不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区（extended-V）的同源性分析
不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株合成胞外多糖能力的实验研究
不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株合成胞外多糖能力的实验研究杨江华;曹元书;刘兴容【摘要】目的比较不同龋敏感儿童El腔中变异链球菌的临床分离株合成胞外多糖能力的差异.方法以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,常规复苏、增菌,配制相同浓度的菌悬液,按菌液与含1%蔗糖的BHI液体培养基1:10(v/v)比例接种细菌,37℃厌氧培养24h后,分别收集水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖,用蒽酮法进行定量分析.结果儿童高、中龋患者口腔中分离出的变异链球菌临床分离株以及国际标准菌株合成胞外多糖能力明显高于无龋者口腔中分离出的变异链球菌,差异具有统计学意义(P<0.05).结论高龋儿童口腔中变异链球菌临床分离株具有高致龋性.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2010(021)024【总页数】3页(P4-6)【关键词】变异链球菌;龋敏感;致龋性;胞外多糖【作者】杨江华;曹元书;刘兴容【作者单位】泸州医学院附属口腔医院,四川,泸州,646000;泸州医学院附属口腔医院,四川,泸州,646000;泸州医学院附属口腔医院,四川,泸州,646000【正文语种】中文【中图分类】R788+.1变异链球菌是乳牙龋患儿口腔中的主要致龋菌，合成胞外多糖的能力是其致龋的重要条件之一。
变异链球菌的葡糖基转移酶（Glucosyl transferases，GTF）可利用蔗糖合成细胞外多糖，包括水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖。
细胞外多糖对细菌在载体表面的附着以及细菌之间的集聚、维持生物膜的结构、提供营养等方面均起着十分重要的作用[1]。
因此，研究细菌合成胞外多糖的能力对于细菌的致龋性研究有着重要意义。
本实验拟采用蒽酮法[2]比较不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株合成水溶性及水不溶性葡聚糖的能力，为进一步研究儿童龋病的发病特点和预防措施奠定基础。
1 资料与方法1.1 主要的仪器和设备厌氧培养箱YQX型(上海跃进医疗器械厂)；紫外可见分光光度计UV-1100型（北京瑞利分析仪器公司）；定时磁力搅拌器JB-90-1型(上海天平仪器厂)；低频离心机TDL-40B型（上海安亭科学仪器厂）。
变形链球菌表面蛋白遗传多态性与粘附性能关系的研究
基金项目：国家自然科学基金（编号30171013）、国家教委博士点基金（编号01061033）320临床医学变形链球菌表面蛋白遗传多态性与粘附性能关系的研究庄 姮，刘天佳，杨德琴，李 颂（四川大学华西口腔医学院，四川省成都市 610041）[摘要] 目的 了解高、低粘附力变形链球菌临床分离株表面蛋白各粘附功能区遗传多态性与其粘附性能的关系。
方法 实验菌株选自本实验室前期工作所获得的粘附力较强和较弱的血清c 型变形链球菌临床分离株，提取全菌DNA ，经PCR 分别扩增表面蛋白A 区，P 、V 区及C 末端编码基因spaP-a 、spaP-pv 、spaP-c 后，用限制性内切酶Hae Ⅲ、Alu I 进行限制性片段长度多态性分析。
19株菌株进行spaP-pv 的序列测定。
结果 1. 高、低粘附力变链菌临床株扩增产物spaP-a 经Hae Ⅲ酶切后，出现了4种基因型，其分布无统计学差异。
2. spaP-pv 经Alu I 酶切后，出现的a 、b 2种基因型菌株在不同粘附力菌株的分布不同（P <0.05）。
测序发现，a 型有2个片段与b 型出现差异，并且均位于V 区。
3. spaP-c 经Alu I 酶切后呈现2种基因型，其分布无统计学差异。
结论 表面蛋白V 区编码基因出现变异可能是导致变链菌临床株粘附性能出现差异的原因之一。
[关键词] 变形链球菌; 表面蛋白; 遗传多态性; 粘附力A study on the Relationship between genetic diversity within surface protein of Streptococcus mutans and Adherent abilitiesZhuang Heng, Liu Tianjia, Yang Deqin, Li Song,. West China College of Stomatology, Sichuan University. Sichuan, Chengdu, 610041, China.[Abstract] Objective To study the relationship between genetic diversity within surface protein of Streptococcus mutans (serotype c) and their adherent abilities. Methods The clinical isolates of S.mutans included two groups with different adherent abilities, which were derived from previous work in our experimental lab. The bacterial DNA was extracted, and spaP-a 、spaP-pv 、spaP-c were amplified respectively by PCR. Genetic diversity were assessed by restriction fragment-length polymorphism(RFLP) with restriction endonucleases Hae Ⅲ and Alu I . Sequence of spaP-pv in 19 strains was performed. Results 1. Four different patterns of spaP-a PCR-RFLPs and two genotypes of spaP-pv were revealed when digested with Hae Ⅲ and Alu I respectively . The distribution of genotypes in strains with different adherent abilities was not different. 2. Two different genotypes(a, b) of spaP-pv were revealed and the distribution of two genotypes in strains with different adherent abilities was different(p<0.05). Sequence of spaP-pv revealed two different DNA fragments between a, b genotype strains and they were located in V-region of surface protein. Conclusion It suggests variation of gene encoding V-region may account for different adherent abilities of surface protein of S. mutans isolates._______________________________________________________________________________[Key words] Streptococcus mutans; surface protein; genetic diversity; adherent ability细菌感染机体并引起疾病的过程是一个复杂的细菌与机体相互作用的过程，细菌的粘附作用在此过程中发挥着重要的作用。
变异链球菌表面蛋白PAc基因A区与霍乱毒素B亚单位融合基因植物表达载体的构建
变异链球菌表面蛋白PAc基因A区与霍乱毒素B亚单位融合基因植物表达载体的构建吴家媛;刘建国;马欣荣;唐琳;张绍伟;管晓燕;洪献忠;吴志刚;张剑;梁文红【摘要】目的构建变异链球菌表面蛋白PAc A区与霍乱毒素B亚单位的植物表达载体,为可食嵌合体防龋疫苗的进一步研究提供实验基础.方法从中间载体pBPC55获得含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的片段,定向连接到植物双元表达载体pCAMBIA2301上,构建重组载体p2355;通过PCR扩增从重组质粒pEAC 10中获得表面蛋白PAcA区与霍乱毒素B亚单位的融合基因pacA-ctxB,克隆至重组质粒p2355中,构建植物表达载体p2355-PAcA/CTB,电转化法导入根癌农杆菌EHA105.PCR及酶切鉴定.结果PCR扩增得到了含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的1.1kb大小片段,经酶切鉴定,该片段已经插入到植物双元载体pCAMBIA2301中.PCR扩增得到了pacA-ctxB基因:构建的质粒p2355-PAcA/CTB经Xho Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切及PCR检测,均得到1.7kb大小的片段,与预计的嵌合目的基因片段大小相同.结论成功构建pacA-ctxB融合基因的植物表达载体p2355-PAcA/CTB.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2011(034)004【总页数】4页(P341-343,347)【关键词】变异链球菌;植物表达载体;表面蛋白;霍乱毒素B亚单位;可食疫苗【作者】吴家媛;刘建国;马欣荣;唐琳;张绍伟;管晓燕;洪献忠;吴志刚;张剑;梁文红【作者单位】遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;中国科学院成都分院生物研究所,四川成都610041;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003;遵义医学院附属口腔医院,贵州遵义563003【正文语种】中文【中图分类】R392.1随着分子生物学技术的飞速发展,通过基因工程改造的转基因植物已成为一种新型的生物反应器,细菌或病毒等病原体的抗原基因可在转基因植物表达系统中表达，且表达的抗原仍较好地保留了天然的免疫原性[1]。
变形链球菌表面蛋白生物学特性的研究现状
变形链球菌表面蛋白生物学特性的研究现状发布时间：2022-10-27T05:37:03.451Z 来源：《健康世界》2022年14期作者：胡丹阳[导读] 变形链球菌是口腔当中十分重要的致龋菌组成部分，并在近些年的研究过程中，证明了这种病菌与全身的系统性疾病，也存在着一定的关系。
胡丹阳联勤保障部队大连康复疗养中心小平岛疗养区，辽宁省大连市，116087 摘要：变形链球菌是口腔当中十分重要的致龋菌组成部分，并在近些年的研究过程中，证明了这种病菌与全身的系统性疾病，也存在着一定的关系。
在细胞外蛋白当中，存在着一定的疾病或者毒性的因子，这对于人体的疾病发生存在着较为紧密的联系。
在本文的分析中，主要阐述了变形链球菌表面蛋白生物学特性，从而为医疗卫生领域的研究提供参考，确保龋齿等相关疾病能够被有效解决。
关键字：变形链球菌；表面蛋白；生物学特性引言：在当下进行变形链球菌的研究过程中，为了实现对表面蛋白生物学的特性研究，就需对其内部组成进行详细的分析与研究。
这种研究方向，不仅仅对于病理研究和抗生素开发有着十分重要的价值，并在不同领域也相应的存在着较高的价值，全面提升了对口腔内部菌群的了解深入程度。
1 研究背景龋齿是一种基于细菌影响下，让引体人体组织发生慢性破坏的疾病、变形链球菌就是一种十分重要的致龋菌。
该菌体是一种革兰氏阳性球菌，在口腔当中的菌群占据着十分重要的比重，也是在近些年的研究进程中，发现对于全身的系统性疾病，带来十分明显影响的关键病害。
在对细胞外蛋白的处理过程中，往往含有这较多的致病菌，同时也相应的存在着一定的毒性因子。
对于这样的疾病发病的机制研究中，存在着较多密切的联系。
蛋白生物学特性的研究中，基本上要从某些特定的时间，对于细胞的蛋白质进行详细的分析，同时加上对于表面蛋白质进行详细的分析，以此了解到蛋白质之间的相互作用情况。
现阶段细菌细胞表面蛋白的研究工作，已经是一个十分重要的研究领域，并取得了十分重要的研究结果。
酸性条件下变异链球菌临床株表面相关蛋白表达差异分析
Ｄｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｉ ａ Ｉ ｅ ｘ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ｓ ｕ ｒ ｆ ａ ｃ ｅ — ａ ｓ ｓ Ｏ ｃ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅｉ ｎ ｓ ｏ ｆ ｓ ｔ ｒ ｅ Ｄ ｔ ０ ｃ Ｏ Ｃ ｃ ｕ Ｓ ｍｕ ｔ ａｎ ｓ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ
相似之 处 ； 两菌株 间蛋 白表 达差 异可能是耐酸性存在差异 的原 因。
关键词 ： 链球菌 ， 变异 ； 蛋 白质组学 ； 临床分离株 ； 表面相关 蛋 白； 耐酸性
中图分类号 ： Ｒ ７ ８ １ ． １ 文献标志码 ： Ａ Ｄ ＯＩ ： １ ０ ． １ １ ９ ５ ８ ￣ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ０ ２ ５ ３ — ９ ８ ９ ６ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ７ ． ０ ０ １
Ｊ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆＥ ｎ ｄ ｏ ｄ ｏ ｎ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｉ ｆ ｎ Ｓ ｔ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆＮ ｏ ａ ｎ ｋ ａ ｉ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｉ ｆ ｎ ３ ０ ０ ０ ４ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｆＥ ｏ ｎ ｄ ｏ ｄ ｏ ｎ ｔ ｉ ｃ ｓ ａ ｎ ｄ Ｏ ｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ， Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ａ ｎ ｄ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆＳ ｏ ｔ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｆ ｕ ｊ ｉ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ； ３ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ａ ｎ ｄ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆＳ ｏ ｔ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｎ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ
血链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh的同源性分析
ａ ａ ｒｂ ｃ ａｍｏ ｐ ｅ ｅ ａ ｄ ｔ ｅｇ ｎ ｍｅ ｗ ｓｏ ｔ ｉｅ ｙ ｔ ｅ ａｋ ｌ ｅ ｍｅｈ ｄ ｎ ｅｏ ｉ ｔ ｓ ｈ ｒ ｎ ｅ ｏ ａ ｂ ａｎ ｄ ｂ ｈ ｌ ａｉ ｔｏ ．Ａ ｐ ｉ ｏ ｒ ｒ ｅ ｅ ｄ ｓｇ ｅ ｎ ｔ ｅ ｍｏ ｔ ｅ ｈ ｎ ａｒ ｆｐ ｉ ｓｗ ｒ ｅ ｉ ｎ ｄ ｉ ｓ — ｍｅ ｈ ｒ
Ｒｅ ｕ ｔ Ｔ ｅ ｕ ｉ ｕ ｒ ｄ ｃ ａ ｏ ｎ ｎ ｂ ａｎ ｄ ｉ ｔ ｐ ｏ ｏ ｃ ｓｓ ｎ ｕ ｓａ ｄ ｓ ｅ ｔ ｃ ｃ ｕ ｔ ｕ ． Ｃｏ ｃ ｕ ｉｎ ｓｌ ｓ ｈ ｎ ｑ ｅ ｐ ｏ ｕ ｔ ｓ ｆｕ ｄ ａ ｄ ｏ ｔｉ ｅ ｎ ｓ ｅ ｔｃ ｃ ｕ ａ ｇ ｉ ｎ ｔ ｐ ｏ ｏ ｃ ｍｕａ ｗ ｒ ｒ ｓ ｓ ｎ ｌ ｓｏ ｓ
实用老年医学 ２ １ ０ ０年 ２月第 ２ ４卷第 １ 期
Ｐａｔ ｅ ￣ｒＦｂｕｒ ０ ０ Ｖ １ ４，ｏ １ ｒｃ Ｇ ｆ ，ｅｒａｙ２ １ ， ｏ． Ｎ ． ｉ ２
血链 球 菌和 变 形链 球 菌耐酸 相 关基 因历
的 同 源 性 分ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ析
朱敏 张志 民 董倩 葛 久禹 王 文梅
【 摘要】 目的 根据耐酸相 关基 因历 同源性 高的特 点， 检测血链球菌 中是否存在耐酸相关基 因历 ， 并对血链
ｆ １ 在 以 变形链 球 茵 和血 链球 菌基 因组 为模 板 的 Ｐ Ｒ 中 ， 获 得 的 特 异 性 片段 与预 期 结果 一 致 。 结 论 ｔ ｔ ￣４－ Ｃ 所 链 球 菌 中存 在耐 酸 相 关基 因ｆ，且 血链 球 菌和 变形 链 球 茵耐 酸相 关基 因 力 同源性 高。 ｉ， ｔ 血
随意引物PCR法鉴别口腔变形链球菌的初步研究
随意引物PCR法鉴别口腔变形链球菌的初步研究
王红杨;潘亚萍;孙开来
【期刊名称】《口腔医学》
【年(卷),期】2001(021)001
【摘要】目的:探讨口腔变形链球菌族细菌中各个种和血清型的关系.方法:采用随意引物PCR法对变形链球菌(血清型c,d,f)及与其同源性相近的血链球菌标准菌株进行PCR扩增,建立口腔变形链球菌基因图谱.结果:变形链球菌与血链球菌基因图谱差异较大;变形链球菌各个种基因图谱有差异;属于同一个种的变形链球菌不同血清型的菌株基因图谱虽相似但有差异.结论:运用随意引物PCR法可鉴别不同种或同一种中血清型不同的变形链球菌.提示:随意引物PCR法是一种鉴别口腔变形链球菌比较简便、准确的方法.
【总页数】2页(P16-17)
【作者】王红杨;潘亚萍;孙开来
【作者单位】沈阳市口腔医院口腔内科,110002;中国医科大学口腔医学院口腔内科,110002;中国医科大学分子遗传学教研室,110002
【正文语种】中文
【中图分类】R78
【相关文献】
1.全托儿童口腔变形链球菌水平传播的初步研究 [J], 邹静;尚冉;凌均棨;周学东
2.不同龋敏感儿童口腔变形链球菌基因型的初步研究 [J], 李伟;刘兴容;曹元书;李
艳萍
3.随意引物PCR用于口腔链球菌基因分型的初步研究 [J], 潘亚萍;王红杨
4.三种不同DNA提取法对血链球菌随意引物PCR鉴定影响的研究 [J], 张卫东;陈晖;余钟声
5.随机引物PCR法在变形链球菌基因分型中的初步应用 [J], 刘加荣;边专;樊明文;聂敏
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变形链球菌葡聚糖结合蛋白B基因克隆、表达及免疫防龋实验分析
独雠性声噍Ｙｓｉｉｓ０２秉承学较严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个＾在导师指导下进行的研究工作及取得的砩究成果。
尽我所知，除了文中特别加以标注韧致谢的地方外，论文中不包含其他＾已经发表或撰写过的研究戚果，不包含本＾或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。
与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确韵说明并表示了致谢。
申请学位论文与资料蔷有不宾之处，本人承担一切相关责任。
论文作者签名：ｄ』二叁。
釜：Ｉｔ期保护ｊＩＩＩ识产权声明≯曲寻一ｉ一，本＾完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在较攻读学位期间论文Ｉ作的知识产权单位属第四军医大学。
本＾保证毕业离校后，发表论文或瞳用论文Ｉ作威果时署各单位仍然为第四军医大学。
学校肓权保留送交论文的夏印件，允许论文被查阅和借阋；学校可以公布论文的全部或部分内客（保密内容除９｝），可以采用影印、缩印或其他夏制手段保存论文。
论文作者签名：尘墨—Ｌ导并签各：瑾艇日期噬！！妒第四军医大学博士学位论文■■｜——＿■—■——毫—＿＿———■———詈量●■——■—鼻暑——●—■■—詈—日—＿●■■■—一Ｉ■—■■—｜●■—＿＿■—高詈—鼍鞭变形链球菌葡聚糖结合蛋白Ｂ基因克隆、表达及免疫防龋实验研究研究生导师辅导教师卫克文肖明振教授吴补领教授苏凌云副教授摘要龋病是一种多因素引起的细菌感染性疾病，变形链球菌是其主要致病菌。
葡聚糖结合蛋白是变形链球菌的主要致龋毒力因子之一，在细菌的黏附和聚集，促进菌斑的形成中起着重要作用。
免疫防龋是目前龋病预防研究的热点之一。
基因疫苗是上世纪９０年代发展起来的一种诱导免疫治疗的新方法，与减毒活疫苗、灭活疫苗、重组亚单位疫苗等疫苗相比，它具有长期稳定表达抗原蛋白，在宿主体内表达的蛋白与天然构象更为接近，抗原性更强等优点。
目前，基因疫苗免疫防龋仅限于对变形链球菌表面蛋白、葡糖基转移酶、葡聚糖结合蛋白Ａ的研究，关于利用葡聚糖结合蛋白Ｂ构建防龋基因疫苗的研究国内外还未见报道。
变形链球菌表面蛋白V区的结构和功能
变形链球菌表面蛋白V区的结构和功能
何奎芳;刘建国
【期刊名称】《国际口腔医学杂志》
【年(卷),期】2004(031)001
【摘要】变形链球茵表面蛋白是变形键球菌的重要毒力因子之一,其氨基酸序列分为七个结构区,V区为中间的可变区.晶体结构显示V区由一p一三明治析叠、二叶和一个液相暴露的臂构成;其上舍有一个糖结合位点.在口腔链球茵中具有序列保守性,且可刺激单核细胞释放肿瘤坏死因子,V区亦有粘附和凝集作用,同A区和P区协问作用才能更充分发挥其功能.
【总页数】4页(P38-41)
【作者】何奎芳;刘建国
【作者单位】遵义医学院附属口腔医院口腔内科;遵义医学院附属口腔医院口腔内科
【正文语种】中文
【中图分类】R378.12
【相关文献】
1.不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的同源性分析 [J], 何奎芳;刘建国;刘天佳;杨德琴;庄姮;李颂
2.变形链球菌表面蛋白遗传多态性与龋病发生关系的研究Ⅱ表面蛋白V区、P区编码基因序列的测定 [J], 庄姮;刘天佳;杨德琴;刘建国;何奎芳;李颂
3.变形链球菌表面蛋白的结构和功能 [J], 汪喻忠;刘建国;樊明文
4.变形链球菌表面蛋白V区、P区及C末端遗传多态性与龋病发生关系的研究 [J], 庄姮;刘天佳;刘建国;杨德琴;何奎芳;李颂
5.维吾尔族不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株表面蛋白A区遗传多态性研究[J], 连冰洁;刘震华;赵今
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不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定
不同基因型变异链球菌临床分离株的分离和鉴定[摘要] 目的分离鉴定变异链球菌临床分离株。
方法收集高龋患者和无龋健康人口腔中牙菌斑标本进行厌氧培养，通过细菌形态学观察、生物化学鉴定、自动微生物分析系统分析、聚合酶链反应（pcr）扩增变异链球菌基因的特异性片段表面蛋白抗原ⅰ/ⅱ（spap）、葡糖基转移酶b（gtfb）和葡聚糖酶（dexa）以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定。
结果从32例临床受试者口腔中分离获得46株变异链球菌临床分离株，经生物化学，自动微生物分析系统，变异链球菌的特异性基因spap、gtfb 和dexa的pcr扩增均鉴定为变异链球菌，基因分型发现其中5株临床分离株的基因型与其他菌株相同。
结论获得41株不同基因型变异链球菌临床分离株。
[关键词] 变异链球菌；基因型；分离；鉴定[中图分类号] r 780.2 [文献标志码] a [doi]10.7518/hxkq.2013.01.020 变异链球菌（streptococcus mutans）是人类口腔中最主要的致龋菌[1]。
变异链球菌群中各菌种的分离与鉴定是进行龋病研究的基础。
细菌菌种的鉴定方式经历了由传统的表型、血清型方法到以分子生物学为基础的基因型方法的转变。
本文采用形态学、生物化学、自动微生物分析系统、扩增变异链球菌基因的特异性片段区域以及基因分型等方法对获得的变异链球菌临床分离株进行鉴定，为龋病临床和基础研究提供材料。
1 材料和方法1.1 实验菌株变异链球菌国际参考株ingbritt（首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所提供），金黄色葡萄球菌临床分离株188号（军事医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室提供）。
1.2 病例选择纳入标准：高龋患者，龋失补牙（decayed-mis-sing-filled-tooth，dmft）指数≥6；无龋健康人，dmft指数=0。
排除标准：饮食结构异常，有嗜甜食（饮）及睡前进餐等不良饮食习惯者；接受放疗和化疗的患者；舍格伦综合征患者；严重全身系统性疾病者；近3个月内服用抗生素者；接受正畸治疗者；口腔卫生状况不良者；牙齿结构异常者；涉及取样的牙体有牙髓病变、根面暴露或根面龋、未控制的牙周病变、冠或固定桥等修复体者。
医学文章变形链球菌Bsp蛋白结构域研究进展
医学文章变形链球菌B SP蛋白结构域研究进展【摘要】蛋白结构域是指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域。
Bsp蛋白结构域基因编码的是一种65kDa的蛋白，含有N-末端，是GBS 中的控制细胞形态的蛋白。
不同细菌中存在类似于Bsp的蛋白结构域。
【关键词】医学文章,结构域,Bsp,Smb,CWB1蛋白结构域概述结构域(Structural Domain)是介于二级和三级结构之间的另一种结构层次。
所谓结构域是指蛋白质亚基结构中明显分开的紧密球状结构区域，又称为辖区。
多肽链首先是在某些区域相邻的氨基酸残基形成有规则的二级结构，然后，又由相邻的二级结构片段集装在一起形成超二级结构，在此基础上多肽链折叠成近似于球状的三级结构。
对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或多个在空间上可明显区分的、相对独立的区域性结构缔合而成三级结构，这种相对独立的区域性结构就称为结构域。
对于较小的蛋白质分子或亚基来说，结构域和它的三级结构往往是一个意思，也就是说这些蛋白质或亚基是单结构域。
结构域自身是紧密装配的，但结构域与结构域之间关系松懈。
结构域与结构域之间常常有一段长短不等的肽链相连，形成所谓铰链区。
不同蛋白质分子中结构域的数目不同，同一蛋白质分子中的几个结构域彼此相似或很不相同。
2 变性链球菌的概述2.1 变形链球菌的致龋性变形链球菌群[8][9]是存在于口腔中的正常菌群，是革兰阳性菌，在微需氧环境中生长最好，能利用蔗糖产生细胞外多糖，借此附着于牙面。
变形链球菌能以蔗糖为底物合成胞外葡聚糖、果聚糖及胞内多糖。
葡聚糖介导细菌的黏附，促进菌斑的形成，是变链球菌重要的致龋毒力因子。
该菌合成的水溶性葡聚糖、果聚糖、胞内多糖还可作为代谢底物提供能量，增强致龋力。
变形链球菌表面蛋白和脂磷壁酸是菌体表面粘结素，它们与获得性膜中的不同受体结合，促进该菌黏附和菌斑的形成。
牙菌斑的致龋作用可以概括为菌斑中细菌代谢碳水化合物产物，由于菌斑基质的屏障作用，这些酸不易扩散，使局部PH下降，从而造成牙体硬组织脱矿，最终形成龋齿。
变形链球菌表面蛋白可变区(V+)基因克隆与表达
Ｐ Ｒ扩增产物为 Ｌ １ ｋ Ｃ ６ ｂ的 ＤＮ Ａ带． 亚克隆人载体， 获得重组 克隆 ｐ Ｖ Ｃ ｆ 本试验 成功地构建 了携
和重组表达克隆 ｐ Ｒ ， Ｓ Ｖｆ表达产物为 ４ ｋ ａ抗原 ． ３Ｄ 可以赦抗 Ｉ／ 日抗 体特异性地 识别。结论 关键词 ： 变形链球 菌 ； 表面蛋 白； 基ｅ Ａｎ ｅ ｃｏｔ． ｔａ ＨｏｐｔｌＤ ｔｍａｏ ｏｙ， ｈ ｎ ｅ ｉａ ｉｅｓｔ （ ｉｕ ｎ ０ ０ ０ ， Ｘｉｏｑｎ， ｃ ｌ ｇ ｔ Ｓ ｉｔｉ ｅ ｌ ｈ ｏ ｓ ｉ ，Ｓｏ ｔｔｇ Ｓ ａ ｘｉＭ ｄ ｃｌ Ｕｎｖ ｒｉ ａ ｙ Ｔａｙ ａ ３ ０ １ Ｃ ｉａ） ｈｎ
用 Ｐ Ｒ从 ｓ 基因中扩 增 目 Ｃ ｒ
的基 因片段 ｖ（ ． ＋）亚克隆人中间载 体 ｐ Ｒ ． 和表达载体 ｐ Ｔ １（ 对重 组体进行诱导 表达并对表达 产物进行 ｃ ２１ Ｅ ２ ａ ＋） Ｓ Ｓ—Ｐ Ｇ Ｄ Ａ Ｅ和 Ｗｅｔ ｎ ｌ ｔ ｇ 析 结果 ｓｅ ｏ ｉ 分 ｒ ｂ ｔｎ
ｓ ｂｌｎ ｄｉｔ ｈ ｌ ｍ ｄ ｕ ｃ ｅ 。ｔｅｐａ ｉ ｔ Ｃ ２ １ａｄ ｔ ｅｅ ｐｅｓ ｅｐ ｓ ｄ ｖｃ ｒｐ Ｔ １ （ ｏ ｎ ￣ ｏ ｐ Ｒ ｎ ｘ ｒｓ ｖ ｌ ｍｉ ｅ ｔ Ｅ ２ ａ ＋） Ｔ ｅｒｃｍｂ ａ ｔ ｒ ｈ ｉ ａ ｏ ｈ ｅｏ ｉ ｎ ｄ ｃｄ ｂ ｎ ｍ ｉ ｕｅ ｙ ｎ
ａ ｘ ｒｓ ｖ ｌｎ ｆＶ ｇ ｎ ｔｏ ｓ Ｖ ＋ｄ ｍａ 、 ａ ｌｉｄｆ ｅ ｅｓ ｙｐ ｌｍｅａｅｃ ａ ｅｅｉｉ Ｐ ｎｅ Ｄｅ ｅｃ ｅｏ ｏ ｅ ｅ Ｍｅｈ ｄ ｏ ｉ ｎ ｍｐｉ ｅ ｌ ｆ ｏｎ ｇ ｎ ｒｂ ｏｙ ｒｓ ｈ ｉ ｒａ ｔ ￣（ ＣＲ）ａ ｄ ｎ ｏ ｎ
探讨原子力显微镜在变形链球菌研究中的应用
探讨原子力显微镜在变形链球菌研究中的应用齐静13 邱文彦1 吴爱国2 张柏林2 欧阳喈1(1.吉林大学口腔医学院口腔修复科 吉林长春 130041;2.中国科学院长春应用化学研究所)[摘要] 目的:探讨原子力显微镜在口腔变形链球菌研究中的应用。
方法:应用原子力显微镜在自然干燥状态和在态条件下观察变形链球菌血清c型M T6R菌株和M T8148葡糖基转移酶基因缺陷型菌株B29的超微结构。
结果:原子力显微镜在自然干燥观察变形链球菌M T6R可见,表面形态呈不规则状,有大量的不定性物质,有呈囊状突起,菌细胞之间靠大量的不定性物质相互连在一起;水不溶性葡糖基转移酶(GTFI)缺陷型菌株B29菌细胞表面相对光滑,无囊状突起,有颗粒状物,菌细胞间不定性物质较少。
在液态条件下观察细菌的超微结构与自然干燥下的相似,但更加清晰。
结论:应用原子力显微镜可以在液态条件下观察变形链球菌表面超微结构,还可以对菌细胞进行三维成像。
[关键词] 变形链球菌 原子力显微镜 超微结构[中图分类号] R781 [文献标识码] A [文章编号] 1671—7651(2004)04—0379—03Im aging the Surface of Mutans Streptococcus by Atomic Force Microscopy.QI Jing,QIU Wen-yan,W U A i-guo, et al.College of S tom atology,JiL in university,Changchun130041[Abstract]Objective:T o investigate application of atomic force microscopy(AFM)on Mutans Streptococci(MS)by imaging the surface of streptococcus mutans MT6R and streptococcus mutans B29using AFM.R esults:AFM can image m orphology of Streptococcus mutans in2-D display.The cell surfaces of strain MT6R were not regular because of the presence of the am or2 phous substance on the colony surface,which congergate globular boby,fibrous structure.The cell surfaces of strains B29were sm ooth and m orphological regularity.T race am ounts of the am orphous substance were observed on the cell surface of B29.AFM can not only image m orphology of a bacterial cell that was dried in air,but als o in liquid.In liquid display,the am orphous sub2 stance covered cells of streptococcus mutans MT6R showed capsule,but the cell surfaces of strains B29was not capsule.C onclu2 tion:Unlike scanning electron microscopy,performance of AFM does not require a vacuum,drying to the critical point,or the coating of the bacterial surface with a metal layer.The digital storage of the information makes it easy to rotate the image,ob2 serve the bacterial surface and induced structural alterations from different points of view,and obtain a cross-section at any de2 sired point with precise,automatic measurement of the heights and sizes of e of the new and outstanding technique of AFM will make it possible for researchers to investigate MS.[K ey w ords] Atomic Force Microscopy Mutans Streptococci Ultrastructure 变形链球菌(简称变链)已被公认是人类龋病的主要致病菌。
变形链球菌表面蛋白抗原Ⅰ／Ⅱ的研究现状
变形链球菌表面蛋白抗原Ⅰ／Ⅱ的研究现状
陈罕
【期刊名称】《口腔医学纵横》
【年(卷),期】1996(12)3
【摘要】变形链球菌表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ由于在变形链球菌粘附机制中的作用和免疫原性,近年来被广泛研究,并作为龋病疫苗的主要候选防龋抗原之一。
目前对表面蛋白的研究包括:表面蛋白基因的克隆与表达、核酸和蛋白质序列测定、蛋白质构象和功能分析、人工多肽的合成以及在免疫中的运用途径等方面。
本文就近五年来对表面蛋白的研究作一综述。
一、表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ的功能 Russell1978年首先从变形链球菌中分离出表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ,随后许多实验室相继分离出分子量185～190kD与抗原Ⅰ/Ⅱ性质一致的变形链球菌表面蛋白,分别称为抗原B、IF、Pl和PAc。
【总页数】3页(P178-180)
【作者】陈罕
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】R780.2
【相关文献】
1.变形链球菌表面蛋白抗原在口腔链球菌中的分布 [J], 边专
2.变形链球菌185—SA表面蛋白抗原的提取与鉴定 [J], 谢佐理;岳松龄
3.变形链球菌表面蛋白抗原及其结构基因的序列和特性 [J], 储冰峰;李育民
4.柱层析法纯化变形链球菌表面蛋白质抗原Ⅰ／Ⅱ的研究 [J], 杜民权;樊明文
5.变形链球菌表面蛋白抗原结构基因克隆和特性 [J], 储冰峰;姜萍
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不同血清型变形链球菌产生葡糖基转移酶能力的比较研究
不同血清型变形链球菌产生葡糖基转移酶能力的比较研究于维先;宋印章;毛华伟
【期刊名称】《口腔医学纵横》
【年(卷),期】1995(11)4
【摘要】变形链球菌是引起龋病的主要病原菌。
各变形链球菌致龋力有所不同。
本文通过检测不同血清型变形链球菌所产生葡糖基转移酶能力来探讨不同变形链球菌致龋力的机制。
结果表明，在相同条件下，远缘链球菌（血清型ｄ）产生葡糖基转移酶的能力较其它变形链球菌强。
提示远缘链球菌（血清型ｄ）致龋力强与其产生葡糖基转移酶的能力强有关。
【总页数】2页(P210-211)
【关键词】变形链球菌;葡糖基转移酶;比较研究
【作者】于维先;宋印章;毛华伟
【作者单位】吉林省长春市白求恩医科大学口腔医学院,吉林省税务学院医务室【正文语种】中文
【中图分类】R378.12
【相关文献】
1.变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗免疫防龋实验研究:唾液和血清抗体水平测定 [J], 杨德琴;刘天佳;曹福娴;杨锦波;刘建国
2.重组变形链球菌葡糖基转移酶催化活性区的活性研究 [J], 汪林;储冰峰;王成龙;刘洪臣;邵宁生;杨光;董洁;刘玉
3.变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗防龋动物实验:Keyes龋齿计分研究 [J], 杨德琴;刘天佳;曹福娴;庄姮;刘建国;杨锦波
4.变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗免疫防龋动物实验:体质量影响研究 [J], 杨德琴;刘天佳;曹福娴;刘建国;杨锦波
5.变形链球菌胞外葡糖基转移酶的提取及综合多糖的能力 [J], 朱华;乌爱菊
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变形链球菌细胞表面及培养上清液中抗原提取的比较
变形链球菌细胞表面及培养上清液中抗原提取的比较
文立亚;蔡美英
【期刊名称】《华西口腔医学杂志》
【年(卷),期】1993(11)1
【摘要】对变形链球菌中的远源链球菌(S·Sobrinus)的菌细胞表面抗原及培养上清液中抗原的提取在质与量上进行了比较。
结果显示,二者的中抗原总浓度相近似,SDS—PAGE 中的高、低分子量的蛋白条带均处于同一水平位置。
故认为二者均为提取抗原的重要来源,但利用菌细胞表面提取抗原则更具有省时、省力、节约经费之优点。
【总页数】3页(P13-14,T003)
【作者】文立亚;蔡美英
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R392－33
【相关文献】
1.链球菌抗原刺激的银屑病外周血单个核细胞培养上清液对角质形成细胞的作用[J], 张理涛;李瑞玲;鄂丽红;陈学荣
2.变形链球菌表面蛋白抗原在口腔链球菌中的分布 [J], 边专
3.变形链球菌185—SA表面蛋白抗原的提取与鉴定 [J], 谢佐理;岳松龄
4.提取变形链球菌表面蛋白抗原的方法探讨 [J], 张传彬;文立亚
5.水芹乙酸乙酯提取物在2215细胞培养内对乙型肝炎病毒表面抗原和E抗原的抑制作用 [J], 杨新波;黄正明;曹文斌;陈鸿雁;张敬珍;陈鸿珊;滕丽;刘东萍
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变形链球菌在几种不同合金表面的黏附实验研究
变形链球菌在几种不同合金表面的黏附实验研究吴婧婷;黄玮;张强【期刊名称】《南昌大学学报（医学版）》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】Objective To compare the adhesion of Streptococcus mutans to surfaces of 5 differ-ent alloy materials(Ni-Cr alloy,Co-Cr alloy,Au-Pd alloy,74% Au alloy and 86% Au alloy). Methods The specimens were grinded and polished progressively until there were no significant differences in the surface roughness among the 5 alloy materials.After sterilization,the specimens were placed into the medium containing Streptococcus mutans(UA159)under anaerobic condi-tions.The number of colonies on surfaces of the specimens was counted after 48 hours.Results The number of Streptococcus mutans adhered to alloy surfaces was in the order of Ni-Cr alloy>Co-Cr alloy>Au-Pd alloy>74%Au alloy>86% Au alloy.The on difference was significant be-tween 74% Au alloy and 86% Au alloy(P >0.05).However,there were significant differences a-mong Ni-Cr alloy,Co-Cr alloy and Au-Pd alloy(P <0.05).Conclusion Precious metal prosthesis is superior to ordinary alloy prosthesis for controlling the adhesion of Streptococcus mutans. Therefore,precious metal prosthesis should be chosen as far as possible in clinical repair.%目的：比较在相同培养条件下，变形链球菌在5种临床常用合金材料（镍铬合金、钴铬合金、金钯合金、74％金合金、86％金合金）表面的黏附情况。
血链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh的同源性分析
血链球菌和变形链球菌耐酸相关基因ffh的同源性分析朱敏;张志民;董倩【期刊名称】《实用老年医学》【年(卷),期】2010(024)001【总页数】2页(P64-65)【作者】朱敏;张志民;董倩【作者单位】【正文语种】中文龋病是人类最常见的流行性疾病,世界卫生组织将龋病列为威胁人类健康的第三大疾病,是人类重点防治疾病之一。
老年人由于口腔组织器官的增龄变化,饮食习惯的改变,龋病发病率增高更为突出[1]。
细菌是龋病发生的重要因素之一,在对龋病微生物学特性的研究结果显示,血链球菌是最早在牙面定居的细菌之一,与窝沟龋的发生有关;而变形链球菌是最重要的致龋菌,与人类龋病密切相关。
细菌的致龋性除与其对牙面的黏附能力和产酸性有关外,还与其耐酸性密切相关。
耐酸性是细菌在低 pH 环境下继续产酸并行使功能的能力,被认为是致龋菌在牙的生物膜上生存的一个重要决定因素[2]。
目前耐酸相关基因 ffh受到国内外学者的密切关注,该基因编码产物为一生物活性蛋白,是真核细胞中参与蛋白质易位的信号识别颗粒 54kDa亚单位同系物[3]。
本研究拟对血链球菌和变形链球菌耐酸相关基因 ffh同源性进行初步探讨。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 细菌:变形链球菌和血链球菌34由上海第二医科大学九院微生物教研室提供。
1.1.2 主要仪器和试剂:GENESYS 2型紫外分光光度计(德国),凝胶电泳成像分析系统(美国基因公司),Biometra基因扩增仪(德国),SORVALL Biofuge stratos离心机;各种限制性内切酶(Takara),Vitagene小量基因组 DNA纯化试剂盒(意大利),DNA 片段快速纯化 /回收试剂盒(鼎国公司)。
1.2 方法1.2.1 致龋菌的培养:采用连续的厌氧菌培养技术,将复苏 48 h经鉴定为纯培养的血链球菌和变形链球菌接种于 LBs液体培养基,37℃厌氧培养 18 h。
1.2.2 细菌基因组的获得:上述细菌培养 18 h后,离心收集,用碱裂解法提取细菌基因组,为进一步聚合酶链反应(PCR)获得目的基因做准备。
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不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区（extended-V）的同
源性分析
不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的同源性分析
目的分析不同血清型变形链球菌表面蛋白可变区(extended-V)的基因及蛋白质的同源性,探讨该区在防龋疫苗研制中的作用.方法以变形链球菌血清型c、d、f、g参考株及部分c型临床株为模板,PCR扩增SrV+区片段,通过内切酶Dde Ⅰ进行限制性片段长度多态性分析并测序,将其测序结果在NCBI服务器上用blastn搜索软件进行同源性比较.结果在相同条件下血清c、f型菌株均扩增出约1.13 kb左右的片段,酶切后出现5种基因型(A、B、C、D、E).选取所占比例较多的A、B、C 型代表株进行测序,经比较显示其基因型间的同源性达92%-98%.血清d、g型无扩增产物,将g型6715表面蛋白SpaA全片段基因同OMZ175的产物序列在blastn上进行比较,有3个大小不一的片段出现同源性;血清d型OMZ176的表面蛋白基因序列在GeneBank上未能查出,故无法比较,但其相应蛋白质的同源性也在77%-82%之间,显示出相当高的同源性.结论就c、f型菌株来说,可以将该区纳入疫苗的研究范畴;d、g型虽未能扩增出相应产物,但其基因还是存在部分区域的相似性,且其蛋白质同源性很高,也可以考虑利用d、g型上同c、f型共有的某些肽段进行疫苗的研制.
作者：何奎芳刘建国刘天佳杨德琴庄姮李颂 HE Kui-fang LIU Jian-guo LIU Tian-jia YANG De-qin ZHUANG Heng LI Song 作者单位：何奎芳,HE Kui-fang(温州医学院附属口腔医院口腔内科) 刘建国,杨德琴,LIU Jian-guo,YANG De-qin(遵义医学院附属口腔医院,口腔内科,贵州,遵义,563003)
刘天佳,庄姮,李颂,LIU Tian-jia,ZHUANG Heng,LI Song(四川大学华西口腔医院,牙体牙髓科,四川,成都,610041)
刊名：华西口腔医学杂志ISTIC PKU英文刊名：WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY 年，卷(期)：2006 24(4) 分类号：
Q523 关键词：变形链球菌血清型 extended-V区同源性分析。