大蒜根尖染色体观察实验.

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大蒜根尖细胞多倍体观察与制片

大蒜根尖细胞多倍体观察与制片一．实验目的1.通过实验掌握人工诱导多倍体植物的方法和技术,观察多倍体的特点2.利用染色体分析的方法对多倍体细胞做出准确判断。

二.实验原理物种的基本特征之一:生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这些染色体组成染色体组，或称基因组。

三.实验步骤1.取材:取大蒜(洋葱，蚕豆，小麦等)发根至0.5-1cm然后转入盛有0.15%秋水仙素水溶液的培养皿中继续培养24小时，待观察到根部有膨大时取出固定，与在水中培养的材料做对照2.固定:在卡诺固定液中固定24小时，移至70%乙醇中保存或备用3.解离：植物的分生组织如根尖、茎尖等需要经过处理以便除去细胞之间的果胶层并使细胞壁软化，经解离的组织才能使压片步骤顺利进行。

解离常用酸解法和酶解法。

①酸解法:固定后的材料用清水洗漆后用1MHCl在60°C水浴中恒温处理5-10min.在酸解过程中一定要掌握好温度和时间，若解离不够，则压片不是分散。

若解离太过，在下一步处理材料的由于材料过软而易丢失。

然后水洗3次。

②酶解法：用10-20g/L的果胶酶，或与10-50g/L的纤维素酶混合使用4.染色：切取根尖分生组织区，用改良苯酚品红染色15min5.压片:将染色后的材料盖上盖玻片,在盖玻片上盖上两层吸水纸，用一个双面刀片,插到盖片与载片之间的一角，用左手食指压紧盖片,防止滑动，用右手持解剖针，用针柄轻敲盖片，使材料均匀分散开。

然后将刀片轻轻撤出，再用针柄重敲盖片，使细胞分散压平。

一张制片好的细胞染色体制片至少符合如下条件:①在一张制片中应有较多的中期分裂相。

②染色体分散而不重叠。

③染色体不断裂、扭曲、有溢痕，随体清晰④染色体着色较深而细胞质不着色或着色很浅，背景清晰无过多杂质。

选择中期分裂相好的细胞观察,通过观察和计数中期染色体数目,确定细胞类型。

五.实验结果六．结果分析所制的片子好多细胞未破裂，有的染色体溢出，应该是压片不好所致，这样就导致所观察的染色体条数不对。

《观察植物细胞有丝分裂》实验报告

《观察植物细胞有丝分裂》实验报告组员：肖石连、周小燕、汪小康、邹苗执笔人：汪小康一、实验原理1.观察部位：植物体的根尖、茎尖等分生区的细胞。

2.分裂过程：高等植物细胞有丝分裂分为间期和分裂期的前期、中期、后期和末期，不同时期细胞染色体的行为变化有各自的特点.。

3.观察过程：先用低倍镜找到根尖生长点的细胞（正方形、排列紧密、有的正在分裂），再用高倍镜辨别各时期的染色体(染色质)变化，并判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。

4.染色过程：细胞核内的染色体容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。

二、实验器材大蒜、显微镜、载玻片、盖玻片、培养皿、刀片、镊子、烧杯等15%的盐酸、95%的酒精、龙胆紫溶液等三、实验步骤1.前期培养：取大蒜若干放在装满清水的100ML烧杯上，让它的底部接触瓶内水面，把烧杯放在温暖地方培养。

2．解离：实验前一天，取大蒜根尖，使用卡诺氏固定液（乙醇：冰醋酸=3:1）进行24H固定，之后用蒸馏水冲洗，放入70%酒精中，在4℃冰箱中保存。

待到实验时即可进行解离处理。

取经过和未经过固定液处理的根尖各1-3个，剪根尖2CM，放入盛有15%盐酸和95%酒精1:1混合液的培养皿中并盖好（以防盐酸挥发），解离3~5min,此时根尖变得酥软透明。

3.漂洗：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到盛有清水的培养皿中漂洗2~3min，可用镊子或玻棒轻轻搅动。

4．染色：用镊子夹住伸长区一端，从培养皿中取出根尖，放到干净的载玻片中央，用刀片切去根尖大概0.5mm，紧贴刚刚切的位置切下针尖大小的根尖，此处即为根尖分生区。

利用准备好的染液进行染色，时间为3~5min。

5.压片：将被染上色的根尖盖上盖玻片（防止气泡产生），然后在盖玻片上放一层吸水纸，水平放在实验台上，用拇指稍用力对其按压，使根尖细胞呈云雾状散开，此时再把盖玻片周围染液吸拭干净即可。

6.观察：先用低倍镜观察，找到分生区细胞（体积小、排列紧密、整齐、近似正方形，有的细胞正在分裂）。

大蒜核型分析

实验二植物染色体组型分析一、实验目的1. 学习并掌握根尖处理、染色、压片及制片观察的方法。

2. 观察有丝分裂各时期染色体的形态变化，了解有丝分裂全过程。

3.观察分析植物细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的方法。

二、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。

每一细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。

染色体组型分析就是研究一个物种细胞核内染色体的数目及各种染色体的形态特征，如对染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等观测，从而描述和阐明该生物的染色体组成，为细胞遗传学、分类学和进化遗传学等研究提供实验依据。

染色体组型分析大都采用植物根尖等分生组织的有丝分裂中期细胞，染色体制片要求分裂相为染色体分散，互不重叠，能清楚显示着丝点位置。

然后通过显微摄影，测量放大照片上的每个染色体的长度和其它形态特征，依次配对排列，编号，并对各对染色体的形态特征作出描述。

三、实验材料1.材料：大蒜2.用具：载玻片，盖玻片，50ml烧杯，温度计，恒温水浴锅，试剂瓶，镊子，解剖针，吸水纸，剪刀，绘图，纸胶水等。

3.药品：Carnoy固定液，无水酒精，70％酒精，1mol/L HCL解离液，苯酚品红染液四、方法与步骤（一）植物有丝分裂1、材料处理1）、大蒜发根将大蒜鳞茎置于盛有清水的小烧杯口上发根，待根长到1.5-2.0 cm左右时备用（在此过程注意换水）。

2）、根尖预处理在分裂高峰期前（大蒜根尖分裂高峰期为早上八点以及下午两点左右），剪下根尖，置于盛有少量蒸馏水的烧杯并放入冰箱(0—4 ℃)中预处理24h。

预处理的作用，主要是阻碍纺锤丝的形成，使染色体缩短，改变细胞质的粘度，在压片时，有利于染色体的分散。

2、材料固定经过预处理的根尖，再放到Carnoy液中固定24h以内。

大蒜根尖诱导多倍体观察实验报告

大蒜根尖染色体观察实验报告高熹168615140001实验目的：1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。

2、掌握大蒜根尖制片的方法。

3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。

4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。

实验背景：在自然条件下，机械损伤，射线辐射，温度骤变，及其它一些化学因素刺激，都可以使植物材料的染色体加倍，形成多倍体种群。

近几十年来，随着人们对多倍体诱导机制研究的深入，由人工模拟自然条件来诱导多倍体植物获得了长足进展，形成了不少由价值的人工多倍体种群。

实验原理：用秋水仙素溶液处理植物的种子或幼苗，是常用的人工诱导多倍体的有效方法。

秋水仙素是从百合科秋水仙属的一个种，秋水仙的种子及器官中提取出来的一种生物碱，其分子式为C22H25NO6，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。

当药剂的作用消除后，由于多倍体细胞继续分裂，便得到多倍体组织，以后则产生新的多倍体植株。

实验器材：刀片，镊子，双目显微镜，载玻片，盖玻片，烧杯，滤纸。

实验材料：经秋水仙素处理过的大蒜根。

（秋水仙素溶液配制取秋水仙素1g（先用少量95%乙醇助溶），溶于250～500ml蒸馏水中，配成浓度为0.2～0.4%的溶液，冰箱中保存。

将大蒜架在盛水的烧杯中进行水培。

待根尖长到1cm时，将大蒜盛在0.4%秋水仙素溶液的瓶盖或小烧杯上，避光处理24小时，然后再水培24小时加倍后根尖很肥大。

）实验试剂：1mol/L的HCl溶液，改良苯酚品红溶液。

实验步骤：1、取2-4根大蒜根放入烧杯中，加入1mol/L的HCl浸没，60℃水域水解5min。

2、弃掉HCl，自来水冲洗大蒜根三次，冲洗干净表面的HCl。

3、在载玻片上切下2-3mm的根尖，用纸吸去多余的水分，在载玻片上用刀片切碎根尖，滴加1滴改良苯酚品红溶液，染色15min。

多倍体鉴定实验报告

一、实验目的1. 掌握化学诱导植物多倍体的原理和方法。

2. 学习利用秋水仙素诱导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。

3. 学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点及诱导染色体加倍后的细胞学表现。

4. 利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。

二、实验原理生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。

多倍体是指细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。

在植物育种上，利用多倍体可以改良作物的经济性状，同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。

秋水仙素是一种常用的化学诱导剂，可以抑制细胞有丝分裂过程中纺锤体的形成，使子染色体不能移向两极，从而诱导植物产生多倍体。

在适宜浓度的秋水仙素作用下，细胞经一定时期后仍可恢复正常，继续分裂，只是染色体数目加倍成为多倍性细胞。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：大蒜根尖分生组织区2. 试剂：0.2%秋水仙素溶液、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、盐酸酒精溶液3. 仪器：显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、滴管、酒精灯、烧杯、剪刀、镊子、培养皿四、实验步骤1. 将大蒜根尖分生组织区剪取约0.5cm，放入装有0.2%秋水仙素溶液的培养皿中，处理48小时。

2. 将处理后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有卡诺氏液的培养皿中固定30分钟。

3. 将固定后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有盐酸酒精溶液的培养皿中解离10分钟。

4. 将解离后的根尖用蒸馏水清洗3次，放入装有改良苯酚品红染液的培养皿中染色10分钟。

5. 将染色后的根尖用蒸馏水清洗3次，制成临时装片。

6. 在显微镜下观察染色体的形态和数目，记录观察结果。

7. 将观察结果进行统计分析，判断多倍体诱导率。

五、实验结果与分析1. 实验结果在显微镜下观察，部分大蒜根尖细胞染色体数目加倍，形成多倍体细胞。

染色体数目加倍现象主要出现在有丝分裂中期。

2. 分析通过实验，我们成功利用秋水仙素诱导了大蒜根尖分生组织区的多倍体。

植物多倍体的诱发和鉴定

植物多倍体的诱发和鉴定一、实验目的通过实验，进一步了解人工诱导多倍体的原理，并初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法及细胞学鉴定。

二、实验原理染色体是遗传物质的主要载体。

每一个物种都具有特定的形态特征。

各个物种细胞内染色体的数目都是相对恒定的，这是一个重要的生物学特征。

染色体数目和结构的改变，将会导致生物性状的改变。

遗传学中把二倍体生物配子中所具有的染色体成为一个染色体组，通常用n来表示。

而一个染色体组中包含的染色体数目成为染色体基数，用x表示。

同一个染色体组的各个染色体的形态、结构和连锁基因群都彼此不同，但它们构成一个完整而协调的体系。

细胞中染色体数目的变异类型有两类：整倍体变异和非整倍体变异。

整倍体变异指体细胞中染色体数目按染色体组的基数（x）成倍数增加或减少的现象。

具有两套染色体组的生物体成为二倍体，体细胞中含有三个或三个以上染色体组的整倍体为多倍体。

多倍体按其来源可以分为：同源多倍体和异源多倍体，同源多倍体是指具有三个或三个以上相同染色体组的细胞或个体：异源多倍体是体细胞中含有两个以上不同类型染色体组的多倍体。

自然界中的多倍体主要存在于植物中，动物中的多倍体很少。

多倍体可以在自然条件卞产生，也可以人工诱导形成。

人工诱导多倍体通常采用物理方法和化学方法。

物理方法有高温、低温、超声波、嫁接和切断等，化学方法是使用秋水仙素、异生长素、蔡骈乙烷来诱导多倍体。

在诱导多倍体的方法中，以应用化学药剂更为有效，其中以秋水仙素效果最好，使用广泛。

秋水仙素阻碍有丝分裂中细胞纺锤体的形成，这样细胞不能分离，产生染色体加倍的核。

本实验用适当浓度的秋水仙素处理洋葱或大蒜根尖，待根尖膨人后制片观察，可诱发多倍体。

三、实验材料大蒜根尖四、实验方法与步骤（一）根尖多倍体的诱发将人蒜去掉老根，置于盛水的培养皿上，25°C条件卞培养发根，待不定根长出1cm时取出洗净，把水晾干后移到0.1%秋水仙素溶液中，根尖朝下，使根部浸没在药液中，于10°C 培养箱中低温培养，直到根尖膨大为止。

大蒜根尖染色体观察实验

大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。

2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。

3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。

4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。

5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。

二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。

3、实验原理(1)洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。

(2)多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。

各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。

解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。

漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。

(3)有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S期（合成期）、G2期（合成后期）和M期（分裂期），其中G1期、S期和G2期合称间期，细胞完成DNA的复制以及有丝分裂的准备，而M期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。

如表一。

表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1)将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温培养箱中2~3天，催化大蒜生根。

植物多倍体的诱导及细胞学鉴定

植物多倍体的诱导及细胞学鉴定实验时间：4月6日摘要一个物种细胞中染色体形态结构和数目的恒定性是这个种的重要特征。

我们把二倍体个体中能维持配子或配体正常功能的、最低数目的一套染色体称为染色体组或基因组。

当生物体内细胞染色体组数达到3组或3组以上者，称为多倍体。

多倍体在植物进化中有很重要的意义。

本实验利用大蒜作为试验材料，利用秋水仙素诱导，使生长出多倍体根尖。

然后通过制作大蒜根尖压片，观察染色体的数目，以鉴定大蒜根尖细胞是否为多陪细胞。

（本实验报告主要从多倍体的鉴定方面展开，而多倍体培育方面，将在下次报告中给出。

）1.引言生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。

遗传学中，将二倍体生物一个配子的染色体总和称为染色体组，也叫基因组，用n表示。

以下是几种常见模式生物的染色体组数目：玉米，2n=20；拟南芥，2n=10；果蝇，2n=8；小鼠，2n=40；水稻，2n=24。

又如，小麦染色体组可表示为2n=6x=42。

其中x表示每一个染色体组的染色体数，称为染色体基数，它是物种演化过程中的染色体倍数性的关系。

多倍体是指细胞中具有3个或3个以上染色体组的细胞或个体,而多倍体可以分为:同源多倍体(具有3个以上相同染色体组的细胞或个体，且染色体组来源于同一物种（AAA，AAAA）)、异源多倍体(具有3个以上染色体组且染色体组来源于不同物种，通常由不相同的种杂交的杂种再经过染色体加倍而来（AABB，AABBDD）)。

在自然界中许多植物都是多倍体，大约有30％～35％的被子植物，其中70％的禾本科植物属于多倍体，它们在植物进化中起了重要的作用，也是植物发生变异的重要途径之一。

多倍体植物，一般被认为是适应恶劣自然环境的结果，如我国西南部地区，温度变化激烈，紫外线辐射强，许多植物产生了多倍体类型。

在自然界中，大多是因为温度骤变，导致细胞分裂时染色体不分离，从而形成了多倍体。

植物多倍体有许多特性，其中一些特性也为农业经济发展提供了帮助。

观察根尖分生组织细胞有丝分裂

D.在光学显微镜下观察植物细胞质壁分离和质壁分离复原
5.对洋葱根尖分生区细胞的正确描述是
A. 既小且方 B. 形态不规则
Ａ
C. 细胞已经开始分化
D. 无间期细胞
6、在“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验中，以下操作
B
和结论正确的是
• A.剪取5cm根尖，用酒精和吡罗红混合液解离染色
• B.右图是高倍显微镜下调解细准焦螺旋看到的视野
的分布。（2）人的口腔上皮细胞可用于观察线粒体及
DNA和RNA在细胞内的分布情况，而观察细胞减数分裂时则选用动物的精巢细胞作为实验材料。
（3）观察叶绿体时常选用藓类的叶，因为藓类植物的叶片薄而小，常是一层细胞，叶绿体清楚，易
于观察和操作。
8、染色剂的使用
试剂甲基绿吡罗红或派洛宁染液
被染成分 DNA
RNA
健那绿
线粒体
龙胆紫醋酸洋红
染色体
呈现颜色绿色
红色
蓝绿色紫色红色
9、小鼠常被用作研究人类遗传病的模式动物。请填充观察小鼠细胞减分裂的实验步骤：供选材料及试剂：小鼠的肾脏、睾丸、肝脏，苏丹Ⅲ染液、醋酸洋红染液、詹纳斯绿B（健那绿）染液，解离固定液。取材：用（__小__鼠__）__睾__丸__作实验材料制片：①取少量组织低渗处理后，放在_解__离__固__定__液___溶液中，一定时间后轻轻漂洗。 ②将漂洗后的组织放在载玻片上，滴加适量__醋__酸__洋__红__染__液。 ③一定时间后加盖玻片，___压__片_______。
2、碱性染料（龙胆紫溶液或醋酸洋红液）能将染色体（或染色质）染成深色。
3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散，用盐酸处理植物的根尖，可以使根尖细胞彼此容易分离。

大蒜根尖染色体观察实验.

大蒜根尖染色体实验报告一、实验目的与实验要求1、掌握洋葱培养的方法，掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。

2、掌握洋葱根尖制片的方法，复习染色、压片的基本操作。

3、通过对于有丝分裂相的观察，统计洋葱染色体数目，加深对于细胞有丝分裂过程的理解。

4、对比进行多倍体诱导前后的洋葱根尖，理解四倍体与二倍体的区别，认识微核和植物细胞分裂期的各形态特征。

5、体验开放式实验教学，培养生物实验意识，提高学习的主动性、获取实验知识的能力和撰写实验报告水平。

二、实验方案1、实验仪器显微镜、载玻片、盖玻片、试管、烧杯、小塑料管、滤纸、刀片、解剖针、滤纸等 2、实验药品新鲜、健康的洋葱鳞茎一个；0.02%秋水仙素、1mol/L HCl、醋酸洋红染液、卡诺氏固定液，碱性品红、乙酸，乙醇等。

3、实验原理 (1 洋葱的根尖洋葱根尖的整体结构如右图，其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。

(2 多倍体的诱导多倍体的诱导使用秋水仙素，秋水仙素可以阻止微管蛋白的聚合，从而使有丝分裂中期纺锤体不能正常形成，但是姐妹染色单体照常想成，只是没有被拉向两级，于是染色体数目加倍。

各步骤的作用：固定液可以迅速杀死细胞，保持细胞形态在有丝分裂相。

解离可以破坏细胞的胞间层（果胶），使细胞之间的联系变松散，有利于压片和染色。

漂洗可以洗去过量的盐酸，防止解离过度破坏细胞结构或影响染色效果（盐酸是酸性，而醋酸洋红是碱性染料）。

(3 有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S 期（合成期）、G2期（合成后期）和M 期（分裂期），其中G1期、S 期和G2期合称间期，细胞完成DNA 的复制以及有丝分裂的准备，而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。

如表一。

表一植物有丝分裂各时期特点4、实验步骤(1 将大蒜剥皮后放进垫了滤纸的培养基中，加入清水，放进25℃恒温培养箱中2~3天，催化大蒜生根。

生物大蒜根尖实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程。

2. 理解细胞周期中各阶段的特点。

3. 掌握制作临时装片和显微镜观察的基本技能。

二、实验原理细胞有丝分裂是生物体细胞增殖的重要方式，分为间期、前期、中期、后期和末期五个阶段。

本实验通过观察大蒜根尖细胞的有丝分裂，了解细胞周期的变化和各个阶段的特点。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜大蒜头、盐酸、酒精、碘液、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、显微镜、酒精灯、滴管等。

2. 仪器：光学显微镜、显微镜载物台、显微镜镜筒、显微镜目镜、显微镜物镜等。

四、实验步骤1. 准备根尖：取新鲜大蒜头，用解剖针切下根尖约2-3毫米，放入盛有盐酸的试管中，在室温下浸泡10-15分钟。

2. 漂洗：将浸泡后的根尖用蒸馏水冲洗干净，去除盐酸。

3. 解离：将冲洗干净的根尖放入盛有盐酸和酒精混合液（1：1）的试管中，在室温下解离10-15分钟。

4. 漂洗：将解离后的根尖用蒸馏水冲洗干净。

5. 压片：将冲洗干净的根尖放在载玻片上，用解剖针轻轻压扁，盖上盖玻片。

6. 染色：在盖玻片边缘滴加碘液，用吸水纸吸取多余的碘液。

7. 观察：将载玻片置于显微镜下，观察大蒜根尖细胞有丝分裂的不同阶段。

五、实验结果与分析1. 间期：细胞核内染色质细长，呈丝状，细胞质均匀，无明显变化。

2. 前期：细胞核内染色质逐渐凝缩成染色体，染色体呈细长条状，细胞质无明显变化。

3. 中期：染色体排列在细胞中央，呈放射状，细胞质无明显变化。

4. 后期：染色体逐渐缩短变粗，向细胞两端移动，细胞质开始分裂。

5. 末期：染色体到达细胞两端，细胞质分裂成两个子细胞。

六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的不同阶段，我们可以了解到细胞周期中各阶段的特点。

本实验成功观察到了大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段，为后续生物学研究提供了基础。

七、实验讨论1. 实验过程中，根尖浸泡在盐酸中，有助于软化细胞壁，便于观察。

2. 解离过程中，盐酸和酒精混合液的作用是使细胞分离，便于观察。

大蒜实验报告观察根尖

一、实验目的1. 学习和掌握制作临时装片的技能。

2. 观察大蒜根尖细胞有丝分裂的过程，了解细胞分裂的各个阶段。

3. 熟悉显微镜的使用方法。

二、实验原理细胞有丝分裂是细胞生命周期中的一个重要过程，通过观察细胞有丝分裂，可以了解细胞分裂的各个阶段及其特点。

大蒜根尖细胞具有分裂能力，可以用来观察细胞有丝分裂过程。

三、实验材料1. 大蒜根尖2. 显微镜3. 龙胆紫溶液4. 盐酸酒精混合液5. 生理盐水6. 刮刀7. 玻片8. 载玻片9. 吸水纸四、实验步骤1. 准备根尖：将大蒜根尖用刮刀刮取2-3mm，放入盛有生理盐水的玻璃皿中。

2. 解离：将根尖放入盛有盐酸酒精混合液的玻璃皿中，室温下解离3-5分钟。

3. 漂洗：将解离后的根尖用生理盐水漂洗2-3次。

4. 染色：将漂洗后的根尖放入盛有龙胆紫溶液的玻璃皿中，染色3-5分钟。

5. 制片：将染色后的根尖用吸水纸吸去多余的水分，将根尖放在载玻片上，用刮刀轻轻刮取根尖细胞，制成临时装片。

6. 观察：将临时装片放在显微镜下，先用低倍镜观察，找到合适的细胞，再换用高倍镜观察细胞有丝分裂的各个阶段。

五、实验结果与分析1. 解离：盐酸酒精混合液可以杀死细胞，并使细胞散开，便于观察。

2. 漂洗：漂洗可以去除细胞中的杂质，提高观察效果。

3. 染色：龙胆紫溶液属于碱性染料，可以将染色体着色，便于观察。

4. 制片：临时装片的制作要均匀、薄，避免影响观察。

5. 观察：通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂的各个阶段，可以了解到细胞分裂的过程，包括前期、中期、后期和末期。

（1）前期：细胞核开始缩小，染色体逐渐凝聚，成为染色体。

（2）中期：染色体排列在细胞中央，形成赤道板。

（3）后期：染色体分离，向细胞两极移动。

（4）末期：染色体到达细胞两极，细胞开始分裂。

六、实验结论通过观察大蒜根尖细胞有丝分裂，我们了解了细胞分裂的各个阶段及其特点。

实验结果表明，盐酸酒精混合液、漂洗、染色和制片等步骤对观察效果有重要影响。

11.30遗传—大蒜根尖诱导微核实验

姓名系年级学号科目遗传学实验题目大蒜根尖诱导微核实验组别周三诱变物质的微核检测技术摘要微核体检测是一种对环境中诱变物质进行评估的快速而简便的方法，被广泛应用于很多行业。

此次实验，利用自主选定的化学制剂培养大蒜根尖，后通过观察根尖中的微核体来检测此试剂的诱变能力，了解了微核检测的方法和意义，掌握了一项评价环境中常见物质诱变情况的技术。

1.引言微核是细胞在间期时，染色体发生断裂，在进入下一次分裂时，染色体片段不能随有丝分裂进入子细胞，而在细胞浆中形成直径小于主核的、与主核分开的微小核，主要由外界损害因素（生物、物理、化学因素）对细胞的作用形成的。

19世纪末，Howell与Jolly分别在猫和大鼠外周血中发现一种小体，命名为Howell-Jolly小体，并且发现这种小体也存在于恶性贫血患者外周血中。

这一小体便是今日被称之为微核的小体。

1959年，Evans等将蚕豆根端细胞暴露在电离辐射下，观察到辐射诱导微核形成效应，并据此间接推断微核来源于辐射诱导的染色体异常。

这篇文献便是以微核发生率反映染色体异常来评价遗传毒性的第一篇报道。

作者认为约60%染色体断片与微核形成直接相关。

1970，年Boiler和Sehmid以中国金黄地鼠为材料，观察了抗肿瘤药三亚胺给予后，骨髓与外周血细胞学的变化，并且提出用本来无核的外周血嗜多染红细胞中的微核发生率来作为微核试验的基本指标，并正式命名为微核实验。

70年代初，Matter和Schmid首先用啮齿类动物骨髓细胞微核率来测定疑似有诱变活力的化合物，建立了微核测定法。

此后至70年代中期，Sehmid以及Heddle研究小组的工作，全面奠定了微核实验的理论及应用基础。

近年来，由于大量新的化合物的合成，原子能的应用，各种各样工业废物的排出，日常生活中人类接触到的有潜在遗传毒性的物质越来越多，微核实验的重要性也就随之突显出来。

微核实验技术简单易行且灵敏，目前国内外不少部门已把微核测试用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、食品添加剂的安全评价，以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面2.实验材料及方法2.1实验材料2.1.1试验材料大蒜。

观察根尖有丝分裂

实验原理
1、观察部位：植物有丝分裂旺盛的部位，如根尖分生区的细胞。
2、染色原理：细胞核内的染色体（或染色质）容易被碱性染料（龙胆紫或醋酸洋红等）着色。
3、观察过程：先用低倍镜找到根尖分生区的细胞，再用高倍镜辨别各时期的染色体（染色质）变化，有丝分裂各个时期染色体行为变化不同，从而判断该细胞处于有丝分裂的哪个时期。
பைடு நூலகம்
材料用具 ? 洋葱（或蒜、葱）的根尖。 ? 质量浓度为0.01 g/mL 的龙胆紫溶液
? 质量分数为15%盐酸和体积分数为95%的酒精 ? 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，镊子，滴管等。实验步骤：1、植物根尖装片的制作
2、显微镜观察植物根尖装片
根尖结构
? 成熟区没有细胞分裂。
? 伸长区有少量细胞分裂。
后高倍镜下观察处于细胞周期各期的细胞
（主要根据染色体形态，行为来判断）
末期中期
后期前期
解离液：目的：时间：程度：
漂洗液：目的：时间：
染液：目的：时间：
三：漂洗。用镊子将解离后的根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗10分钟
思考：（1）目的？（2）若没有漂洗，对观察结果有何影响？
四：染色。染液：龙胆紫。用量：一滴染色时间：3～5min
思考：染色时间过长或过短对实验结果会有何影响？
五：制片。 1、先放根尖，再滴清水，然后用镊子尖
弄碎根尖，盖上盖玻片 2、先将玻片上多余的水吸干，然后在盖
? 分生区有大量细胞分裂。
实验步骤：
? 洋葱根尖培养
换水目的？
实验前3~4d，待根长到 5cm
一：取材。切取根尖2～3mm （乳白色）
二：解离。取根尖放入解离液中解离3-5min

植物细胞染色体标本的制作与观察

普通生物学实验课须知1.新生进实验室之前要认真阅读实验室基本知识。

2.每次进入实验室的时间为以课表为准，提前10分钟进入实验室。

3.应严格按照实验平台上预约时间进入实验室进行实验，不来者，视为旷课。

如因特殊情况请假，需在实验开始前至少三天向指导教师说明，在选课平台系统中取消原预约时间，重新预约，一次不做实验或一次不交报告，即按不及格论处。

4.预习实验内容和有关知识，写好预习报告（手写）,前四部分内容（一、实验目的，二、实验原理，三、实验器材与试剂，四、实验步骤与操作方法），无预习报告者扣10分。

5. 实验过程中应认真操作，仔细观察实验现象，做好原始记录(三个实验需要用相机或手机拍照，DNA指纹图谱实验需用U盘拷贝实验结果，请自备拍照工具和U盘)。

6. 预习、课堂操作、课堂纪律、善后处理、实验报告是评分的依据。

7. 实验完毕，要将自己使用的仪器刷洗干净，药品按序恢复原位，台面擦净，把自己做实验的一套东西找齐，经指导老师检查合格并签字后方可离开。

8. 值日生要认真清扫地面、水槽、台面，检查水、电、门窗是否关好。

9. 实验讲义：实验预约系统中可以下载，也可到生命科学与技术学院网站下载。

10. 实验报告模板见附件，需注明姓名、学号、组号、做实验具体时间。

植物细胞染色体标本的制作与观察上课地点：化学楼120 上课时间：选课时任课教师：陈丽杰办公地点：生化楼215 电话：课程要求：预习实验内容，掌握实验目的及原理、仪器和试剂、实验步骤；手写完成预习报告（实验名称、实验目的、实验原理、实验器材与试剂、实验方法与步骤），课堂检查预习报告情况。

实验注意事项：1、实验台上物品按实验室管理老师要求摆放整齐；2、实验废物按实验室管理老师要求收集；3、实验结束后，经老师检查后方可离开。

实验纪律：1、按时上课2、穿实验服（白大衣）3、不许吃东西，课堂严禁大声喧哗4、手机静音实验成绩：预习报告： 20分实验操作： 40分报告内容：结果和讨论 40分植物细胞染色体标本的制作与观察1. 实验背景与原理染色体的研究在生物进化、发育、遗传和变异中都有十分重要的作用。

利用大蒜根尖制作植物细胞有丝分裂装片

利用大蒜根尖制作植物细胞有丝分裂装片付小艳，四川省德阳中学校(618000)中学生物教学，1999年第2期在教学实践中作者曾选用过许多材料(洋葱、水稻、葱、大蒜等)做“植物细胞有丝分裂”实验，通过大量实验证明大蒜是作为该实验研究的好材料。

利用自己动手制作的“大蒜根尖纵切片”永久切片，让学生观察植物细胞有丝分裂效果很好。

实验具体操作如下：1.材料大蒜根尖。

2.用具显微镜、解剖盘、草纸、载玻片、盖玻片、刀片或切片机。

3.药品离析液、醋酸洋红或醋酸地衣红、铁苏木精甲液(媒染剂)、酒精、桑弗利斯固定液。

4.方法步骤(1)幼根培养。

选取新鲜饱满的蒜瓣，剥去膜质鳞被，用细竹签将蒜瓣穿成串，放在盛有水的解剖盘内，使蒜瓣的基部与吸透水的草纸接触，并用1层～2层吸水纸盖上，置于温暖处(24℃～25℃)或培养箱中，保持一定的水分，3天～5天后在蒜瓣基部则可长出洁白的幼根。

(2)掌握取材时间。

待根生长到1cm～1.5cm时，切取3个～5个根尖，放入浓盐酸与95%的酒精等量混合液中，离析5min～6min后，用蒸馏水清洗数次，置于干净的载玻片上，用刀片切去根冠和伸长区，留下分生组织，将其纵切成数片，用1滴～2滴醋酸洋红(或醋酸地衣红)染色5min，盖上盖玻片，用拇指腹部对准盖玻片下的材料轻压，使其分散成粉状，置于显微镜下观察。

经过反复实验，认为在室温24℃时，中午11时～13时取材较好，尤其在11时与12时之间分裂期细胞最多。

(3)材料的处理与固定。

在根尖细胞分裂旺盛期将培养的大蒜根尖全部切下，投入蒸馏水内稍加摇动使其下沉并放入0℃～5℃的冰箱内低温处理30min后，用桑弗利斯固定液固定4h～6h，经流水冲洗6h～12h，以清除材料中的固定液。

(4)脱水与透明。

将材料经30%、50%、70%、85%、95%的各级酒精逐级脱水30min至1h(视材料在固定液中时间长短而定)，转入100%的1号、100%的2号酒精各脱水15min，再经过纯酒精与二甲苯等量混合液和纯二甲苯1号、2号各30min处理直至透明为止。

大蒜根尖诱导微核实验

一、实验目的1．了解细胞微核形成的机理及其形态特点。

2．学习植物根尖细胞的微核检测技术。

二、实验原理微核是间期细胞的细胞质中一个或多个圆形或杏仁状结构，是有丝分裂后期丧失着丝粒的落后的染色体片段形成。

微核是染色体畸变的一种表现方式。

许多能引起染色体断裂的理化因素，如辐射、化学诱变剂等，均可作用于分裂细胞而产生微核。

目前研究表明，微核发生率同作用因子的剂量呈正相关，微核发生率来反映诱变物质对生物的遗传危害程度。

微核微核试验是一种建立在细胞水平上分析DNA损伤的技术。

该技术以其经济、简便、快速、敏感、特异、准确等特点，成为检测致突变剂和环境污染物等经典的短期试验方法。

目前许多国家和国际组织将其规定为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理性安全性评价的必做试验并用于染色体遗传疾病和癌症前期诊断等各个方面。

本试验采用大蒜作为试验材料，具有许多优点：①用鳞茎进行无性增殖，避免了有性生殖过程中的遗传性变异，具有遗传背景稳定的优势；②分布广、材料易得，不受地区和季节的限制；③培养方便，操作简单，蒜瓣去皮后将基部浸入净水中即可萌生新根，无需其他条件，且蒜瓣体积较小，萌生新根的数目较多；④价格低廉，对诱变剂敏感，是一种理想的试验材料。

本次实验中采用叠氮化钠和水处理的大蒜作为对照组，以四种常用的洗护用品作为实验组。

目前在大学生群体，尤其是女生群体中，各种洗护化妆品已经成为必备品，那么经常使用的这些洗护化妆物质是否会对人体造成危害呢？本次实验目的即在于鉴定洗护化妆品的毒理安全性。

三、实验用品实验器具：显微镜、解剖针、盖玻片、载玻片、培养皿实验试剂：改良苯酚品红染液、1M盐酸、叠氮化钠、水、花露水、海昌护理液、黄瓜水、卸甲水实验材料：大蒜根尖四、实验步骤1、将大蒜去皮，在培养板上每个孔中放入2~3瓣，25℃培养24h。

2、在培养板的六个孔中分别加入叠氮化钠、水、六神驱蚊花露水、海昌、黄瓜水、卸甲水，没过大蒜根部为宜，25℃继续培养24h。

洋葱根尖染色体观察

大蒜根尖多倍体诱导与染色体观察实验目的：1、了解利用秋水仙素诱导植物多倍体的方法。

2、掌握大蒜根尖制片的方法。

3、通过对玻片的观察，统计染色体数目。

4、对比不同的大蒜根尖染色体数目，理解二倍体和四倍体的区别。

实验原理：1. 有丝分裂完整的有丝分裂相包括G1期（合成前期）、S 期（合成期）、G2期（合成后期）和M 期（分裂期），其中G1期、S 期和G2期合称间期，细胞完成DNA 勺复制以及有丝分裂的准备，而M 期又可以分为前期、中期、后期和末期，为了形态观察的方便，本实验采用后一种分法。

观察有丝分裂，重点在于观察染色体的形态。

在细胞分裂前期，细胞核解体，染色质凝聚显现出染色体的形态；在前中期，染色体散乱地分布于细胞的中部；在中期，纺锤体形成，染色体受到微管的牵引，着丝粒成行排列于赤道板上；在后期，染色体受到动粒微管的牵引，向细胞两级运动；在末期，染色体重新解螺旋，细胞核重新形成。

细胞染色体过程示意图见图1.2. 大蒜的根尖大蒜根尖的整体结构如图2,其中只有分生区的初生分生组织由于细胞始终polarspndB兴时 gl 雷 Eilws图1:细胞有丝分裂过程示意图处于持久而强烈的有丝分裂之中而作为我们的观察对象，其余部分在制片时都应当尽量剔除来保证观察效果。

图2:大蒜根尖结构示意图3. 多倍体诱导秋水仙素易溶于冷水、不易溶于热水、有毒、针状结晶或淡黄色粉末，是诱导多倍体的一种常用试剂，其是从百合科植物秋水仙的鳞茎和种子中提取出来的一种生物碱。

它的作用机理是与微管蛋白单体结合，抑制微管的形成，进一步抑制纺锤体的形成，使染色单体分离受阻，形成同源多倍体。

因此，秋水仙素作用于正在分裂的细胞，如生长点才能产生作用，诱导多倍体的形成。

秋水仙素诱导多倍体在蔬菜和观赏植物的应用非常广泛，但是在大蒜方面的报道却很少。

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