幽门螺旋杆菌分型检测
口腔中幽门螺杆菌耐药性分型检测的方法和试剂盒[发明专利]
![口腔中幽门螺杆菌耐药性分型检测的方法和试剂盒[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/87682f0b5627a5e9856a561252d380eb62942309.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010994688.5(22)申请日 2020.09.21(71)申请人 南开大学地址 300071 天津市南开区卫津路94号(72)发明人 郗日沫 佟悦 王倍 王朔 甘奇 张瑞肖 (51)Int.Cl.C12Q 1/689(2018.01)C12Q 1/6858(2018.01)C12Q 1/04(2006.01)C12N 15/11(2006.01)(54)发明名称口腔中幽门螺杆菌耐药性分型检测的方法和试剂盒(57)摘要由于胃活检样本内窥镜取样困难、成本高，幽门螺杆菌(Hp)生长条件苛刻难以培养，Hp耐药性的侵入性诊断方法并不理想。
本发明提供一种非侵入性幽门螺杆菌耐药性检测的分子诊断方法，采用巢氏PCR技术结合测序技术对粪便样本进行快速检测与解析，利用核苷酸序列如表2及表3所示的引物联合检测23SrRNA，gyrA ,PBP1,16SrRNA ,porD ,oorD，rpoB等7种耐药基因的52个位点的突变及rdxA耐药基因的随机突变，进而对目前临床常用7种抗生素耐药情况进行判定。
本发明属于生物技术领域，快速灵敏，适合临床应用，在指导幽门螺杆菌患者的个性化诊疗根除方面有较大应用前景。
权利要求书2页 说明书14页序列表5页CN 112760391 A 2021.05.07C N 112760391A1.一种检测和判定幽门螺旋杆菌耐药性的诊断方法，其特征在于，此方法为非侵入性诊断，该幽门螺旋杆菌的来源为口腔内唾液及牙菌斑。
2.应用如权利要求1所述的诊断方法，其特征在于，采用巢氏PCR技术结合测序技术，灵敏度、特异性与准确率较高。
3.应用如权利要求1所述的诊断方法，其特征在于，口腔内唾液及牙菌斑标本进行全基因组提取时，采用改良的碘化钾提取方法，整个提取流程操作简单、耗时短、成本低，与试剂盒法相比，得到的后续PCR结果相同，能够满足当前实验需求，适合于临床样本的快速提取。
pcr分型检测胃黏膜组织中幽门螺旋杆菌的应用研究
２ 结果
２ １ 病理甲苯胺蓝特殊染色法与荧光探针 ＰＣＲ 法检测结果
比较 在 １００ 例样本中ꎬ染色法检出 Ｈｐ 阳性 ６０ 例ꎬ阴性 ４０
例ꎬＨｐ 检出率为 ６０％ ꎮ 荧光 ＰＣＲ 法检出 Ｈｐ 阳性 ６３ 例ꎬ阴性
７６ 例ꎬ非活动性胃炎 ２４ 例ꎮ
１ ２ 研究方法 所有患者胃黏膜石蜡切片标本均应用 ２ 种
方法检测 Ｈｐ:甲苯胺蓝组织切片染色法、荧光探针 ＰＣＲ 法ꎮ
１ ３ 甲苯胺蓝特殊染色法( 幽门螺杆菌双重特殊染色) 将
胃粘膜石蜡切片放在盛有二甲苯的染色缸中脱蜡ꎬ然后用蒸
基金项目:泉州市科技计划项目( 项目编号:２０１８Ｚ１５５)
染分为四级ꎻ阴性 － :无 Ｈｐꎻ阳性 ＋ :少量 Ｈｐꎻ阳性 ＋ ＋ :发现
散在分布的或偶有成丛的 Ｈｐꎻ阳性 ＋ ＋ ＋ :大量弥漫的 Ｈｐꎮ
荧光探针 ＰＣＲ 法:根据荧光定量 ＰＣＲ 原理ꎬ针对幽门螺
生 ＣａｇＡ 和 ＶａｃＡꎬ国外的研究多支持Ⅰ型菌株感染与消化性
杆菌保守基因序列设计荧光探针和特异性引物ꎬ通 过 荧 光
在泉州市儿童医院因消化道不适就诊接受胃镜检查的患者胃
配对卡方检验( ＭｃＮｅｍａｎｒ 检验) ꎬＰ < ０ ０５ 为差异有统计学意
仅能够辅助临床医生针对不同患者出具幽门螺杆菌治疗的个
１ １ 研究对象 回顾选取我院 ２０１７ 年 ８ 月 ~ ２０１７ 年 １０ 月
黏膜石蜡切片标本 １００ 例ꎮ 其中经病理诊断为活动性胃炎
结果ꎬ评估检测是否存在差异ꎻ比较两种方法检测结果与活动性胃炎的相关性ꎮ 方法 选取 ２０１７ 年 ８ 月 ~ ２０１７ 年 １０ 月在泉州市儿童医院因
消化道不适就诊接受胃镜检查的患者胃黏膜石蜡切片标本 １００ 例ꎬ分别采用上述两种方法进行 Ｈｐ 检测ꎮ 结果 检出阳性符合率达 ９６ ７％ ꎬ阴
幽门螺旋杆菌
传统检测方法
C13 C14 幽门螺旋杆菌的血液检测
幽门螺旋杆菌抗体IgG
幽门螺杆菌毒性:
细胞毒素CagA 空泡毒素VacA
致病强
尿素酶
尿素酶A UreA 尿素酶B UreB
无致病性
只是表示幽门螺旋杆菌存在
分型比较
分型
CagA VacA UreA UreB 判断
结果 无感染 无毒性 无
症状
治疗
无需 治疗
个人 意愿
个人 意愿
选择 治疗
咨询 医生
建议 治疗
HP根治三联或四联疗法 请在医生指导下使用
幽门螺旋杆菌（HP）
在人群中：
阳性检出率：57.9% 其中：45.5%为Ⅰ型 54.5%为Ⅱ型
幽门螺旋杆菌（HP）
Ⅰ型HP抗体阳性 CagA,VacA任意一种或两种同时 阳性
幽门螺旋杆菌（HP）
Ⅱ型HP抗体阳性 只有UreA,UreB任意一种或两种同 时阳性
幽门螺旋杆菌（HP）
阴性结果： 未见任何HP抗体
说明
+ + + + + + + +
+ + 有感染 无毒性 无 + +
+
细胞毒素：会引起炎症 空泡毒素：主要毒力致病因子 尿素酶A HP 存在依据 尿素酶B HP 存在依据 UreA和/或UreB+说明有感染 CagA和/或VacA+说明有毒性 胃部不适症状，胃镜结果提示
-
有感染 有毒有 无 有
有感染 有毒性 无 有
幽门螺旋杆菌标准值
幽门螺旋杆菌标准值幽门螺旋杆菌是一种常见的胃肠道病原菌，也是胃癌和十二指肠溃疡的主要致病因素之一。
因此，对于幽门螺旋杆菌的检测和诊断具有重要意义。
下面是幽门螺旋杆菌检测的标准值及相关内容。
一、幽门螺旋杆菌检测标准值1. 快速尿素酶测试（RUT）：阴性2. 红细胞凝集试验（RBC）：阴性3. 呼气氢试验：正常值<20ppm4. 尿素酶链式反应（PCR）检测：阴性5. 幽门螺旋杆菌抗体检测（血清学）：血清幽门螺旋杆菌抗体IgG数值正常值<10IU/ml，IgA数值正常值<4IU/ml。
二、幽门螺旋杆菌检测方法1. 快速尿素酶测试（RUT）：该方法利用特定酶判定幽门螺旋杆菌存在的方法，需要从胃部粘膜分泌物中采集样本进行检测。
2. 红细胞凝集试验（RBC）：该方法通过测定幽门螺旋杆菌抗体处理红细胞的凝集能力来判定幽门螺旋杆菌是否存在。
3. 呼气氢试验：该方法是一种无创检测方法，通过检测呼气气体中氢气浓度的变化来判断幽门螺旋杆菌的存在。
4. 尿素酶链式反应（PCR）检测：该方法是一种高度敏感和特异性的分子生物学检测方法，能够快速准确地检测幽门螺旋杆菌。
5. 幽门螺旋杆菌抗体检测（血清学）：该方法通过检测血清中的IgG 和IgA抗体来判断幽门螺旋杆菌的感染情况。
三、幽门螺旋杆菌感染的症状常见的幽门螺旋杆菌感染症状包括：1. 腹痛和不适感。
2. 消化不良和胃灼热。
3. 恶心和呕吐。
4. 食欲下降和体重减轻。
5. 腹泻和便秘。
四、幽门螺旋杆菌感染的危害1. 导致胃炎和胃溃疡，甚至胃癌的发生。
2. 导致恶心、呕吐、腹泻等症状，严重者可能导致水分和电解质的失衡。
3. 幽门螺旋杆菌感染也与其他疾病如心血管疾病、胆囊炎、关节炎等有关。
五、幽门螺旋杆菌感染的预防和治疗1. 加强个人卫生，避免食用不洁食物和饮水。
2. 定期进行消化系统检查，避免病情进一步恶化。
3. 采用幽门螺旋杆菌治疗方案进行治疗，包括抗生素、质子泵抑制剂、降酸药等。
两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较
两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较目的为考核南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌（Hp）抗体及其分型试剂的敏感性和特异性，从而判断其在临床诊断中的应用价值。
方法临床上采用经SFDA注册的深圳市伯劳特生物制品有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）检测幽门螺杆菌抗体及其分型（分为CagA、VacA和Urease），共检测血清476份，检测结果与对比试剂不同的标本用第三方经SFDA认证的试剂进行复核，对于Urease不符合的病例，采用北京康美天鸿生物科技有限公司的幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）进行检测，对于CagA和VacA不一致的标本，则采用上海研域生物科技有限公司提供的ELISA试剂盒进行检测。
结果南京大渊生物技术工程有限责任公司生产的蛋白芯片法检测幽门螺杆菌抗体及其分型试剂CagA阳性符合率94.5%，阴性符合率96.5%，总符合率95.8%（P>0.05）；Urease阳性符合率95.1%，阴性符合率92.7%，总符合率95.4%（P>0.05）；VacA阳性符合率91.6%，阴性符合率97.1%，总符合率95.2%（P>0.05）；两种方法结果经统计学检验差异无统计学意义。
结论经以上结果的分析，本次临床试验的有效病例476例，大渊Hp 分型检测试剂盒（蛋白芯片法）与伯劳特幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）的一致率均在90%以上，产品质量达到临床使用要求。
标签：幽门螺杆菌抗体；分型；蛋白芯片法；免疫印迹法幽门螺旋杆菌（helicobacter pylori，Hp）是一种革兰氏阴性杆菌，是能够在人的胃中生存的唯一微生物种类。
幽门螺旋杆菌外形为S形或弧形弯曲，细菌可以穿过胃黏膜而定居至胃上皮细胞，又能产生大量尿素酶，分解尿素在菌体周围形成一股碱性的“氨云”，可以抵抗胃中的酸性环境，免受胃酸杀死。
1 材料与方法1.1 研究对象随机选取2013年1月～2013年2月本院门诊及住院患者476例。
幽门螺杆菌分型抗体1型和ii型分型的原理
幽门螺杆菌分型抗体1型和ii型分型的原理嘿，朋友们！今天咱们来唠唠幽门螺杆菌分型抗体里的1型和II型分型的原理，这事儿可有趣又重要呢！咱先得知道幽门螺杆菌这小家伙，它就像个隐藏在咱们胃里的小捣蛋鬼。
幽门螺杆菌有不同的类型，这就跟人有不同性格似的。
1型和II型可不一样，那科学家们是怎么把它们区分出来的呢？这就涉及到它们产生的抗体啦。
想象一下，幽门螺杆菌就像一个个小小的外星生物入侵了咱们的胃部这个星球。
咱们的身体呢，可不会坐以待毙，身体里的免疫系统就像是星球的防御部队。
当幽门螺杆菌进来的时候，免疫系统就开始制造武器来对抗它们，这些武器就是抗体。
1型幽门螺杆菌啊，它就像是个比较“坏”的小坏蛋。
它会产生一些特殊的物质，这些物质会让咱们的胃变得很不舒服，容易引起比较严重的胃部问题。
1型幽门螺杆菌的这些特殊之处，会让身体的防御部队，也就是免疫系统，产生一种特定模式的抗体反应。
这就好比这个小坏蛋有独特的作恶手段，身体就针对这些手段打造特定的反击武器。
那II型幽门螺杆菌呢？它就相对没那么“坏”，有点像那种偶尔调皮一下的小捣蛋。
它引起的免疫反应，也就是身体制造的抗体情况，和1型是有区别的。
打个比方，如果1型是那种明目张胆搞破坏的大反派，II型可能就是偷偷摸摸做点小坏事的小喽啰，身体对待它们的防御策略，也就是制造的抗体类型和模式自然就不同。
我有个朋友，他老是胃不舒服，去医院一查，发现感染了幽门螺杆菌。
医生就给他做了这个分型检测。
他当时就特别好奇，问医生：“这分型到底是咋回事啊？”医生就跟他解释说：“你看啊，就像不同的敌人有不同的弱点，我们通过检测你身体里针对幽门螺杆菌的抗体类型，就能知道你感染的是哪种幽门螺杆菌。
如果是1型，那我们就得更加重视，因为它可能带来的危害更大。
”我朋友听了之后，恍然大悟，就像突然打开了一扇知识的新大门。
从科学原理上来说，这两种类型的幽门螺杆菌在基因层面就存在差异。
这些基因差异就导致了它们在感染人体后，表面的一些蛋白质或者其他分子的表达不一样。
幽门螺杆菌抗体分型检测在上消化道疾病中的应用价值
幽门螺杆菌抗体分型检测在上消化道疾病中的应用价值发布时间：2023-06-25T11:54:29.711Z 来源：《中国医学人文》2023年2月2期作者：畅彦红[导读]幽门螺杆菌抗体分型检测在上消化道疾病中的应用价值畅彦红（大庆市第五医院；黑龙江大庆163711）【摘要】目的：分析幽门螺杆菌（Hp）抗体分型检测在上消化道疾病中的应用价值。
方法：选取我院2020年1月-2023年收治的100例上消化道疾病患者为研究对象，所有患者均行胃镜检查、检测Hp感染情况及抽取静脉血，采用免疫印迹法检测患者血清中Hp抗体分型，包括细胞毒素相关蛋白A（CagA）、空泡毒素相关蛋白A（VacA）、尿素酶A（UreA）、尿素酶B（UreA）。
结果：CagA及VacAHp抗体阳性率在GC组最高，FD组最低；GC组患者的CagA抗体及VacAHp抗体阳性率高于其他组；GC组UreA和UreB抗体均高于其他各组，其中和CSG、CAG、RE、FD组比较差异明显；PU组UreA和UreB抗体均高于CSG、CAG、RE、FD、PU组（P＜0.05）；其与组间无明显差异（P＞0.05）。
CSG、CAG、PU、GC、RE、FD组HpⅠ型感染率均显著高于HpⅡ型；其中GC组HpⅠ型感染率显著高于CSG、RE、FD组；PU 组、CAG组HpⅠ型感染率高于FD组（P＜0.05）；其与组间无差异（P＞0.05）。
结论：上消化道疾病患者普遍存在Hp感染，其中叫人破能够以发生感染的是PU、GC患者，Hp抗体主要为Ⅰ型，采用Hp抗体检测可评估患者疾病情况，并对其预后治疗提供可靠依据。
【关键词】幽门螺杆菌抗体分型检测；上消化道疾病；应用价值随着医学研究中对HP的深入了解，发现HP是引起上消化道疾病的主要原因。
根据调查结果发现，国内HP的感染率比较高，且感染HP 对患者的机体有一定程度的损伤，需要及时进行相应的预防和治疗。
Hp是一种微厌氧细菌，可导致患者发生慢性胃炎、消化性溃疡等疾病，若不及时进行治疗则会发展为胃癌，严重威胁患者生命安全。
幽门螺旋杆菌如何检测
幽门螺旋杆菌如何检测幽门螺旋杆菌作为寄生在胃黏膜中的菌群，患者发生感染后，容易导致人们感到胃部不适，有些人在感染后发生胃炎及消化性溃疡。
幽门螺旋杆菌引发的疾病较多，人们往往在感染前无法发现感染，等到出现胃部不适后，进入临床诊断已经确诊疾病。
现阶段，幽门螺旋杆菌已经被世界卫生组织认为是一种致癌因子，医学界对幽门螺旋杆菌感染的关注度增高。
对此，人们应当认识到幽门螺旋杆菌如何检测，等待身体出现不适症状后，及时进入医院完成检查，那么，幽门螺旋杆菌究竟是什么？如何进行检测呢？幽门螺杆菌是什么幽门螺旋杆菌是人们身体中常见的菌群，不同地区及国家发病率存在差异，与人们生存的地区及人口密集情况相关，幽门螺旋杆菌会随着人们年龄增加，发生率随之增加。
在发展中国家，幽门螺旋杆菌感染的概率非常高，半数以上的人群会出现幽门螺旋杆菌感染，而发达国家发生感染的概率则相对较低。
幽门螺旋杆菌是具有传染能力的菌群，消化道传播的概率高，也有人群通过粪便及口腔传播。
粪便传播与人们的饮食结构相关，实物中含有幽门螺旋杆菌，在排便后，粪便中也会出现幽门螺旋杆菌。
家长经常亲吻婴儿，也容易诱发幽门螺旋杆菌感染，这种便是经口传播，也有一些医院对感染物品处理不恰当，导致人们出现幽门螺旋杆菌感染。
对菌群属性进行分析，幽门螺旋杆菌属于革兰阴性菌，呈现螺旋状或者海鸥状，幽门螺旋杆菌容易诱发一些慢性炎性病变，包括慢性胃炎或者消化道溃疡。
所以，面对幽门螺旋杆菌人们无需害怕，经常参与体检，或者在胃肠道感到不适后及时进入医院检查，均能发现幽门螺旋杆菌，经过有效的治疗后，可消除幽门螺旋杆菌。
幽门螺旋杆菌如何检查呢幽门螺旋杆菌作为一种胃肠道中的革兰阴性菌，对生活条件要求较高，也会对人们的人体产生重大的损害。
菌群主要是对人们的胃黏膜产生影响，导致胃黏膜破坏，从而发生不同类型的胃部病变。
长此以往，人们没有重视，容易导致患者发生胃部癌性病变，甚至导致人们死亡。
那么幽门螺旋杆菌究竟如何检测呢，以下几种方法均具有适用性。
抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值
２０２１年８月 第１５期影像学及诊断检验抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值李春鸿，林养，吴春芳，杨康土湛江市第四人民医院，广东 湛江 524008【摘要】目的：探讨抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值。
方法：选取健康体检者200名，使用免疫印迹法进行幽门螺杆菌抗体分型检测，根据抗体分型分为I型(98例)和II型(102例)，记录两组患者的幽门螺杆菌感染情况。
结果：①200名体检者中共发现幽门螺杆菌感染140例，幽门螺杆菌感染率为70.0%。
其中I型组感染84例，感染率为42.0%；感染抗体分型主要是细胞毒素、空泡毒素、尿素酶A、尿素酶B，均为阳性20例，占23.8%；细胞毒素、尿素酶B阳性10例，占11.9%；II型组感染56例，感染率为28.0%，尿素酶B为阳性，细胞毒素、空泡毒素、尿素酶A为阴性最为常见，10例，占17.9%，其次为尿素酶A为阳性、细胞毒素、空泡毒素、尿素酶B为阴性，3例，占5.4%，尿素酶A与尿素酶B阳性、细胞毒素、空泡毒素为阴性，3例，占5.4%。
②幽门螺杆菌抗体分型I型患者呼气实验阳性率52.4%，显著高于抗体分型II型患者呼气实验阳性率10.7%，P<0.05。
结论：抗体分型检测有助于诊断幽门螺杆菌感染，提高诊断水平，值得临床推广。
【关键词】抗体分型检测；幽门螺杆菌；感染[中图分类号]R57 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249(2021)09-0196-02幽门螺杆菌是寄生在人体胃黏膜表层的病原菌，其不仅是慢性活动性胃炎、消化性溃疡等疾病的重要诱因，而且与胃癌的发生、发展也有直接关系[1]。
本文对抗体分型检测在幽门螺杆菌感染诊断中的应用价值进行了探讨，现报道如下：1 资料与方法1.1一般资料 选取2019年1月～2019年12月的健康体检者200名，其中，男性122例，女性78例，年龄在18～82岁之间，平均45.9±5.8岁。
幽门螺旋杆菌五分型标准
幽门螺旋杆菌五分型标准
幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori）是一种革兰氏阴性杆菌，常定植于胃黏膜上。
在幽门螺旋杆菌的研究中，科学家们发现了不
同的分型标准，其中比较常见的是根据细菌的表面抗原进行分类，
主要包括cagA基因和vacA基因的分型。
cagA基因是编码细菌细胞质蛋白的基因，它的存在与幽门螺旋
杆菌引起的胃炎、溃疡和胃癌等疾病密切相关。
根据cagA基因的多
态性，幽门螺旋杆菌可分为cagA阳性和cagA阴性两种类型。
cagA
阳性菌株通常与更严重的胃黏膜病变和胃癌风险增加相关。
另一个常见的分型标准是vacA基因的分型。
vacA基因编码的
毒力因子能够导致细菌对胃部组织的损害。
根据vacA基因的多态性，幽门螺旋杆菌可分为不同类型，包括s区（s1和s2）和m区（m1
和m2）。
不同的vacA基因型与幽门螺旋杆菌相关疾病的发生和发
展密切相关。
除了cagA和vacA基因的分型外，还有一些其他的分子标记，
比如iceA基因、dupA基因等，这些基因的存在也与幽门螺旋杆菌
引起的疾病相关性有所不同。
总的来说，幽门螺旋杆菌的五分型标准主要是基于其不同基因型的分类，这些基因型与幽门螺旋杆菌相关疾病的发生和发展密切相关。
通过对不同基因型的研究，可以更好地了解幽门螺旋杆菌的致病机制，为相关疾病的预防和治疗提供更有效的策略。
两种方法检测幽门螺旋杆菌抗体及其分型的比较
率 ９４．５％，阴性符合率 ９６．５％，总符合 率 ９５．８％ （Ｐ＞ Ｏ．０５）；Ｕｒｅａｓｅ阳性符 合率 ９５．１％，阴性符合率 ９２．７％，总符合
率 ９５．４％ （Ｐ＞ ０．０５）；ＶａｃＡ阳性符合 率 ９１．６％，阴性符合率 ９７．１％，总符合率 ９５．２％ （Ｐ＞ ０．０５）；两种 方法结 果 经统计 学检验差 异无统 计学意义 。结论 经 以上结果 的分析 ，本次 临床试验 的有效病 例 ４７６例 ，大渊 Ｈｐ分型检 测
ｗｉｔｈ ＶａｃＡ，ｔｈｅ ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｂｙ Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｙａｎｙｕ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，ＬＴＤ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｅｓｔｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｉｐ ｍｅｔｈｏｄ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｄａｙｕａｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．，ＬＴＤ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆ ｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔｓ，ｗｈｅｒｅ ＣａｇＡ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ９４．５％ ，ｎｅｇａｔｉｖｅ
试 剂的敏感 性 和特 异性 ，从 而判断 其在临 床诊断 中的应 用价值 。方法 临床上采 用经 ＳＦＤＡ注册 的深 圳市伯 劳特
生 物制 品有限 公司 的幽门螺杆 菌抗 体分 型检测试 剂盒 （免疫 印迹 法 ）检测 幽 门螺 杆菌 抗体及其 分 型（分 为 ＣａｇＡ、 ｖａｃＡ和 ｕｒｅａｓｅ），共检测血 清 ４７６份 ，检测结 果与对 比试剂 不同 的标 本用第三方 经 ＳＦＤＡ认证 的试剂进行复 核 ，对
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型
获奖证书
免疫印迹法背景介绍
免疫印迹技术：它与内切酶的发现和PCR基因扩增技术一起，在上世纪做 为分子生物学领域三大发现之一。给人类生物工程带来了革命性进展。
基本原理：将提取的蛋白混合物先进行SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白 质按照分子量大小不同分离然后再转印至印迹膜，显色后按照显色带位置 不同判断分子量多少和所含蛋白质数量，称为Southern blot。
参考：张万岱，胡伏莲等. 中国自然人群幽门螺杆菌感染的流行病学调查.，2006
HP检测的方法
侵入性方法（依赖胃镜活检）
快速尿素酶试验（RUT） 病理切片染色 细菌培养 基因检测（PCR等）
非侵入性方法（不依赖内径检查）
13C或14C尿素酶呼气试验（UBT） 粪便Hp抗原检测（HpSA) 血清和分泌物抗体检测 基因芯片，蛋白芯片检测等
深圳市伯劳特公司
国内刚刚拿到、唯一有产品注册证的幽门螺杆菌分型检测试剂盒生产商
研发过程
2000年7月获得中检所新生物制品审评检验报告 2002年5月上海医疗器械质量监督检验中心的注册检验 2002年7月瑞金医院的临床试验报告 2002年7月长宁区中心医院的临床试验报告 2002年8月上海市药监局颁发医疗器械注册证 2003年12月国家药监局颁发医疗器械注册证 2005年6月和2007月7月北京医疗器械质量监督检验中心的注 册检验 2007年12月获得国家科技进步二等奖。 2010年1月完成上海长海医院、青海省人民医院和吉林大学 中日友谊医院临床试验。 2010年3月获得中国药品生物制品检定所 注册检验报告 2011年7月获得国家食品药品监督管理局 产品注册证
如何检测幽门螺杆菌的方法
如何检测幽门螺杆菌的方法首先，最常见的检测方法是呼气试验。
这种方法通过让患者饮用一种标记氢或尿素的溶液，然后在一定时间内收集患者的呼出气体样本，通过质谱仪或呼气氢试验仪来检测氢或二氧化碳的浓度变化，从而判断是否感染了幽门螺杆菌。
这种方法无创伤且准确率较高，是常用的检测方法之一。
其次，幽门螺杆菌抗体检测也是一种常用的方法。
这种检测方法通过采集患者的血液样本，检测其中的抗体水平来判断是否感染了幽门螺杆菌。
虽然这种方法简单易行，但是需要注意的是，由于抗体检测可能受到其他因素的干扰，因此结果可能存在一定的假阳性或假阴性。
另外，胃镜检查也是一种直接观察幽门螺杆菌感染情况的方法。
通过胃镜检查，医生可以直接观察胃黏膜表面的情况，进行活检并进行幽门螺杆菌的快速尿素酶测试，从而确定是否感染了幽门螺杆菌。
虽然这种方法较为直接，但是需要进行内窥镜检查，对患者来说是一种较为不适的检测方式。
最后，分子生物学检测方法也是一种准确率较高的幽门螺杆菌检测方法。
这种方法通过采集患者的胃黏膜组织样本，利用PCR或原位杂交等技术来检测幽门螺杆菌的DNA或RNA，从而判断是否感染了幽门螺杆菌。
这种方法准确率较高，但是需要进行组织采集，对患者来说是一种较为创伤的检测方式。
总的来说，针对幽门螺杆菌的检测方法有呼气试验、抗体检测、胃镜检查以及分子生物学检测等多种方式。
每种方法都有其优缺点，医生应根据患者的具体情况来选择合适的检测方法。
及早检测幽门螺杆菌对于预防和治疗胃部疾病具有重要意义，希望本文介绍的方法能够对大家有所帮助。
幽门螺杆菌抗体分型流程
幽门螺杆菌抗体分型流程嘿，朋友们！今天咱就来讲讲幽门螺杆菌抗体分型流程。
你可别小瞧了这幽门螺杆菌，它就像个调皮的小捣蛋，在咱们的胃里捣乱呢！那怎么知道它是哪种类型的捣蛋鬼呢？这就得靠抗体分型啦！首先呢，得去医院找医生开个检查单。
这就好比你要去抓小捣蛋，得先拿到许可证呀！然后就去检验科抽血。
哎呀，就那么一小管血，可别害怕哦！这血里可藏着关于幽门螺杆菌的秘密呢。
抽完血之后，就等着检验科的医生们大显身手啦！他们就像侦探一样，要从这血样里找出幽门螺杆菌抗体的蛛丝马迹。
他们会用各种高科技的手段和试剂，去分析、去鉴别。
这过程就好像是在大海里捞针，得仔细着呢！要是不小心弄错了，那可就麻烦啦。
你想想，要是把一个好的当成坏的，或者把坏的当成好的，那不就乱套啦！等啊等，终于等到结果出来啦！这结果就像是一份关于小捣蛋的“判决书”。
如果是阳性，那可就得重视啦！说明这小捣蛋在你胃里待着呢。
要是阴性，那也别掉以轻心，说不定它还没被发现呢。
那怎么看这个结果呢？这就需要专业的医生来解读啦！医生就像个法官，根据这个“判决书”来判断你的胃里到底是个什么情况。
他们会结合你的症状、病史等等，给出最准确的诊断和治疗建议。
你说这幽门螺杆菌抗体分型流程重要不重要？当然重要啦！就好像你要打一场仗，得先知道敌人是谁，有多少兵力，才能制定出最佳的作战计划呀！所以啊，大家可别小看了这个小小的检查。
它能帮我们早早地发现问题，及时地解决问题。
让我们的胃能健健康康的，吃嘛嘛香！总之呢，幽门螺杆菌抗体分型流程虽然听起来有点复杂，但只要我们按照医生的要求去做，就一定能弄清楚我们胃里的情况。
可别嫌麻烦哦，为了我们的健康，这点麻烦算什么呢！大家说是不是呀！。
幽门螺旋杆菌
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
传统检测方法
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
C13 C14 幽门螺旋杆菌的血液检测
幽门螺旋杆菌抗体IgG
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
幽门螺杆菌毒性:
有感染 有毒性 无 咨询 医生 有 建议 治疗
幽门螺旋杆菌（HP）
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
在人群中：
阳性检出率：57.9% 其中：45.5%为Ⅰ型 54.5%为Ⅱ型
幽门螺旋杆菌（HP）
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
Ⅰ型HP抗体阳性 CagA,VacA任意一种或两种同 时阳性
细胞毒素：会引起炎症 空泡毒素：主要毒力致病因子
+ +
+ + +A HP 存在依据 尿素酶B HP 存在依据 UreA和/或UreB+说明有感染 CagA和/或VacA+说明有毒性 胃部不适症状，胃镜结果提示 HP根治三联或四联疗法 请在医生指导下使用
有感染 有毒有 无 个人 意愿 有 选择 治疗
致病强 细胞毒素CagA 空泡毒素VacA
尿素酶
世 健 会 中 国 基 层 糖 尿 病 教 育 拓 展 计 划
尿素酶A UreA 尿素酶B UreB
无致病性
只是表示幽门螺旋杆菌存在
分型比较
分型
CagA
结果
说明
+
无感染 无毒性 无 无需 治疗
+ + 有感染 无毒性 无 个人 意愿 + +
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型什么是BLOTHP幽门螺杆菌？BLOTHP幽门螺杆菌是一种属于螺杆菌科的革兰氏阴性菌，其生长在人体消化系统内。
这种菌可以感染人体的上消化道部位，包括胃和十二指肠。
BLOTHP幽门螺杆菌感染的危害BLOTHP幽门螺杆菌感染会对人体健康带来很大的危害，可能会引发以下疾病：•慢性胃炎：季节性的腹痛、恶心、呕吐等症状，长期患病容易发展为胃癌；•消化性溃疡：通常在胃和十二指肠处形成；•美克尔憩室炎：BLOTHP感染是导致这种疾病的最主要因素之一；•消化道淋巴瘤：BLOTHP感染是散发性淋巴瘤的主要危险因素。
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型的意义BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型是指通过对抗BLOTHP幽门螺杆菌的抗体进行分类，以便确诊患者是否感染了该菌，从而对相关疾病进行预警和治疗。
当前，世界卫生组织(WHO)和医学专家普遍认为，通过检测BLOTHP幽门螺杆菌抗体进行分型，是目前最理想的BLOTHP幽门螺杆菌检测手段之一，因为该方法检测敏感性高、准确性高、重复性强，并且可以免疫传染。
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型的检测方法BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型检测主要是通过血液检测进行的。
具体检测步骤为：1.提取被检测者的血液；2.将血液送往专业实验室进行其抗体分型检测；3.实验室根据检测结果，输出检测报告。
BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型的结果说明BLOTHP幽门螺杆菌抗体分型检测报告通常会输出3种不同的检测结果，分别是IgG抗体、IgA抗体和IgM抗体，以下是对每种抗体的说明：IgG抗体IgG抗体是最常见的一种BLOTHP幽门螺杆菌抗体，通常在感染后的2-4周内出现，而且会一直存在于人体内，即便幽门螺杆菌已经被彻底清除。
因此，IgG抗体检测通常用于对BLOTHP幽门螺杆菌感染的过去进行判断。
IgA抗体IgA抗体是在感染的早期出现的BLOTHP幽门螺杆菌抗体，通常出现在感染后的1-3周内，而且在感染后的6个月内会逐渐消失。
简析标本储存周期对量子点免疫荧光法胃幽门螺旋杆菌分型检测的影响
简析标本储存周期对量子点免疫荧光法胃幽门螺旋杆菌分型检测的影响摘要：目的：探讨不同不同样品放置周期对胃幽门螺旋杆菌分型检测结果的影响状况，从而为基层社区卫生服务中心制定适宜的胃幽门螺旋杆菌分型检测检测周期提供循证学依据。
方法：以门诊确诊感染Hp的158例胃肠疾病患者以及163列排除感染Hp的门诊正常人群为对照组作为研究对象，用量子点免疫荧光法分别对新鲜血清标本（4小时内）、4℃放置三天、4℃放置一周的血清标本分别进行胃幽门螺旋杆菌分型检测，分析相应的Hp细胞毒素相关蛋白（CagA）、空泡毒素（VacA）、尿素酶抗体（Urease）检测结果的差异。
结论：样品放置3天以内对样品检测结果影响不大、没有表现出明显的差异，放置7天以上对检测结果影响较大表现出明显的差异（p﹤0.05）。
关键词：标本储存周期、胃幽门螺旋杆菌、量子点免疫荧光法、免疫分型检测。
幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori,HP）,是由Warren和Marshall于1983年从慢性胃炎和消化道溃疡患者黏膜中分离出来的一种弯曲样杆菌，是慢性胃炎和消化性溃疡病的主要原因，超过80%的携带者并不会出现症状。
本菌约有67%的菌株产生细胞空泡毒素（VacA）和细胞毒素相关蛋白（CagA）。
产毒株致病性更强，与胃溃疡、胃癌的发病有密切关系。
【1】胃癌是最常见的恶性肿之一，占我国恶性肿瘤发病率和病死率的首位。
【2】持续的幽门螺旋杆菌感染所致的慢性炎症可引起黏膜上皮反复的退化和再生，可能有助于恶性转化，从正常胃黏膜→慢性萎缩性胃炎→肠上皮化生→胃黏膜上皮不典型增生→胃癌，幽门螺旋杆菌感染主要起了一个引导作用。
【3】我国新的慢性胃炎共识意见（2006年）已将有胃黏膜萎缩、糜烂或有消化不良症状的幽门螺旋杆菌阳性慢性胃炎作为根除幽门螺旋杆菌的适应症。
【4】因此准确检测胃幽门螺旋杆菌无论对于临床医生还是患者均具有重要的意义。
目前HP的检测方法有很多，主要方法包括免疫荧光法、ELISA法、胃镜法等。
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幽门螺旋杆菌分型检测
MARSHALL和WARREN
1979年根据活组织切片检查结果， Warren发现50%左右的病人的胃 腔下半部分附生着许多微小的、 弯曲状的细菌。Warren的发现引 来了同行的质疑，但也引起了 Marshall的极大兴趣，他们决定 联合对取自100个病人的活组织 切片进行研究。 经过反复试验，Marshall成功地 培育出一种当时尚不为人知晓的 细菌——后来被命名为幽门螺杆 菌。基于试验结果，Marshall和 Warren认为，幽门螺杆菌是导致 胃炎、十二指肠溃疡或胃溃疡的 关键因素。发现这种细菌，使胃 炎、十二指肠溃疡或胃溃疡的诊 断治疗变得及其简单。
幽门螺旋杆菌分型检测
消化性溃疡出血 流行病学调查 胃MALT淋巴瘤 胃萎缩 近期或正在使用PPI或抗生素
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺杆菌的致病机制
HP基因多态性是造成HP感染后不同临床结局主要的原因， 现 在 认 为 与 空 泡 毒 素 A （ VacA ） 基 因 和 细 胞 毒 相 关 基 因 （CagA）及其基因表达的蛋白质与致病有关。
幽门螺旋杆菌分型检测
2005年诺贝尔医学奖
2005年10月3日，瑞典卡罗林斯卡 医学院宣布，把2005年诺贝尔生 理学或医学奖授予澳大利亚科学 家Barry J. Marshall和J. Robin Warren，以表彰他们发现了导致 胃炎和胃溃疡的细菌-幽门螺杆菌。 诺贝尔奖委员会在授奖词中说， 由于Barry J. Marshall和J. Robin Warren的发现，使得原本慢性的、 经常无药可救的胃溃疡变成了只 需抗生素和一些其他药物短期就
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺杆菌感染是消化性溃疡 最主要的病因
十二指肠溃疡
5%
胃溃疡
25%
90%
3%
70%
2%
Cancer (Zollinger Ellison) Other
Marshall BJ. Am J Gastroenterol 1994; 89 (8 Suppl): S116-28
幽门螺旋杆菌分型检测
个人要求治疗
幽门螺杆菌阳性疾病
强烈推荐 推 荐 √
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
应经过严格评估: 年龄<45岁, 无报警 症状者，支持根除治疗; 年龄≥45岁或 有报警症状者则不予支持，需先行内 镜检查。
在治疗前需向受治者解释清楚这一处 理潜在的风险，如漏检胃癌、掩盖病 情、药物不良反应等。
幽门螺杆菌阳性疾病
强烈推荐
不明原因的缺铁性贫血
特发性血小板减少性紫癜（ITP）
其他幽门螺杆菌相关性疾病（如淋巴细胞性胃炎、增生性胃息肉、 Ménétrier病）
推荐
√ √ √
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
在日本的幽门螺杆菌处 理指南中作为根除适应 证。
根除幽门螺杆菌可使 70%患者的息肉消退。
幽门螺杆菌阳性疾病
慢性胃炎伴胃黏膜萎缩、糜烂 早期胃肿瘤已行内镜下切除或手术胃次全切除 长期服用质子泵抑制剂 胃癌家族史 计划长期服用NSAID（包括小剂量阿斯匹林）
强烈推荐 推 荐 √ √
√
√ √
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
化生性萎缩
萎缩性胃炎
Correa P, et al. Lancet 1975;2:58–60. Correa P, et al. Cancer Res. 1990;50:4737– 4740.
VacA和CagA蛋白是HP毒素的主要标志。部分革兰阴性 和阳性致病菌的染色体上毒力因子基因的特殊区域称为“致 病岛”。CagA致病岛是HP的主要毒力因子。CagA基因序列 的拓展研究发现，CagA是Cag致病岛中基因之一，CagE是诱 导胃上皮细胞产生白介素8（IL）的主要基因，IL 是诱发胃 黏膜炎症的主要细胞因子。
可治愈的疾病。
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌感染共识会议
1999年，海南第一次会议。
2003年，安徽桐城第二次会议。
2007年，江西庐山第三次会议。
2012年，江西井冈山第四次会议。 2012年4月召开，10月发表。
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺杆菌阳性疾病
消化性溃疡(不论是否活动和有无并发症史) 胃黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤 慢性胃炎伴消化不良症状 慢性胃炎伴胃黏膜萎缩、糜烂 早期胃肿瘤已行内镜下切除或手术胃次全切除 长期服用质子泵抑制剂 胃癌家族史 计划长期服用NSAID（包括小剂量阿斯匹林） 不明原因的缺铁性贫血 特发性血小板减少性紫癜（ITP） 其他幽门螺杆菌相关性疾病（如淋巴细胞性胃炎、增生性胃息肉、 Ménétrier病） 个人要求治疗
幽门螺旋杆菌分型检测
是否实施“Hp检测和治疗”策略 根除Hp对GERD的影响
HP检测的方法
幽门螺旋杆菌分型检测
侵入性方法（依赖胃镜活检）
快速尿素酶试验（RUT） 病理切片染色 细菌培养 基因检测（PCR等）
非侵入性方法（不依赖内径检查）
13C或14C尿素酶呼气试验（UBT） 粪便Hp抗原检测（HpSA) 血清和分泌物抗体检测 基因芯片，蛋白芯片检测等
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
消化性溃疡患病率
幽门螺旋杆菌分型检测
服用NSAID + Hp感染
服用NSAID
n=180 n=205 Hp阳性 Hp阴性
服用NSAID
Hp感染 非Hp非NSAID
n=127 n=149 Hp阳性 Hp阴性
对照
ang JQ, et al. Lancet 2002;359:14–22
胃MALT淋巴瘤 根除Hp前
胃MALT淋巴瘤 根除Hp后
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
Suerbaum S,et al. N Engl J Med 2002;347:1175-1186Gerrits MM,et al. Lancet Infectious Diseases 2006; 6: 699– 709
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺旋杆菌分型检测
幽门螺杆菌（H.PYLORI ）
• 1982年澳大利亚学者Marshall和Warren从 胃黏膜中分离出Hp
– 常见于人的胃窦和幽门部位 – 可通过一端多条鞭毛移动 – 是一种革兰氏阴性螺旋菌 – 分泌高活性的尿素酶和过氧化氢酶 – VacA、CagA导致宿主的炎症反应