药品生产技术口腔细菌的培养实验报告

药品生产技术口腔细菌的培养实验报告变形链球菌、血链球菌、乳杆菌、粘性放线菌、中间普氏菌、白色念珠菌是常见的口腔致龋菌。本实验主要作为大实验的一部分，以标准株为培养对象，设置了各种细菌的普通培养法以及外加原卟啉的培养基培养法。

【关键词】变形链球菌血链球菌乳杆菌粘性放线菌中间普氏菌白色念珠菌培养

材料与仪器

菌株选择

变形链球菌ATCC 25175

血链球菌ATCC 1055611]

嗜酸乳杆菌ATCC 4356[1[3]

粘性放线菌ATCC 1598712]

中间普氏菌ATCC 25611[2]

白色念珠菌ATCC 90038

试剂与培养基

磷酸缓冲液PBS

无原卟啉培养液：

BHI液体培养基：将粉末溶于100ml纯水中，待溶解后调，高压灭菌，

4C冰箱保存备用。

[3]

BHI平板：BHI粉末、琼脂溶解于100ml纯水中，待溶解后调，高压灭菌，4C冰箱保存备用。

MRS液体培养基：MRS粉末溶解于100ml纯水中，调pH，高压灭菌，4C保存备用。

[3]

MRS平板：将 MRS粉溶于100毫升的纯水中，加2克琼脂，调整pH值，高压杀菌，4 C贮存。

SDA培养基：1克蛋白，4克葡萄糖，2克琼脂，加入蒸馏水到100毫升，调整到大约1/2，121 C的高压水蒸气消毒15分钟，冷却后加入50克/毫升的青霉素，将其倒装，放置4 C。(4)（)；

YPD液体介质：2克蛋白，2克葡萄糖，1克酵母，加入蒸馏水到100毫升，调整到121。

C高压蒸气消毒15分钟，冷却后加入50克/毫升的青霉素，放置4 C。(4)添加原卟啉（primary）培养物：

[5]6]加入水中，将其定容至500毫升，

原卟啉1 X （也可以是锌原卟啉，也可以是原卟啉二钠盐）

配制1克/婴儿的溶液将人加入到上述各种液体培养基中，将1克/儿原卟啉溶液配制为每一只婴儿3只的培养基。

【注意： BHI配方：将牛心脏提取物25毫升，牛脑提取物20毫升，胰蛋白酶，刃天青（%）的 VPI盐液。

盐酸半胱氨酸、葡萄糖、酵母萃取液、

MRS的配方：每100毫升的纯水中添加胰蛋白酶、牛油膏、酵母

萃取物、柠檬酸、葡

葡萄糖、乙酸钠、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸锰。

本试验是由简单的粉末混合而成。】

生长环境

无菌、厌氧（85% Nz、10%H2、5% CQ）、37 C （1）

主要设备

厌氧罐（美国 Bugboxdual）

消毒工作台

2种培育

变形链球菌的培养

用固态介质进行分离和提纯

用 BHI固态培养液接种环取变形链球菌ATCC25175，经37 C培养24 h。扩展栽培

BHI液态培养液37 C

将单个菌株分离接种于无原卟啉的研究

含原卟啉的 BHI液体培养基

在24小时内，在温度下进行培养。

血链球菌的培养

对ATCC10556进行分离和纯化，并将其扩增。

粘附性放线菌

中间型细菌培养

对中间普氏菌ATCC25611进行分离和纯化，并将其扩增。

乳杆菌培养

用固态介质进行分离和提纯

用接种环取..

扩展栽培

将单个菌株分离接种于无原卟啉的研究

含原卟啉的 MRS液体培养基

MRS液相介质，

在37℃下进行24 h的恒温培养。

假丝酵母培养

用固态介质进行分离和提纯

用接种环将白色假丝酵母 ATCC 90038接种于 SDA固态培养液中，经37 C培养24 h。

扩展栽培

YPD液体和含有原卟啉的 YPD液体介质，37 C

将单个菌株分离接种于无原卟啉的研究

在温度下进行24小时的培养。