特殊杂质检查(Therelativesubstancetest)
特殊杂质检查法
2.阿司匹林中检查游离水杨酸 游离水杨酸来源：a.生产中未 反应完全；b、贮存中水解 影响：游离水杨酸酸性较强， 对胃粘膜43;Fe3+一不反应 SA+Fe3+一紫堇色
检查方法：样品管：取样品0.1g，加乙醇 1ml溶解 1ml 加水至50m1 标准管：水杨酸0.1g加水溶解，加醋酸 加水至1000m1,取出1.0m1加 乙醇1ml，水48ml。 样品管、标准管均加新制成稀硫酸铁铵 lml，摇匀30"内如显色，比较不得更深。
③加校正因子的主成分自身对照法 将供试溶液稀释成与杂质限度相 当浓度作为对照溶液，分别取供试溶 液和对照溶液进样分析，供试液中各 杂质峰面积总和与校正因子相乘后与 对照溶液主成分峰面积比较，计算供 试品中杂质的含量。
校正因子（f） =
AS / CS AR / CR
（C x） f × =
Ax ′ AS / C'S
例如ChP2000枸橼酸乙胺嗪中检查N-甲 基哌嗪。 板：硅胶G薄层板 点样：供试品（50mg/ml甲醇液， 对照品(N-甲基哌嗪50μg/ml甲醇液）， 各10μl 展开剂：氯仿：甲醇：氨水(13： 5：1） 显色剂：置碘蒸气中显色。 规定：供试品液所显与对照品液 相应的杂质斑点，颜色不得深于对照 品液主斑点。
L = 杂质量/ 供试品量×100% = 2×10 ×100% = 0.06%
0.05 453× 100 −3
3）吸附或分配性质的差异（色谱差异） （1）TLC:根据药物与杂质对吸附剂 的吸附或展开剂的解析能力不同，加以 分离和检查。 ①利用待检杂质的纯品作对照：用待 检杂质纯品（或可能存在的杂质纯品） 作为对照液，与供试液点于同一薄层板 上，展开和定位后进行检查。
②不加校正因子的主成分自身对照法
中药制剂特殊杂质的检查(中药制剂检验课件)
-7-
二、必备知识
一、乌头碱的检查
2、高效液相色谱法（HPLC法） 制川乌中双酯型生物碱的检查 供试品溶液的制备：取制川乌粉末（过三号筛）约2g，精密称定，至具塞锥形
36g，加氨试液4ml，拌匀，放置2小时，加乙醚60ml，振摇1小时，放置24 小时，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇溶解使成1ml，作为供试品溶液。另 取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。 吸取供试品溶液12μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯 甲烷（经无水硫酸钠脱水处理）-丙酮-甲醇（6∶1∶1）为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上出现 的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。
-5-
二、必备知识
一、乌头碱的检查
2、高效液相色谱法（HPLC法） 制川乌中双酯型生物碱的检查 色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈四氢
呋喃（25∶15）为流动相A，以0.1mol/L醋酸铵溶液（每1000ml加冰醋酸 0.5ml）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为235nm。理 论板数照苯甲酰新乌头原碱峰计算应不低于2000。
瓶中，加氨试液3ml，精密加入异丙醇-乙酸乙酯（1∶1）混合液50ml，称定 重量，超声处理（功率300W，频率40kHz；水温在25℃以下）30分钟，放冷， 再称定重量，用异丙醇-乙酸乙酯（1∶1）混合液补足减失的重量，摇匀，滤过。 精密量取续滤液25ml，40℃以下减压回收溶剂至干，残渣精密加入异丙醇-三 氯甲烷（1∶1）混合液3ml溶解，滤过，取续滤液，即得。
药物分析第05章巴比妥类药物的分析
医学ppt
13
2. 化学性质 （1） 弱酸性
巴比妥类药物分子结构中都有1,3-二酰亚 胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水 溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水
溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成
水溶性的盐类。
医学ppt
14
O H
R1 C N
C
CO
R2
CN H
O
O
R1 C N
医学ppt
41
2. 芳环取代基的反应
(1) 硝化反应
含有芳香取代基的巴比妥类药物，与硝酸 钾及硫酸共热，可发生硝化反应，生成黄色 硝基化合物。
苯巴 K 比 N 3H 妥 O 2S4 O 黄色
医学ppt
42
2. 芳环取代基的反应
(2) 与硫酸－亚硝酸钠的反应
苯巴比妥与NaNO2—H2SO4反应生成橙 黄色→橙红色
医学ppt
36
2. 与铜盐的反应
取 供 试 品 约 50mg ， 加 吡 啶 溶 液 （ 1→10 ） 5m1，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜4g，水 90ml溶解后，加吡啶30m1，即得）1m1，即显 紫色或生成紫色沉淀。
医学ppt
37
（二）熔点测定
巴比妥类的钠盐＋酸 → 游离巴比 妥类药物↓ → 过滤 → 洗涤 → 干燥 → 测熔点
C
CO
CN
H O
苯巴比妥
Phenylb医学aprpt bital
8
O
H
CH2 CH CH2 C N
C
C ONa
C3H7 CH C N
CH3 O
司可巴比妥钠
Secobarbital
医学ppt
药物中特殊杂质的检查
精品PPT
一、目的要求 1.掌握本实验中药物特殊杂质的来源 (láiyuán)； 2.掌握特殊杂质检查的操作方法。
精品PPT
二、实验(shíyàn)原理
•
特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引
入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、
• 2.H板：玻璃背面先贴上标签（H板），取硅胶 H粉5g，加18毫升CMC-Na，同上法制板，平推 ，勿动！！--制板完让老师(lǎoshī)看板，认可 后方能离开。
精品PPT
精品PPT
（三）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基(ānjī)苯甲酸的 检查
检查 吸取上述两种溶液各10μl（毛细管高度(gāodù)约 2.0cm），分别点于同一含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅 胶H薄层板上。以苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4）为 展开剂，展开后，晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2%对 二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加入冰醋酸5ml制成）喷 雾显色，供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜 色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。
5品30片片0025g片研细用乙醇片研细用乙醇15ml分分次研磨并移入次研磨并移入50ml量瓶中充分振摇用水稀释至刻量瓶中充分振摇用水稀释至刻度摇匀立即滤过精密量取续滤液度摇匀立即滤过精密量取续滤液2ml置置50ml纳纳氏比色管中用水稀释至氏比色管中用水稀释至50ml立即加新制的稀硫酸铁立即加新制的稀硫酸铁铵溶液铵溶液3ml摇匀摇匀20秒钟内如显色与对照液精密秒钟内如显色与对照液精密量取量取001水杨酸标准溶液水杨酸标准溶液45ml加乙醇加乙醇3ml005酒酒石酸溶液石酸溶液1ml用水稀释至用水稀释至50m
原理：
药物杂质检查 特殊杂质检查
2、利用药物和杂质在化学性质上的差异 酸碱性的差异 ✓ 利用杂质的酸、碱性。规定消耗滴定 液的体积、规定pH值范围、指示剂法 氧化还原性的差异 ✓ 利用药物与杂质之间的氧化还原电位 的差异进行检查 杂质与一定试剂反应产生气体 ✓ 砷、硫、碳酸盐、氨或胺盐、氰化物 杂质与一定试剂反应产生沉淀
目录页
Contents
1.药物中杂质的来 源及其种类
3.特殊杂质检查
2.一般杂质检查
3.特殊杂质检查
Part3 特殊杂质检查
一、特殊杂质的概念
1、特殊杂质 在生产和贮藏过程中可能引入特有的杂质
二、特殊杂质检查方法
1、利用药物和杂质在物理性质上的差异 臭味及挥发性的差异 ✓ 药物（特别是挥发性药物）中如存在具有特殊气味的杂质，可以由气味判 断该杂质的存在
✓如麻醉乙醚异臭检查，控制原料乙醇中引入的杂醇油以及乙醛和过氧化物等杂质。方 法为：取供试品10ml，置于瓷蒸发皿中，使自然挥发，挥散完毕后，不得有异臭
Part3 特殊杂质检查
二、特殊杂质检查方法
1、利用药物和杂质在物理性质上的差异 颜色的差异
✓ 某些药物自身无色，但从生产中引入了有色的有关物质，或其分解产物有颜色 ✓维生素C溶液颜色检查：加水溶解应澄清无色
溶解行为的差异
✓ 有的药物可溶于水、有机溶剂或酸、碱中，而其杂质不溶；反之，杂质可溶而药物不溶
旋光性质的差异
✓ 比旋度（旋光度）的数值可以用来反映药物的纯度，限定杂质的含量 ✓ 中国药典规定使用钠光谱的D线（589.3nm）测定药物在特定溶液中的旋光度
✓黄体酮在乙醇中的比旋度范围限定。硫酸阿托品（无旋光性）50 mg/ml水溶液的旋光 度不得过-0.4°（特殊杂质莨菪碱为左旋体）
4+药物的特殊杂质检查
检查法 6. 特殊杂质检查法
29
第三章 药物的杂质检查
基本要求
❖掌握药物纯度、杂质及其限度的概 念,杂质限度表示及计算方式, 氯化 物、重金属、砷盐等一般杂质检查原 理与操作要点. ❖熟悉药品与化学试剂标准的区别, 特殊杂质检查原理,薄层色谱法在药 物分析中的应用. ❖了解药物杂质的来源途径.
30
第三章 药物的杂质检查
1.药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列
三种类型 对照法 、 灵敏度法 、 比较法 。
2.药物中存在的杂质，主要来源于两个方面，即生
和 储存 。
产
3.药物中微量的氯化物在 硝酸 酸性条件下与 硝酸银
反应，生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊，
与一定量的标准氯化钠溶液（浓度1为0ug/ml ） 在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判
4
(二) 颜色差异
一 物
药物自身无色
理
生产中引入有色的有关物质
性 或分解产物.
质 差
例：磺胺嘧啶原料药颜色检查
异
——磺胺苯环上胺基被氧化
生成有色偶氮苯化合物.
5
(三) 溶解行为的差异
一
物
理 性
根据药物与杂质溶解度的差异
质 例：葡萄糖中糊精的检查
差
异
6
(四) 旋光性质的差异
一 物
1. 药物有旋光度而杂质没有.
行
HO
为
OH 肾上腺素
差
HO
CH CH2NHCH3
异
HO
药物分析特殊杂质检查项目与方法
药物分析特殊杂质检查项目与方法药物名称特殊杂质检查项目检查方法阿司匹林游离水杨酸纳氏比色管比色法布洛芬有关物质TLC,自身稀释对照法丙磺舒有关物质TLC,自身稀释对照法盐酸普鲁卡因注射液对氨基苯甲酸TLC,杂质对照品(对氨基苯甲酸)法对乙酰氨基酚有关物质TLC,杂质对照品(对氯乙酰苯胺)法对氨基酚纳氏比色管比色法肾上腺素酮体UV,310nm测定吸光度值苯巴比妥中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量司可巴比妥钠中性或碱性物质重量分析法,碱性条件下用乙醚提取后称定重量异烟肼游离肼TLC,杂质对照品（硫酸肼）法硝苯地平有关物质HPLC，外标法诺氟沙星有关物质HPLC，外标法盐酸氯丙嗪有关物质TLC，自身稀释对照法地西泮及其注射液有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法奥沙西泮有关物质TLC，自身稀释对照法硫酸阿托品莨菪碱旋光法其他生物碱比浊法盐酸吗啡阿扑吗啡比色法罂粟酸比色法其他生物碱TLC，自身稀释对照法与对照品（磷酸可待因）法硫酸奎宁三氯甲烷-乙醇中的不溶物重量分析法其他金鸡纳碱TLC，自身稀释对照法硝酸士的宁马钱子碱硝化反应后观察颜色，不得显红色或红棕色葡萄糖亚硫酸盐与可溶性淀粉加碘试液反应应，应即显黄色蛋白质与磺基水杨酸反应，不得产生沉淀右旋糖酐20 分子排阻HPLC，示差折光检测器醋酸地塞米松有关物质HPLC，不加校正因子的主成分自身对照法硒UV，氧瓶燃烧破坏后测定吸光度值维生素B1 总氯量容量分析法，银量法维生素C 铁盐和铜盐原子吸叫分光光度法维生素E 生育酚容量分析法，铈量法正已烷外标法，GC，FID检测器维生素K1 甲萘醌比色法顺式异构体HPLC，面积归一化法青霉素钠（钾）吸光度难关UV青霉素聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器阿莫西林有关物质HPLC，梯度洗脱阿莫西林聚合物分子排阻HPLC，葡聚糖凝胶柱，UV检测器硫酸庆大霉素G组分HPLC，蒸发光散射检测器盐酸四环素有关物质HPLC，加校正因子的主成分对照法罗红霉素有关物质HPLC。
药品特殊杂质检测方法-V1
药品特殊杂质检测方法-V1
[正文]
药品特殊杂质指的是在药品中可能存在的未被药品原料、药品生产工艺等方面控制的杂质，这些杂质可能是有害的，因此对药品特殊杂质的检测至关重要。
药品特殊杂质的检测方法也经历了不断的更新和发展。
以下是药品特殊杂质检测方法的一些整理：
1. 红外光谱法
红外光谱法是通过测量药品中不同组分在不同波长下红外光的吸收程度来进行检测的。
此方法准确度高，且操作简单，但是需要样品纯度较高，且样品制备要求比较严格。
2. 质谱法
质谱法是利用药品分子的质量-电荷比来进行检测的。
该方法准确度非常高，可以检测分子量小于1 Dalton的物质，但是需要样品制备技术高超，设备大型化，价格昂贵。
3. 核磁共振法
核磁共振法是利用药品中原子核的磁性偏振来进行检测的。
该方法可以提供分子结构和化学环境的信息，并能够用于鉴定同分异构体。
但是此方法对设备要求高且需要对样品有一定的特殊处理。
4. 毛细管电泳法
毛细管电泳法是利用药品中带电离子在电场作用下发生迁移的特性进行检测的。
此方法具有分离效果好，极小抗性等优点，但是需要使用一定水平的电泳液、需要样品制备技术高超。
5. 液相色谱法
液相色谱法以样品在不同试剂中的扩散系数或分配系数的差异为基础进行检测。
该方法可以用于检测特殊杂质中的不同成分，具有操作简单，准确度高的优点，但是需要硬件设施条件的支持。
综上所述，药品特殊杂质检测方法各有优缺，选择适当的方法对监管和药品生产有很大的作用。
在选择具体的检测方法时，需要根据实际情况而定，以达到检测效果的最佳化。
甾体激素类药物的分析——特殊杂质检查
第三节特殊杂质检查 多由结构改造来，可能带来原料、中间体、异构体、降解产物以及试剂溶剂等，是⼀重要项⽬。
此外，有些甾体药物还规定其他检查项⽬。
⼀、游离磷酸 ⽰例中国药典收载地塞⽶松磷酸钠的检查，⽅法为： 称取供试品20mg，置25ml量瓶中，加⽔15ml溶解；另取标准磷酸盐溶液[精密称取经105℃⼲燥2h的磷酸⼆氢钾0.35g，置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3→10）10ml与⽔适量使溶解，并稀释⾄刻度，摇匀；临⽤时再稀释10倍]4.0ml，置另⼀25ml 量瓶中，加⽔11ml；各精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2萘酚-4-磺酸溶液（另取⽆⽔亚硫酸钠5g，亚硫酸氢钠94.3G与1-氨基-萘酚-4-磺酸0.7g，充分混合，临⽤时取此混合物1.5g加⽔10ml使溶解，必要时过滤）1ml，加⽔⾄刻度，摇匀，在20℃放置30~50min，在740nm的波长处测定考试，⼤收集整理吸收度。
供试品溶液的吸收度不得⼤于对照溶液的吸收度。
原理：酸性条件下，磷酸与钼酸作⽤⽣成磷钼酸铵，再经还原形成磷钼酸蓝（钼蓝），在740nm波长处有吸收。
⼆、甲醇和丙酮 ⽰例地塞⽶松磷酸钠⽅法： 精密量取甲醇10µl（相当于7.9mg）与丙酮100µl（相当于79mg），置100ml量瓶中，精密加0.1%（ml/ml）正丙醇（内标物质）溶液20ml，加⽔稀释⾄刻度，摇匀，作为对照液；另取本品⽉约0.16g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加⼊上述内标溶液2ml，加⽔溶解并稀释⾄刻度，摇匀，作为供试品。
取上述溶液，照⽓相⾊谱法，⽤⾼分⼦多孔⼩球⾊谱柱（按正丙醇计算的理论板数应⼤于700），在柱温150℃测定。
含丙酮不得过5.0%（g/g），并不得出现甲醇峰。
本品在⽣产⼯艺中使⽤⼤量甲醇和丙酮，因此要检查。
甲醇的检测限为3.1ng. 三、雌酮 炔雌酮中雌酮检查⽅法如下： 取本品5mg溶于0.5ml⼄醇，加间⼆硝基苯0.05g，再加新配制的稀氢氧化钾-⼄醇液0.5ml，在暗处放置1h后，再加⼄醇10ml 时，溶液呈现的颜⾊不得⽐下⾯的对照液更深。
特殊杂质检查Therelativesubstancetest
色环 （B） (4) 在酸性溶液中与三氯化铁反应 显紫堇色 （D）
5. 巴比妥类药物的鉴别方法有:
A. 与钡盐反应生成白色化合物 B. 与镁盐反应生成红色化合物
C. 与银盐反应生成白色沉淀
D. 与铜盐反应生成有色产物 E. 与氢氧化钠反应生成白色沉淀
6．中国药典（2000年版）中司可巴比妥钠鉴
别及含量测定的方法为:
pH10和强碱溶液的吸收度之差
2)差示法测定血清中苯巴比妥 含量 自学 要弄明白.
（五）高效液相色谱法
第四章 巴比妥类药物的分析 1．掌握巴比妥类药物的化学结 构与分析方法间的关系： （1）弱酸性 （2）水解性 （3）与重金属离子的反应
2．掌握巴比妥类药物的鉴别：
（1）与重金属的反应 （2）特殊取代基（不饱和烃基 取代、芳环取代）和硫元素的 鉴别试验
每1 ml 硝酸银滴定液（0.1 mo1/L） 相当于22.63 mg的异戊巴比妥 C11H18N2O3。
3. 注意事项
（1）无水碳酸钠应新鲜配制
（2）AgNO3滴定液应新鲜配制
（3）银电极使用前应进行处理
（二）溴量法
凡取代基中含有双键的巴比妥
类药物，其不饱和键可与溴定量地 发生加成反应，故可采用溴量法进
终点指示：电位法指示（Ag电极 为指示电极，饱和甘汞电极为参 比电极）自身指示 溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠 原 理 ：反应摩尔比（1∶1）
测定方法与计算
异戊巴比妥：
取本品约0.2 g，精密称定，加甲醇
40 ml使溶解，再加新制的3％无水碳
酸钠溶液15 m1，照电位滴定法，用
硝酸银滴定液（0.1 mol/L）滴定。
检查方法： 碱性条件下乙醚提取，蒸 干乙醚，称重。不能超过0.3%。
特殊杂质检查
多组分混合物不经分离的定量方法 ——计算分光光度法
解方程组法 双波长分光光度法 差示分光光度法 导数光谱法 三波长法
差示分光光度法（ 法）
利用在不同的值下的电离级数不 同,而产生不同的光谱,进行计算. 适合于巴比妥制剂分析和体内药 物监测.
)复方苯巴比妥散中巴比妥的差 示分光光度法测定.
溶解
淡蓝色
本类药物在水中的溶解度小，常在 含水的醇中进行。
异戊巴比妥的含量测定 取本品约 ，精密称定，加乙醇 溶 解后，加麝香草酚酞指示液滴，用 氢氧化钠滴定液（ ）滴定，并将滴 定结果用空白试验校正，即得。每 氢氧化钠滴定液（ ）相当于 的。
原料药：直接滴定法（空白校正）
百分 含 T(V量 V0)F10% 0 ms
（四）、 直接紫外分光光度法 本法是将样品溶解后，根据溶液 的值选用其相应的 处进行直接 测定。
单组分定量方法：
吸收系数法
A E11c%mCl C(g/100)mlA
E11c%m l
C(g/m)l A E11c%m l100
标准曲线法
对照法
A供 E11c%mC供l A对 E11c%mC对l
特殊杂质检查 ()
()
用丙二酸二酯合成法，在乙醇钠的 催化下，在位碳上先上较大的异戊 基，再上较小的乙基，最后与脲素 关环缩合。
COOEt COOEt
R1X EtONa
EtBr EtONa
R1 COOEt R2 COOEt
O H2N NH2
EtONa
O R1
R2 O
NH O
NH
R1Br: iso-Amyl Bromide
2
摩尔数。
13.01mg ml
. 注意事项
特殊杂质检查法
三、猪去氧胆酸的检查
安宫牛黄丸中猪去氧胆酸的限量检查-薄层色谱法 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不 得显相同颜色的斑点。
四、土大黄苷的检查
1. 大黄流浸膏中土大黄苷的检查-荧光分析法 置紫外光灯(365nm)下观察，不得显持久的亮紫色荧光。
2. 三黄片中土大黄苷的检查-薄层色谱法 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不得显
二、乌头碱的检查
1.三七伤药片和附子理中丸中乌头碱的限量检查-薄层色 谱法
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上出现的 斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。
2.制川乌中酯型生物碱的检查-高效液相色谱法
制川乌中含双酯型生物碱以乌头碱（C34H47NO11）、次 乌头碱（C33H45NO10）及新乌头碱（C33H45NO11）的总量计， 不得过0.040%。
相同颜色的荧光斑点。
五、焦袂康酸的检查
灯盏生脉胶囊中焦袂康酸的检查-化学反应法 供试品的水溶液加三氯化铁试液1滴，不得显红色。
点滴积累
1. 特殊杂质指在某些药物制剂生产和贮运过程中，由于药 物本身的性质、生产方式及工艺条件可能引入的杂质。
2. 附子、川乌、草乌等药材及含此类药材的制剂需要进行 乌头碱型生物碱限量检查，常用的检查法是薄层色谱法。
特殊杂质检查法
Shandong College of Traditional Chinese Medicine
ห้องสมุดไป่ตู้
一、概述
特殊杂质指在某些药物制剂生产和贮运过程中，由 于药物本身的性质、生产方式及工艺条件可能引入的杂 质。
特殊杂质的检查一般是利用药品和杂质的理化性质 及生理作用的差异，采用物理的、化学的、药理的、微 生物的方法来进行。
最新整理执业药师《药物分析》冲刺辅导精华(13)
执业药师《药物分析》冲刺辅导精华(13)药物中特殊杂质检查法步骤特殊杂质是指在该药物的生产和贮存过程中，根据药物的性质、生产方式和工艺条件，有可能引入的杂质。
这类杂质随药物的不同而异。
由于特殊杂质多种多样，检查方法各异，故一般将其分成四大类：一、物理法：利用药物与杂质在嗅、味、挥发性、颜色、溶解及旋光性等上的差异，检查所含杂质是否符合限量规定。
二、化学反应法：(一)容量分析方法：利用药物与杂质在酸碱性及氧化还原性等方面的差异，用标准溶液滴定来测定杂质含量。
(二)重量分析方法：在一定实验条件下测定遗留物重量。
(三)比色法和比浊法：利用杂质特有的呈色反应(比色法)和沉淀反应(比浊法)与标准对照。
三、色谱法：(一)纸色谱法(P a p e r C h r o m a t o g r a p h y，P.C)：取一定量供试品溶液杂质限量对照品溶液，于同一色谱滤纸上点样，展开，检出后，比较杂质斑点的个数、颜色深浅或荧光强度等。
通常用于极性较大的药物或放射性药物的检查。
该法展开时间长、斑点较为扩散、不能用强酸等腐蚀性显色剂。
(二)薄层色谱法(T h i n L a y e r C h r o m a t o g r a p h y，T L C)：类似纸色谱法，但较简便、快速、灵敏、不需特殊设备，适用于有机杂质的检查。
另外，一般将与主药有密切相关的原料、中间体、副产物或分解产物等特殊杂质称为有关物质，将甾体类药物中的特殊杂质称为其它甾体。
T L C法按操作方法又可归纳为如下几种情况：1、在一定供试品及检查条件下，不允许有杂质斑点存在。
2、选用实际存在的待检杂质作为杂质对照品。
3、选用可能存在的某种杂质作为杂质对照品。
4、将供试品稀释到适当浓度作为杂质对照溶液。
5、选用质量符合规定的与供试品相同的药物作为杂质对照品。
(三)高效液相色谱法(H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i dC h r o m a t o g r a p h y，H P L C)：本法分离效能高、专属性强和检测灵敏，适用于有机杂质，但更多地用于含量测定。
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A E
1% 1cm
l
A C (g/ml ) 1% E1cm l 100
B 标准曲线法
C 对照法
A供 A对
A供 A对
E C供 l E C对l
C供 C对
1% 1cm
1% 1cm
C供 C对
A供 A对
P109，根据现有的UV数据 就可以进行定量。
测定硫喷妥钠的方法(对照法)： 取 硫 喷 妥 钠 约 0.25 g ， 置 于 500 ml 量瓶中，加水稀释至刻度 , 用 0.4% 氢 氧 化 钠 溶 液 定 量 稀 释 成 5ug/ml 的溶液 , 另取对照品同样定 量稀释成 5ug/ml 的溶液 , 304nm 下 测定 , 根据每支的平均装量进行计 算 ,1mg 硫喷妥相当于 1.091mg 的硫 喷妥钠,以氢氧化钠溶液作空白。
2 中性及碱性物质 副产物和分解产物，酰 脲或酰胺类化合物等。不溶 于氢氧化钠而溶于乙醚，碱 性提取，干燥，称重，测残 渣。同苯巴比妥。
五 含量测定(Assay) （一）、银量法
用银盐滴定，形成一银盐后， 二银盐一出现就沉淀，以此指示 终点。现采用电位法指示终点。 专属性很强，因为分解产物与 杂质都不与硝酸银反应（为什么 只与二酰亚胺的结构反应？）。 缺点是受温度的影响大。
百分含量 T（V0 V）F 100 % ms
CM T （滴定度） n C：摩尔浓度，M：摩尔质 0.1 mol L 260.27 g mol 量（分子量），n：滴定液 2 的摩尔数。 13.01 mg ml
3. 注意事项 （1）操作中要防止溴和碘的逸失
（2）平行条件进行空白试验可减少溴
3．掌握巴比妥类药物含量测定的原理 与方法： （1）银量法测定的原理与含量计算： （2）溴量法测定的原理与含量计算： （3）紫外分光光度法测定（计算）：
目的要求： 1 ．掌握巴比妥类药物的化学结构 与分析方法间的关系；掌握巴比妥、 苯巴比妥、司可巴比妥及硫代巴比妥 类药物的鉴别，巴比妥类药物的银量 法与溴量法测定的原理与方法。 2．熟悉巴比妥类药物的紫外分光光 度法。 3．了解苯巴比妥的特殊杂质及其检 查。
摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液 （0.1mol/L）滴定，至近终点时， 加淀粉指示液，继续滴定至蓝色 消失，并将滴定结果用空白试验 校正。每1ml溴滴定液（0.1mo1/L） 相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。
原料药：剩余滴定法（回滴定法）
作空白实验的百分含量计算： Vo：空白试验消耗滴定液的体积， V：样品测定消耗滴定液的体积， F：滴定液浓度矫正因子
特殊杂质检查 (The relative substance test)
COOEt COOEt
R1X EtONa
EtBr EtONa
R1
COOEt
R2 COOEt
O H2N NH2 R1 R2
O NH O NH O
EtONa
R1Br: iso-Amyl Bromide
一 苯巴比妥的特殊杂质检查 1 酸度 主要控制苯基丙二酰 脲。是乙基化产物不完全而产 生的。因5位存在氢，使酸性 比巴比妥强，能使甲基红指示 剂成红色。
终点指示：电位法指示（Ag电极 为指示电极，饱和甘汞电极为参 比电极）自身指示 溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠 原 理 ：反应摩尔比（1∶1）
测定方法与计算
异戊巴比妥：
取本品约0.2 g，精密称定，加甲醇
40 ml使溶解，再加新制的3％无水碳
酸钠溶液15 m1，照电位滴定法，用
硝酸银滴定液（0.1 mol/L）滴定。
多组分混合物不经分离的定量方法——计算分光光度法解方程组法 双波长分光光度法 差示分光光度法
导数光谱法
三波长法
3 差示分光光度法（A法） 利用在不同的pH值下的电离级数 不同,而产生不同的光谱,进行计 算.适合于巴比妥制剂分析和体内 药物监测.
1)复方苯巴比妥散中巴比妥的 差示分光光度法测定. 在复方中阿司匹林,水杨酸 等成分在两种不同的pH下的差 值没有变化,而苯巴比妥的差值 变化大,只与它自己的浓度成正 比.
和碘逸失带来的误差。
（三） 酸碱滴定法 用碱滴定液测定酸类物质的中 和法称为酸量法。
用酸滴定液测定碱类物质的中 和法称为碱量法。
1. 在水—醇混合溶剂中的滴定法
弱酸性
水—醇
pKa7.3～8.4
麝香草酚酞
异戊
溶解
NaOH
淡蓝色
本类药物在水中的溶解度小，常在 含水的醇中进行。
异戊巴比妥的含量测定
取本品约 0.5 g ，精密称定，加乙醇
物是:
A. 苯巴比妥
B. 异戊巴比妥
C. 司可巴比妥
D. 巴比妥
E. 硫喷妥钠
4. 用于鉴别反应的药物: A. 硫喷妥钠 B. 苯巴比妥 C. A和B 均可 D. A和B 均不可 (1) 与碱溶液共沸产生氨气（C） (2) 在碱性溶液中与硝酸银试液反 应生成白色沉淀 （ C）
(3) 与甲醛 - 硫酸反应生成玫瑰红
pH10和强碱溶液的吸收度之差
2)差示法测定血清中苯巴比妥 含量 自学 要弄明白.
（五）高效液相色谱法
第四章 巴比妥类药物的分析 1．掌握巴比妥类药物的化学结 构与分析方法间的关系： （1）弱酸性 （2）水解性 （3）与重金属离子的反应
2．掌握巴比妥类药物的鉴别：
（1）与重金属的反应 （2）特殊取代基（不饱和烃基 取代、芳环取代）和硫元素的 鉴别试验
必要条件
（ 1 ）供试品在不同的化学环境中 以不同的分子形式存在，它们的
吸收光谱有显著的差异。 （2）干扰物的吸收不受测定时化
学环境的影响，光谱行为不变。
定量依据 供试品在两种不同的化学环境中 分别以x、y 表示，干扰物用 z 表示
A A样品 A参比 ( Ax Az ) ( Ay Az )
每1 ml 硝酸银滴定液（0.1 mo1/L） 相当于22.63 mg的异戊巴比妥 C11H18N2O3。
3. 注意事项
（1）无水碳酸钠应新鲜配制
（2）AgNO3滴定液应新鲜配制
（3）银电极使用前应进行处理
（二）溴量法
凡取代基中含有双键的巴比妥
类药物，其不饱和键可与溴定量地 发生加成反应，故可采用溴量法进
色环 （B） (4) 在酸性溶液中与三氯化铁反应 显紫堇色 （D）
5. 巴比妥类药物的鉴别方法有:
A. 与钡盐反应生成白色化合物 B. 与镁盐反应生成红色化合物
C. 与银盐反应生成白色沉淀
D. 与铜盐反应生成有色产物 E. 与氢氧化钠反应生成白色沉淀
6．中国药典（2000年版）中司可巴比妥钠鉴
别及含量测定的方法为:
T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 V——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml） V0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml）
c实测 F——浓度校正因子 F c标准
ms——供试品的质量
2. 非水溶液滴定法 巴比妥类药物在非水溶液中 的酸性增强，用碱滴定，终 点明显。
溶
剂：二甲基甲酰胺
A. 银镜反应进行鉴别
B．采用熔点测定法鉴别
C．溴量法测定含量
D. 可用二甲基甲酰胺为溶剂，甲醇
钠的甲醇溶液为滴定剂进行非水滴定
E. 可用冰醋酸为溶剂，高氯酸的冰 醋酸溶液为滴定剂进行非水滴定
7. 凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，
如司可巴比妥钠，中国药典（2000年版）
采用的方法是:
A. 酸量法
滴定剂：甲醇钠（钾）
指示剂：麝香草酚蓝 司可巴比妥的测定（P108）
戊巴比妥的测定（P108）
略。
（四）、 UV
1 直接紫外分光光度法
本法是将样品溶解后，根据溶液 的 pH值选用其相应的 max处进行直
接测定。
单组分定量方法：
A 吸收系数法
A E Cl
1% 1cm
C (g/100ml )
C供 C对 C C供 n
A供 A对
对照法
n——稀释倍数
A供 A对 A供 n V C对
m C V C对
500 m（ mg） 200 1.091 1000 A对 5 20 C 对 A供 A对 1.091
2 经提取分离后的紫外分光光 度法 要点：经提取，反提后， 调pH，测氢氧化钠液的UV , 可排除杂质.
20 m1 溶解后，加麝香草酚酞指示液 6 滴，
用氢氧化钠滴定液（0.1 mo1/L）滴定， 并将滴定结果用空白试验校正，即得。 每l ml氢氧化钠滴定液（0.1 mol/L）相 当于22.63 mg的C11H18N2O3。
原料药：直接滴定法（空白校正）
T (V V0 ) F 百分含量 100% ms
行测定。如司可巴比妥钠及其胶囊
的测定。
Br2＋2KI＝2KBr＋I2 I2＋2Na2S2O3＝2NaI＋Na2S4O6
溴滴定液（0.1 mol/L）的
配制：取溴酸钾3.0 g与溴化钾15 g， 加水适量使溶解成1000 ml，摇匀。
反应摩尔比1∶2
测定方法与计算（剩余滴定法 ） 司可巴比妥钠 ChP（2000）： 取本品约0.1g，精密称定，置250ml 碘瓶中，加水 10m1 ，振摇使溶解，精密 加溴滴定液（ 0.1mol/L ） 25ml ，再加盐 酸5m1，立即密塞并振摇1min，在暗处静 置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试 液10m1，立即密塞。
检查方法 取本品0.2克， 加水10ml，煮沸搅拌1min，放 冷，滤过，去5ml，加甲基橙 1d，不得显红色。
2 溶液的澄清度 主要控制苯巴比妥中乙醇 不溶性杂质，利用苯巴比妥酸 等在乙醇中的溶解度小的特性 进行检查。
取苯品1.0g，加乙醇 5ml，加热回流3min，溶液 应澄清。