《微生物的生长简》PPT课件

需要相对高的细菌浓度；
个体小的细菌在显微镜下难以观察。
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三. 以生物量为指标测定微浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，
菌数越多，光密度越大。因此，在一定波长下测定菌悬液的光密度，就可反
映菌液的浓度。
特点：快速、简便；但易受干扰。
2、重量法
细胞干重测定：单位体积的培养液中的微生物细胞的干重。
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1、稀释倒平板法
操作较麻烦，对 好氧菌、热敏感 菌效果不好！
2、涂布平板法
使用较多的常规 方法，但有时涂 布不均匀！
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3、平板划线分离法（Streak Plate）
特点：快速、方便。 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）
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4、选择培养分离
为了从混杂的微生物群体中分离出某种微生物，可以根据该 微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培 养的方法进行分离。
抑制大多数其它微生物的生长，使待分 离的微生物生长更快, 数量上升
直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。
＊利用选择培养基进行直接分离 ＊富集培养
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利用选择培养基分离
根据所要分离的菌种的特性选用培养基： ①分离真菌用马丁氏培养基，pH偏酸；
分离放线菌用高氏1号，pH中性偏碱。
②根据不同菌对化学试剂的敏感性： 分离放线菌，培养基中加10%酚，抑制细菌、真菌； 从土壤中分离真菌，加链霉素，抑制细菌生长。
菌数低的样品（如水）→ 膜过滤 → 培养 → 菌落计数
水中的细菌总数：124个/100
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ml
（二）以数量变化对微生物生长情况进行测定
3、显微镜 直接计数法
采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜 下对微生物数量进行直接计数（计算一定 容积里样品中微生物的数量）。
缺点：
不能区分死菌与活菌；
不适于对运动细菌的计数；
二. 以数量变化对微生物生长情况进行测定 三. 以生物量为指标测定微生物的生长
要求：掌握微生物生长的概念及常规测定方法
（原理和操作）
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一. 微生物生长概述
生长growth：有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。 表现为细胞质的量不断增加，体积加大。
繁殖reproduction由于细胞分裂而引起的个体数目的增加。 单细胞微生物如细菌，生长往往伴随着细胞数目的增加。 多细胞微生物（如某些霉菌）细胞数目的增加（菌丝细
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第一节 微生物生长的测定
在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长。 二. 以数量变化对微生物生长情况进行测定
1、培养平板计数法 2、膜过滤培养法 3、显微镜直接计数法
三. 以生物量为指标测定微生物的生长
1、比浊法 2、重量法
3、 生理指标法
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二. 以数量变化对微生物生长情况进行测定
1、培养平板计数法 测定微生物的活菌数viable count 稀释平板测数法dilute plate count
微生物生长的概念（与动植物生长概念的差别） 微生物生长的常规测定方法（原理和操作）
√ 第二节 细菌的群体生长繁殖
细菌生长繁殖的规律（标准生长曲线） 及控制技术（连续培养的概念与方法）
√ 第三节 微生物生长繁殖的控制
各种物理、化学因素对微生物生长的影响（方法／原理） 2
第一节 微生物生长的测定
一. 微生物生长概述
胞的不断延长或分裂）如不伴随着个体数目的增加，只能叫 生长。只有通过形成无性孢子或有性孢子使得个体数目增加 的过程才叫做繁殖。
一般情况下，当环境条件适合时，生长与繁殖始终是交替进
行的。从生长到繁殖是一个由量变到质变的过程，这个过
程就是发育development。
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纯培养技术
• 微生物在自然界总是混杂地生活在一起，要想研究某一种微 生物，必须把研究对象从混杂群体中分离出来。
3、 生理指标法
①总氮量：用化学分析方法测出微生物细胞中蛋白质或氮元素的含量。 ②DNA含量：用荧光法测定微生物细胞中DNA含量。 ③代谢活性：根据微生物生命活动的强度来估算生物量。
如单位体积培养物在单位时间内的O2消耗、糖消耗或产酸产CO2量等。
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第二节 细菌的群体生长繁殖
细菌生长繁殖的规律（标准生长曲线） 及控制技术（连续培养的概念与方法）
③根据分离对象的营养特征： 分离能发酵纤维素的菌株，培养基以纤维素为唯一碳源。 分离固氮菌，用无氮培养基。
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5、单细胞（单孢子）分离法
采用显微分离法在显微镜下从混杂群体中直接分离单个 细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。 毛细管法：用毛细管提取微生物个体，适于较大微生物 显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子 小液滴法：将经过适当稀释后的样品制成小液滴，在显 微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离。
第七章：微生物的生长繁殖及其控制（3学时）
通过本章的学习，要求掌握： 1、微生物生长量的测定方式。 2、细菌纯培养生长曲线各个时期的主要特点。 3、物理、化学手段用于控制微生物生长的方法及原理。 重点： 细菌纯培养生长曲线。 难点：
如何利用细菌纯培养生长曲线的对数生长期来计算细菌的 代时和代数。
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√ 第一节 微生物生长的测定
纯培养(pure culture)——微生物学中把从一
个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后 代,称纯培养.
获得纯培养的方法
① 稀释倒平板法pour plate method ② 涂布平板法spread plate method ③ 平板划线分离法streak plate method ④ 利用选择培养基分离 ⑤ 单细胞（单孢子）分离法
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一、生长曲线
一条典型的生长曲线至少可以分为 迟缓期，对数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期
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①迟缓期lag phase （滞留适应期）
菌种初接入新鲜培养液内，微生物细胞需要通过自身生理机能的 调节逐步适应新环境。表现为细胞数量不增加了但细胞个体体 积增大，代谢活跃
以CFU(colony forming units)表示
•稀释培养测数法（又称最大概率法，MPN most probable number）（参见实验
教材）
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2、膜过滤培养法测定含菌较少的空气和水中的微生物数目
将定量的样品通过滤膜过滤，菌体被阻留在滤膜上，取 下滤膜进行培养，然后计算菌落数，可求出样品中所含 菌数。