金银花有效成分提取技术研究
金银花有效成分提取技术研究
金银花（Lonicera japonica Thunb.）是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾,具有清热解毒、通经活络、广谱抗菌抗病毒等功效,目前70%以上的消炎、感冒中成药中都含有金银花。随着对金银花研究的深入,人们逐渐认识到金银花浑身都是宝,其用途也越来越广泛,在医药产业、饮料食品产业、保健品产业及日用化工产业都有应用。
目前,对金银花有效成分的提取分离及应用还没有进入规模化生产阶段,因此有必要对其有效成分进行提取分离与应用,并进行深入产业化研究。为此,根据技术的成熟度、投入产出比、工业化可行性等因素,本研究筛选了挥发油、活性成分提取工艺进行优化比较研究。
采用共水蒸馏、超临界萃取、水提醇沉、超声辅助乙醇提取实验小试、中试及气相色谱-质谱联用、高效液相色谱法等多种现代技术手段,对金银花有效成分进行了提取、工艺优化与测定比较分析,获得最优工艺条件和评价指标体系。1.采用共水蒸馏法对金银花挥发油进行提取,原料使用量250 g,在5 L圆底烧瓶中进行提取,通过单因素试验和正交试验得到最佳提取工艺为:金银花粉碎度20目,5%盐溶液浸泡28 h,料液比1:10（g:mL）,提取时间42 h,挥发油得率0.171%,产物为淡黄色蜡状固体,脂腊味较重;产物经过GC-MS分析,检测到金银花挥发油成分79种,其中脂肪酸类成分9种（占69.1%）、脂类成分17种（占16.83%）和烷烃类成分15种（占5.37%）最多,占总成分的91.3%。
2.采用超临界CO2萃取金银花挥发油,通过单因素试验和正交试验得到最佳萃取工艺为:萃取压力45 MPa,萃取温度45℃,静态萃取0.5 h,动态萃取1 h,CO2流量4 L/min,萃取得率2.0687%,产物为淡黄色至淡
绿色膏状物,气味清香柔和;产物经GC-MS分析,检测到金银花挥发油成分57种,其中脂肪酸类13种（占55.59%）、烷烃类11种（占21.66%）和脂类成分11种（占5.13%）最多,占总成分的82.38%。说明优化超临界萃取条件可提高得率。
3.采用水提醇沉法提取金银花活性成分,通过单因素试验和响应面试验,得到水提醇沉金银花最佳提取工艺为:料液比1:30（g:mL）,提取温度90℃,提取2次,每次45min,醇沉浓度75%,绿原酸提取率为73.72%。水提醇沉工艺在10 L反应釜放大阶段,加入负压提取条件,其余条件同小试,以醇沉液绿原酸和木犀草苷得率为检测指标,获得最佳工艺为,真空度0.06 MPa左右,提取温度75℃
77℃,绿原酸提取率达91.43%,木犀草苷提取率23.12%,经喷雾干燥（优化喷雾干燥条件进风温度87℃,物料流量460 ml/h）,喷雾干燥产物中绿原酸含量7.765%,木犀草苷含量0.077%。
在50 L提取浓缩机组中试阶段,条件同放大阶段,综合考虑活性成分提取率,产物得率和产物指标成分含量,选择真空度0.06 MPa,温度76℃作为最佳工艺条件,在该条件下,产物得率39.887%,绿原酸提取率88.583%,木犀草苷提取率22.838%,产物绿原酸含量6.418%,木犀草苷含量0.057%;喷雾干燥产物得率22.924%,产物绿原酸含量7.177%,木犀草苷含量0.071%。4.采用超声辅助乙醇提取金银花活性成分,实验小试中,通过单因素试验和正交试验,确定绿原酸的最佳提取工艺条件:以浓度50%的乙醇作提取溶液,料液比1:15（g:mL）,超声辅助提取温度为50℃,提取两次,每次20 min,金银花绿原酸提取率为88.3%。
醇提工艺在50 L提取浓缩机组放大阶段,比较40%、50%、60%、70%四个乙醇浓度对活性成分的提取效果,得到醇提的最佳工艺为60%乙醇浓度,其余条件同小试,在该条件下,产物得率为32.94%,绿原酸提取率82.097%,木犀草苷提取
率72.720%,产物绿原酸含量7.900%,木犀草苷含量0.239%,。5.综合比较两种金银花挥发油提取工艺,认为超临界萃取工艺优于共水蒸馏法,超临界萃取挥发油比共水蒸馏得率高12倍,提取完全时,提取时间缩短26倍以上,挥发油提取与分离一步进行,操作简单,节省能耗,不残留有机溶剂,产物味道清香柔和。
6.综合比较两种金银花活性成分提取工艺,认为醇提工艺优于水提醇沉。醇提工艺对绿原酸和木犀草苷都有较好的提取效果,且提取温度较低,对活性成分的破坏较小,提取时间短,操作简便。
本研究通过优化金银花挥发油与活性成分提取工艺,可为工业化提取金银花有效成分提供技术理论支撑,同时对于提高金银花的附加值、提升河南道地药材的核心竞争力有重要的意义。
金银花有效成分提取技术研究
金银花有效成分提取技术研究 金银花（Lonicera japonica Thunb.）是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾,具有清热解毒、通经活络、广谱抗菌抗病毒等功效,目前70%以上的消炎、感冒中成药中都含有金银花。随着对金银花研究的深入,人们逐渐认识到金银花浑身都是宝,其用途也越来越广泛,在医药产业、饮料食品产业、保健品产业及日用化工产业都有应用。 目前,对金银花有效成分的提取分离及应用还没有进入规模化生产阶段,因此有必要对其有效成分进行提取分离与应用,并进行深入产业化研究。为此,根据技术的成熟度、投入产出比、工业化可行性等因素,本研究筛选了挥发油、活性成分提取工艺进行优化比较研究。 采用共水蒸馏、超临界萃取、水提醇沉、超声辅助乙醇提取实验小试、中试及气相色谱-质谱联用、高效液相色谱法等多种现代技术手段,对金银花有效成分进行了提取、工艺优化与测定比较分析,获得最优工艺条件和评价指标体系。1.采用共水蒸馏法对金银花挥发油进行提取,原料使用量250 g,在5 L圆底烧瓶中进行提取,通过单因素试验和正交试验得到最佳提取工艺为:金银花粉碎度20目,5%盐溶液浸泡28 h,料液比1:10（g:mL）,提取时间42 h,挥发油得率0.171%,产物为淡黄色蜡状固体,脂腊味较重;产物经过GC-MS分析,检测到金银花挥发油成分79种,其中脂肪酸类成分9种（占69.1%）、脂类成分17种（占16.83%）和烷烃类成分15种（占5.37%）最多,占总成分的91.3%。 2.采用超临界CO2萃取金银花挥发油,通过单因素试验和正交试验得到最佳萃取工艺为:萃取压力45 MPa,萃取温度45℃,静态萃取0.5 h,动态萃取1 h,CO2流量4 L/min,萃取得率2.0687%,产物为淡黄色至淡
金银花的有效成分及其提取工艺研究
金银花的有效成分及其提取工艺研究 赵奇 （山东华鲁制药有限公司，山东茌平252100） 摘要：本文通过对大量文献的总结，对金银花的分布、药用价值及化学成分作了详细的阐述；对金银花的有效成分绿原酸作了介绍，并对绿原酸的提取、分离、纯化方法作了描述和对比，为工业上绿原酸的制备提供了参考。 关键词：金银花提取工艺绿原酸药用价值 金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb)、红腺忍冬(Lonicera Lypoglauca Miq)、山银花(Lonicera confusa DC)或毛花柱忍冬(Lonicera dasystyla Rehd) 的干燥花蕾或带初开的花。全世界忍冬植物大约200种，我国有98种，分布于全国各地，其中供药用的达47种。金银花为中医常用药，其味甘、寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症，应用历史悠久。 1 理化成分 1.1 挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。 1.2 有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸(Chlorogenic acid) 和异绿原酸(isochlorogenicacid)，其他有机酸还有咖啡酸(coffeic acid)和棕榈酸(Palmiticacid)。 1.3 黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素(luteolin)，后又得忍冬苷(lonicerin)，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛 等首次分离出corymbosin和5- 羟- 3’- 4’- 7- 三甲基黄酮(5-hydroxy- 3’- 4’- 7- t rimethoxyflavone)。 1.4 三萜类：娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F。 1.5 无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca。 1.6 醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：β- 谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等。 2 金银花的有效成分———绿原酸 金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1- 羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。
金银花中绿原酸的提取与分离
现代分离技术实验安排 一、实验说明 1、本课程实验为一次性综合大实验，采取分班进行，每班实验必须在连续两天内 完成，各组的实验安排均为周六和周日的上午8点到晚上的8点。 每次实验1个班，每个实验由两个人共同完成，即两人一组，每组一套实验仪器和一张实验台。每班的班长负责实验室的卫生和安全。 2、课程考核方法采用实验考察形式进行，每人只安排一次实验机会，过期不补，希 望各位同学能够按时参加。若有冲突，学生之间可相互对调。 3、进入实验室后，各组同学首先按照仪器清单检查仪器的数量和完好情况。若有 仪器短缺或破损等问题，请在上课后20分钟内与实验室工作人员及时联系，并要求实验人员进行补充或更换。 4、实验结束后，各组同学应对照仪器清单检查，分别洗净后交实验人员验收。如 有损坏或缺少，应按规定缴纳赔偿金。因此，希望同学们爱惜仪器，认真操作。 实验期间，应注意保持实验室台面、地面和水槽的卫生，尤其是自己的工作区域。同时应注意实验室的财产安全和自身安全，不可在实验室喧哗吵闹。 二、实验内容 题目：金银花中绿原酸的提取与分离 学习内容：固体中有效成分的提取（索氏法）技术； 减压浓缩（旋转蒸发）技术；硅胶吸附柱层析； 硅胶吸附TLC技术；薄层色谱对产品纯度检测 金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾，它是一种“药 食同源”的绿色植物，是临床常用的中药之一。具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能，主治痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病 发热、急性支气管炎、肺炎、腮腺炎、胆道感染、关节炎等，能改善放、化疗所 致的白细胞降低，有“中药中的青霉素”的美誉。另外，金银花还被广泛地应用 于保健品、化妆品、卷烟、食品等行业。近代研究一般认为金银花的主要生物活 性有效成分为绿原酸类化合物，并且常以绿原酸含量的高低来评价金银花质量的 优劣。