护心康片中黄芪_茯苓_炙甘草的薄层色谱鉴别_田其学

1 缺黄芪阴性对照
1 缺茯苓阴性对照
2 黄芪甲苷对照品
2 茯苓对照药材
3 ～ 4 样品
3 ～ 4 样品
图 1 黄芪 TLC 图
图 2 茯苓 TLC 图
2. 2 茯苓的薄层色谱鉴别 取 2 个批次的护心康片各 40
片，分别除去糖衣，研细，加乙醚 80mL，加热回流 1h，滤过， 滤液挥干，残渣加甲醇 1mL 使溶解，作为供试品溶液［1］。取
［2］ 苗明三，李振国 . 现代实用中药质量控制技术［M］. 北京： 人 民卫生出版社，2000： 287，742，890.
［3］ 侯峰，施法，孙晓军，等 . 寒湿痹颗粒的质量控制研究［J］. 现 代药物与临床，2011，26（ 6） ： 495 － 498.
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第 29 卷第 7 期
Vol. 29 No. 7
2013 年 7 月 HUNAN JOUＲNAL OF TＲADITIONAL CHINESE MEDICINE July 2013
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护心康片中黄芪、茯苓、炙甘草的薄层色谱鉴别
田其学，吴劲松，陈玲珑 （ 湖南省中医药研究院附属医院，湖南 长沙，410006）
薄层 板 上，以 乙 醚 － 石 油 醚 （ 60℃ ～ 90℃ ） （ 1 ∶ 1 ） 为 展 开
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2013 年第 29 卷第 7 期（ 总第 173 期）
剂［2］，展开，取出，晾干，置紫外光灯（ 365nm） 下检视。如图 2 所示： 供试品色谱中，在与茯苓对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜 色 的 荧 光 斑 点。 且 斑 点 清 晰，分 离 度 好，缺 茯 苓的阴性对照没有干扰。 2. 3 炙甘草的薄层色谱鉴别 取 2 个批次的护心康片各 40 片，分别除去糖衣，研细，加乙醚 50mL，水浴加热回流 1h， 滤过，弃去乙醚液，药渣加甲醇 35mL，水浴加热回流 1h，滤 过，滤液蒸干，残渣加水 40mL 使溶解，转移置分液漏斗中， 用水饱和的正丁醇振摇提取 3 次，每次 20mL，合并正丁醇 液，用水洗涤 3 次，每次 10mL，弃去水洗液，正丁醇液蒸干， 残渣加甲醇 2mL 使溶解，作为供试品溶液［1］。取甘草对照 药材 0. 5g，加乙醚 30mL，水浴加热回流 1h，滤过，自“弃去乙 醚液”起，与供试品溶液同法制成对照药材溶液。另取甘草 苷对照品，加甲醇溶解，制成每 1mL 含 2mg 的溶液，作为对 照品溶液。再 按 处 方 称 取 缺 甘 草 的 其 他 药 材，制 成 缺 甘 草 阴性样品，同供 试 品 溶 液 制 备 方 法 制 得 缺 甘 草 的 阴 性 对 照 溶液。照薄层色谱法（ 《中国药典》2010 年版一部附录 VIB） 试验，吸取 上 述 缺 甘 草 的 阴 性 对 照 溶 液 与 供 试 品 溶 液 各 5μL、甘草对照药材溶液 4μL、甘草苷对照品溶液 5μl，分别 点于同一硅胶 G 薄层板上，以乙酸乙酯 － 甲酸 － 冰醋酸 － 水（ 15∶ 1∶ 1∶ 2） 为展开剂［1］，展开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸 乙醇溶液，在 105℃ 加热至斑点显色清晰，分别置日光与紫 外光灯（ 365nm） 下检视。如图 3 所示： 供试品色谱中，在与 甘草对照药材 与 甘 草 苷 对 照 品 色 谱 相 应 的 位 置 上 ，显 相 同 颜色斑点。且斑点清晰，分离度好，缺甘草的阴性对照没有 干扰。
甘草对照药材和甘草苷对照品同时用于炙甘草的薄层 色谱鉴别，对照品可以直观地检视其有效主成分，而对照药 材能更全 面 地 反 映 药 品 质 量。并 分 别 置 日 光 与 紫 外 光 灯 （ 365nm） 下检视，更全面、准确地控制其质量。
参考文献
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( 收稿日期: 2013 － 04 － 09)
考虑样品处 理 时 过 中 性 氧 化 铝 柱 比 较 费 时，黄 芪 样 品 处理 考 察 了 供 试 品 去 糖 衣，研 细，加 水 适 量 煮 沸，搅 拌 使 溶 解，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取 3 次，每次 20mL， 合并正 丁 醇 液，加 1% 氢 氧 化 钠 水 溶 液 洗 涤 2 次，每 次 10mL，弃去碱液，正丁醇液再用正丁醇饱和的水洗涤 2 次， 每次 20mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇 0. 5mL 使 溶解，实验结果显示： 该方法处理的样品薄层色 谱 图 不 清 晰，可能是杂质色带掩盖了黄芪甲苷斑点。
1 缺甘草阴性对照 2 甘草苷对照品 3 甘草对照药材 4 ～ 5 样品 图 3 甘草 TLC 图
3讨 论 本文试验过程中均考察了 2 批制剂，以保证试验方法的
重复性。临床上护心康片具有补气活血、宽胸理气、通络止 痛、定悸安神 的 作 用。 方 中 黄 芪 能 促 进 机 体 代 谢、抗 疲 劳、 增强 心 肌 收 缩 能 力、保 护 心 血 管 系 统、抗 心 律 失 常，扩 张 冠 状动 脉 和 外 周 血 管、降 低 血 压，并 能 降 低 血 小 板 黏 附 力、减 少血栓形成，还有降血脂、抗衰老、抗缺氧等作用； 茯苓具益 心脾而宁心安神的作用，常用于治疗心脾两虚、气血不足之 心悸、失眠、健忘等证； 甘草能补益心气、益气复脉，主要用 于心气不足 而 致 结 代，心 动 悸 者［5］。 因 此 黄 芪、茯 苓、炙 甘 草均为护心康 片 处 方 中 起 主 要 作 用 的 药 材，故 选 择 摸 索 以 上 3 味药材的薄层色谱鉴别，作为控制该制剂内在质量的指 标。虽然以上 3 味药材单独的薄层鉴别方法在其他文献中 均有报道，且方法成熟，本文鉴别复杂成分复方制剂中的单 一药材，为中药复方制剂的质量控制提供了准确、可行的测 定方法，具有实际应用意义。
护 心 康 片 为 我 院 生 产 的 制 剂 品 种，由 黄 芪、茯 苓、炙 甘 草等中药组成，具有补气活血、宽胸理气、通络止痛、定悸安 神等作用。适用于冠心病、高脂血症以及气虚痰阻、脉络不 畅所致的胸 闷、心 悸、失 眠 等 症。 在 长 期 的 临 床 实 践 中，深 受患者信 赖。原 质 量 标 准 有 北 山 楂 和 三 七 的 薄 层 色 谱 鉴 别，为进一步控制药品内在质量，特增加了黄芪、茯苓、炙甘 草的薄层色谱鉴别，虽然《中国药典》及其他参考文献中均 有黄芪、茯 苓、炙 甘 草 药 材 或 其 复 方 制 剂 的 薄 层 色 谱 鉴 别［1 － 4］，但护心康片由十多味中药组成，成分复杂，取样和样 品处理均需根据实际情况摸索。本文对其质量标准进行了 深化研究，为该制剂的质量控制提供了快速、准确的测定方 法，现介绍如下。 1 仪器与试药 1. 1 仪器 薄层扫描仪（ ＲEPＲOSTAＲ3） ，CG － 300 型超声 波清洗器（ 300W，25kHz，江苏张家港港威超声波仪器厂生 产） ，AE － 240 电子天平（ 梅特勒 － 托利多仪器上海有限公 司生产） ，电热恒温水浴锅（ 江苏金坛市环宇科学仪器厂生 产） 。 1. 2 试药 黄芪甲苷对照品（ 批号： 110781 － 200613） 、茯苓 对照药材 （ 批 号： 121117 － 201107 ） 、甘 草 苷 对 照 品 （ 批 号： 110777 － 200507） 和甘草对照药材（ 批号： 120904 － 200914） 均购自中国药品生物制品检定所。护心康片（ 2 个批次） 为 湖南省中医药研究院附属医院制剂室生产。其他试剂均为 分析纯。 2 方法与结果 2. 1 黄芪 的 薄 层 色 谱 鉴 别 取 2 个 批 次 的 护 心 康 片 各 30 片，分别除去糖衣，研细，加甲醇 50mL，水浴加热回流 1h， 滤过，滤液加于中性氧化铝柱（ 100 ～ 120 目，5g，内径为 10 ～ 15mm） 上，用 40% 甲醇溶液 100mL 洗脱，收集洗脱液，蒸干， 残渣加水 30mL 使溶解，转移置分液漏斗中，用水饱和的正 丁醇振摇提取 2 次，每次 20mL，合并正丁醇液，用正丁醇饱 和的水洗涤 2 次，每次 15mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣 加甲醇 0. 5mL 使溶解，作为供试品溶液［1］。另取黄芪甲苷 对照品，加甲醇溶解，制成每 1mL 含 1mg 的溶液，作为对照 品溶液。再按 处 方 称 取 缺 黄 芪 的 其 他 药 材，制 成 缺 黄 芪 阴
［摘要］ 目的: 进一步完善护心康片的质量标准。方法: 采用 TLC 法对黄芪、茯苓、炙甘草进行鉴别。结果: TLC 色谱斑 点清晰，专属性强，重复性良好。结论: 本方法简便、可靠、准确，可用于护心康片的质量控制。
［关键词］ 护心康片； 薄层色谱法； 黄芪； 茯苓； 炙甘草； 实验研究 ［中图分类号］Ｒ283． 64 ［文献标识码］A ［文章编号］1003 － 7705（ 2013） 07 － 0131 － 02
性样品，同供试 品 溶 液 制 备 方 法 制 得 缺 黄 芪 的 阴 性 对 照 溶 液。照薄层色谱法（ 中国药典 2010 年版一部附录 VIB） 试 验，吸取黄芪甲苷对照品溶液 5μL，缺黄芪的阴性对照溶液 与供试品溶液各 10μl 分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以三 氯甲烷 － 甲醇 － 水 （ 13 ∶ 7 ∶ 2） 的下层溶液为展开剂［1］。展 开，取出，晾干，喷以 10% 硫酸乙醇溶液，在 105℃ 加热至斑 点显色清晰。如图 1 所示： 供试品色谱中，在与黄芪甲苷对 照品色谱相 应 的 位 置 上，显 相 同 的 棕 褐 色 斑 点。 且 斑 点 清 晰，分离度好，缺黄芪的阴性对照没有干扰。
茯苓薄层色谱鉴别《中国药典》（ 一部） （ 2010 版） 以甲 苯 － 乙酸乙酯 － 甲酸（ 20∶ 5∶ 0. 5） 为展开剂，展开后晾干喷 2% 香草醛硫酸溶液 － 乙醇（ 4∶ 1） 混合溶液显色，由于甲苯 毒性 较 大，甲 酸 腐 蚀 性 较 强，本 文 选 用 乙 醚 － 石 油 醚 （ 60℃ ～ 90℃ ） （ 1∶ 1） 为展开剂［2］，展开后晾干直接置紫外光 灯（ 365nm） 下检视，实验操作过程更安全、简便。
茯苓对照药材 1g，加乙醚 20mL，自“加热回流 1h”起，与供试
品溶液同法制成对照药材溶液。再按处方称取缺茯苓的其
他药材，制成缺茯苓阴性样品，同供试品溶液制备方法制得
缺茯苓的阴性对照溶液。照薄层色谱法（ 《中国药典》2010
年版一部附录 VIB） 试验，吸取缺茯苓的阴性ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ照溶液与供
试品溶液各 15μL、对照药材溶液 10μL，分别点于同一硅胶