常规保湿剂吸湿比较 Fig.2 Hhygroscopicity of polysaccharide compare with
moisturize

扇贝提取物在肿瘤治疗中的作用及其毒理学研究的开题报告

扇贝提取物在肿瘤治疗中的作用及其毒理学研究的开题报告

扇贝提取物在肿瘤治疗中的作用及其毒理学研究的开题报

一、研究背景
肿瘤是目前一种世界性疾病,尽管人类的医学技术发展迅速,但肿瘤仍是困扰世界各国的一个难题。

西药和化疗在肿瘤治疗方面有限,而且有很多副作用,限制了它们的使用。

因此,研究新型天然抗肿瘤药物成为当今世界医学领域研究的热点。

扇贝提取物作为一种天然的药物,具有较强的抗肿瘤活性,对许多肿瘤引发的疾病具有一定的治疗作用。

然而,由于其未经大规模的毒理学研究,其毒性与安全性尚不完全清楚。

二、研究问题
1. 扇贝提取物在肿瘤治疗中的作用是什么?
2. 扇贝提取物是否具有毒性,以及其毒性和安全性如何?
三、研究目的
1. 研究扇贝提取物在肿瘤治疗方面的作用并探究其作用机制,为开发新的天然抗肿瘤药物提供理论基础。

2. 研究扇贝提取物的毒性和安全性,为临床应用提供参考。

四、研究方法
1. 通过文献调查收集有关扇贝提取物的相关信息。

2. 将扇贝提取物应用于体外肿瘤细胞中,检测其对肿瘤细胞活性的影响,并研究其作用机制。

3. 将扇贝提取物应用于动物体内,评估其毒性和安全性。

五、研究意义
1. 探究扇贝提取物的抗肿瘤活性和作用机制,为开发新的天然抗肿瘤药物提供新的理论和实践依据。

2. 评估扇贝提取物的毒性和安全性,为临床应用提供参考。

3. 对扇贝提取物的深入研究不仅能够促进我国药物开发和生产技术的发展,而且对推进生物技术学科发展具有重要意义。

扇贝综合利用的研究进展

扇贝综合利用的研究进展
相对分子质量为8 0 00D。研究 发现 ,扇贝多肽是 0 ~10

氨酸 、亮氨酸 、赖氨酸、精氨酸等含量相对较高 。氨基 酸具有构成生物蛋 白质和同生命 活动有关的特殊 的生理
功能,是人体不可缺少的营养成分之一。扇贝肉中钙 、 镁、锌 、铁、铜 、硒等矿 质元素含量 比较丰富。高钙 、 高镁对人类身体有益 ,对维持机体酸碱平衡、神经肌 肉 的兴奋等有重要作用 ;扇贝肉中锌含量 特别高 ,是人体 补锌的天然食 品。扇贝裙是在扇 贝加工过程中取 出扇贝 柱 以后 的下脚料 ,主要 由 中肠腺 、性腺 、扇贝边 等构
含量和细胞抗氧化酶含量 ,从而保护H l L e _ 皮细胞不受 a
瘤 ,并能提高小 鼠腹腔 巨噬细胞的吞噬率和N 细胞的活 K
性 ,增加小鼠免疫器官的重量 。扇贝糖蛋白的肿瘤抑制 作用可能是通过增强小 鼠细胞免疫功能而实现 [1 1。 5 2 5 其他 活性成分 . 扇贝裙边提取物 ( S )富含微量元素硒以及蛋 白 ES 质、维生素、多糖 、磷脂以及其他多种微量元素等生理 活性物质。扇贝裙边提取物作为一种天然富硒提取物 , 能调节血脂代谢 、提高机体抗氧化能力 ,具有抗动脉粥 样硬化 的作用 ,可 能通过增强宿主免 疫功能和提高机体 抗氧化能力而抑制肿瘤的生长。扇贝中还 富含牛磺 酸 , 它具有多种生理功能 ,对婴幼儿的发育是至关重要 的营 养素 ,是婴幼儿大脑发育、神经传导、视觉机能完善所
殖 、医药 、毒理 、遗传和分子生物学等诸多领域。扇贝在
食品开发、医l保健、疾病 防治以及化工等领域都有很好 序 的应用和开发前景 ,本文对扇贝的综合利用作简要综述 ,
以期为扇贝的开发利用提供思路和依据。
2 扇贝 中生物活性成分
2 1 多糖 .

海湾扇贝酶解物的制备、鉴定及其体内外抗肿瘤作用研究

海湾扇贝酶解物的制备、鉴定及其体内外抗肿瘤作用研究

海湾扇贝酶解物的制备、鉴定及其体内外抗肿瘤作用研究海洋生物提取物多具有抗肿瘤活性,扇贝是海洋生物的一种,由于其营养价值高且含有多种生理活性成分,因此在海洋抗癌药物研究中具有很好的应用和开发前景。

本研究以海湾扇贝为原料,研究了海湾扇贝酶解物的制备、鉴定、抗肿瘤作用及其可能机制。

主要研究结果如下:1.研究提出了海湾扇贝酶解物制备工艺条件,证明该酶解物具有较高的体外抗氧化活性。

以去除内脏的海湾扇贝肉为原料,按固液比(g:m L)1:6.25加水匀浆,按1312.82U/g加入酸性蛋白酶,调节p H值到3.53,50℃恒温水解4 h,所得海湾扇贝酶解物的DPPH自由基清除率达到91.59%。

进一步研究结果表明,10 mg/m L该酶解物的红细胞氧化溶血度(93.59%)与0.1 mg/m L Vc的红细胞氧化溶血度(96.63%)差异不显著,10 mg/m L该酶解物抗亚油酸过氧化能力(96.26%)显著高于1.0 mg/m L Vc(67.74%)和0.1 mg/m LVc(40.65%)的抗亚油酸过氧化能力(P﹤0.05),说明该酶解物具有较高的抗氧化活性。

2.测定了海湾扇贝酶解物的氨基酸组成及含量,鉴定了该酶解物中海湾扇贝多肽的一级结构。

用柱前衍生反相高效液相色谱法测出海湾扇贝酶解物中包含14种游离氨基酸,多肽混合物中包含13种氨基酸,按含量由高到低依次为:精氨酸、半胱氨酸、组氨酸、苏氨酸、甘氨酸、脯氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸和亮氨酸。

经串联飞行时间质谱法(MALDI TOF/TOF)鉴定,5个多肽组分的氨基酸序列分别为:组分1(m/z为706.3)Cys-Cys-Ser-His-Thr-Arg;组分2(m/z为718.3)Asn-Gly-Trp-Val-Thr-Arg;组分3(m/z为730.3)Gly-Asn-Pro-Met-Arg-Arg;组分4(m/z为741.4)Asp-His-Trp-Lys-Arg;组分5(m/z为908.5)Cys-Thr-Tyr-Gly-Pro-Val-Leu-Arg。

东海厚壳贻贝多糖的抗衰老生物学活性研究的开题报告

东海厚壳贻贝多糖的抗衰老生物学活性研究的开题报告

东海厚壳贻贝多糖的抗衰老生物学活性研究的开题报告
一、研究背景
随着我国人口老龄化的加剧,抗衰老的研究备受关注。

多糖作为海洋生物中一类重要的天然活性物质,具有很高的生物学活性,被广泛应用在保健、药品等领域。


厚壳贻贝是一种常见的贝类,它的厚壳中含有多种多糖,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤
等多种生物学活性。

因此,研究厚壳贻贝中的多糖对于开发新型的抗衰老保健品具有
重要的意义。

二、研究目的和意义
本研究的目的在于从东海厚壳贻贝中提取多糖,并对其进行化学成分分析和抗衰老生物学活性检测,以期为开发新型的抗衰老保健品提供有力支持。

三、研究内容
1. 东海厚壳贻贝多糖的提取和纯化方法的优化:利用常规提取方法和柱层析技术对多糖进行提取和纯化。

2. 多糖成分的分析:利用色谱、光谱等分析方法对多糖进行化学成分分析,分析其单糖组成、分子量等信息。

3. 多糖的抗氧化活性测试:采用体外试验方法,如DPPH自由基清除、还原力等,评价其抗氧化活性。

4. 多糖的抗炎活性测试:采用细胞实验方法,如西红柿红素诱导RAW264.7细
胞产生炎症反应,通过测定促炎性因子(IL-1β、TNF-α等)的生成量,评价多糖的抗炎
活性。

5. 多糖的抗衰老活性测试:采用体外和体内试验方法,如细胞抗氧化实验、老年小鼠模型等,评价多糖的抗衰老活性。

四、研究预期结果
通过对东海厚壳贻贝多糖的提取和纯化,分析其化学成分,并进行抗氧化、抗炎和抗衰老生物学活性检测,预期能够探明其在抗衰老方面的作用机制,为开发新型的
抗衰老保健品提供有力支持。

海藻多糖的抗肿瘤作用研究进展

海藻多糖的抗肿瘤作用研究进展

1647.
[2]Qingzhi Zhai,Xiuli Li,Yizhuo Yang,et al.Antitumor activity of a
polysaccharide fraction from Laminaria japonica on U14 cervical
carcinoma-bearing mice[J].Tumor Biology.2014,35(1):117-122.
HepG2 细胞凋亡[1]。褐藻海带硫酸化多糖分级组分(LJSP)对宫颈癌 but Not Fucomannoglucuronans, Determine the Biological Activities
具有抗肿瘤作用。LJSP 主要通过增加 Bax / Bcl-2 蛋白的比率来诱 of Sulfated Polysaccharides from Laminaria saccharina Brown Sea-
p65 基因的表达抑制宫颈癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡[7]。
(15):10031-10036.
5 改变肿瘤细胞膜的生长特性
[10] 季宇彬, 武晓丹, 邹翔. 海洋藻类多糖的药理研究进展 [J]. 亚
海藻多糖可显著提高其膜流动性,恢复细胞的生理功能和正常 太传统医药,2006, 1: 73-76.
代谢[8]。昆布多糖通过稳定细胞膜,维护细胞膜的完整性,影响肿瘤
海藻多糖是一类多组分的混合物,大部分溶于水,不溶于有机 [3]F. Namvar, J.Baharara, A.A. Mahdi,et al.Antioxidant and Anti-
溶剂。粗品一般为白色、乳白色或略带黄色的粉末,具有抗肿瘤、抗 cancer Activities of Selected Persian Gulf Algae[J].Indian Journal of

扇贝多糖口服液制备工艺研究

扇贝多糖口服液制备工艺研究

扇贝多糖口服液制备工艺研究蔡坤; 李文婷; 梁志坚; 史福林; 刘杨【期刊名称】《《汕头大学学报(自然科学版)》》【年(卷),期】2019(034)004【总页数】10页(P3-12)【关键词】扇贝; 多糖; 微波辅助提取; 免疫活性; 口服液; 制备工艺【作者】蔡坤; 李文婷; 梁志坚; 史福林; 刘杨【作者单位】汕头大学理学院广东汕头515000【正文语种】中文【中图分类】TS218栉孔扇贝(Chlamys farreri)为海洋软体动物瓣鳃纲贝类,又名海扇,其营养丰富,肉质鲜美可口,具有很高的食用价值.有资料表明扇贝含有丰富的蛋白质、糖类脂肪、维生素、微量元素等营养成分[1-5],每100 g 扇贝瑶柱中含蛋白质63.7 g、脂肪3 g、糖类15 g、钙47 mg、磷886 mg 和铁2.9 mg 等[6],其中糖类含量丰富,仅次于蛋白质含量.研究还发现,扇贝中的多种生物活性成分,具有很高的药用和保健价值.其中多糖是扇贝生理活性物质的主要组成部分,具有抗肿瘤、抗氧化、增强机体免疫能力、抗病毒等多种生理功能[7-13],对扇贝多糖的研究将为扇贝的高值化利用提供依据,因此扇贝多糖口服液开发具有十分广阔的商业应用前景.本研究主要通过微波辅助热水浸提法提取扇贝粗多糖,利用双水相体系、透析技术纯化,真空干燥后得粗多糖干粉.利用所得的多糖进行吞噬细胞吞噬和活化实验,以探究其免疫活性.再将提取所得多糖与白砂糖、柠檬酸、蜂蜜共同调配成口服液.制备过程中以多糖得率和感官评定分数为指标,分别考查扇贝多糖的提取方法和口服液配方组成等因素,优选扇贝多糖提取工艺及口服液制备配方,为扇贝的进一步开发和利用提供参考.1 材料与方法1.1 实验材料与仪器1.1.1 实验材料实验用扇贝瑶柱由江苏连云港洋溢海鲜馆提供,取自栉孔扇贝(Chlamys farreri).在50°C下烘干,研磨成扇贝干粉后备用.扇贝粗多糖(CFP):按微波功率650 W、微波提取时间15 min、微波温度50℃及液料比60∶1 的条件处理扇贝干粉,提取液经双水相体系、透析技术纯化后冷冻干燥后备用.用于细胞试验的试样溶液均在临用前用细胞培养液配制,经0.22μm 滤膜过滤除菌,备用.RAW 264.7 细胞株来自武汉普诺赛科技有限公司,磷酸缓冲盐溶液(PBS)、脂多糖(LPS)购于北京索莱宝科技有限公司,DMEM 高糖培养基、胎牛血清(FBS)、胰酶消化液、青-链霉素双抗均购于Gibco 公司,二甲基亚砜(DMSO)购于麦克林公司,硫酸铵、无水乙醇为分析纯,均购于国药集团化学试剂有限公司;透析袋(截留分子量:2000 g/mol)购于美国Spectrum laboratories 股份有限公司;柠檬酸、白砂糖、蜂蜜均为食用级.1.1.2 实验仪器CW-2000 型超声-微波协同萃取仪(上海新拓分析仪器科技有限公司);RE-52AA型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);DK-S12 型电热恒温水浴锅(上海森信实验仪器有限公司);二氧化碳培养箱(美国Thermo Fisher Scientific 公司);M200 Pro 光栅型多功能酶标仪(瑞士Tecan 公司);37XC 型倒置显微镜(上海光学仪器厂);BCM-1300 生物洁净工作台(安泰空气技术有限公司);MLS-3750 高压蒸汽灭菌锅(三洋电机株式会社);DK-S12 型电热恒温水浴锅(上海森信实验仪器有限公司);BCD-196T 冰箱(青岛海尔股份有限公司).1.2 方法1.2.1 扇贝粗多糖的制备1.2.1.1 超声微波辅助热水浸提扇贝粗多糖的条件优化超声-微波协同萃取仪主要由加热装置、超声发生装置、微波发生装置、冷凝装置、反应器(球型玻璃烧瓶)组成.反应器体积可达1000 mL.将样品粉末与蒸馏水按一定液料比配置于反应器中,然后将反应器置入萃取仪中,调节好萃取仪微波功率、微波时间、微波温度的参数后,运行萃取仪.待萃取过程完成后取出萃取液,待进一步操作.具体工艺参数设置如下:(1)固定液料比为60∶1、微波时间为15 min 及微波温度为50°C,考察不同微波功率(350、450、550、650 和750 W)对扇贝多糖得率的影响;(2)固定液料比为60∶1、微波功率为650 W 及微波温度为50°C,考察不同微波时间(5、10、15、20 和25 min)对扇贝多糖得率的影响;(3)固定液料比为60∶1、微波功率为650 W 及微波时间为15 min,考察不同微波温度(40、50、60、70 和80°C)对扇贝多糖得率的影响;(4)固定微波功率为650 W、微波时间为15 min 及微波温度为50°C,考察不同液料比(40∶1、50∶1、60∶1、70∶1 和80∶1)对扇贝多糖得率的影响.用葡萄糖制备标准溶液,通过苯酚-硫酸法[14]测定吸光值后绘制标准曲线,得到线性回归方程,再利用线性回归方程计算提取的扇贝溶液中的多糖得率.以扇贝多糖得率为指标,绘制关于微波功率、提取时间、提取温度和液料比的单因素实验图,优选出多糖提取条件.1.2.1.2 获取脱蛋白的扇贝多糖干粉将经不同微波辅助热水浸提后的样品液倒入旋转蒸发器的烧瓶中,蒸发浓缩至40 g,然后配置乙醇-硫酸铵双水相体系(400 g 体系:硫酸铵177.0 g、乙醇:109.2 g、蒸馏水73.8 g、样品液40 g),将配置好的溶液混匀后倒入分液漏斗静置分层,取下层清液,经透析后再进行冷冻干燥.1.2.2 扇贝多糖的体外免疫活性研究1.2.2.1 中性红法测定RAW 264.7 巨噬细胞的吞噬能力取生长良好、对数生长期的RAW 264.7 巨噬细胞,吸去培养液,加入2 mL 预热的PBS 清洗残留的培养液,重复两次,然后用冷的PBS 进行处理,2 min 后进行吹打,制成浓度为1×105 个/mL 的细胞悬液,接种在无菌的96 孔细胞培养板中,每孔加入100 μL,在5%CO2、37 ℃的培养箱中贴壁培养12 h,待细胞贴壁后,吸弃培养液,用预热的PBS 洗去未贴壁的细胞,分别加入100 μL 培养液(含10% FBS)和不同浓度CFP(125-2000 μg/mL),以 LPS(5 μg/mL)为阳性对照.细胞培养24 h 后,在无菌环境下,吸弃细胞培养液,每孔加入无菌0.075%的中性红生理盐水溶液100 μL,继续培养20 min,吸去中性红溶液,每孔用PBS 小心洗涤两次,吸去PBS 后每孔加入200 μL 的细胞裂解液体积比φ(冰醋酸:无水乙醇)=1∶1,提取出细胞内的中性红,室温静置过夜,用酶标仪在540 nm 处检测吸光值.每次实验重复三次.1.2.2.2 Griess 法测定RAW 264.7 巨噬细胞的NO 分泌量NO 在体内或者在水溶液中极易氧化成NO2-,在酸性条件下,NO2- 与重氮盐磺胺发生重氮反应,后者进一步与萘基乙烯己二胺发生偶合反应,该反应的终产物浓度与NO2- 浓度具有线性关系,在540~570 nm 处具有最大吸收峰.细胞浓度和加药方式同1.2.2.1(但将加药体积改为200 μL).细胞分别培养24 h 后,离心(170xg,10 min),收集培养液上清,按试剂盒说明书(Griess 法)制作标准曲线,测定NO 含量.1.2.3 优选扇贝多糖口服液配方1.2.3.1 口服液制备单因素实验按1.2.1 实验操作中筛选的提取条件提取出扇贝多糖,与白砂糖、柠檬酸和蜂蜜加水混合制备成口服液,并进行感官评定.以感官评定分数为指标,优选出扇贝多糖口服液的配方.具体调配操作如下:(1)取扇贝多糖粉,配制成质量分数为0.1%、0.6%、1.1%、1.6%和2.1%扇贝多糖溶液各100 mL,分别向溶液中加入质量分数达到2%白砂糖、0.12%柠檬酸、1.5%蜂蜜,配置成扇贝多糖口服液,对其进行感官评价(选用百分制),确定最佳扇贝多糖用量;(2)在最佳扇贝多糖用量的基础上,添加白砂糖,质量分数分别达到1%、2%、3%、4%和5%,随后添加质量分数为0.12%柠檬酸、1.5%蜂蜜,配置成扇贝多糖口服液,对其进行感官评价,确定最佳白砂糖用量;(3)在最佳扇贝多糖和白砂糖的基础上,柠檬酸质量分数达到0.02%、0.07%、0.12%、0.17%和0.22%,然后各加入蜂蜜,质量分数达到1.5%,配置成扇贝多糖口服液,对其进行感官评价,确定最佳柠檬酸用量;(4)在上述单因素实验的基础上,扇贝多糖,白砂糖,柠檬酸都分别选用其最佳用量.添加蜂蜜,质量分数达到0.5%、1%、1.5%、2%和2.5%,配置成扇贝多糖口服液,对其进行感官评价,确定最佳蜂蜜用量.1.2.3.2 评分标准为使制得的口服液具有较好的感官品质,将制备好的扇贝多糖口服液分别请10 名具有一定经验及鉴别能力的不同品尝者进行感官评定.总得分选用百分制,每个指标最高25 分,评分标准见表1(总分计算方法:去除一个最高分和一个最低分后,计算剩余得分的平均值,结果保留整数).表1 口服液评分标准项目品质要求得分色泽浅黄色 1~25香味浓郁蜂蜜香味1~25口感酸甜适中 1~25状态半透明 1~252 结果与分析2.1 优选微波辅助热水浸提法条件利用超声-微波协同萃取仪进行微波辅助热水浸提时有4 个重要的工艺参数:微波功率、微波提取时间、微波温度及液料比.因此本实验以多糖得率为依据,对这4个参数分别进行单因素实验,以期寻找到最佳的提取条件.实验结果如图1.图1(A)图是固定液料比为60∶1、微波时间为15 min 及微波温度为50°C,考察不同微波功率(350、450、550、650 和750 W)对扇贝多糖得率的影响.从图中可以明显观察到,当功率在350~650 W 之间时,多糖得率随功率增加而增大,但功率超过650 W 后多糖得率开始明显下降.因此,得出扇贝多糖微波辅助热水浸提的最佳微波功率应为650 W.图1(B)图是固定液料比为60∶1、微波功率为650 W 及微波时间为15 min,考察不同微波时间(5、10、15、20 和25 min)对扇贝多糖得率的影响.从图中可以看出在5~15 min 间,多糖得率随提取时间增长而增加,但15~20 min 多糖得率却开始缓慢下降,超过20 min 多糖得率下降明显.因此,扇贝多糖微波辅助热水浸提的最佳微波提取时间应为15 min.图1(C)图是固定液料比为60∶1、微波功率为650 W 及微波时间为15 min,考察不同微波温度(40、50、60、70 和80 ℃)对扇贝多糖得率的影响.从图中可以看出40~50 ℃时,多糖得率随温度上升而增加;但50~60 ℃之间,多糖得率随温度上升而逐渐降低;当温度在60~70 ℃之间时,多糖得率又有小幅度增高;而随着温度继续上升,多糖得率开始大幅度下降.因此,扇贝多糖微波辅助热水浸提的最佳微波温度应为50 ℃.图1(D)图是固定微波功率为650 W、微波时间为15 min 及微波温度为50℃,考察不同液料比(40∶1、50∶1、60∶1、70∶1 和80∶1)对扇贝多糖得率的影响.从图中看,当液料比为60∶1 时,多糖得率明显高于其他条件下的多糖得率.因此,扇贝多糖微波辅助热水浸提的最佳液料比应为60∶1.综上所述,要想利用微波辅助热水浸提法获得较高的多糖得率,应对工艺参数进行如下选择:微波功率650 W、微波提取时间15 min、微波温度50℃及液料比60∶1.图1 微波功率、微波提取时间、微波温度和液料比对扇贝多糖得率的影响2.2 扇贝多糖的体外免疫活性研究2.2.1 中性红法测定RAW 264.7 巨噬细胞的吞噬能力作为机体非特异性免疫系统的重要组成细胞,巨噬细胞承担着吞噬、消除细胞内寄生菌、真菌,和清除衰老的自身细胞的职能,所以巨噬细胞的吞噬功能,在一定程度上可以反映机体的免疫状态.本实验中采用巨噬细胞吞噬中性红的方法对RAW 264.7 巨噬细胞的吞噬能力进行测定,结果如图2所示.由图可知,当作用时间为24 h 时,LPS 组和粗多糖组的吸光值较空白对照组均有着不同程度的升高,表明经过LPS 和粗多糖处理后,巨噬细胞RAW 264.7 吞噬中性红的能力得到了提高.图2 扇贝粗多糖(CFP)对RAW264.7 细胞吞噬中性红的影响(24 h)与对照组比较:*p<0.05,**p<0.01.2.2.2 Griess 法测定RAW 264.7 巨噬细胞的NO 分泌量NO 作为信使分子和细胞毒性分子,广泛的参与集体免疫应答相关的各种生理过程,是活化的巨噬细胞杀伤肿瘤细胞和病原微生物的主要效应分子,所以NO 的分泌量可以作为检测巨噬细胞活化状态的一个指标[15].本实验选用 5 个质量浓度梯度(125 μg/mL,250 μg/mL,500 μg/mL,1000 μg/mL,2000 μg/mL)的三种多糖对巨噬细胞RAW 264.7 刺激24 h,收集细胞培养上清,以PBS 组为空白对照,LPS(5 μg/mL)为阳性对照.以NaNO2 为标准品制作标准曲线,得到图3,并从图中计算得NO 标准曲线线性回归方程为y=0.0058x,R2=0.9993,再根据线性回归方程计算得各实验组的NO 浓度,结果如图4(24 h).如图4所示,在粗多糖处理组中,多糖质量浓度在250~2000 μg/mL 范围内显著的促进了巨噬细胞RAW 264.7 分泌NO,而且呈现了浓度依赖性.图3 NO 标准曲线图4 扇贝粗多糖(CFP)对 RAW 264.7 细胞分泌 NO 的影响(24 h)与对照组比较:*p<0.05,**p<0.01.2.3 优选扇贝多糖口服液配方2.3.1 多糖用量对口服液品质的影响如表2所示,制备口服液时,随着扇贝多糖添加量的增多,口服液的色泽由无色变为浅黄色,状态也由透明澄清变成半透明,但对于口服液的香味和口感不会产生明显影响.从色泽和状态角度,多糖含量为1.6%和2.1%呈浅黄色半透明的口服液给人的感官感受优于多糖含量为0.1%~1.1%无色透明的口服液,又因为多糖含量为1.6%和2.1%的口服液在香味和口感上无明显差异,基于成本考虑,扇贝多糖含量1.6%为最适用量.表2 扇贝多糖对口服液品质的影响多糖含量色泽香味口感状态总分0.1% 无色蜂蜜香味浓郁稍酸透明 74 0.6% 无色蜂蜜香味浓郁稍酸透明 76 1.1% 无色蜂蜜香味浓郁稍酸透明 75 1.6% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍酸半透明 80 2.1% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍酸半透明 802.3.2 白砂糖和柠檬酸用量对口服液品质的影响口服液的酸甜度主要有白砂糖和柠檬酸比例决定,白砂糖含量偏低的话,柠檬酸的涩味就会凸显,影响口感;白砂糖含量偏高,甜味过重,会降低服用者的食欲.同样,过多的添加柠檬酸,则涩味偏重,影响口感.添加柠檬酸不仅打破口服液滋味单一的状况,还能起到防腐的作用,避免了使用食品防腐剂,为开发出天然安全的扇贝多糖口服液提供保障[16].如表3和表4所示,综合考虑选择白砂糖质量分数3%,柠檬酸质量分数为0.07%.表3 白砂糖对口服液品质的影响白砂糖含量色泽香味口感状态总分1% 浅黄色蜂蜜香味浓郁有涩味半透明 70 2% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍酸半透明 80 3% 浅黄色蜂蜜香味浓郁酸甜适中半透明 81 4% 浅黄色甜味香气偏甜半透明 78 5% 浅黄色甜味香味浓郁甜味重半透明 75表4 柠檬酸对多糖口服液品质的影响柠檬酸含量色泽香味口感状态总分0.02% 浅黄色蜂蜜香味浓郁偏甜半透明 75 0.07% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍甜半透明83 0.12% 浅黄色蜂蜜香味浓郁酸甜适中半透明 81 0.17% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍酸半透明 76 0.22% 浅黄色蜂蜜香味浓郁酸涩半透明 652.3.3 蜂蜜用量对口服液品质的影响蜂蜜的添加使扇贝多糖口服液滋味更丰富,营养价值也有所提高.但蜂蜜的用量对口服液的组织状态,口感,香味等指标影响较大,因此,筛选蜂蜜用量应更加谨慎. 如表5所示,当蜂蜜含量为1%时,多糖口服液酸甜适中,清新爽口;当蜂蜜含量超过2%时,口服液组织状态受蜂蜜影响开始变浓稠,口感偏甜,因此,选用蜂蜜质量分数为1%为佳.表5 蜂蜜对多糖口服液品质的影响蜂蜜含量色泽香味口感状态总分0.5% 浅黄色蜂蜜香味淡稍酸半透明 80 1% 浅黄色蜂蜜香味稍浓酸甜适中半透明 85 1.5% 浅黄色蜂蜜香味浓郁稍甜半透明 83 2% 黄色变浓蜂蜜香味更浓偏甜半透明,质感粘稠 79 2.5% 金黄色蜂蜜香味很浓甜味重半透明,质感粘稠 752.3.4 小结根据上述成分的最佳用量(即以质量分数记,扇贝多糖为1.6%、白砂糖为3%、蜂蜜为1%、柠檬酸为0.07%)配置扇贝多糖口服液,蜂蜜香味浓郁,酸甜适中,呈浅黄色半透明状,经感官评分为85,因此适合作为制备口服液的配方.3 结论本实验采用微波辅助热水浸提的方法提取扇贝多糖,研究了不同提取条件对扇贝多糖得率的影响,并在此基础上选择合适的提取条件.通过对微波功率、提取时间、提取温度及液料比进行的单因素实验的结果分析,最终选择在微波功率650 W、微波提取时间15 min、微波温度50℃及液料比60∶1 的条件下对本实验所用的扇贝瑶柱材料进行提取.根据细胞实验的结果可知,扇贝多糖浓度在125-2000 μg/mL 范围内可以促进巨噬细胞RAW 264.7 吞噬中性红的能力,浓度在250-2000 μg/mL 范围内能促进巨噬细胞RAW 264.7 分泌NO 且呈浓度依赖性.在调配扇贝多糖口服液的过程中,通过对扇贝多糖、白砂糖、蜂蜜和柠檬酸4 种成分的单因素实验的研究,得出适宜的口服液配方(以质量分数记):扇贝多糖为1.6%、白砂糖为3%、蜂蜜为1%、柠檬酸为0.07%.本试验制备的扇贝多糖口服液清香爽口、食用方便,但还需通过动物实验及临床实验来验证其药用价值,这也是下一步需要研究的方向.参考文献【相关文献】[1]任红,黄海,杨宁,等.华贵栉孔扇贝软体部营养成分分析及评价[J].食品工业,2015,36(6):279-282.[2]王昊.岩扇贝与深海扇贝营养成分分析及与三种养殖扇贝的比较[D].大连:大连海洋大学,2016.[3]曹善茂,王昊,陈炜,等.岩扇贝闭壳肌营养成分的分析及与中国3 种扇贝的比较[J].大连海洋大学学报,2016,31(5):544-550.[4]陈炜.网箱养殖与野生岩扇贝营养成分的分析与评价[C]//中国水产学会、四川省水产学会.2016年中国水产学会学术年会论文摘要集,2016:1.[5]陈炜,曹善茂,肖逸啸,等.浮筏养殖与底栖野生岩扇贝营养成分的分析与比较[J].大连海洋大学学报,2018,33(1):45-51.[6]王光亚.中国食物成分表[M].北京:北京大学医学出版社,2009:150-151.[7]ZHAO L Y,LAN Q J,HUANG Z C,et al.Antidiabetic effect a newly identified component of Opuntia dilleniid polysaccharides[J].Phytomedicine,2011,18(8):661-668.[8]范巧云,李朝品,许礼发,等.扇贝多糖抗鸭乙型肝炎病毒作用[J].中国人兽共患病学报,2012,28(3):248-251.[9]雷云霞,仲娜,杨敏,等.扇贝糖蛋白及多糖对S180 荷瘤小鼠的抑瘤作用[J].中国药师,2006(2):123-124.[10]范巧云,许礼发,李朝品,等.扇贝多糖体外抗乙型肝炎病毒活性的研究[J].中国人兽共患病学报,2011,27(4):307-310.[11]赵芙钗.栉孔扇贝和海湾扇贝的生殖腺的基本营养成分分析及其多糖的免疫活性测定[D].青岛:中国海洋大学,2012.[12]金路.栉孔扇贝多糖的提取分离及纯化多糖对Hela 细胞增殖的影响[D].锦州:辽宁医学院,2015.[13]李雪梅,李丽梅,陈辉,等.海湾扇贝多糖的纯化、分离及抗肿瘤活性研究[J].中国食品学报,2016,16(7):121-127.[14]高馨,郭义美,周君,等.苯酚-硫酸法测定红参多糖含量研究[J].实验室科学,2018,21(1):28-30+33.[15]BOSCÁ L,ZEINI M,TRAVÉS P G,et al.Nitric oxide and cellviability in inflammatory cells:A role for NO in macrophage function and fate[J].Toxicology,2005,208(2):249-258.[16]常双艳.金线莲多糖提取、初步纯化及其口服液制备[D].福州:福建农林大学,2013.。

海湾扇贝多糖水提工艺研究

海湾扇贝多糖水提工艺研究

海湾扇贝多糖水提工艺研究佟海菊;张志胜;王鸥;孙克岩;刘亚南;宋欣【期刊名称】《河北农业大学学报》【年(卷),期】2011(034)003【摘要】To optimize the fine extracting process via orthogonal experimental design, the extraction efficiency of polysaccharide was used to evaluate the effects of the extraction temperature,time and the ratio of material to water. The results showed that the ideal extraction process was:extraction for 6 h at 90 ℃ with 1: 40 ratio of material to water, the extraction efficiency of polysaccharide was 5. 419%.%利用正交试验法对海湾扇贝多糖水提工艺进行优化,以多糖提取率为指标,研究了温度、料液比、时间对提取效果的影响.结果表明:最佳水提工艺为:提取时间为6 h,温度为90℃,料液比为1∶40,多糖提取率为5.419%,为海湾扇贝产品开发提供依据.【总页数】3页(P85-87)【作者】佟海菊;张志胜;王鸥;孙克岩;刘亚南;宋欣【作者单位】河北农业大学,食品科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,食品科技学院,河北,保定,071001;中国农业大学,食品科学与营养工程学院,北京,100083;河北农业大学,食品科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,食品科技学院,河北,保定,071001;河北农业大学,食品科技学院,河北,保定,071001【正文语种】中文【中图分类】TS254.5【相关文献】1.热水提取沙棘多糖工艺研究 [J], 杨宏志;王洪江;张春芝;钟运翠;魏程程2.水提醇沉法提取香菇多糖的最佳工艺研究 [J], 张玉娜; 王倩文; 张双灵3.水提法同步提取分离香菇中蛋白质和多糖的工艺研究 [J], 胡丽玲; 刘世柱; 吴志君; 周晓云; 陈雯雯4.响应面优化水提法提取玉米须多糖的工艺研究 [J], 陈燕萌;招幸辰;张鹏5.超声协同沸水提取无花果叶多糖工艺研究 [J], 王婷婷;李鑫;邱乐群;聂芳;乔彬;梁淳裕;赵春建;李春英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

海洋生物中抗肿瘤活性成分的研究进展

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杨文鸽
【期刊名称】《海洋科学》
【年(卷),期】2000(024)007
【摘要】@@ 从20世纪60年代开始,"向海洋要药"成为沿海国家药学研究的新
方向,各国学者用现代科学方法从海洋生物中分离和鉴定出了许多结构新颖、作用
独特的天然物质,其中有5000多种具抗病毒、抗肿瘤、抗凝血等药理作用,从而成
为研制开发新药的基础.而从海洋活性物质中筛选攻克肿瘤的特效药,无疑是国内外科学家研究的热点.美国国立肿瘤研究所每年筛选30000个新的抗肿瘤化合物,约5%来自海洋生物.业已证实,约10%的海洋动物提取物有抗P388白血病及KB细胞活性,3.5%的海洋植物提取物有抗瘤或细胞毒活性.本文对近几年来海洋生物中抗肿瘤活性成分的研究作一综述,并对其开发与利用进行展望.
【总页数】4页(P38-41)
【作者】杨文鸽
【作者单位】宁波大学,315211
【正文语种】中文
【中图分类】R9
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2.对蛹虫草中抗肿瘤活性成分的研究进展 [J], 赵允章;刘毓婷;王建国;夏爽;金美妮;庞雨晴
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4.蛹虫草中抗肿瘤活性成分及作用机制研究进展 [J], 项婷;夏琛;沈建福;王超然
5.海洋生物提取物中抗皮肤光老化活性成分的研究进展 [J], 林飞燕;黄邓高;殷晓静因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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海湾扇贝多糖的提取、纯化及抗肿瘤活性研究癌症是当前严重危害人类健康、威胁人类生命的主要常见病之一,并且逐渐全球化。

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本研究以海湾扇贝为原料,进行扇贝多糖的提取和纯化,并对其抗肿瘤活性进行研究,为扇贝多糖的进一步研究及应用奠定基础。

主要研究结果如下:(1)海湾扇贝粗多糖的提取工艺研究:采用热水、二次浸提法提取海湾扇贝粗多糖,通过单因素试验和响应曲面法试验设计对海湾扇贝粗多糖提取工艺进行优化,确定了最佳提取工艺条件为浸提温度90℃、液固比50.0mL/g、浸提时间180min,在此条件下海湾扇贝粗多糖的平均提取率约为57.7mg/g。

(2)海湾扇贝粗多糖纯化和分离技术研究:对海湾扇贝多糖的蛋白质脱除方法进行比较,结果表明75%乙醇沉淀结合TCA法处理能较好地去除多糖中的蛋白质,脱除率可以达到91.80%。

DEAE-52纤维素离子交换层析分离结果表明海湾扇贝多糖由中性多糖和酸性多糖两部分组成,其中,酸性多糖为其主要成分,但酸性多糖的具体组成和结构还需要进一步研究。

(3)海湾扇贝多糖体外抗肿瘤效果及机制研究:采用MTT比色法检测海湾扇贝多糖对体外培养的不同肿瘤细胞的增殖抑制作用,利用光学显微镜、扫描电
子显微镜、透射电子显微镜及流式细胞仪观察、分析其对不同肿瘤细胞的细胞形态、显微结构、超微结构及细胞周期的影响。

结果表明,海湾扇贝多糖对体外培养的肿瘤细胞具有直接的细胞毒性作用,能够抑制体外培养的小鼠黑色素瘤细胞株B16F10、人卵巢上皮癌细胞株SKOV3和人肝癌细胞株HepG2的生长;经
20.0mg/mL海湾扇贝多糖处理后,三种肿瘤细胞的细胞形态、显微结构和超微结构均发生了改变,表现为细胞皱缩、透明度降低、细胞密度降低、膜结构改变、核结构改变、核内染色质固缩等,并可对细胞周期产生不同程度的阻抑作用,说明海湾扇贝多糖可通过对肿瘤细胞的直接作用而发挥抗肿瘤的效果。

(4)海湾扇贝多糖体内抗肿瘤效果研究:通过建立小鼠肝癌细胞株H22腹水瘤荷瘤小鼠模型,以灌胃方式给予不同剂量的海湾扇贝多糖,进行海湾扇贝多糖体内抗肿瘤效果研究。

结果表明每日灌胃150.0mg/kg、250.0mg/kg的海湾扇贝多糖能够抑制小鼠肝癌细胞株H22腹水瘤的形成,两种剂量条件下试验小鼠的生存期分别延长38.68%和32.92%,说明海湾扇贝多糖在适当剂量条件下具有体内抑制肿瘤细胞生长的作用。

(5)海湾扇贝多糖免疫增强活性研究:结果表明,在试验剂量范围内,海湾扇贝多糖对试验小鼠的肝脏指数均无显著影响,但能明显提高脾脏指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬指数和吞噬率以及脾脏T-淋巴细胞转化能力,其中每日灌胃100.0mg/kg、150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小鼠的脾脏指数最高,分别为(3.8±0.4)mg/g和(3.7±0.5)mg/g,两者之间没有显著差异;每日灌胃150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小鼠的胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数均最高,分别为(3.4±0.5)mg/g、(49.70±1.09)%、0.90±0.20;每日灌胃100.0mg/kg、150.0mg/kg海湾扇贝多糖组小脾脏T-淋巴细胞增殖能力显著高于
其他剂量组,刺激指数分别为1.25±0.10和1.22±0.15,且两组之间差异不显著。

海湾扇贝多糖的免疫增强活性可间接起到抑制肿瘤细胞生长的作用,并具有较高的安全性。

(6)海湾扇贝多糖抗氧化活性研究:体外试验结果表明,海湾扇贝多糖有较强的体外抗氧化活性,能够清除试验体系中的·OH、DPPH·和O2-·,并具有较强的还原能力;体内试验结果表明,海湾扇贝多糖能够显著提高试验小鼠肝、肾组织中的SOD、GSH-Px、CAT活力,降低MDA含量,提高机体的抗氧化能力。

其中SOD活性以150.0mg/kg剂量组为最高,分别为(24.96±0.79)U/g·mass 和(1.79±0.03)U/g·mass;GSH-Px活力以100.0mg/kg剂量组为最高,分别为(637.22±27.04) U/g· mass和(255.72±21.59)U/g·mass;CAT活力以150.0mg/kg剂量组为最高,分别为(6473.08±55.68)U/g·mass和(5269.41±47.02)U/g·mass;200.0mg/kg剂量组MDA含量最低,分别为(20.47±1.31)nmol/g·mass和(13.13±0.23)nmol/g·mass。

海湾扇贝多糖对自由基的清除能力,可以提高机体的抗氧化水平,避免DNA 被过量的活性氧氧化损伤而导致细胞的癌变,防止肿瘤的发生。

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