安捷伦1200液相色谱操作规程
安捷伦1200LC标准操作规程
安捷伦1200高效液相操作规程一目的规范检测仪器、设备的管理，确保仪器、设备的正常使用。
二范围适用于安捷伦1200高效液相色谱仪（自动进样）的使用和维护管理。
三职责研究所分析人员。
四内容1 仪器组成及开机1.1 本仪器由G1322A在线脱气机、G1312A泵、G1329A自动进样器、G1316A柱温箱、G1315D 检测器、和Chem32工作站组成。
1.2 将电源插头分别插入插座后，依次打开脱气机、泵、柱温箱、自动进样器、检测器（从上到下）的电源开关。
开始自检后双击打开仪器1 联机图标，进入化学工作站。
1.3 旋开泵上的排气阀，将工作站中溶剂A设到100%，泵流量设到5ml/min，在工作站中打开泵，排出管线中的气体几分钟（不低于5min）。
切换到B溶剂排气。
1.4 将工作站中的泵流量设到1ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=10%，B=90%1.5 关闭排气阀，检查柱前压力1.6 配制90%水+10%异丙醇，每20分钟冲洗0.5分钟进行seal-wash，每三天更换一次溶剂。
1.7 用90%有机溶剂冲洗柱子和系统0.5小时，再用90%水冲0.5-1小时，待换成流动相且柱前压力基本稳定后，打开检测器，观察基线情况。
2 方法编辑2.1 进样器设置单击进样器图标，选择设置进样器，设置进样量。
2.2 二元泵设置单击二元泵图标，选择设置泵，设置流速、溶剂比例、泵停止时间（即采集时间），也可插入一行时间列表，编辑梯度；选择控制，设置定期清洗泵。
单击溶剂瓶图标，选择溶剂瓶填充量，设置溶剂瓶中溶液体积。
2.3 柱温箱设置单击柱温箱图标，选择设置柱温箱，设置柱温。
2.4 VWD检测器设置单击检测器图标，选择设置DAD信号，设置检测波长。
系统更换为流动相后，单击图标，选择控制，打开紫外灯。
2.5 方法保存在联机页面右下角LC参数窗口检查各参数设置正确后，在方法菜单下拉选项下单击方法另存为，设置方法名和保存路径。
高效液相色谱仪操作规程
6、数据处理在“仪器2脱机”中进行。
一个画面。
（3）进行参数设定
包括泵、柱温箱、DAD检测器、RID检测器和馏分收集器。
（4）在“运行时选项表”中，选中“数据采集”，点击“确定”。
（5）从“方法”菜单，选用“方法另存为”，输入一方法名，确定。
（6）从菜单“视图”中，选中“在线信号”，选中“信号窗口1”，然后点击“改变”钮，将所要绘图信号移到右边的框中，点击“确定”。
3、清洗及管道准备
流动相放入溶剂瓶中（注：水放入棕色瓶中），手动旋开冲洗阀。点击“泵”图标，点击“设置泵“选项，设置流速进行系统冲洗，直到管线内无气泡为止。
4、数据采集和方法编辑
（1）开始编辑完整方法
从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三个选项，点击确定进入下一个界面。
（2）方法信息
（7）从“运行控制”中，选择“样品信息”选项，输入操作者名称，结果保存路径等参数，确定。
（8）从“仪器”菜单选择“启动系统。
（9）等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制“菜单中选择”运行方法“进样。
5、数据分析方法编辑
从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。从“文件”菜单选择“调用信号”，选中要编辑数据的文件名，做图谱的优化等各项操作。
高效液相色谱仪
型号：Agilent1200
厂家：安捷伦
价格：5.1万美元
购入日期：2008.6
主要功能：用于蛋白质、核酸和多糖等成分的分离和纯化
操作规程
操作步骤
1、开机
打开计算机，进入WindowsXP画面，双击（仪器1联机）图标，进入工作站画面。
2、准备工作溶液和样品
安捷伦1200标准操作规程
Agilent 1200液相色谱仪操作规程设备组成：G1311A（四元泵）、G1329A（标准型自动进样器）、G1316A（柱温箱）、 G1314B（VWD检测器）、G1315D（DAD检测器）。
基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机，进入Windows XP画面。
（IP 地址由Bootp Service 程序写入）2、打开1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器 1 联机”图标，或者（点击屏幕左下角的“开始”，选择“程序”，选择“Agilent Chemstation”，选择“仪器 1 联机”）化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“系统视图”，“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、手动旋开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵”选项，进入泵编辑画面。
8、设流速：3-5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选中“启动”，点击“确定” ，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
若使用缓冲盐，要加入泵头冲洗（seal-wash），点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选择“用于泵密封垫清洗的泵”，开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸。
10、点击“泵” 图标，点击“控制”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，手动旋紧冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵选项”，设流速：1.0ml/min。
12、点击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶添充量”如下图所示（以四元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积，点击“确定”。
（二）数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，如下图所示选中除“数据分析 ”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
Agilent 1200高效液相色谱仪(四原泵)操作规程
Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）操作规程1.目的建立高效液相色谱仪（四原泵）使用维护保养标准操作规程，确保测量结果准确、可靠。
2.适用范围本SOP适用于Agilent 1200高效液相色谱仪（四原泵）的使用。
3.责任者化验员应严格遵照该操作规程，管理方负责监督本规程的实施。
4.定义无5.规程5.1准备在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相、供试品及对照品。
流动相装入溶剂储液瓶，确认吸滤头已置于液面以下，供试品溶液和对照品溶液均用0.45μm的膜过滤。
5.2开机5.2.1打开电脑；5.2.2打开1200各模块电源；5.2.3等待各模块就绪后，双击桌面上的工作站图标，进入化学工作站；5.2.4旋开泵上的purge阀（逆时针转动，旋松即可，不要转动太多。
），将流速设置为5.0ml/min，将准备排气的管道的流量设置为100%（如：流路A比例则是100%-B-C-D），在工作站中打开泵，则开始排除管路中的气泡（时间约为5min）；其他通道同理操作。
5.2.5排气完成后，关闭purge阀（顺时针旋转，旋紧即可，不必旋的太紧。
）。
5.2.6连接色谱柱，用适宜的流动相冲洗色谱柱。
如果使用有盐的流动相，要先用80%的水过渡。
5.2.7更换方法规定的流动相。
冲洗约30分钟。
5.3设置方法5.3.1设置新方法5.3.1.1（自动进样器参数设定：单击工作站中“进样针”图标，选择“设置进样器”（一般选择洗针进样，清洗瓶位置一般为100位），单击“确定”按钮即可；5.3.1.2泵参数设定（四元泵）：单击工作站中“泵”图标，选择“设置泵”。
①在“流速”处输入流速（如1.0ml/min）；②在“停止时间”处设定所需采集时间；③在时间表中插入时间列表，编辑梯度；④在压力限处可设定最大耐高压，以保护色谱柱，单击“确定”按钮即可；5.3.1.3检测器参数的设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如280nm，在“峰宽（响应时间）”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min（2s）。
Agilent1200高效液相色谱仪标准操作程序
Agilent 1200高效液相色谱仪标准操作程序1.目的使操作人员的操作步骤规范化。
2.适用范围适用于仪器安装、调试、校准后正常状态下进行的操作。
3.责任者质控科仪器分析员对此规程负责。
4.规程4.1清洗液、流动相、封柱液预处理4.1.1所有清洗液、流动相、封柱液在使用前均需过滤、脱气以及混合均匀。
4.1.2甲醇-水（10：90）、乙腈-水（10：90）、超净水、乙腈均需存放在棕色溶剂瓶中。
4.1.3含有乙腈的溶液以及不含乙腈但含有较高比例的其他有机溶剂的溶液在过滤时需使用有机相微孔滤膜，其它溶液在过滤时需使用水相微孔滤膜。
4.1.4存放清洗液、流动相、封柱液的溶剂瓶在每次装入溶液前需用少量过滤好的该溶液清洗数次。
4.2接通电源,开启连机电脑,再接通仪器电源,仪器自检完毕，处于准备进行状态。
双击桌面图标“仪器1联机”，打开Agilent 1200化学工作站，在左上角下拉框中选择“方法与运行控制”界面。
显示如下图标：注意：一定要先双击“仪器1联机”图标，进入联机状态，方可双击“仪器1脱机”图标，同时进入脱机界面。
否则，将无法联机。
4.2泵4.2.1 准备清洗液并装入溶剂瓶中，将吸滤器放入瓶内。
安装所需用柱子。
4.2.3 将吹扫阀（即“Purge”阀）打开，单击泵图标，选择“设置泵”，将“流速”设置为3.00ml/min。
选择清洗液所在通道（建议为A通道），单击“确定”，在“系统视图”中单击“启动”运行泵，泵运行10分钟后，观察压力，应小于10bar，若大于此压力，应更换purge阀滤芯，调节流速1.00ml/min。
4.2.4关闭purge阀，观察柱压是否正常。
4.2.5选择“控制”，在“用于泵密封垫清洗的泵”（Seal Wash）中选择“定期清洗”，“周期”设置为5min，“持续”设置为0.1min，同时观察试剂架中10%异丙醇是否充足，相应的废液瓶是否有充足空间。
4.2.6 根据“柱使用记录中所规定的方法”清洗柱子约30分钟后，在“控制”组中的“泵”选项中选择“待机”，待系统压力降到10bar 以下后，更换流动相，在“控制”组中的“泵”选项中选择“启动”改用流动相平衡柱子，约30分钟后柱子处于平衡状态。
Agilent 1200制备 液相培训手册(操作手册)
Agilent 1200 制备液相色谱 现场培训手册捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部培训目的•基本了解1200制备液相色谱硬件构成•了解制备液相色谱原理•掌握化学工作站中关于制备液相色谱部分的参数设定，馏分收集，数据分析等操作培训准备一．仪器设备：Agilent 1200制备液相色谱•分析级制备液相色谱G1322A（脱气机）；G1379B（微池脱气机）G1310A（单元泵）；G1312A，G1312B（二元泵）；G1311A（四元泵）G1329A（标准型自动进样器）；G1367A（微盘自动进样器）G1316A，G1316B（柱温箱）G1314B，G1314C（可变波长紫外检测器）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器）G1365C，G1365D（多波长检测器）G1364C（分析级馏分收集器）•制备级制备液相色谱G1361A（制备泵）；G1391A（双制备泵，供梯度进样用）G2260A（标准制备型自动进样器）G2258A（双环自动进样器，可兼作分析/制备使用）G1383A（制备柱挂架）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器，配合制备级流通池使用）G1365C，G1365D（多波长检测器，配合制备级流通池使用）G1364B（制备级型馏分收集器）二．色谱柱：•分析级制备液相色谱Zorbax Eclipse XDB-C18 150X4.6, 5um column) or equivalentP/N 993967-902 / 5063-6600•制备级制备液相色谱ZORBAX SB-C18, 50 mm x 9.46mm (846975-202) or equivalent三．溶剂及调试用样品准备：•色谱级纯度乙腈或者甲醇•二次蒸馏纯水•延迟体积校正用染料样品（G1946-85020）•LC用调试样品(01080-68704)注：本手册内涵盖的内容为制备液相模块的内容，其他模块如分析级泵，分析级自动进样器，柱温箱等，请参看安捷伦1200液相色谱现场培训手册等制备液相色谱原理一．什么是制备液相色谱？制备液相这一术语通常是和大容量色谱柱、高流速联系在一起的。
安捷伦液相色谱仪操作规程
安捷伦液相色谱仪操作规程1. 引言安捷伦液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于药物分析、食品检测、环境监测等领域。
本文档旨在介绍安捷伦液相色谱仪的操作规程，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
2. 仪器准备在正式操作前，需要进行以下仪器准备工作：1.检查仪器及附件是否正常运行，如有故障应及时联系维修人员。
2.检查系统电源是否接通，并确保电源稳定。
3.打开色谱柱热水浴，使其预热至设定温度。
4.检查溶剂储液罐中溶剂余量，如不足应及时更换。
5.检查进样器和检测器，确保其完好并调整到正确位置。
3. 样品处理对于待分析的样品，需要进行以下处理：1.准备样品溶液，确保溶解度适当并不含有干扰物质。
2.使用准确的量筒或移液管，取适量样品溶液放入进样器。
3.注意避免气泡的产生，可以轻轻敲击进样器以排除气泡。
4. 方法设定在进行样品分析之前，需要根据实际需求设定合适的方法参数：1.打开仪器控制软件，选择相应的方法模板。
2.根据样品性质和分析要求，设置进样量、流动相浓度、流速等参数。
3.点击确认，保存方法设定。
5. 进样操作在方法设定完成后，进行样品进样操作：1.将进样器连接至样品溶液，确保连接部位密封良好。
2.打开进样器注射阀，注入样品溶液。
3.操作软件，点击进样按钮，进行样品进样。
6. 色谱柱选择根据样品性质及分析要求，选择适当的色谱柱：1.通过试验和经验，选择合适的色谱柱类型和尺寸。
2.将色谱柱安装到色谱仪上，并调整其位置和方向。
3.使用手轮或电动调节色谱柱的流动方向和速度。
7. 检测器调整确保检测器能够正确检测和记录样品的信号：1.打开检测器的电源，确认其正常运行。
2.根据检测器类型，调整检测器的灵敏度、波长等参数。
3.使用标准样品进行校准和调试，确保检测器输出准确可靠。
8. 数据采集与处理在检测完样品后，需要进行数据采集和处理：1.点击软件界面上的数据采集按钮，开始采集样品的色谱图数据。
2.使用软件提供的数据处理功能，对样品的色谱图进行处理和分析。
Agilent1200高效液相色谱仪标准操作规程
一、目的制定一个关于Agilent 1200高效液相色谱仪的标准操作规程，保证仪器的正确使用以及实验室电子数据的可靠、真实、完整，实现药品仪器检验工作的科学化和规范化。
二、适用范围适用于本公司使用的Agilent 1200高效液相色谱仪仪器分析的人员和设备。
三、责任者1.化验员:作为Agilent 1200高效液相色谱仪的操作者，严格按照操作规程进行检验工作和出具报告，保证数据的准确、可靠。
2.仪器负责人：作为Agilent 1200高效液相色谱仪仪器管理者，负责数据的备份，定期检查化验员操作的符合性，定期进行数据的查看，及时发现问题。
3.质量总监：负责监督所有人员按规程操作实施。
四、相关定义高效液相色谱法：系采用髙压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
五、工作程序1.仪器组成1.1.脱气机、四元泵、自动进样器、自动进样器恒温器、可变波长检测器（DAD）、柱温箱、工作站、打印机。
2.在线清洗2.1.若实验的流动相中含有的缓冲盐和离子对等试剂干后会留下固体印迹的物质时，必须要进行在线清洗过程。
首先配制好10%异丙醇溶液，经0.45μm有机膜抽滤后，装入已用滤过的10%异丙醇溶液洗过三遍的洁净玻璃瓶内，调整流量为2～3滴/分钟，10%异丙醇溶液必须每周更新。
3.开机3.1.接通电源，打开计算机，等计算机启动成功后，将Agilent 1200高效液相色谱仪系统：从上到下，依次打开脱气机、泵、进样器、进样器恒温器、柱温箱和检测器。
约30秒钟后，各部件自检完毕，进入待机状态，指示灯为黄色或无色。
3.2.双击桌面上的，进入到用户界面，输入用户名与密码。
3.3.计算机进入工作站的Method and Run Control操作界面，如下图所示。
4.色谱条件的设定4.1.方法的编辑4.1.1．在method and run control 状态下，单击“method”选择“edit entire method”，请先在复选框中选择method中需要编辑的项目。
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1 目的：建立一个安捷伦1200高效液相色谱仪标准操作程序。
2 范围：本规程适用于安捷伦1200高效液相色谱仪的操作。
3 责任：相关操作人员。
4 程序：
4.1 原则与定义
4.1.1高效液相色谱法是将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液为流动相，用高压泵将流动相压入装有填充剂的色谱柱，注入供试品，经流动相带入柱内，在填充剂上分离后，各组分先后进入检测器，用记录仪记录色谱图，各供试品谱图与标准或对照品谱图比对，经一定的数据处理进行化合物的定性和定量分析。
4.1.2 除另有规定者外，都应按现行版《中国药典》附录（高效液相色谱法）的要求测定。
4.2 仪器及用具
4.2.1 安捷伦1200高效液相色谱仪系统
4.2.2 DAD紫外检测器
4.2.3 色谱柱
4.2.4 色谱工作站
4.2.5 溶剂过滤系统
4.2.6 样品过滤系统
4.2.7 其他用具和试剂应符合现行版《中国药典》规定或仪器说明书上指明的要求。
4.3 准备工作
4.3.1流动相临用前过滤并脱气。
4.3.2供试品溶液和标准品(或对照品)溶液应按药品标准中有关规定配制过滤。
4.4 操作方法
4.4.1 开机准备好流动相并安装色谱柱。
依次打开仪器各部件电源开关（在线脱气机、输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器等），约15min 后，仪器进入待机状态，此时仪器各部件指示灯应无色或呈黄色。
计算机进入工作站的操作页面。
色谱条件的设定,当色谱参数设置完成后，单击工作站流程图右下角的【on】，仪器开始运行。
4.4.2 样品测定
4.4.3 分析报告的打印
4.4.4 关机，分析结束后，按规定程序彻底冲洗色谱柱及所用的仪器流路。
4.4.5 实验结束工作
4.4.6 全部分析工作结束后，依次关闭电脑、检测器、电源开关。
4.4.7 泵流量调到零，关闭泵电源。
4.4.8 仪器参数设定及操作方法同药典仪器操作规程安捷伦1100。
4.5.1反相高效液相色谱，如所用流动相含有缓冲溶液，实验前需要用重蒸馏水冲洗管路和色谱柱，实验结束时也要用水冲洗约半小时, 然后再用甲醇平衡柱子约30min后关闭仪器，以保护柱子。
4.5.2反相键合柱一般需充满甲醇保存，硅胶柱一般充满正已烷保存。
4.5.3如果从正相转到反相条件或从反相转到正相条件，通常采用异丙醇为过渡溶剂，然后再按照所需的实验条件，平衡柱子。
4.5.4输液泵压力不稳时，打开排液阀，用针筒抽取流动相, 排除可能存在的气泡，若不能解决问题，应停泵拆开色谱柱与泵、与检测器的连接，分段赶气泡。
4.5.5一般不要在高于3000PSI柱压条件下操作，当柱压异常升高时要考虑(1) 柱前管道有无阻塞，可拆除色谱柱，增大输液泵流量进行冲洗；(2)色谱柱本身内阻增加，一般排除较难，可试行采用不同流动相洗柱以减小内阻。
4.5.6试液一般需经0.45μm滤漠过滤，试液浓度不能太大，以免引起色谱柱负荷过载和污染进样阀。
实验结束再用相应溶剂冲洗进样阀管路。
4.5.7单一色谱峰发生分裂，肩峰等不正常情况时，首先考虑色谱柱有否损坏, 若有柱头塌陷，可进行局部填补，柱体内部损坏则无法改善，应予更换。
编制：潘渭樵
审核：戴其昌
批准：蒋国强。