柱层析分离芦丁和槲皮素以及聚酰胺TLC鉴定芦丁和槲皮素
槐花米中芦丁的鉴定
实验五 槐花米中芦丁的鉴定
一、实验目的
• 掌握硅胶薄层层析鉴定鼠李糖和葡 萄糖的方法。
• 掌握芦丁和槲皮素的化学检识方法。
二．实验原理
• 1.根据鼠李糖和葡萄糖在硅胶板上 的分配系数不同达到分离的目的。
• 2.根据芦丁和槲皮素的理化性质来 检识芦丁液的硅胶薄层层析 1. 硅胶板的活化；
• 2. 配制展开剂，正丁醇：醋酸：水＝ • 4：1： 5 • 3. 将展开剂倒入层析缸中，展开缸中展开
剂的高度4mm左右。 • 4. 画基线，基线距底边1.0～1.5cm；
（一）糖液的硅胶薄层层析
• 5. 点样（点样顺序为：糖液、鼠李糖、葡 萄糖），点样一般为圆点，点样直径一般 不大于2mm，点样时必须注意勿伤薄层表面。
• 6. 将硅胶板放入展开缸的展开剂中，浸入 展开剂的深度为距圆点5mm为宜，一般展距 为8cm，取出薄层板，晾干。
（一）糖液的硅胶薄层层析
7. 喷苯胺－邻苯二甲酸试剂，在105℃下 烘10min。 • 8. 实验结果见图1。
（二）芦丁、槲皮素及糖的化学检识
• 1. 浓硫酸和浓盐酸反应 • 取芦丁或槲皮素数毫克于比色瓷板上，
入少许镁粉，滴加数滴浓HCl，溶液由黄色渐变红 色者表示有黄酮类化合物。以同法试验槲皮素。
• 5.三氯化铝反应： • 取样品1mg溶于1ml乙醇中，加1%三氯化铁乙醇
液2-3滴，黄酮类呈鲜黄色。
6.醋酸镁反应
• 取样品乙醇液与醋酸镁试剂作纸上反映， 观察荧光。二氢黄酮，二氢黄酮醇类可显 天蓝色荧光，若有5-OH，色泽更明显。而 黄酮，黄酮醇和异黄酮类等显黄色—橙 色—褐色荧光。
分别加浓硫酸或浓盐酸1滴，注意呈色变化， 研磨后溶解成橙色溶液，加较多量的水稀 释后转为浅黄色，析出黄色沉淀。
芦丁槲皮素的聚酰胺薄层层析
芦丁槲皮素的聚酰胺薄层层析1. 引言哎呀，今天我们聊聊一个听起来有点高大上的话题——芦丁槲皮素的聚酰胺薄层层析！听起来像是科学家们在实验室里搞什么高深莫测的事情，但其实，这个过程简单得让人意想不到。
芦丁槲皮素，这个名字是不是很复杂？简单来说，它是一种存在于很多植物里的天然化合物，常被用作保健品，效果还挺不错的。
今天就让我们一起揭开这个神秘面纱，看看它是如何被提取和分离的。
2. 芦丁槲皮素是什么？2.1 认识芦丁槲皮素首先，芦丁槲皮素其实是黄酮类化合物，存在于一些水果和蔬菜里，比如柑橘类、苹果和洋葱等。
它不仅能帮助我们抗氧化，还能增强血管的健康。
要说这东西跟健康的关系，那真是如鱼得水，简直是“绝配”啊！2.2 为什么要分离？那么，为什么我们要对它进行分离呢？大家都知道，化合物的“干货”可多着呢，但想要从复杂的植物中提取出芦丁槲皮素，就得用到一些手段。
通过聚酰胺薄层层析，我们可以把它从一大堆杂七杂八的物质中分离出来，确保我们得到的是真材实料，正宗的芦丁槲皮素。
就像在一堆沙子里找金子，得花点功夫。
3. 聚酰胺薄层层析3.1 这个过程怎么进行？接下来，咱们就要谈谈聚酰胺薄层层析的具体步骤了。
首先，得准备好样品。
把含有芦丁槲皮素的植物材料处理成粉末，然后溶解在适合的溶剂中。
嘿，这里就像是给植物洗澡，帮它们去掉一些不必要的“赘肉”。
然后，拿出聚酰胺薄层板，涂上一层薄薄的胶，准备接受“洗礼”。
把刚才准备好的样品点在板子上，接着把板子放进盛有移动相的容器里。
这里的“移动相”可以理解为溶剂的混合物，简直就像是一条小河，把芦丁槲皮素从板子的底部慢慢洗到顶部。
你能想象到那种画面吗？就像在看一场精彩的运动会，选手们一争高下，争着往前冲。
3.2 观察与分析当一切都完成后，等到溶剂上升到一定高度，就可以拿出板子进行观察了。
这时候，你会看到不同的成分根据极性和质量分开，形成了一道道漂亮的色带。
简直像是大自然为我们准备的艺术展览！通过观察这些色带的位置和颜色，我们就能分析出芦丁槲皮素的存在与否，甚至还可以评估它的纯度。
芦丁和槲皮素的聚酰胺薄层色谱鉴定-2022年学习资料
思考题及记录-思考题：-1芦丁和槲皮素用不同展开剂系统展层将出现什么结果？为什么？-2芦丁和槲皮素聚酰胺薄 色谱将出现什么结果？为什么？-记录：-1芦丁和槲皮素的纸色谱、聚酰胺薄层色谱结果。-2糖的检出纸色谱结果。 1位移测定的结果-2测定克分子吸收系数、在吸收峰前后20m波长范围内，依次测定波-长和吸收值，用方格纸作图 精确的测出吸收峰的波长和吸收值，记-录测定结果。
四测定结果-槲皮素加位移试剂结果表（入，nm-加入试剂-编号-II峰-位移值-羟基位置-无水甲醇-1-25 -371-NaOH-430-I峰△59-4-0H-Na0H5'-分解-3,4’-0-MeONa-416-I △45-3-0H-MeONa5-AICIs-270-450-I峰△79-3,5及3’，4’-0H-AICI HCI-265-425-I峰△54-3,4-0Π-NaOAC-277-387-I峰△21-7-0H-NaO C/H3BO3-259-385-I峰△14-3’,4-0H-克分子吸收系数的测定：根据己测定的黄酮光谱，测 吸收峰的波-长和吸收峰前后20nm的波长范围。然后取样品溶液约3ml,置于1cm长的-石英杯中，测V,仔细 量在上述波长范围内各波长的吸收值，反复测-定三次。
四、槲皮素的降解-取槲皮素50mg,置于圆底烧瓶中，加水5m1,乙醇6ml,-KOH2g,置水浴上加热回流 0小时，蒸去乙醇，加水50m1溶-解，用浓盐酸酸化至pH2~3,用乙醚萃取三次，合并乙-醚液，回收乙谜，供 层层析点伴用。-五、槲皮素降解产物的薄层色谱-硅胶CMC-Na薄层-对照品：原儿茶酸Protocatech ic acid-间苯三酚Phloroglucinol-展开剂：氯仿-丙酮-醋酸8：20.5-显色剂：三氧化 试剂
二.纸色谱及薄层色谱鉴别-1.纸色谱：-新化一号层析滤纸-样品：自制芦丁、槲皮素-对照品：芦丁、槲皮素-展 剂：1正丁醇-醋酸-水4：1：5上层或4：1：1-2-25%醋酸水溶液-3》-85%醋酸水溶液-显色：1见光下观察，再在紫外光下观察-经氨气后再观察-喷三氧化铝试剂后再观察
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式综合化学实验:芦丁的提取分离和鉴定芦丁简介:芦丁（Rutin）又名芸香苷化学式: C27H30O16·3H2O，是一种浅黄色针状结晶有机化合物，广泛存在于自然界植物中，是一种被人们广泛使用的有机天然产物。
目前已发现含有芦丁的植物至少在70种以上，常见的如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均有不同含量。
尤其以中药槐米（豆科、槐属，槐树Sophorajaponica的花蕾）和荞麦中含量最高，因此槐米可作为大量提取芦丁的天然植物原料。
芦丁是由槲皮素（quercetin）3位上的羟基与芸香糖（rutinoe，一种由葡萄糖glucoe与鼠李糖rhamnoe组成的双糖）脱水合成的苷，是一种浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174，178℃，无结晶水时188，190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
补充知识:关于苷（gān）和甙(dài): 苷类（glycoide，旧称甙）又称配糖体，是糖或糖的衍生物的半缩醛羟基与另一类非糖物质中的羟基以缩醛键（甙键）脱水缩合而成的环状缩醛衍生物，水解后能生成糖与非糖化合物。
目前国际上通用“苷”如“皂苷”，而过去习惯使用的中文名称“甙”目前已不再使用如“皂甙”现统称“皂苷”。
一、目的要求：1．通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、掌握化学鉴别试验、苷水解、衍生物制备、熔点和薄层层析检测等手段在苷类结构鉴定上的作用。
3、通过UV、IR、HNMR和MS图谱解析，了解光谱方法黄酮类化合物结构鉴定中的作用。
二、已知重要成分性质：1、芦丁（rutin）：分子式C27H30O16·3H2O，为浅黄色针状结晶物，mp174～178℃（含三分子水）；100mmHg和110℃加热12小时后，变为无水物，115～117℃软化，214～215 ℃发泡分解。
芦丁槲皮素鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解芦丁和槲皮素的理化性质。
2. 掌握芦丁和槲皮素的提取、分离与鉴定方法。
3. 熟悉光谱分析在有机化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁和槲皮素均为黄酮类化合物，具有多种生物活性。
芦丁是槐米中的一种主要活性成分，槲皮素则广泛存在于多种植物中。
本实验通过碱酸法提取芦丁和槲皮素，并利用光谱分析（紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱）对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、芦丁标准品、槲皮素标准品、无水乙醇、浓盐酸、镁粉、10%萘酚溶液、浓硫酸、聚酰胺薄层板、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温加热器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
四、实验步骤1. 芦丁和槲皮素的提取（1）将槐米粉末用无水乙醇回流提取，过滤，收集滤液。
（2）将滤液浓缩至一定体积，用热水溶解，冷却后用盐酸调节pH值至2～3。
（3）静置沉淀，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干。
（4）用少量无水乙醇溶解残渣，定容至一定体积，得到芦丁和槲皮素的提取液。
2. 芦丁和槲皮素的鉴定（1）紫外-可见光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用紫外-可见分光光度计测定其在200～400nm范围内的吸收光谱，与标准品进行比较。
（2）红外光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用红外光谱仪测定其红外光谱，与标准品进行比较。
（3）核磁共振波谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用核磁共振波谱仪测定其核磁共振波谱，与标准品进行比较。
3. 芦丁和槲皮素的分离（1）薄层色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，点样于聚酰胺薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（5:4:1）为展开剂进行薄层色谱分析，与标准品进行比较。
（2）高效液相色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，经适当处理后，用高效液相色谱仪测定其含量，与标准品进行比较。
五、实验结果与分析1. 紫外-可见光谱分析芦丁和槲皮素的紫外-可见光谱与标准品的吸收光谱基本一致，表明提取液中含有芦丁和槲皮素。
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式
纸层析法鉴定芦丁和槲皮素的实验方程式纸层析法是一种简单、快速、经济、易于操作的色谱分离技术，广泛应用于化学分析和药物化学等领域。
在实际应用中，纸层析法常用于对化合物的分离和纯化，并通过染色、显色等方法进行定性和定量分析。
在鉴定芦丁和槲皮素中，可以使用纸层析法进行分离和鉴定。
实验步骤如下：1.实验物料准备：准备好检测芦丁和槲皮素的纸层析板、标准品芦丁和槲皮素、溶剂毛细管、显色剂等。
2.准备样品溶液：取一定量的待测样品，将其溶解在适量的溶剂中，使浓度适当，以便在纸层析板上均匀涂抹。
3.准备标准溶液：准备芦丁和槲皮素的标准溶液，浓度分别为C1和C24.样品处理：将纸层析板上端标出起点线，再标出标准品C1和C2的位置，然后用毛细管在起点上均匀涂抹样品溶液和标准溶液。
5.平行纸层析：将涂抹好样品和标准品的纸层析板，放入干燥的脱水培养器中，在温度适宜的条件下进行平行纸层析分离，待样品跑至标准品C1和C2处时，取出纸层析板进行干燥。
6.显色：将纸层析板放入含有显色剂的容器中，在室温下进行显色反应，待出现斑点时取出。
7.结果分析：观察纸层析板上的斑点形成情况和色谱图，对比标准品的色谱图，根据斑点位置和色谱图形态，可以初步判断出纸层析板上的斑点是否与标准品C1和C2相同或相似。
8.定量分析：根据纸层析板上斑点的形成情况和色谱图，可以根据标准品的浓度、质量和相对迁移率等参数，计算出样品中芦丁和槲皮素的含量。
需要注意的是，纸层析法是一种相对简单的色谱分离方法，但是对于复杂样品的分离和鉴定较为有限。
在实际应用中，需要对样品进行预处理、选用合适的纸层析板和显色剂，并进行合理的操作控制和数据分析。
同时，纸层析法也可以与其他色谱分离方法如薄层色谱、柱层析等相结合，提高分析的准确性和可靠性。
柱层析分离芦丁与槲皮素
三．实验操作步骤
• （一） 柱层析分离芦丁和槲皮素 聚酰胺5g 加水50ml 5g， 50ml， 1. 装柱 聚酰胺5g，加水50ml，搅 倒入层析柱中（打开层析柱活塞， 匀，倒入层析柱中（打开层析柱活塞， 让水滴出，让聚酰胺自由沉降而填实。 让水滴出，让聚酰胺自由沉降而填实。 注意保持液面1cm高度。） 1cm高度 注意保持液面1cm高度。）
三．实验操作步骤
• 2. 加样 芦丁和槲皮素各0.03g ,加甲醇 芦丁和槲皮素各0.03g ,加甲醇 2ml溶解，加聚酰胺0.03 g，在水浴上除尽 2ml溶解，加聚酰胺0.03 g， 溶解 甲醇，将所拌样品轻轻的置于柱上端。 甲醇，将所拌样品轻轻的置于柱上端。 加好样品后，先用50%的乙醇冲洗， 50%的乙醇冲洗 3. 洗脱 加好样品后，先用50%的乙醇冲洗， 待两层析带之间的距离约1cm 1cm后 再用90% 90%的 待两层析带之间的距离约1cm后，再用90%的 乙醇冲洗。 乙醇冲洗。
二、实验原理
• 2）. 展开剂的极性较小（脂溶性溶剂所占 展开剂的极性较小（ 比例>50% >50%） 丁酮： 60： 比例>50%）时，如：苯：丁酮：甲醇 = 60： 20： 洗脱先后顺序: 20：20; 洗脱先后顺序: • 极性小的先洗脱，极性大的后洗脱。 极性小的先洗脱，极性大的后洗脱。 • 用正相色谱理论来解释。 用正相色谱理论来解释。
三．实验操作步骤
• 4. 收集 用试管收集，每试管接收30 ml。 用试管收集，每试管接收30 ml。 • 5. 检测 分离结果用TLC检测。 分离结果用TLC检测。 TLC检测
（二）芦丁和槲皮素聚酰胺色谱柱层析后的 试样进行聚酰胺薄膜层析操作 • 1. 配制展开剂，甲醇：丙酮：苯＝8：1：1 配制展开剂，甲醇：丙酮： • 2. 将展开剂倒入展开缸中，展开缸中展开剂 将展开剂倒入展开缸中， 的高度4mm左右。 4mm左右 的高度4mm左右。 • 3. 画基线，基线距底边1.0～1.5cm； 画基线，基线距底边1.0 1.5cm； 1.0～ • 4. 点样（点样顺序：试样1、试样2、芦丁、 点样（点样顺序：试样1 试样2 芦丁、 槲皮素) 点样一般为圆点， 槲皮素)，点样一般为圆点，点样直径一般不 大于2 mm，点样时必须注意勿伤薄层表面。 大于2 mm，点样时必须注意勿伤薄层表面。
天然药化槐米中芦丁的提取分离、鉴定及槲皮素的制备
的硼酸使成饱和溶液进行测定。本法适用于在加入醋酸钠 5 分钟后有分解现象者，方法 二：于 3ml 样品中加入 5 滴硼酸饱和溶液后，快速加入醋酸钠，立即测定。
1%鼠李糖标准品水溶液 展开剂：正丁醇：醋酸：水（4：1：5 上层） 显色剂：喷邻苯二甲酸苯胺溶液后，105℃烘烤 5 分钟，显棕红色斑点。
6.光谱测定 芦丁溶液的配制 精密称取的芦丁纯品 1g，用无水甲醇溶解，并稀释至 10ml，从中吸取 5ml，置 50ml 容量瓶 中，用甲醇稀释至刻度。 A. 甲醇光谱：取样品液置石英杯中，至 200～500nm 内进行扫描，重复一次，观察紫外光
取上述溶液 1~2ml，然后滴加 2%的 ZrOCl2 的甲醇溶液，观察颜色变化（生成黄色的络 合物）。然后向试管中加入 2%的枸橼酸甲醇溶液，观察颜色变化（黄色溶液显著褪色）。 （3）Molish 反应
取上述溶液 1~2ml，置于试管中，加 10%等体积的α-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴 加少量浓硫酸，观察现象（两液界面处产生紫红色的环）。 4．芦丁和槲皮素的薄层色谱鉴别
槐花米的主要成分为芦丁。芦丁可降低毛细血管脆性和调节渗透性。临床上用作毛细血 管脆性引起的出血症，并常作为高血压症的辅助治疗药， 一、实验目的与要求
1．掌握酸碱法提取黄酮类化合物的原理及操作。 2．掌握化学鉴别实验、苷的水解及薄层检查等方法在苷类化合物鉴定中的作用。 3.了解 UV 在黄酮类化合物结构鉴定中的应用。 二、实验原理 芦丁（rutin）C27H30O16：浅黄色针状结晶 mp174~178℃（含三分子结晶水）；188℃（无 结晶水）。难溶于冷水，可溶于热水、热甲醇、冷甲醇、热乙醇、冷乙醇，不溶于乙醚、氯 仿、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液，酸化后析出。全水解得槲皮素和葡萄糖及鼠 李糖。 槲皮素（quercetin）C15H10O7﹒2H2O:黄色结晶,mp313~314℃（2 分子结晶水）。316℃ （无水物）。能溶于冷乙醇、易溶于沸乙醇，可溶于甲醇、乙酸乙脂、冰醋酸、吡啶、丙酮 等，不溶于水、苯、乙醚、氯仿、石油醚等。
槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定
槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验名称：槐米中卢丁和槲皮素的提取分离与鉴定实验目的：1）掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理及操作，学会芦丁的精制与水解方法。
2）能运用化学法、色谱法鉴定芦丁。
实验器材：槐花粗粉石灰乳硼砂烧杯纱布蒸馏水抽滤装置盐酸硫酸三角烧杯镁粉α-萘酚硅胶ＧBa(OH)2 FeCl3K3[Fe(CN)6]苯胺-联苯二甲酸芦丁标准品槲皮素标准品葡萄糖标准品鼠李糖标准品参考文献：（一）主要成分的结构及性质槐花系豆科植物Sophora japonica L.的干燥花蕾。
其主要有效成分为芦丁，芦丁在槐花花蕾中含量高，《药典》规定槐花中芦丁含量不得少于20.0％。
其结构为槲皮素-3-O-芸香糖苷。
（二）基本原理芦丁分子中有较多的酚羟基，有弱酸性，可与碱成盐而溶于水中，加酸酸化后可沉淀析出，因而用碱溶酸沉法提取芦丁。
芦丁的精制是利用它在冷热水中的溶解差异进行的。
（三）操作步骤１．芦丁的提取称取槐花粗粉，置500ml烧杯中，加入0.4％硼砂沸水溶液200ml，在搅拌下加入石灰乳，调至pH8～9,加热微沸20分钟（注意保持pH8～9），并随时补充蒸发的水分，趁热用四层纱布滤过。
同样操作再提取一次，合并两次滤液。
滤液在60~70oC用浓HCl调至pH ３~４，静置过夜使沉淀完全，抽滤，沉淀用蒸馏水洗２~３次，抽干，置空气中晾干，得芦丁粗品。
2．芦丁的精制称量粗品芦丁，按1:200的比例悬浮于蒸馏水中，煮沸10分钟使芦丁全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析晶。
抽滤，结晶置空气中晾干或60～70oC干燥，得精制芦丁，称重，计算收率。
3．芦丁的水解取芦丁，研细后置于250ml三角烧杯中，加入2%H2SO4溶液100ml，直火加热微沸约40分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤，滤液保留作糖检查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干称重，得粗制槲皮素，然后用乙醇（95%乙醇约15ml）重结晶得精制槲皮素。
辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷的含量分析
辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷的含量分析谷俐媛;陶俊宇;曾芸;韦英益;胡庭俊【摘要】The flavonoids of Polygonum hydropiper were separated and purified by means of macroporous adsorption resin, and its antioxidant activity was tested in previous research, which gained satisfied results. In order to obtain flavonoids of Polygonum hydropipe with stable quality, and provide evidence for quality control in industrial production, high performance liquid chromatography for determination of total flavonoids in Polygonum hydropiper was used with rutin, quercetin and quercitrin as reference substance. The results showed that the contents of rutin, quercetin and quercitrin from flavonoids ethyl acetate ( FEA) in Polygonum hydropipe were 281. 97, 160.98, 83. 31 mg/g respectively; The contents of rutin, quercetin and quercitrin of flavonoids n-butanol ( FNB) in polygonum hydropiper were 150. 33, 147. 51, 73. 82 mg/g respectively. The method demonstrated advantage of simply, accuraty and sensitivity, and successfully applied to the analysis of rutin, quercetin and quercitrin content in flavonoids from Polygonum hydropipe.%为保障辣蓼黄酮工业化生产中的质量控制,建立辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷含量测定高效液相色谱法.结果表明,运用高效液相色谱法测定辣蓼黄酮乙酸乙酯部分(FEA)中芦丁、槲皮苷与槲皮素的含量分别为281.97、160.98、83.31 mg/g,辣蓼黄酮正丁醇部分(FNB)中芦丁、槲皮苷与槲皮素的含量分别为150.33、147.51、73.82 mg/g.该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可作为辣蓼黄酮中芦丁、槲皮素与槲皮苷含量分析的参考方法.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2017(051)010【总页数】7页(P39-45)【关键词】辣蓼;黄酮;高效液相色谱;含量分析【作者】谷俐媛;陶俊宇;曾芸;韦英益;胡庭俊【作者单位】广西大学动物科学技术学院,南宁530005;广西医科大学基础医学院,南宁530021;广西大学动物科学技术学院,南宁530005;广西大学动物科学技术学院,南宁530005;广西大学动物科学技术学院,南宁530005【正文语种】中文【中图分类】S853.7辣蓼，味辛、温，具有祛风利湿，散瘀止痛，解毒消肿，杀虫止痒之功效[1]。
芦丁的提取分离和鉴别
芦丁的提取分离和鉴别槐花米系豆科槐属植物槐树（SophorajaponicaL）的花蕾。
味苦性凉，入肝、大肠经。
具有清热凉血、止血的功效，常用于治疗便血、痔血、尿血、衄血、崩漏下血和赤血下痢等，常炒炭应用。
槐花米主要化学成分为芦丁（芸香甙），具有维生素P样作用，可降低毛细血管脆性、调解其渗透性。
临床用于防治高血压脑病、视网膜出血和慢性气管炎等。
芦丁羟基化衍生物曲克芦丁能抑制血小板聚集，防止血栓形成的作用，同时能对抗内源性血管损伤，增加毛细血管抵抗力降低其脆性，防止水肿，对急性缺血性脑损伤有显著保护作用，临床用作抗血小板药物。
一、实验目的：1．掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法；2．掌握黄酮类成分的主要性质及鉴别方法。
二、仪器与试药（一）仪器SHB-III循环水式多用真空泵HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（250mL）ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）（二）试药槐花米粗粉硼砂氧化钙乙醇盐酸浓硫酸硅胶CMC-Na镁粉a-萘酚甲醇乙酸乙酯脱脂棉三氯化铝试液芦丁和槲皮素对照品甲酸丙酮三、主要成分的结构与性质：表5－1槐花米中主要成分的物理性质白桦脂醇* (Betulin) 无色针晶251〜252C能溶于醋酸、丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水。
槐花二醇* (Sophoradiol) 无色针晶219~220C或224C溶于石油醚、苯、丙酮、甲醇；难溶于水*皂苷（Saponin）,粗品为白色粉末，mp210〜220°C，易溶于吡啶，能溶于200倍的甲醇中,酸水解得上述两种苷元及糖。
糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。
R=H槲皮素R=-glu-rha芦丁四、实验原理：1．芦丁分子结构中含有酚羟基，具有弱酸性，能与碱反应生成盐而溶于水，此盐加酸酸化，又析出芦丁，利用此性质进行提取。
并可利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差悬殊，用水重结晶2．芦丁在酸性溶液中可被水解，生成槲皮素和糖。
槐米中芦丁的提取与分离(建大)
槐米中芦丁的提取与鉴定一、摘要：芦丁是一种分布广泛的黄酮类化合物。
目前主要用于治疗毛细血管脆性减弱和渗透性增强所致的出血，芦丁还可降低人体血脂和胆固醇并具有抗菌和抗放射作用。
国外主要用作食品、化妆品的添加剂和着色剂。
文献报道的槐米中提取芦丁的方法较多。
本实验通过煮沸槐米与水的混合物得到粗芦丁的水溶液，然后利用硅胶色谱柱法得到产物芦丁。
关键词：槐米芦丁硅胶色谱柱层板二、引言芦丁（Rutin）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤以槐花米（为植物Sophora japonicaL的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高(含量可达12-16%)，可作为大量提取芦丁的原料。
芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水形成的苷。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。
溶解度：冷水中为1:10 000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。
芦丁具有维生素P样作用。
能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。
亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。
三、实验仪器与试剂【仪器】紫外灯蒸馏装置一套 250ml烧杯（一只） 500ml烧杯（两只）100ml三角瓶（一只）纱布色谱柱（Ф1.5×30cm）玻璃板（5×20cm 3片 2.5×7.5 8片）【试剂】硅胶层析用聚酰胺（60~100目）甲醇 70%工业乙醇槐米芦丁标准样四、实验内容与步骤1.芦丁的提取将粉碎好的槐米12g倒入500ml烧杯中，加沸水150ml，煮沸1h（在煮沸的过程中，可补加水），趁热用纱布过滤，残渣中加入100ml水，再煮沸30min，共进行两次，将两次滤液合并，放置，冷却。
（整理）天然药物萃取与分离习题答案.
（整理）天然药物萃取与分离习题答案.第⼀章总论习题⼀、选择题（⼀）单项选择题1. ⾼效液相⾊谱具有较好分离效果的⼀个主要原因是（）A. 吸附剂颗粒⼩B. 压⼒⽐常规⾊谱⾼C. 流速更快D. 有⾃动记录装置 2. 纸上分配⾊谱，固定相是（）A. 纤维素B. 滤纸所含的5~7%的⽔C.展开剂中极性较⼤的溶剂D. 醇羟基 3. 利⽤较少溶剂提取有效成分，提取较为完全的⽅法是（） A ．连续回流法 B. 加热回流法 C. 透析法 D. 浸渍法4. 某化合物⽤三氯甲烷在缓冲盐纸⾊谱上展开，其Rf 值随pH 增⼤⽽减少，这说明它可能是（）。
A. 酸性化合物B. 碱性化合物C. 中性化合物D. 酸碱两性化合物5. 通常要应⽤碱性氧化铝⾊谱分离，⽽硅胶⾊谱⼀般不适合分离的化合物为（）。
A. ⾹⾖素类化合物 B. ⽣物碱类化合物 C.酸性化合物 D. 酯类化合物6. 依次采⽤不同极性溶剂来提取药效成分应采取的极性顺序是（）A. H 23OH EtOAC CH 2Cl 2B.2Cl EtOAC 3OH H 2OC.H 2O 3EtOACCH 3OH2O2Cl 22Cl 27. 有效成分是指（）A ．需要提纯的成分 B. 含量⾼的成分 C. 具有某种⽣物活性的成分 D.⽆副作⽤的成分 8.下列溶剂中溶解化学成分范围较⼴的溶剂是（）。
A. ⽔ B. ⼄醇 C. ⼄醚 D. 苯9. 化合物Ⅰ的主要⽣物合成途径为（）。
OHH 3CO OHCH 3CH 3OA.MVA途径B. 桂⽪酸途径C. AA-MA途径D. 氨基酸途径10. 植物的醇提浓缩液中加⼊⽔，可沉淀（）A．树胶 B. 蛋⽩质 C. 树脂 D. 氨基酸11. 拟提取挥发性成分宜⽤（）A. 回流法B. 渗漏法C. ⽔蒸⽓蒸馏法D. 煎煮法12. 超临界流体萃取法适⽤于提取（）A. 极性⼤的成分B. 极性⼩的成分C. 离⼦型化合物D. 能⽓化的成分13. 索⽒提取回流法语常⽤回流提取法相⽐，其优越性是（）。
芦丁的提取与鉴定以及芦丁和槲皮素的柱色谱分离道
实验五芦丁的提取与鉴定以及芦丁和槲皮素的柱色谱分离芦丁Rutin又称芸香苷Rutoside是广泛存在于植物界的黄酮类化合物。
其中以槐花米、荞麦叶、桉树叶中含量较高均可作为提取芦丁的原料。
本实验以槐米为提取原料。
槐米为豆科植物槐树Sophora japonica L.的末开放花蕾其中芦丁含量高达23.5槐花开放后降至13.0。
槐米的主要化学成分为芦丁此外还含有槲皮素、白桦脂醇、槐二醇、三萜皂苷以及槐花米甲、乙、丙素等。
芦丁具有多方面的生理活性如抗炎、维生素P样作用、抗病毒、抑制醛糖还原酶作用等。
临床上用于防治脑溢血、高血压、视网膜出血、急性出血性肾炎等。
其衍生物三羟乙芸香苷troxerutin即维脑路通用以治疗脑血管病、视网膜水肿及出血。
一、目的和要求1、通过碱溶酸沉、水重结晶等方法要求得到纯品芦丁。
2、通过芦丁的水解制备其苷元槲皮素。
3、学习和掌握聚酰胺柱色谱法的原理和操作技术。
4、通过槲皮素的乙酰化反应要求得到纯品五乙酰化物。
二、主要成分结构和性质OOOROHOHOHOHRGlu-O-RhaRutinRHQuercetin 1、芦丁Rutin: 分子式C27H30O16.3H2O分子量664.51。
是黄酮苷类化合物为浅黄色粉末或极细的针状结晶水熔点176-178℃.无水芦丁熔点不恒定185-192℃成棕色215℃发泡分解. 溶解度:难溶于冷水1:8000略溶于沸水1:200冷乙醇1:300热乙醇1:30沸甲醇1:7易溶于吡啶和稀碱溶液中.微溶于丙酮、乙酸乙酯不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
芦丁分子中具有多个酚羟基显弱酸性易溶于碱液中酸化后又析出因此可用碱溶酸沉法来提取芦丁。
芦丁分子中含有邻二酚羟基在空气中易被光分解而变为暗褐色在碱性条件下更易被氧化分解硼酸盐能与邻二酚羟基结合从而达到保护的目的因此在用碱液加热提取芦丁时往往加入少量硼砂保护芦丁以减少其氧化分解。
2、槲皮素Quercetin: 分子式C15H10O7.2H2O分子量338.28。
中药化学题库大题
中药化学题库大题章节实验二试题：实验中芦丁和槲皮素的层析检识选用了何种担体？分离原理是什么？此种担体较常用的移动相是什么？为何选用AlCl3 作显色剂？写出槲皮素结构式。
【答案】1．聚酰胺2．原理是氢键吸附。
3．常用水—乙醇不同比例为移动相。
4 ．芦丁与槲皮素为黄酮类，且都有5-OH 、邻二酚羟基，槲皮素还有3-OH ，与AlCl3 反应可显黄绿色荧光。
编号：716 章节2.1 试题：简述中药化学成分划分概况。
（写出五种类型）题号868【答案】一．按物质基本类型：有无机成分、有机成分。
二．按化学结构母核或骨架：甙、黄酮、甾类、萜类、醌类等。
三．按酸碱性：酸性、中性、碱性成分。
四．按极性程度：亲脂性（非极性）、中等极性、亲水性（极性）。
五．有无活性：有效（有活性）成分、无效成分。
六．按物质代谢有一级代谢产物、二级代谢产物。
编号：718章节2.2 试题：某氯仿或乙醚中含有机酸、酚性成分、中性成分、碱性成分，如何用萃取法将它们分离。
可用流程表示。
编号：722章节4.3 试题：在羟基蒽醌中，羟基位置与酸性强弱有何关系？为什么？对碱的溶解性有何不同？题号874【答案】性OH酸性较强，a -OH酸性较弱。
1. 受羰基及p- n共轭效应的影响使B -OH酸性增强可溶于Na2CO3 ;2. 与羰基形成分子内氢键使a -OH酸性降低，不溶于Na2CO3，可溶于NaOH。
编号：723章节 4.6 试题：羟基蒽醌乙酰化时，乙酰化试剂有哪些种？欲保护a -OH，须用什么方法？为什么？题号875【答案】1 .有冰乙酸、醋酐、醋酐+硼酸、醋酐+硫酸、醋酐+吡啶。
2. 可用醋酐/ 硼酸作为乙酰化试剂。
3. 硼酸可与a -OH络合形成络合物，并且该络合物不稳定，加水可分解，恢复原结构。
编号：725章节 4.3 试题：羟基蒽醌的酸性与结构有什么关系？题号877【答案】1. 与位置及数目有关。
2 .a-OH的酸性小于B -OH ;3 .数目相同时：1 ）个a-OH时，1 , 8-二羟基酸性大于1 , 4或1 , 5-二羟基；2）1个a-OH、1个B-OH时，1 , 3-二羟基或1 , 6-二羟基酸性强；3）2个B-OH时，3 , 6-二羟基酸性最强、2 , 3-二羟基酸性则弱。
《中药化学》黄酮类化合物练习题及答案
《中药化学》黄酮类化合物练习题及答案一.单选题（来源自学考试）1.黄酮类化合物的基本碳架是（B）。
A.C6－C3B.C6－C3－C6C.C6－C6－C3D.C6－C6－C62.黄酮苷元在水中溶解度最大的一类是（C）。
A.黄烷醇类B.查耳酮类C.花色素类D.二氢黄酮醇类3.检查黄酮类化合物最常用的显色反应是（B）。
A.碘化铋钾反应B.HCl-Mg粉反应C.Mg(Ac)2反应D.乙酐-浓硫酸反应4.除下列哪点外，其它三点一般作为黄酮类化合物结构分类的依据（D）。
A.三碳链的氧化程度B.B环的连接位置C.三碳链是否与B环构成环状结构D.是否具有2-苯基色原酮的结构5．黄酮（a）.花色素（b）.二氢黄酮（c）三类化合物（羟基取代相同时）的水溶性从大到小排序是（ C ）。
A.>b>cB.a>c>bC.b>c>aD.b>a>c6.下列化合物中酸性处于第二强的是（A）。
A.7-羟基黄酮B.7，4′-二羟基黄酮C.5-羟基黄酮D.3，5-二羟基黄酮7.下列化合物中与四氢硼钠生成红色反应的是（B）。
A. 5，7，4’-三羟基黄酮B. 5，7，4’-三羟基二氢黄酮C. 3，5，7，4’-四羟基花色素D. 4，2’，4’，6’-四羟基查耳酮8.可用于区别3，5，7，4’-四羟基黄酮和5，7，4’-三羟基黄酮的反应是（C）。
A.盐酸-镁粉反应B.KOH反应C.锆-枸橼酸反应D.乙酸镁反应9.聚酰胺色谱的原理是（B）。
A.分配B.氢键缔合C.分子筛D.离子交换二.单选题1.黄酮类化合物早期又称黄碱素，其碱性原子指（ A）。
A.1位O原子B.4位酮羰基C.5位羟基D.B环苯基2.二氢黄酮.二氢黄酮醇类苷元在水中溶解稍大是因为（ D ）。
A.羟基多B.有羟基C.离子型D. C环为非平面型3.黄酮类化合物的颜色与下列哪项因素有关（D）。
A.结构中有酚羟基B.结构中有临二酚羟基C.分子中存在交叉共轭体系D.A+C项4.下列化合物中与四氢硼钠生成红色反应的是（B）。
天然药物化学实验报告（槲皮素的提取与鉴别）
天然药物化学实验报告（槲⽪素的提取与鉴别）天然药物化学实验报告⼀、实验题⽬：槐⽶中槲⽪素的提取分离及结构鉴定⼆、实验⽬的:通过对该选题进⾏资料查阅、⽅案设计、试验、结果分析等，让我⾃⼰学到⼀套系统、完整的槐⽶药效成分芦丁和槲⽪素进⾏基源鉴定、提取、分离和结构鉴定的⽅法，并通过此项训练，提⾼⾃⼰的动⼿操作能⼒及综合运⽤⾃⼰所学知识的能⼒，培养⾃⼰独⽴思考、分析问题、解决问题的能⼒。
掌握槐⽶中槲⽪素的提取及提取⽅法了解槲⽪素的药理作⽤及应⽤价值掌握槲⽪素的纯度检测掌握槲⽪素的结构鉴定的⽅法三、实验基本原理：本实验主要利⽤黄酮类化合物虽然有⼀定的极性，可溶于⽔，但却难溶于酸性⽔，易溶于碱性⽔，故可⽤碱性⽔提取，再将碱⽔提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。
以槐⽶为原料，采⽤煎煮法提取槐⽶有效成分芦丁，然后酸溶液⽔解获得槲⽪素粗品，⼄醇重结晶获得槲⽪素精品。
四、实验所⽤试剂、仪器的型号及⽣产⼚家：（⼀）实验试剂，见下表：序号名称数量规格⽣产⼚家1 95%⼄醇溶液25ml 500ml／瓶 AR 天津天⼒2 浓H2SO4 12ml 500ml／瓶 AR 天津天⼒3 甲醇10ml 500ml／瓶 AR 天津天⼒4 ⽆⽔⼄醇43ml 500ml／瓶 AR 天津天⼒5 纯净⽔1500ml 18L/桶万家纯⽔6 硅胶GF254 30g 500g／瓶青岛海浪薄层层析（⼆）实验仪器，见下表：序号名称数量型号⽣产⼚家1 电⼦天平1台IM-B2002 余姚市纪铭称量校验设备有限公司2 圆底烧瓶1个GG-17 1000ml 蜀⽜3 烧杯1个GG-17 1000ml 蜀⽜4 烧杯1个 GG-17 500ml 环球5 烧杯1个GG-17 250ml Jing Xing6 量筒1个100ml BOMEX7 量筒1个10ml 旌湖8 直型冷凝管1个BOMEX9 75?弯管1个10 橡胶管2条11 移液管1个10ml12 玻璃棒1个直径7mm 长40cm ⾼邮亚泰13 尾接管1个BZ24129 HENG TAJ14 布⽒漏⽃1个15 抽滤瓶1个GG-17 500ml 蜀⽜16 滤纸1张17 玻璃漏⽃1个18 研钵1套19 胶头滴管1个20 薄层板10个21 展开缸1个P-1 100×100 上海信谊仪器⼚22 紫外光谱仪1台UV-8三⽤紫外分析仪⽆锡科达仪器⼚23 熔点测定仪1台X-6显微熔点测定仪北京泰克仪器有限公司24 真空泵1台SHD-III型循环⽔式多⽤真空泵保定⾼新区阳光科教仪器⼚25 电热套1台98-1-C型数字控温电热套天津市泰斯特仪器有限公司五、实验⽅法创新之处：六、⾃制或创造的实验条件：利⽤饮料瓶装取废液，以备不时之需；七、实验流程及操作⽅法：（⼀）实验流程流程：槐⽶粗粉（150克）加⽔800ml 加热，加氢氧化钠调PH8-8.5，升温⾄80℃，加硼砂3.2克，搅拌加热，95℃保温50分钟，趁热过滤，滤渣再如上提取⼀次，合并滤液。
芦丁和槲皮素的化学检识
精选课件
实验步骤
• 芦丁和槲皮素的化学检识
(1)对不同强度碱液的溶解度试验：
芦丁
槲皮素
精选课件
实验步骤
(2)浓硫酸和浓盐酸反应： (3)Molish反应：
精选课件
实验步骤
精选课件
（3）
H O
O
O H O
O H
H O
O
O H
A lC l3
OO A l3+
O A l3+
O H O
O
H C l/H 2O
OO A l3+
O H O H
形成络合物的能力：
黄酮醇3-OH >黄酮5-OH（二氢黄酮5-OH）> 邻二酚羟基 > 二氢黄酮醇5-OH 邻二酚羟基和二氢黄酮醇5-OH在酸性条件下不与AlCl3络合 ； 但不在酸性条件下，五者皆与Al3+络合； 形成络合物越稳定，红移越多。
芦丁的鉴别及含量测定
小组成员：陈丽、陈惠渝、 黄雄、李钰川
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实验目的
• 熟悉黄酮类化合物的化学检识的常用方法 • 掌握芦丁紫外吸收光谱测定的方法与原理 • 学习用紫外分光光度法测定芦丁提取物的含量
精选课件
实验原理
芦丁和槲皮素的化学检识
1.对不同强度碱液的溶解度试验 2.浓硫酸和浓盐酸反应 3.Molish反应 4.盐酸-镁粉试验 5.FeCl3反应 6.AlCl3反应
芦丁的紫外吸收光谱的测定：
7
O
R O
苯甲酰基
4'
7
O
实验三 芦丁、槲皮素及糖的检识
实验三 芦丁、槲皮素及糖的检识
一、实验目的：
1.掌握纸色谱、聚酰胺薄层色谱的操作技术；
2.了解黄酮类化合物和糖类的一般性质。
二、实验原理和步骤
1. 糖的纸色谱检识
糖溶液的制备：
水解母液（20ml
） 调至pH=7 玻璃漏斗过滤 滤液浓缩至2ml ，待用
2. 芦丁、槲皮素的薄层色谱检识
芦丁和槲皮素样品：各取精制芦丁和槲皮素3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，待用。
聚酰胺薄层色谱
吸附剂：聚酰胺预制板
展开剂：甲醇-水（8：2）
点样：标准芦丁、标准槲皮素、芦丁样品、槲皮素样品
显色剂：1%AlCl3的乙醇溶液或在UV365nm下观察荧光斑点位置
纸色谱
吸附剂：滤纸条
展开剂：BAW(4:1:5)
点样：标准芦丁、标准槲皮素、芦丁样品、槲皮素样品
显色剂：1%AlCl3的乙醇溶液或在UV365nm下观察荧光斑点位置
3. 糖类成分的检识反应（molish反应）
分别取制备的芦丁和槲皮素样品1ml，加入2-3滴10%α-萘酚溶液，摇匀，倾斜试管，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两界面产生的变化。
4.黄酮类化合物的检识反应
盐酸——镁粉反应（黄酮母核）
各取制备的芦丁和槲皮素样品1ml，加2滴浓盐酸，在酌加少许（50mg）镁粉，注意观察颜色变化情况。
醋酸镁反应
各取制备的芦丁和槲皮素样品0.5ml，加等体积1%醋酸镁醇溶液，注意观察颜色变化情况。
（黄色荧光）。
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二、实验原理
• 2）. 展开剂的极性较小（脂溶性溶剂所占 比例>50%）时，如：苯：丁酮：甲醇 = 60： 20：20; 洗脱先后顺序: • 极性小的先洗脱，极性大的后洗脱。 • 用正相色谱理论来解释。
二、实验原理
• 二）．黄酮苷元之间的比较： • 用氢键吸附的原理来解释。
二、实验原理
• 本实验利用聚酰胺在乙醇-水系统中，洗 脱原理与RP-18的洗脱原理类似，因此，芦 丁先从聚酰胺柱上洗脱出来，槲皮素后从 聚酰胺柱上洗脱出来。
三．实验操作步骤
• 4. 收集 • 5. 检测 用试管收集，每试管接收10 ml。 分离结果用TLC检测。
（二）芦丁和槲皮素聚酰胺色谱柱层析后的 试样进行聚酰胺薄膜层析操作
• 1. 配制展开剂，甲醇：丙酮：苯＝8：1：1 • 2. 将展开剂倒入展开缸中，展开缸中展开剂 的高度4mm左右。 • 3. 画基线，基线距底边1.0～1.5cm； • 4. 点样（点样顺序：试样1、试样2、芦丁、 槲皮素)，点样一般为圆点，点样直径一般不 大于2 mm，点样时必须注意勿伤薄层表面。
（二）芦丁和槲皮素聚酰胺色谱柱层析后的 试样进行聚酰胺薄膜层析操作 • 5. 倾斜展开缸，使展开剂到入展开缸的另 一个槽中，聚酰胺薄膜浸入展开剂的深度 为距圆点5 mm为宜，一般展距为8 cm,取出 薄层板，晾干。 • 6. 喷1％的AlCl3显色。 • 7. 实验结果见图1。
四．体会与讨论
• 1. 画出聚酰胺薄膜层析鉴定芦丁和槲皮素 分析图
实验四 柱层析分离芦丁和槲皮素以 及聚酰胺TLC鉴定芦丁和槲皮素
一 、实验目的
• 掌握用聚酰胺柱层析分离芦丁和槲皮素 的方法。
二、实验原理
1. 槲皮素与芦丁的结构
OH HO O OH
OH OH O
槲皮素
HO O
OH
OH
O Glc OH O
Rha
芦丁
二、实验原理
• 根据聚酰胺的“双重功能”来进行分离。 • 一）．比较黄酮苷 • 1. 展开剂的极性较大（水溶性溶剂所占比 例>50%）时，如：含水醇或水：甲醇：丁 酮：乙酰丙酮=65：15：15：5; 洗脱先后 顺序: • 三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元 •验操作步骤
• （一） 柱层析分离芦丁和槲皮素 1. 装柱 聚酰胺5g，加水30 ml，搅 匀，倒入层析柱中（打开层析柱活塞， 让水滴出，让聚酰胺自由沉降而填实。 注意保持液面1cm高度。）
三．实验操作步骤
• 2. 加样 芦丁和槲皮素各0.03g ,加甲醇 2ml溶解，加聚酰胺0.03 g，在水浴上除尽 甲醇，将所拌样品轻轻的置于柱上端。 3. 洗脱 加好样品后，先用50%的乙醇冲洗， 待两层析带之间的距离约1cm后，再用90%的 乙醇冲洗。