人参皂苷Re的提取分离与鉴定
实验六 人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定(共享)一、实验介绍人参是一种传统的中药材,具有滋补强壮、改善免疫功能、抗氧化、抗疲劳等保健作用。
人参中的主要活性成分为人参皂苷,是一类四环倍半萜类化合物,已经被证明具有多种药理活性,包括治疗心血管疾病、神经系统疾病、肿瘤等。
本实验将通过浸提、分离纯化和质谱鉴定等方法,提取并鉴定人参中的人参皂苷。
二、实验原理1、浸提法浸提法是将药材浸入某种合适的溶剂中,使药材中的有效成分与溶剂发生物理或化学变化,达到提取目的的一种分离方法。
2、硅胶柱层析法硅胶柱层析法是将样品溶液通过硅胶柱,利用在硅胶表面的物理吸附或化学吸附作用,将混杂在一起的化合物分离开的方法。
3、质谱鉴定质谱鉴定是一种能够确定样品化学结构和分子质量的分析技术。
常用的质谱仪有基质辅助激光解吸/电离质谱仪(MALDI-TOF MS)、毛细管电泳-电喷雾离子化质谱仪(CE-ESI-MS)、气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)等。
三、实验步骤1、人参皂苷的浸提提取取50克粉碎后的人参,加入500 mL纯水,加热至60℃灌装入烧杯中,自然冷却至室温,用纱布过滤液体,重复浸提两次,将过滤液集合并浓缩至100 mL,抽取所有成分并将溶剂蒸干,得到人参的浸提液。
将人参浸提液溶于甲醇,用硅胶柱层析法进行分离。
在硅胶柱中注满硅胶,静置,再用甲醇将硅胶冲洗至洗液pH值小于7,并流至平衡,用稀甲酸使硅胶柱的pH值保持在4.5左右,注入30 ml的样品溶液后,按照乙醇-水(5:95)逐步更换溶剂进行洗提。
收集各部分2 mL溶液,检测其皂苷浓度。
将含有人参皂苷的溶液分别离子化并进入质谱仪,分别进行质谱分析,并比对和参考相关文献,确定人参皂苷的种类及分子质量。
四、实验结果浸提液得率为12.5%,色深浅不一,澄清程度良好。
利用硅胶柱进行层析分离,得到了包含人参皂苷的溶液。
收集了各部分的溶液,并测定了其皂苷浓度,得到各部分的含人参皂苷浓度、总皂苷脂含量和分离效果。
人参皂苷提取,纯化实验总结
以下是人参皂苷提取和纯化实验的总结:实验目的:本实验旨在提取和纯化人参皂苷,评估提取和纯化方法的有效性和效率。
实验步骤:1.人参饮片研磨:将人参饮片研磨成细粉末,增加其表面积,有利于提取。
2.提取溶剂选择:根据文献和先前研究的经验,选择适合的提取溶剂。
常用的溶剂包括水、乙醇和乙醚。
3.提取过程:将人参粉末与选择的溶剂进行浸泡或回流提取。
通过搅拌、温度控制和提取时间的调整,使人参皂苷溶解到溶剂中。
4.过滤和浓缩:将提取液过滤以去除悬浮物和杂质。
然后使用适当的浓缩技术(如真空浓缩或冷冻干燥)将提取液浓缩,得到浓缩的人参皂苷提取物。
5.纯化方法选择:根据实验要求和目标,选择合适的纯化方法。
常用的方法包括凝胶柱层析、高效液相色谱(HPLC)和溶剂萃取等。
6.纯化过程:根据选择的纯化方法进行操作,将提取物中的杂质和其他成分分离,得到纯化的人参皂苷。
7.纯化产物分析:使用适当的分析技术(如质谱、紫外-可见光谱、高效液相色谱等)对纯化产物进行分析和定量,以确保其纯度和含量。
实验结果与总结:根据实验结果,成功提取和纯化了人参皂苷。
通过测定纯化产物的含量和纯度,可以评估提取和纯化方法的有效性和效率。
此外,对提取过程中的各个步骤进行优化和调整,可以进一步改进提取和纯化的效果。
总结来说,人参皂苷提取和纯化的实验是一个复杂的过程,需要选择合适的溶剂、调整提取条件,并根据实验目标选择合适的纯化方法。
通过实验,可以得到纯度较高的人参皂苷提取物,为进一步的研究和应用提供了基础。
然而,对于特定的提取和纯化过程,仍需要根据具体情况进行调整和改进,以提高纯化产物的纯度和产量。
人参皂苷实验报告
一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取人参皂苷,并对其活性进行初步探究,以期为人参皂苷的应用提供科学依据。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:(1)人参:新鲜五加科植物人参根,产地吉林。
(2)试剂:甲醇、氯仿、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
(3)仪器:超声波清洗器、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外分光光度计、分析天平等。
2. 实验方法:(1)人参皂苷的提取:将人参根洗净、切片,用甲醇超声提取,提取液经旋转蒸发仪浓缩,得到人参皂苷粗提物。
(2)人参皂苷的鉴定:采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定。
(3)人参皂苷的活性研究:①抗氧化活性:采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性。
②抗炎活性:采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性。
③抗肿瘤活性:采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性。
三、实验结果与分析1. 人参皂苷的提取通过超声波辅助提取法,从人参根中成功提取出人参皂苷粗提物。
经过旋转蒸发仪浓缩,得到人参皂苷的纯度较高。
2. 人参皂苷的鉴定采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定,结果显示,提取物中主要含有人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Rc等单体皂苷。
3. 人参皂苷的活性研究(1)抗氧化活性:采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性,结果显示,人参皂苷具有显著的自由基清除作用,IC50值为(0.6±0.1)mg/mL。
(2)抗炎活性:采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性,结果显示,人参皂苷具有显著的抗炎作用,耳肿胀抑制率为(75.3±2.5)%。
(3)抗肿瘤活性:采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性,结果显示,人参皂苷对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞A549具有显著的抑制作用,IC50值分别为(10.5±0.8)μg/mL和(15.2±1.0)μg/mL。
四、结论1. 本研究采用超声波辅助提取法成功从人参根中提取出人参皂苷,并对其进行了鉴定。
2. 人参皂苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性,为人参皂苷的应用提供了科学依据。
人参皂苷Re的分离提纯
人参皂苷一.人参皂苷的背景及药理作用人参是一味被广泛用于养身治病的传统中药,与貂皮、鹿茸并称为中国东北三宝。
而人参皂苷又是人参的主要有效成分,其药理作用表现多样。
人参皂苷虽然在人参的药理作用上起了关键性的作用,但其含量很少,只约占4 %。
根据皂苷元的不同,人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。
现在我们对于单个人参皂苷的药理作用研究已非常深入, 像其在神经系统、小肠传送功能、内分泌系统、免疫系统、信号传导、抗衰老、溶血、烧伤创面愈合、抗肿瘤增效、人的精子活力、药物代谢酶、降血糖方面的影响机理都有相关的新研究成果,人参皂苷Re也已被证实具有抑制中枢神经,促进DNA、RNA合成,促进血清蛋白质合成,促进蛋白质分解酵素活性化,促进刺激副肾皮质荷尔蒙分泌等作用。
人参皂苷作为人参的主要有效成分之一,其药效作用表现的多样性在一定程度上揭开了人参具有奇特功效的神秘面纱。
作为皂苷类成分,其口服直接经肠道吸收是比较差的,大多需要经肠道菌群代谢后,其代谢产物才能被较好地吸收入体内。
从这一点来讲,人参皂苷的药效作用与肠菌代谢的关系是密不可分的,因此,今后需进一步加强人参皂苷肠菌代谢这一关键上游环节的研究,这对于进一步认识人参皂苷起效的物质基础及体内过程是相当重要的,而且有利于判断体外实验结果的价值。
但是,对于人参皂苷在成分及剂量上的配伍研究还显得较为薄弱,这需要在今后的研究中予以加强。
再者,人参皂苷具有典型的双向调节作用,如何通过控制相关条件及合理的配伍来达到治疗目的也是今后值得研究的一个方面。
二.人参皂苷的分离提取人参皂苷在人参中的含量很低,在人参的各个组织器官中的含量都有所不同,这无形中又增加了我们对人参皂苷的分离提取的难度。
在实际生产中,我们一方面要保证皂苷的产率,另一方面又要保证它的生物活性。
下面我就以人参皂苷Re的提取为例,通过硅胶柱层析技术从人参叶三醇皂苷中分离制备较纯人参皂苷Re,采用重结晶技术将分离后较纯Re精制并通过HPLC检测其纯度:(一)材料人参皂苷标准品Re、Rg ,精致人参叶三醇皂苷,薄层层析板Silica Gel 6O—F254,AB-8大孔吸附树脂,硅胶G。
人参皂苷的提取与分离 汇报材料
人参皂苷的提取与分离学生姓名专业班级学院摘要首先认识人参和人参皂苷,了解人参皂苷的详细作用和功效,接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法,用详细的工艺提取人参皂苷,并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定,为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词:皂苷;人参茎叶;鉴定。
Abstract.The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process ofextraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation.key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;目录摘要 (1)Abstract ............................................... 错误!未定义书签。
1绪论 (3)1.1 ................................................................ 人参概述错误!未定义书签。
1.2 ......................................................... 人参的化学成分11.2.1人参皂苷 (1)1.2.2 人参蛋白 (1)1.2.3 人参多糖 (1)1.2.4 无机元素 (2)1.2.5 其他成分 (2)1.3 .............................................. 人参的生理功能及药理活性21.3.1增强免疫功能 (2)1.3.2抗衰老 (2)1.3.3抗肿瘤 (3)1.3.4增强学习和记忆能力 (3)1.3.5保护心血管系统 (3)2实验部分 (5)2.1 ............................................................... 实验材料52.2人参皂苷的提取分离 (5)2.2.1人参皂苷的提取分离原理 (5)2.2.2人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5)2.3 .......................................................... 人参皂苷的检识72.3.1显色反应 (7)2.3.2薄层层析 (7)3讨论 (9)4结论 (10)参考文献 (11)1 绪论1.1 人参概述人参系五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,人类对人参的利用在《神农本草经》中已有记载,据今已有2000多年的历史,但人们偏向于对人参根的利用,而对人参茎叶的开发从近几年才开始。
实验五 人参皂甙的提取及甙元的分离鉴定
实验五 人参皂甙的提取及甙元的分离鉴定人参为五加科(Araliaceae )人参属植物人参(Panax gin-seng C.A.Meyer )的干燥根,为我国特产名贵中药。
具有大补元气、补脾益肺、固脱生津、安神益智的功效。
主治虚咳喘促、食少倦怠、惊悸健忘、久虚不复等症,疗效显著。
有关人参化学成分的研究已有很多报道,近年来取得了较大进展。
日本学者Shibata 等从人参根中分离出10多种皂甙,命名为人参甙皂(gensenoside )R 。
Ra,2120321,,,,,,,,,g g f ghcu f e d c b b b R R R R R R R R R R --和h R 等,并测定了这些皂甙得化学结构。
近年来对人参地上部分也进行了研究,叶、花、总皂甙中除了含有皂甙类成分外,还有黄酮类成分,主要为山奈酚(Kampferol )、三叶甙(Trifelin )和人参黄酮甙(Pana-senoside )药量及生化实验证明,人参皂甙有人参相同的药理作用,目前认为人参皂甙是人参中主要有效成分。
人参中除含有多种人参皂甙外,还含有少量挥发油、脂肪油、胆碱、β谷甾醇、多种氨基酸和多种维生素等。
人参皂甙的皂甙元有三种,即原人参二醇(Protopanaxaiol )、原人参三醇(Protoanaxtriol )及齐墩果酸(Oieanolicacid )。
前两种皂甙元在水解过程中侧链环合,故水解后实际得到的是人参二醇(Panaxdiol )及人参三醇(Panaxtriol )。
一、目的要求①通过实验掌握人参皂甙的提取、精制方法,进一步巩固和熟悉人参皂甙的性质。
②熟悉和掌握人参皂甙的水解条件和方法。
③熟悉和掌握柱层析分离人参皂甙元的原理方法及基本操作技术。
二、人参中已知主要成分的理化性质人参皂甙:多数为白色无定形粉末或无色针状结晶,味微甘苦,具有较强引湿性。
易溶于水、甲醇、乙醇;可溶于正定醇和乙酸乙脂,不溶于乙醚、苯中。
人参中人参皂苷的提取、分离和测定
人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。
提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。
常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。
溶剂提取法:这是最常见且相对简单的方法,主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。
常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。
通过浸泡、回流或渗漉等方式,使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中,再通过蒸发溶剂得到粗提物。
微波辅助提取法:微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用,提高提取效率和速度。
微波产生的热能可以使细胞壁破裂,加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解,从而缩短提取时间。
超声波辅助提取法:超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用,增加溶剂对原材料的穿透力,提高人参皂苷的提取率。
同时,超声波还可以破坏细胞结构,使皂苷更容易释放到溶剂中。
超临界流体提取法:超临界流体提取是利用超临界状态下的流体(如二氧化碳)作为溶剂,通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力,从而实现对人参皂苷的高效提取。
这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。
在实际应用中,可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素,选择最合适的提取方法。
为了提高提取效果,还可以结合使用多种提取方法,如先用溶剂提取法得到粗提物,再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。
三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤,其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。
这通常涉及到一系列的色谱技术,包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱(HPLC)等。
液-液分配色谱,也称为液-液萃取,是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。
这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。
固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。
HSCCC法分离制备人参果中人参皂苷Re_孙成贺
酯-正丁醇-水 ( 1B6B7) 为最佳溶剂系统。详见表 1。
表1
H SCCC 溶剂系统筛选
溶剂系统
固定相保留率 分配系数
(% )
( k)
氯仿-甲醇-正丁醇-水 ( 5B6B1B4)
101 5
01 22
氯仿-甲醇-正丁醇-水 ( 6B6B2B4)
261 7
01 34
氯仿-甲醇-正丁醇-水 ( 6B6B3B4)
参考 文献
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பைடு நூலகம்
厂 ) ; 大型旋转蒸发仪 ( 德国 H e idolph); 小型旋转蒸 发仪 ( 瑞士 BUCH I) ; 抽 滤装置; 薄 层观察 分析仪
概括描述人参皂苷的提取和分离过程
概括描述人参皂苷的提取和分离过程
人参皂苷是人参的主要活性成分,具有多种生物活性和药理作用,在医药工业中有广泛应用。
其提取和分离过程,一般分为以下几个步骤:
1. 原料制备:选择优质的人参作为原料,经过清洗、切片、烘
干等处理,使其达到适宜的含水量和粉碎度。
2. 提取工艺:采用不同的提取剂(如水、乙醇、丙酮等)对原
料进行提取,提取温度、时间和比例等参数会影响提取效果。
3. 分离方法:利用色谱技术、薄层色谱、高效液相色谱等方法,将提取液中的人参皂苷分离出来,并通过检测手段(如紫外光谱)确定其纯度和组成。
4. 纯化过程:对分离得到的人参皂苷进行纯化处理,达到更高
的纯度和稳定性,常用的方法有深度冻干、蒸馏、结晶等。
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人参中各个皂苷分离流程
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一、粗提。
1. 将人参粉碎成细粉。
2. 加入适当溶剂(如乙醇)浸泡提取,充分搅拌。
人参皂苷国标19506-2009检测方法
人参皂苷国标19506-2009检测方法
本方法人参皂苷Re的低检出量为2μg/mL
一、方法提要
样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定。
二、仪器
1.722分光光度计。
2.PT—大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂)。
3.超声波振荡器。
三、试剂
1.甲醇(分析纯)
2.乙醇(分析纯)
3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)
4.5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至l00mL
5.高氯酸(分析纯)
6.冰乙酸(分析纯)
7.人参皂苷Re标准溶液:称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每1mL含人参皂苷Re2.0mg
8.重蒸水
四、测定步骤
1.样品处理:
(1)固体样品
称取1.0g左右样品于100mL烧杯中,加入20~40mL 85%乙醇,超声波
振荡30min,再定容至50mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离
(2)液体样品
含乙醇的酒类样品:准确吸取1.0mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析;非乙醇类液体样品:准确吸取1.0mL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)直接进行柱分离
2.柱层析
以PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液1.0mL上柱,用15mL水洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中,于水浴上蒸干,以此作显色用。
人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型-A 型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20(S)-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
高效液相法测人参皂苷
以测Re、Rg1为例1 色谱条件的选择1.1采用C18(4.6mm×250mm,5um)1.2流动相乙腈(A) - 水(B),20:801.3流速1.0mL/min1.4波长的选择(203nm)以人参皂苷对照溶液在200 ~ 300nm 范围进行光谱扫描测定, 结果人参皂苷在nm 波长处有最大特征吸收, 选择nm作为人参皂苷的测定波长。
1.5温度301.6进样量10ul2 溶液制备2.1对照品溶液的制备精密称取干燥的人参皂苷Re对照品5.790mg 人参皂苷Rg1对照品6.325mg,置于50mL的容量瓶中,加入甲醇进行溶解并稀释至刻度,摇匀,后静置,即得对照品溶液( 其中含有人参皂苷Rg10.1235mg/mL,人参皂苷Re0.1028mg/mL)。
2.2 供试品溶液的制备取样品2g,至于具塞锥形瓶中,加甲醇5ml,超声10min,离心15min,转速为2500r/min,取上清液过滤,甲醇定容至5ml。
加5ml水饱和正丁醇萃取两次,合并正丁醇液,蒸干,残渣用甲醇定容至5ml。
2.3 阴性样品溶液的制备取缺少人参的其他药材,制成缺少人参的阴性样品,再按照2.2项下的步骤制成阴性样品溶液。
3 系统适应性试验取对照品溶液供试品溶液阴性对照品溶液按照1项下的色谱条件,分别将3种溶液以10ul进样,测定分离度,均应≥1.5,色谱峰对称性,理论塔板数,说明空白对照样品的测定无干扰性。
4 线性关系考察分别精密取2.2项下的供试品溶液1、2、4、6、8、10、12 uL,按照1项下的色谱条件进样测定,以峰面积( Y) 对浓度( X) 进行线性回归,回归方程分别为( r=) 结果表明人参皂苷在g范围内线性关系良好。
5 精密度考察取2.1项下方法制备的对照品溶液10.0u L,在1色谱条件下依法重复进样6次,记录其峰面积,结果表明峰面积的RSD为%,表明其精密度良好。
6 稳定性考察取同一批供试品溶液,分别于0、2、4、8、12、24、36、48h,精密吸取溶液10 uL,注入高效液相色谱仪中,按照1项下进行测定,记录色谱峰面积结果峰面积的RSD为%,表明样品溶液在48h内基本稳定。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
人参皂苷的提取分离方法研究进展人参皂苷是人参中的重要活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种药理作用。
近年来,随着对人参皂苷研究的深入,其提取分离方法也得到了广泛。
本文对近年来人参皂苷的提取分离方法研究进展进行综述,总结各种方法的优缺点,并探讨人参皂苷提取分离方法的未来发展方向。
人参皂苷是一种由人参中提取的天然化合物,具有广泛的药理作用和生物活性。
随着人们对人参皂苷药理作用的不断发现,其提取分离方法也成为了研究的热点。
本文将对近年来人参皂苷的提取分离方法进行综述,旨在为相关研究提供参考和借鉴。
传统的人参皂苷提取分离方法主要包括溶剂萃取、沉淀、柱色谱等。
这些方法操作简单,适用于大规模生产,但分离效率较低,纯度不高,且有机溶剂的使用对环境造成了污染。
为了提高分离效率和纯度,人们不断探索新的提取分离方法。
这些方法主要包括超临界流体萃取、高速逆流色谱、分子印迹技术等。
超临界流体萃取:该方法具有高效、快速、节能等优点,适用于分离热敏性和易氧化性物质。
在人参皂苷的提取分离中,超临界流体萃取能够有效地提取和分离人参皂苷,但设备成本较高,需要进一步降低成本。
高速逆流色谱:该方法是一种高效的液相色谱技术,可用于分离制备高纯度的人参皂苷。
其优点是分离效率高、纯度高、速度快,但需要使用大量的有机溶剂,且操作难度较大。
分子印迹技术:该方法是一种新兴的分离技术,通过制备分子印迹聚合物特异性地吸附目标分子。
在人参皂苷的提取分离中,分子印迹技术具有高选择性和高吸附容量,能够实现目标分子的高效分离,但制备分子印迹聚合物较为复杂,需要进一步优化制备条件。
近年来,一些新的提取分离方法如双水相萃取、膜分离技术、离子液体等也逐渐应用于人参皂苷的提取分离。
这些方法有的能够简化操作流程,提高分离效率,有的则能够降低能耗和污染。
例如,双水相萃取技术利用两种水溶性聚合物在不同的浓度下可以实现人参皂苷的选择性萃取;膜分离技术则能够实现人参皂苷的分子级别分离,提高纯度和收率;离子液体则作为一种新型的溶剂,具有优异的溶解性和稳定性,能够有效地溶解和分离人参皂苷。
试验人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型-A 型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20(S)-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
医学论文-人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究
人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究【关键词】人参皂苷摘要:目的:建立人参皂苷Rg1、Re的含量测定方法。
方法:采用HPLC 色谱法,流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱。
结果:人参皂苷Rg1在0.032~0.192 mg/ml范围内线性良好;人参皂苷Re在0.024~0.144 mg/ml 范围内线性良好。
平均回收率为97.59%,RSD为1.64%。
结论:该方法简便稳定,准确,重现性好,可用于控制人参药材的质量。
关键词:人参;人参皂苷Rg1;人参皂苷Re;高效液相色谱法人参作为贵重药材,含有人参皂苷和多糖等成分。
具有大补元气、复脉固脱、补脾益气,生津,安神的功效。
用于体虚欲脱,肢冷脉微,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,内热消渴,惊悸失眠,阳痿宫冷;心力衰竭,心原性休克等。
本文参考《中国药典》2000年版Ⅰ部人参项下含量测定方法[1],建立了人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。
结果表明,本实验所建立的方法含量重现性良好,专属性强,数据比较稳定。
1仪器与试药 1.1仪器Agilent 1100型高效液相色谱仪;色谱柱:Echrom C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)Echrom工作站;AE240型双量程电子分析天平(十万分之一)。
1.2试剂高效液相用试剂为色谱纯,其余均为分析纯。
1.3对照品为中国药品生物制品检定所提供(人参皂苷Rg1,批号0703-200221,供含量测定用;人参皂苷Re,批号110754-200218,供含量测定用)。
1.4药材人参购自安徽亳州市场,经鉴定符合《中国药典》要求。
2方法学考察 2.1色谱条件流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱,理论塔板数按人参皂苷Re峰计算不得低于2 500。
2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品8.00 mg,人参皂苷Re对照品6.00 mg,置10 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀;精密量取1 ml,置5 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 ml含人参皂苷Rg1 0.160 mg,人参皂苷Re 0.120 mg)。
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天然药物化学教研室
1
要求提取分离人参皂苷Re;
一、实验目的
2
掌握大孔树脂法提取人参皂苷的操作程序;
3
学习薄层层析在皂苷检识中的应用。
二、实验原理
果汁中含脂溶性杂质,用乙醚脱脂后,利于水溶 性皂苷在树脂上的吸附,籍此提取皂苷,且利用Re 溶于热乙醇,在冷乙醇溶解度小的特点析出 Re,与 其它成分分离。Biblioteka 四、鉴定1.泡沫实验
2.显色反应
3.薄层层析
取果汁1~2ml于试 管内,激烈振摇, 如产生多量蜂窝状 泡沫,放置10分钟 以上,泡沫不明显 减少,示有皂苷成 分。
LiebermannBurchard反应: 取果汁1ml,加等 量乙酸酐,滴加1 滴浓硫酸,变成紫红 色。
1)展开剂:1°氯仿:甲醇:乙酸 乙酯:水(2:2:4:1,下层) 2°氯仿:甲醇:水(65:35: 10,下层) 2)显色剂:5%硫酸乙醇溶液 (110℃以上加热5分钟)显红色、 紫红色斑点 。
2.人参皂苷Re的制备
取4/5量的乙醇提取物
少量展开剂2°溶解; 上样于硅胶H(40g)柱 展开剂1洗脱,每30ml为一流份收集
Fr3 ……
Fr1
Fr2
Fr13
TLC检测,合并Re单一斑点的流份 回收洗脱液至小体积(约20—30ml) 放置、析晶 Re粗晶B 95%乙醇重结晶 Re纯品C
注:①树脂柱用前需经无水乙醇处理; ②可用α—萘酚糖反应检测,实际中可目测,至 水洗液颜色变浅至清即可; ③洗脱时,自紫色带即将流出时,开始收集洗脱 液。收集1200~1500ml ④需半周时间; ⑤可用回流装置中脱色半小时。
五、思考题
1
1. 层析结果如何? 若想进一步得到 Re纯品应怎样程 序处理?
2
2. 根据皂苷性质、 自行设计一种自人 参根中提取总苷及 皂苷单体分离的方 案。
三、实验方法
1.人参果汁总皂苷的提取
人参果肉50g
150ml水温浸(70℃,1hr),抽滤
滤液1 果肉 100ml水温浸(70℃,30′),抽滤 滤液2 果肉
合并,通过大孔吸附树脂D4020柱① ; 水洗至无糖反应② ; 90%乙醇(800~1000ml)洗脱③ 。 乙醇洗脱液
回收乙醇
乙醇提取物(人参粗总苷A)