表达GLP-1融合蛋白的重组大肠杆菌分批补料培养工艺优化

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表达的影响，发现氦源流加过程是提高融合蛋白表达水平的关键因素。进而通过对补料过程的优化，建立了高密度高表达的分批补料培养工艺，最终使菌体密度、融合蛋白表达水平、融合蛋白体积得率和融合蛋白细胞得率分别达到５．１３９
ｇＬ・一、３．４６％、２９７ｇＬＯ０７ｇｇ，较分批培养分别提高了３４５．３．－和．５＇ｕ一１．％、１０００．％、７４６８．％和Ｉ１１１．％。研究结果对
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表达ＧＰ１Ｌ．融合蛋白的重组大肠杆菌为研究对象，在分批培养条件下，通过流加甘油并在诱导前Ｏ５ｈ添加氮源使菌．
体密度、融合蛋白表达水平、融合蛋白体积得率和融合蛋白细胞得率分别提高了１８％、２．％、２６９和２．３．Ｏ９５１．Ａｏ９６％。在此基础上，进一步考察了甘油补加策略、氮源补料方式以及补氮液浓度等过程因素对菌体生长以及ＧＬ－Ｐｌ融合蛋白
ＧＰ１Ｌ．融合蛋白的产业化开发有一定的指导意义。
关键词：重组大肠杆菌；人胰高血糖素样肽一；分批补料培养；高密度发酵Ｉ中图分类号：Ｔ３．６Ｑ９６１；Ｑ８５１文献标识码：Ａ
ＯｐｉｚｔｏｆＦｅ－ｔｈＣｕｔｅｏｃｍｂｎｎｔｃｌ．ｏｉｈＥｘｅｓｏｆｔｍｉａｉｎｏｄｂａｃｌｕｒｆＲｅｏｉａｏｉｆｒＨｇｐｒｓｉｎｏＥ．ＧｌａｏｋｅＰｅｔｄ一ｕｃｇｎＬｉｐｉｅ１
第２４卷第３期２１年６月００
高校
化
学
工程
学报
Ｎｏ．、１４３ｂ．２Ｊｎ２０Ｏｕｅｌ
ＪｕｎｌｆｏｒａＣｈｅｃｎｎｅｒｎｆＣｈｎｓｉｅｓｔｅｏｍｉａＥｇｉｅｉｇｏｌｉｅｅＵｎｖｒｉｉｓ
文章编号：１０－０５２１）３０６－８０３９１（０００－４８０
表达ＧＰ１融合蛋白的重组大肠杆菌分批补料培养工艺优化Ｌ．
胡爽，蔡海波，蒋加庆，谭文松
（华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海２０３）０２７
摘要：人胰高血糖素样肽．（ｌａｏｉｅｔｅ１ＧＰＩ是一种有潜在应用价值的治疗糖尿病的药物。今以一株１ｕｇｎｋＰｐｉ．，Ｌ－ＧｃＬｅｄ）
ｃｎｒａｅ１８０，２．％，２１．％ａｄ２６，ｒｓｅｔｅｙｙｕｉｇｔｅｍｅｓｏｅｄｎｌｃｒｌａｄｎａｉｃｅ３．％ｓ９５６９ｎ９．％ｅｐｃｉｌ，ｂｓｎｈａｆｆｅｉｇｇｙｅｏｎｖｎ