高中生物选修一血红蛋白的提取与分离练习

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人教版高中生物 选修1 专题5课题3 血红蛋白的提取和分离 同步练习

人教版高中生物 选修1 专题5课题3 血红蛋白的提取和分离 同步练习

《课题3 血红蛋白的提取和分离》13.(改编题)红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳,我们可以选用猪、牛、羊或其它脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步:样品处理、 、 和 。

(2)样品处理包括红细胞的洗涤、 和 三步。

红细胞洗涤次数不能过少,否则 ;离心速度 和时间 会使白细胞等一同沉淀,达不到分离的效果。

(3)凝胶色谱柱在装填过程中,凝胶充分溶胀后,配成凝胶悬浮液,在色谱柱下端的尼龙管的螺旋夹的情况下,一次性缓慢倒入色谱柱内,可轻轻地敲动色谱柱,使凝胶装填均匀。

(4)右图是样品的加入与洗脱示意图,从图中可以看出,正确的加样操作是用吸管小心将透析后的样品 加样,正确的操作次序是 。

14.凝胶色谱法是60年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经在生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学等领域广泛应用,不但应用于科学研究,而且已经大规模地用于工业生产。

据图回答下列问题:(1)a 、b 均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是 ,原因是 。

(2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d 位置相当于多孔板的结构可由 替代。

(3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡的存在,原因是 。

(4)洗脱时对洗脱液的流速要求是 。

若选用SephadexG-75,则“G ”表示 ;“75”表示 。

15.某生物兴趣小组以α-淀粉酶为实验材料进行系列实验:一是用凝胶色谱法测定α-淀粉酶的相对分子质量,二是用包埋法固定α-淀粉酶来探究固定化酶催化效果。

请回答下列问题:(1)凝胶色谱法的原理是 。

(2)某人欲使用凝胶色谱法比较α-淀粉酶、唾液淀粉酶两种蛋白质的分子质量大小,请你选择需○ ○ ○○ ○··· ○·○ ··· a c b d ① ② ③ ④ 样品样品要的材料,借用右图的实验装置,帮助其设计实验步骤,并预测实验结果,得出相关结论。

人教版高中生物选修一5.3 血红蛋白的提取和分离人教版高中生物选修一练习

人教版高中生物选修一5.3 血红蛋白的提取和分离人教版高中生物选修一练习

5.3 血红蛋白的提取和分离学校:___________姓名:___________班级:___________考号:___________一、单选题(本大题共30小题,共60.0分)1.以下关于血红蛋白提纯的叙述,正确的是()A. 实验材料用鸡血比猪血好B. 血红蛋白呈红色,有利于凝胶色谱分离过程中的监测C. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得两条带,说明血红蛋白是由两条肽链构成的D. 在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢2.下列有关提取和分离猪血红蛋白的实验,叙述错误的是()A. 用生理盐水洗涤红细胞,以防止红细胞破裂B. 用蒸馏水和甲苯处理红细胞,使其释放出血红蛋白C. 用生理盐水透析血红蛋白溶液,以保持血红蛋白活性D. 用磷酸缓冲液洗脱,有利于血红蛋白在凝胶柱中移动3.样品的加入和洗脱的操作不正确的是()A. 加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B. 用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要破坏凝胶面C. 加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内D. 等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口4.下列有关血红蛋白的提取的叙述,错误的是A. 使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质B. 凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法C. 血红蛋白的提取和分离一般按照样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定的顺序进行D. 装填色谱柱时要尽量紧密,减小颗粒间隙;避免出现气泡;洗脱液不能断流5.将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min速度离心10 min后,离心管中溶液分为4层,血红蛋白位于从下至上的A. 第一层B. 第二层C. 第三层D. 第四层6.下图1是血红蛋白的提取和分离流程图,图2是为用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定某血浆蛋白的结果,下列叙述中错误的是A. 图1中①②分别代表血红蛋白的释放、凝胶色谱柱的装填B. 为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂柠檬酸钠C. 凝胶色谱法能除去血红蛋白溶液中相对分子质量较大的杂质D. 根据电泳结果,可得出“提取的血浆某白蛋白一定由两条肽链组成”的结论7.在血红蛋白的提取和分离中,关于对样品处理过程的分析,不正确的是()A. 洗涤红细胞用0.9%的生理盐水,目的是去除杂蛋白B. 洗涤红细胞和分离血红蛋白都要离心,离心速度可相同C. 血红蛋白的释放要加蒸馏水和甲苯D. 透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质8.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质,其分子大小、电荷的性质和数量情况如下图所示。

高中生物选修1练习:专题5课题3血红蛋白的提取和分离 含解析

高中生物选修1练习:专题5课题3血红蛋白的提取和分离 含解析

专题5 DNA和蛋白质技术课题3 血红蛋白的提取和分离1.下列试剂可用于血红蛋白释放的是()①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④B.①④C.④⑤D.①③[解析]0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂,不能用于血红蛋白释放;甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂,加速血红蛋白的释放;磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质,不能用于释放血红蛋白;蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破,释放其中的血红蛋白;柠檬酸钠的作用是采血时,防止血液凝固,不能用于血红蛋白的释放。

[答案]A2.在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,与其有关的是()A.凝胶色谱柱的制作B.色谱柱的装填C.洗脱过程D.样品的处理[解析]在血红蛋白分离过程中如果红色带区歪曲、散乱、变宽,说明色谱柱制作不成功,可能是凝胶装填不紧密、不均匀,或者存在气泡,打乱了洗脱次序所致。

[答案]B3.在蛋白质的提取和分离中,下列关于样品处理及粗分离过程的叙述,正确的是()A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C.洗涤过程选用质量分数为0.1%的NaCl溶液D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质[解析]洗涤红细胞的目的是去除血浆中的杂蛋白;洗涤时离心速度过高,时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程应选用质量分数为0.9%的NaCl溶液。

[答案]D4.凝胶色谱柱取长为40 cm,内径为1.6 cm,有关说法中,不正确的是()A.一般凝胶色谱柱直径的大小不会影响分离的效果B.凝胶色谱柱过高,超过1 m,不影响分离的效果C.凝胶色谱柱过矮,则影响混合物的分离度D.凝胶色谱柱直径过大会耗用过多洗脱液,样品的稀释度过大[解析]一般凝胶色谱柱直径的大小不影响分离的效果,但是直径过大会造成洗脱液体积增大,样品的稀释度过大,因此应选择直径不超过2 cm的色谱柱。

高二生物选修1《血红蛋白的提取和分离》实验练习

高二生物选修1《血红蛋白的提取和分离》实验练习

高二生物选修1《血红蛋白的提取和分离》实验练习一、单选题:在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。

1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大B.人血也可代替鸡血进行实验C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D.DNA不能溶于酒精2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是A.DNA溶解于水 B.血细胞破裂,DNA释放C.稀释血液,防止凝固 D.有利于搅拌3. 在DNA的粗提取过程中,为了提取鸡血细胞中的核物质,需向鸡血细胞液中注入适量的液体,既使条件很不充分的条件下,所注液体也不能用A.未灭菌处理的但无污染的池水 B.未长期静置的自来水C.灭菌后的蒸馏水 D.灭菌后的生理盐水4. 在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是A.有利于溶解DNA B.有利于溶解杂质C.减少DNA的溶解度D.减少杂质的溶解度5. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是A.氯化钠的浓度越低,对DNA的溶解度越大B.人体的血液不可代替鸡血进行该实验C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D.利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA中的部分杂质6. 下列操作中,对DNA的提取量影响较小的是A. 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,发出DNA等核物质B. 搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C. 在析出DNA粘稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增多D. 在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却7. 有关DNA粗提取的描述中,正确的是A. NaCl溶液的浓度越大,DNA的溶解度越大B. DNA易溶于酒精C. 在破裂的鸡血细胞中加入蒸馏水,可使其破裂,放出DNAD. 在破裂的鸡血细胞溶液中,加入2mol/l的NaCl溶液,可使DNA大量析出8. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐,加入食盐的目的是A. 利于DNA的溶解B. 分离DNA和蛋白质C. 溶解细胞膜D. 溶解蛋白质9. 蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来,下列药品可达到上述同一目的的是A. 蒸馏水B. NaCl溶液C.NaOH溶液D. 盐酸10. DNA不溶于A. NaCl溶液B. KCl溶液C. C2H5OH溶液D. MgCl溶液11. 提取含杂质较少的DNA所用的溶液是A. NaCl溶液B. 冷却的酒精体积分数为90%的溶液C. 加热的酒精体积分数为90%的溶液D. 冷却的酒精体积分数为90%的溶液12. 如果在除去杂质时选择方案三,为什么要将滤液放在60-75℃的恒温水浴箱中保温10-15minA. 使DNA变性B. 使蛋白质变性C. 使DNA和蛋白质变性D. 分解蛋白质13. 在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需用蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。

人教版高中生物选修1血红蛋白的提取与分离 精编作业

人教版高中生物选修1血红蛋白的提取与分离   精编作业

血红蛋白的提取与分离一、单选题1.蛋白质提取过程中有关透析的叙述,错误的是A. 用于透析的薄膜要具有选择透过性B. 透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C. 透析能使小分子自由出入,而将大分子保留在袋内D. 透析可用于更换样品的缓冲液【答案】A【解析】化学用透析膜虽是半透膜,但是静态的,以膜孔径大小决定透析物质,不是选择透过性膜,A错误;透析膜一般是用硝酸纤维素制成的,B正确;透析能使小分子自由出入,而将大分子保留在袋内,C正确;透析可以去除样品中相对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液,D正确。

2.生物产品的分离、纯化是现代生物技术中一种常见的技术。

下列关于物质提取、纯化原理的叙述中,不正确的是( )A. 采用凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度不同B. 使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质C. 电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同,产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离D. 离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同【答案】B【解析】凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法,相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程长,移动的速度慢,相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道,路程短,移动的速度快,因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离同,A正确;使用透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质,B错误;电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同,产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离,C正确;离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同,D正确。

3.下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中,错误的有A.提取哺乳动物红细胞中的DNA和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法B.采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C.蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质D.血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化,DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化【答案】D【解析】DNA和蛋白质存在于细胞内,用动物作材料提取DNA和蛋白质,都要用蒸馏水处理,使细胞吸水涨破,释放出其中的蛋白质或DNA,A正确;DNA在不同浓度的NaCl 溶液中的溶解度不同,因此可以采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质,B正确;蛋白质纯化过程中,由于小分子杂质可以通过透析袋,大分子蛋白质不能通过透析袋而留在袋内,因此可以采用透析法可去除溶液中的小分子杂质,C正确;凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种,蛋白质的纯化也可以采用电泳、盐析等方法纯化,D错误.【考点定位】蛋白质的提取和分离;DNA的粗提取和鉴定【名师点睛】本题是对DNA的粗提取和蛋白质分子提取过程的比较、DNA和蛋白质分子分子纯化的方法的考查,回忆DNA分子的粗提取与鉴定及血红蛋白的提取和分离的过程,然后分析选项进行解答.4.样品的加入和洗脱的操作不正确的是()A. 加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B. 加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内C. 等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口D. 用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要破坏凝胶面【答案】A【解析】试题分析:加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐关闭出口,故A错误。

高中生物选修1人教版练习:专题5第18课时血红蛋白的提取和分离

高中生物选修1人教版练习:专题5第18课时血红蛋白的提取和分离

第18课时血红蛋白的提取和分离目标导航 1.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

2.理解缓冲液的组成和作用机理。

3.体验提取生物大分子的基本过程和方法。

一、分离蛋白质的基本方法原理1.蛋白质的分离方法——凝胶色谱法凝胶色谱法也称做________________,是根据________________的大小分离________的有效方(1)作用在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界________和________对溶液________的影响,维持pH 基本不变。

纯水的pH因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。

然而,1滴浓盐酸加入到 1 L CH3COOH—CH3COONa混合溶液或NaH2PO4—Na2HPO4混合溶液中,[H+]的增加不到百分之一(从1.00×10-7 mol/L增到1.01×10-7 mol/L),pH没有明显变化。

(2)组成缓冲溶液通常由________种缓冲剂溶解于水中配制而成,调节缓冲剂的____________就可以制得________________________的缓冲液,其类型主要有3种:①弱酸及其对应盐,如CH3COOH—CH3COONa,H2CO3—NaHCO3。

②多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐,如NaHCO3—Na2CO3,NaH2PO4—Na2HPO4。

③弱碱及其对应盐,如NH3·H2O—NH4Cl。

3.电泳(1)概念电泳是指____________在________的作用下发生________的过程。

许多重要的生物大分子,如________、________等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上________或________。

在电场的作用下,这些带电分子会向着________________的电极移动。

(2)原理在同一电场下,由于各种分子________性质的差异及分子本身________、________的不同,使带电分子产生________________,从而实现样品中各种分子的分离。

【全优设计】2022秋生物人教版选修1练习:5.3 血红蛋白的提取和分离

【全优设计】2022秋生物人教版选修1练习:5.3 血红蛋白的提取和分离

课时训练14血红蛋白的提取和分别1.下列关于凝胶色谱柱的操作,正确的是()。

A.将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B.将橡皮塞下部用刀切出凹穴C.插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D.将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片解析:制作凝胶色谱柱时,先选择合适的橡皮塞打孔,然后将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴,取适宜长度的玻璃管插入橡皮塞孔内,插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。

将尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片,掩盖在橡皮塞的凹穴上,再用尼龙纱将橡皮塞上部包好,插入到玻璃管的一端。

答案:A2.使用SDS—聚丙烯酰胺电泳的过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于()。

A.电荷的多少B.分子的大小C.肽链的多少D.分子外形的差异解析:SDS能与各种蛋白质形成蛋白质SDS复合物,SDS所带的负电荷量大大超过蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

答案:B3.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是()。

A.防止血红蛋白被氧气氧化B.血红蛋白是一种碱性物质,需磷酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和性质解析:磷酸缓冲液的作用是稳定pH,从而维持血红蛋白的结构和性质。

答案:D4.蛋白质的提取和分别分为哪几步?()A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分别、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分别、纯度鉴定解析:蛋白质的提取和分别分为样品处理、粗分别、纯化、纯度鉴定四步。

A中凝胶色谱操作及SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳为试验操作过程中的技术。

答案:C5.下列关于DNA的粗提取试验和血红蛋白的提取试验,叙述正确的是()。

A.前者选择鸡血细胞作为试验材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为试验材料较好B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色C.在DNA粗提取试验中,往2 mol/L氯化钠溶液中加入蒸馏水析出DNA时,应当缓慢加入,直到消灭黏稠物即止D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析:鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。

人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题

人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题

人教版生物选修一.5.3血红蛋白的提取和分离同步测试题一、单选题1. 蛋白质提取过程中有关透析的叙述,错误的是A.用于透析的薄膜要具有选择透过性B.透析膜一般是用硝酸纤维素制成的C.透析能使小分子自由出入,而将大分子保留在袋内D.透析可用于更换样品的缓冲液2. 在采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是()A.调节pH B.维持红细胞的能量供应C.防止微生物生长D.防止血液凝固3. 凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75),其中G、75的含义分别是()A.G表示凝胶的使用量,75表示加75 g水B.G表示凝胶的交联程度,75表示需加热至75 ℃C.G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示每克凝胶及膨胀时吸水7.5 gD.G表示凝胶的膨胀体积,75表示每克凝胶膨胀后体积可达75 cm34.用某种药物饲养动物一段时间,测得实验组比对照组动物血浆中血红蛋白含量明显偏高。

该药物的作用最可能是A .增加血红蛋白的合成能力C .对红细胞有破坏作用5. 血红蛋白由____________个肽链组成( )A .2B .4C .3D .56. 分离血红蛋白溶液时,离心后试管中的溶液分四层,血红蛋白在第__________层( )A .一B .二C .三D .四7. 洗涤红细胞时,离心所采用的方法是A .低速长时间离心B .低速短时间离心C .高速长时间离心D .高速短时间离心8. SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS 的作用是A .增大蛋白质的相对分子质量B .改变蛋白质的形状C .掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D .减少蛋白质的相对分子质量9. 随着人类跨入蛋白质组时代,对蛋白质的研究和应用越来越深入,首先要做的一步是( )A .弄清各种蛋白质的空间结构B .弄清各种蛋白质的功能C .弄清各种蛋白质的合成过程D .获得高纯度的蛋白质10. 制作凝胶色谱柱时,橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是( )A .移液管头部5 cmB .移液管尾部5 cmC .移液管头部3 cmD .移液管尾部3 cmD .增加红细胞的合成数量B .提高血浆蛋白的含量二、非选择题11. 蛋白质的各种特性的差异,可以用来分离不同种类的蛋白质,下列对这种特性的描述中正确的一项是……( )A .分子的形状、大小和溶解度B .所带电荷的性质和多少、吸附性质C .对其他分子的亲和力D .以上三项都是12. 使用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳过程中,不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于( )A .电荷的多少B .分子的大小C .肽链的多少D .分子形状的差异13. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中,关于蛋白质的叙述,正确的是( )A .相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B .相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C .相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D .二者根本无法比较14. 蛋白质的提取和分离一般分为四步,符合要求的一项为( )A .粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B .粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C .样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D .纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理15. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是 A .对其他分子的亲和力C .所带电荷多少D .相对分子质量的大小B .溶解度()入烧杯,加入五倍体积的__________缓慢搅拌__________min,低速短时间离心,重复洗涤__________次,至上清液中无__________,则表明红细胞洗16.采集血样后,及时分离红细胞。

高中生物选修一新增课题3:血红蛋白的提取与分离综合练习题Word版含答案及解析

高中生物选修一新增课题3:血红蛋白的提取与分离综合练习题Word版含答案及解析

高中生物选修一新增内容课题3:血红蛋白的提取与分离综合练习题全国卷在高考对高中生物选修一:生物技术实践专题高考内容进行新增,主要新增了三个课题:专题4课题1果胶酶在果汁生产中的作用、课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果、课题3 酵母细胞的固定化、专题5课题3 血红蛋白的提取和分离由于内容新增,于是在市面上很少见到新增内容的习题,教学过程中学生也想老师们多训练一点新增内容的综合练习,于是我从为了应对2020及以后高考对选修一的考查,无论是全国卷还是地方卷,都适用,我特定汇编了新增内容的练习题,希望能帮助到大家,无论是学生还是老师。

试题部分(本课题共30题)1、[选修一:生物技术实践专题] 某生物兴趣小组一部分同学选用牛的血液进行血红蛋白的提取和分离的实验;另一部分同学进行霉菌的培养和分离实验。

根据相关信息,回答下列问题:(1)在培养霉菌时,常选用________培养基进行培养。

在分离出能产生某种抗生素的霉菌后,若想利用对该抗生素敏感的大肠杆菌鉴别此种霉菌产生抗生素能力强弱,请写出实验设计思路_______________。

(2)在血红蛋白的提取和分离实验中,一般分为四步:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

在透析时使用的透析袋一般是用_______________制成的,其实质是一层___________。

(3)在测定血红蛋白分子量时通常使用的_________________________。

在凝胶中加入SDS 的目的是_________________________________________。

2、[选修一:生物技术实践专题]某同学对“血红蛋白的提取和分离”实验进行改进和研究,实验步骤如图1所示。

请回答下列问题:(1)血红蛋白由4条肽链组成,包括_________________,血红蛋白因含有_______而呈红色,这有利于对提取过程的监测。

(2)洗涤红细胞的目的是____________________________。

人教版高中生物选修1 血红蛋白的提取和分离练习题测试题

人教版高中生物选修1 血红蛋白的提取和分离练习题测试题

自我小测1.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为图中()2.电泳过程中,什么样的分子迁移速度最快?()A.纤维状、大分子B.纤维状、小分子C.球状、大分子D.球状、小分子3.将人红细胞置于盛有下列液体的离心管中,10 min后离心,得到沉淀物和上清液,则上清液中K+含量最高的离心管内盛有()A.质量分数为10%的氯化钠溶液B.质量分数为20%的蔗糖溶液C.质量分数为0.9%的氯化钠溶液D.蒸馏水4.下列有关提取和分离血红蛋白的实验叙述错误的是()A.该实验的材料必须选用鸡血B.通过透析法可以去除样品中分子质量较小的杂质,此为样品的粗提取C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D.电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离5.下列关于电泳的说法,不正确的是()A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率完全取决于它所带净电荷的多少D.用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质电泳迁移率完全取决于分子的大小6.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是()A.防止血红蛋白被氧化B.血红蛋白是一种两性物质,需要酸中和C.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D.让血红蛋白处在稳定的pH范围内,维持其结构和功能7.凝胶色谱分离法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用都是()A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在凝胶中D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度8.将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r/min的速度离心10 min后,离心管中的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是()A.血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层B.甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层C.脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D.甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层9.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述,正确的是()A.红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心B.血红蛋白的释放:加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌C.分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离D.透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h10.凝胶柱制作的顺序一般是()①橡皮塞打孔②挖凹穴③玻璃管插入橡皮塞孔内④盖尼龙网⑤用尼龙纱将橡皮塞上部包好⑥将包好的橡皮塞插入玻璃管⑦连接尼龙管、装螺旋夹⑧柱顶部插入安装了玻璃管的橡皮塞A.①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→②B.①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧C.①→②→③→④→⑥→⑤→⑧→⑦D.①→②→③→⑦→⑥→⑤→⑧→④11.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?()A.交联葡聚糖凝胶(Sephadex G75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300 mL物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12 hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液12.下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作,不正确的是()A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B.让吸管管口沿管壁环绕移动,贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后,直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每5 mL收集一管,连续收集流出液13.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2或CO2的运输。

高中生物5.3血红蛋白的提取和分离精编每课一练(人教版选修1)

高中生物5.3血红蛋白的提取和分离精编每课一练(人教版选修1)

5.3血红蛋白的提取和分离每课一练(人教版选修1)一、选择题1.凝胶色谱分离法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是() A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在凝胶中D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度【解析】凝胶的种类较多,但每一种凝胶内部都有孔隙,其共同点是改变蛋白质分子通过凝胶时的路径。

【答案】 A2.(2013·咸阳高二检测)下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是()A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其空隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来【解析】凝胶内部微细的多孔网状结构,若空隙过大,所有蛋白质分子都能进入,不能起到分离的作用。

【答案】 C3.用凝胶色谱法分离蛋白质的实验中,相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为图中哪一个()【解析】题图所示,相对分子质量较大的蛋白质容易通过凝胶间隙,先被洗脱出来;相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部,后被洗脱出来。

【答案】 B4.血红蛋白的提取和分离一般分为四步,符合要求的是()A.粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B.粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C.样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D.纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理【解析】血红蛋白的提取和分离一般可分为四大步,包括样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,即样品处理;再经过透析法去除小分子的杂质,即样品的粗分离;然后通过凝胶色谱法将相对分子质量与血红蛋白不同的杂质蛋白除去,即样品的纯化;最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。

人教版高中生物选修1-5.3《血红蛋白的提取和分离》高频精练

人教版高中生物选修1-5.3《血红蛋白的提取和分离》高频精练

课题3 血红蛋白的提取和分离一、选择题1.用凝胶色谱法分离蛋白质时,分子量大的蛋白质()A.路程较长,移动速度较慢B.路程较长,移动速度较快C.路程较短,移动速度较慢D.路程较短,移动速度较快2.下列各项中,一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是()A.层析柱的柱高B.层析柱的直径C.缓冲溶液D.样品的分布3.的蛋白质能进入凝胶内部通道()A.相对分子质量大的B.吸附性高的C.相对分子质量小的D.溶解度低的4.SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是()A.增大蛋白质的相对分子质量B.改变蛋白质的形状C.掩盖不同种蛋白质间的电荷差别D.减少蛋白质的相对分子质量5.在装填色谱柱时,不得有气泡存在的原因是()A.气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果B.气泡阻碍蛋白质的运动C.气泡能与蛋白质发生化学反应D.气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密6.将释放出的血红蛋白以2000r/min的速度离心10min后,可以看到试管中的溶液分为4层,其中哪一层是血红蛋白水溶液()A.第一层无色透明B.第二层白色C.第三层红色透明D.第四层暗红色7.利用凝胶色谱法,什么样的蛋白质先洗脱出来()A.相对分子质量大的B.溶解度高的C.相对分子量小的D.所带电荷多的8.下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作,其中不正确的是()A.血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过颜色来判断什么时候应该收集洗脱液B.用生理盐水重复洗涤红细胞C.血红蛋白释放后应低速短时间离心D.不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的PH范围内,以维持其结构和功能9.下列有关提取和分离血红蛋白实验的叙述,错误的是()A.该实验的材料必须选用鸡血B.通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质,为此样品的粗提取C.凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D.电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小差异分离蛋白质10.凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是()A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在细胞中D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速率。

生物(人教版选修1)练习专题5课题3血红蛋白的提取和分离

生物(人教版选修1)练习专题5课题3血红蛋白的提取和分离

专题五课题三一、选择题1.利用凝胶色谱法什么样的蛋白质先洗脱出来()A.相对分子质量大的B.溶解度高的C.相对分子质量小的D.所带电荷多的解析:相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。

答案:A2.蛋白质提取和分离分为哪几步()A.样品处理、凝胶色谱操作、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳B.样品处理、凝胶色谱操作、纯化C.样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定D.样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定解析:A中凝胶色谱操作及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为实验操作过程中的技术。

答案:C3.在蛋白质的提取和分离中,关于对样品处理过程中,分析无误的是()A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C.洗涤过程选用0.1%的生理盐水D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质解析:洗涤红细胞的目的是去除血浆中除血红蛋白以外的杂蛋白;洗涤时离心速度过大,时间过长,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果;洗涤过程选用0.9%的生理盐水。

答案:D4.使用凝胶色谱法分离蛋白质实验中,相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程,可表示为图中()解析:本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解,相对分子质量较大的蛋白质留在颗粒外面,相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部;蛋白质相对分子质量大的通过凝胶间隙先被洗脱,蛋白质相对分子质量小的进入凝胶内部而后被洗脱。

答案:B5.下列各项中,一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质的分离度的是()A.层析柱的高度B.层析柱的直径C.缓冲溶液D.样品的分布解析:分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关。

样品的分布也影响分离度,缓冲溶液的pH影响蛋白质所带的电荷,因此也影响分离度。

只有层析柱的直径一般不会影响分离度。

新人教版选修1高中生物血红蛋白的提取和分离 同步练习

新人教版选修1高中生物血红蛋白的提取和分离 同步练习

血红蛋白的提取和分离同步练习1. 凝胶色谱法分离蛋白质的依据是()A. 对其他分子的亲和力B. 溶解度C. 所带电荷多少D. 相对分子质量的大小2. 凝胶色谱法中所用的凝胶化学本质大多是()A. 糖类化合物B. 脂质C. 蛋白质D. 核酸3. 选用红细胞作为分离蛋白质的实验材料,有何好处()A. 血红蛋白是有色蛋白B. 红细胞无细胞核C. 红细胞蛋白质含量高D. 红细胞DNA含量高4. 将搅拌好的混合液离心来分离血红蛋白溶液时,第二层是()A. 甲苯B. 血红蛋白水溶液C. 脂溶性物质的沉淀层D. 其他杂质的沉淀5. 血红蛋白因含有()而呈红色A. O2B. COC. CO2D.血红素6. 下列操作正确的是()A. 分离红细胞时采用低速长时间离心B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D. 透析时要用20mmol/l的磷酸缓冲液,透析12h7. 样品的加入和洗脱的叙述正确的是()A. 先加入1ml透析后的样品B. 加样前要使缓冲液缓慢下降全部流出C. 如果红色带均匀一致的移动,说明色谱柱制作成功D. 洗脱时可以用缓冲液也可以用清水8. 下列有关提取和分离血红蛋白的程度叙述错误的是()A. 样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液B. 通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质,此为样品的粗提取C. 可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去,即样品的纯化D. 可通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度9. 凝胶色谱法操作正确的是()A. 将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B. 将橡皮塞下部切出凹穴C. 插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D. 将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片10. 样品的加入和洗脱的操作不正确的是()A. 加样前,打开色谱柱下端的流出口,使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面B. 加样后,打开下端出口,使样品渗入凝胶床内C. 等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口D. 用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端,不要破坏凝胶面答案:1. D 2.A 3.A 4.D 5.D 6.D 7.C 8.B 9.A 10.D★课余作业1、你能描述血红蛋白分离的完整过程吗?2、与其他真核细胞相比较,红细胞有什么特点?这对你进行蛋白质的分离和提取有什么意义?★教学体会本课题重在让学生了解生物科学在蛋白质领域的进展,说明提取、分离高纯度的蛋白质的重要性和必要性,并学习一些蛋白质分离和提取的基本技术。

生物人教版高二选修1成长训练:专题5课题3_血红蛋白的提取和分离_word版含解析

生物人教版高二选修1成长训练:专题5课题3_血红蛋白的提取和分离_word版含解析

主动成长夯基达标1.凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是(A.糖类化合物B.C.蛋白质D.核酸解析:凝胶实际上是一些微小的多孔球体,这些微小的球体,大多是由多糖类化合物构成的。

答案:A2.分离血红蛋白溶液时,离心后试管中的溶液分四层,血红蛋白在第层(A.一B.C.三D.四解析:答案:C3.凝胶色谱法分离蛋白质的依据是(A. B. C. D.相对分子质量的大小解析:凝胶色谱法分离蛋白质的依据是相对分子质量的大小。

相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内答案:D4.血红蛋白由条肽链组成(A.2B.4C.3D.5解析:血红蛋白由四条肽链组成,即两条α肽链和两条β答案:B5.将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是()A. B.C. D.其他杂质的暗红色沉淀物解析:试管中的第一层是有机溶剂,第二层是脂类物质,第三层是血红蛋白溶液,第四层是红细胞破碎物答案:C6. 的蛋白质能进入凝胶内部通道(A相对分子质量大的 B.C.相对分子质量小的D.溶解度低的解析:当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道。

答案:C7.透析时取血红蛋白溶液装入透析袋内,放入缓冲溶液中(A.2 mLB.1.5 mLC.0.5 mLD.1mL解析:考查样品处理的操作。

透析时,取1 mL答案:D8.洗涤红细胞时,分离所用方法为(A.低速长时间离心B.C.高速长时间离心D.高速短时间离心解析:答案:B9.SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是(A. B.C. D.减少蛋白质的相对分子质量解析:SDS(十二烷基硫酸钠)—聚丙烯酰胺凝胶电泳法加入SDS的目的是使蛋白质完全变性,SDS所带负答案:C10.制作凝胶色谱柱时,橡皮塞顶部凹穴内插入的移液管的部位及长度是(A.移液管头部5 cmB.移液管尾部 5 cmC.移液管头部 3 cmD.移液管尾部 3 cm解析:凝胶色谱柱制作时,将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴,将0.5 mL的移液管头部切下5 cm长的答案:A11.对血红蛋白的研究结果表明,血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子(Fe2+)所组成的结合蛋白质。

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血红蛋白提取与分离原理
一、选择题(每小题 4 分,共20分)
1.利用凝胶色谱法先洗脱出来的蛋白质是
( ) 。

A •相对分子质量大的
B •溶解度高的
C.相对分子质量小的 D .所带电荷多的
解析相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道,路程较长,移动速度较慢;相对分子质量大的蛋白质,路程较短,移动速度较快,首先洗脱出来。

答案A
2.将经处理破裂后的红细胞混合液以 2 000 r/min 的速度离心10 min 后,离心管中
的溶液分为四层,从上到下的顺序依次是
( ) 。

A .血红蛋白、甲苯层、脂溶性物质层、沉淀层
B .甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂溶性物质层
C.脂溶性物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层
D .甲苯层、脂溶性物质层、血红蛋白、沉淀层
解析混合液经离心后,按密度大小排列,在离心管中从上到下的顺序依次是:第1层为无色透明的甲苯层;第2层为白色薄层固体,是脂溶性物质沉淀层;第3层为红色透明液体,这是血红蛋白的水溶液;第 4 层为暗红色沉淀物,主要是红细胞破碎物沉淀。

答案D
3.下列关于电泳的说法不正确的是
( ) 。

A .电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
B .带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动
C.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少
D .用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大

解析蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,SDS能与各种蛋白质形成蛋白质一SDS复合物,SDS所带负电荷的量大大超
过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。

答案C
4•已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质,其分子大小、电荷的性质和数量情况如下图所示。

下列叙述正确的是
()。

k相对分子质量
丙.
•丁•戊
0 电荷基
A •将样品装入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋内,则分子甲也保留在袋内
B •若五种物质为蛋白质,则用凝胶色谱柱分离时,甲的移动速度最快
C•将样品以2 000 r/min的速度离心10 min,若分子戊存在于沉淀中,则分子丙也
存在于沉淀中
D •若五种物质为蛋白质,用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,
则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近
解析透析的原理是相对分子质量小的物质能透过半透膜,相对分子质量大的物质不
能透过,乙保留在袋内,甲则不一定保留在袋内;凝胶色谱柱分离时,相对分子质
量小的物质路程长、移动慢;离心时相对分子质量大的物质先沉淀,戊沉淀,则
乙、丁、丙均已沉淀;用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质时,电泳迁移率主要
取决于分子大小。

答案C
5.下面说法不正确的是
()。

A .在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸、碱对溶液pH的影响,维持
pH基本不变
B .缓冲溶液通常由1〜2种缓冲剂溶解于水中配制而成
c•电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程
D •透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内
解析透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。

透析袋能使小分子自由进
出,而将大分子保留在袋内。

透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质。

答案D
二、非选择题(共30分)
6.(10分)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中02
或C02的运输。

请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。

凝胶色谱操作
(1)_______________________________ 将实验流程补充完整:A为 , B为。

凝胶色谱法是根据
_______________________ 达到蛋白质分离的有效方法。

(2)____________________________ 洗涤红细胞的目的是去除_________ 洗涤次数过少,无法除去__________________ ;离
心速度过高和时间过长会使_________ 同沉淀,达不到分离的效果。

洗涤干净的标志是__________ 。

释放血红蛋白的过程中起作用的是___________ 。

⑶在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的
是_____________________ 。

如果红色区带___________ 说明色谱柱制作成功。

解析凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法,在蛋白质分离与提取过程中包括样品的处理、粗分离、纯化和纯度鉴定四步,每一步均应用了不同的操作技术,需要注意。

答案(1)血红蛋白的释放样品的加入和洗脱相对分子质量的大小(2)杂
蛋白(血浆蛋白)血浆蛋白白细胞和淋巴细胞离心后的上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯(3)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内一致均匀一致地移动
7.(8分)蛋白质分子中,氨基酸的a氨基和a羧基虽然大部分结合成为肽键,但
是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团,如肽链末端的a氨基和a-
羧基、天冬氨酸和谷氨酸残基中的羟基、赖氨酸和组氨酸残基中的各种碱性基团,所以蛋白质是两性电解质。

在酸性溶液中,碱性基团的解离增大,使蛋白质带正电荷;在碱性溶液中,酸性基团的解离加强,使蛋白质带负电荷。

当溶液到达某一pH 时,蛋白质可因内部酸性和碱性基团的解离相等而呈等电状态,这时的溶液pH 叫做蛋白质的等电点。

不处于等电点状态的蛋白质分子的正、负电荷量是不相同的。

试回答下列问题。

(1)多数蛋白质的等电点近于5,一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点
________ (填“偏高”或“偏低” )。

(2)根据等电点的不同,你能用______ 方法将不同种类的蛋白质分子分开。

(3)简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。

解析本题深入到蛋白质内部,从蛋白质分子带电性质及数量的角度,引导学生理解电泳法分离蛋白质的原理。

含碱性基团较多的蛋白质溶液,在pH 近于 5 时解离程度较大,蛋白质带正电荷。

要使蛋白质内部酸性和碱性基团解离相等呈等电状态,必须提高溶液的pH,使酸性基团解离增加,故蛋白质的等电点提高。

根据等电点不同,可以利用电泳法将特定的蛋白质分离出来。

答案(1)偏高
(2)电泳
(3)调节电泳槽中缓冲液的pH,使某种蛋白质处于等电点状态,而其他蛋白质带有
电荷,在电场作用下,带有正、负电荷的蛋白质分别移向两极,而不带电荷的蛋白质留在原处。

8.(12 分)凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地用于工业生产。

据图回答下面的问题。

(1)a、b均为蛋白质分子,其中先从层析柱中洗脱出来的是__________ ,原因是
(2)自己制作凝胶色谱柱时,在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由
________ 代。

⑶装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是
(4)_____________________________________________ 洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体_____________________________________ (填“相同”或“不同”),洗脱时,对洗脱液的流速要求是________ 。

解析用凝胶色谱法分离各种大分子物质时,大分子物质先洗脱出来,然后是小分子物质。

大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布于颗粒之间,所以向下移动的速度较快。

小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶内,在向下移动的过程中,从一个凝胶颗粒内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质从而落后于大分子物质洗脱出来。

在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密,以减少凝胶颗粒之间的空隙。

在装填凝胶色谱柱时,不得有气泡存在,因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果;凝胶色谱操作过程中,不能发生洗脱液流干,露出凝胶颗粒的现象。

一旦发生上述两种情况,凝胶色谱柱需要重新装填。

答案(1)a a的相对分子质量大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快
(2)尼龙网和尼龙纱
⑶气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果
(4)相同保持稳定。

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