hiv1病毒载量测定及质量保证指南

病毒载量测定及质量保证指南

（版）

中国疾病预防控制中心

年月

前言

随着病毒载量检测在艾滋病临床辅助诊断、抗病毒治疗监测及相关科研工作中的广泛应用，我国开展该项检测工作的实验室日益增多。自年艾滋病实验室首次引进病毒载量检测技术以来，截至年底全国已经配备台病毒载量检测仪，覆盖疾控、医院、检疫、军队等系统，艾滋病流行重点地区及少数县级实验室均已配备病毒载量检测仪，每年检测量已达万人份以上。由于病毒载量检测质量对艾滋病的早期诊断及治疗有重要影响，因此急需加强该领域的培训和质量控制，规范实验室操作，以保证检测结果的准确性和可靠性。

自年开始实施《病毒载量测定及质量保证指南》（试行，以下简称《指南》）以来，参与病毒载量能力验证工作的实验室从年的家增加到年的家，占已开展工作实验室的百分之九十以上。通过综合分析近几年能力验证发现的问题与检测技术发展的实际情况，考虑各种试剂的检测要求，结合专家意见和一线实验室工作人员的经验与需求，对本指南进行了适当修改、调整和补充，主要修改内容包括：（）增加“人员要求”章节；（）修改“常用病毒载量检测方法”；（）修改“病毒载量检测能力验证（）”；（）补充常见问题分析和处理等内容。

修订后的《指南》共分八章，包括：总则，人员要求，实验室环境与设施，样品的采集、处理保存运输，常用检测方法简介，室内质量控制，实验室检测能力验证（），实验室生物安全，以及四个附表。

本指南在修改过程中，接纳了国内专家、同行的意见和建议，经过多次修改编写成《指南》（）版。本指南由中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心艾滋病参比实验室组织有关专家撰写，由中国疾病预防控制中心批准执行，并在病毒载量检测实验室网络内发布实施。

由于国内各实验室条件不同，不能采纳所有实验室的建议，因此本指南主要提出一些原则上的参考建议，其中定有不妥之处，希望广大同仁提出意见，以便不断完善。

本指南在年颁布的《指南》（试行）的基础上修订，在此对编写试行版过程中给予帮助的国际组织和专家表示感谢。对本次修订过程中提出建议的全国病毒载量检测实验室基层工作人员表示衷心的感谢。

本指南的解释权属于中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心。

本指南编写主持人：蒋岩

本指南编写人员：潘品良蒋岩李敬云钟平尚红李太生李繁

本指南审核咨询专家及技术人员：邵一鸣汪宁王佑春郭志宏肖瑶邱茂

锋邢文革姚均朱红秦光明徐建青本指南编写联系人：潘品良

本指南适用于全国病毒载量检测实验室

本指南编写单位：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心

本指南自发布之日实施，同时终止年颁布的《病毒载量测定及质量保证指南》（试行）。

病毒载量测定及质量保证指南

目录

第一章总则

第二章人员要求

第三章实验室环境与设施

第四章样品的采集、处理、保存、运输

第五章常用检测方法简介

第六章室内质量控制

第七章实验室检测能力验证（）

第八章实验室生物安全

附表常见问题分析和处理

附表病毒载量检测样品送检及接收单

附表病毒载量检测能力验证样品接收专用单

附表病毒载量检测报告单

参考文献

缩略语

第一章总则

意义

病毒载量是指每毫升血浆中病毒颗粒的数量，是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标。病毒载量检测主要用于抗病毒治疗监测，包括治疗时机判定、治疗效果评估、耐药预警；还可用于感染的辅助诊断，包括窗口期、病程晚期、婴儿感染、疑难样本等的诊断；也可用于血液筛查。为了保证检测结果的准确性和可靠性，必须对开展病毒载量检测的实验室进行规范化管理和质量控制。

目的

指导病毒载量检测工作，规范实验室质量控制与管理。

适用范围

适用于我国开展病毒载量检测工作的所有实验室。

第二章人员要求

病毒载量检测人员分为检验人、复核人、签发人。

培训

实验室在使用新方法前，须对技术人员进行上岗培训，获得资格后方可开展相应工作。上岗培训内容至少应包括：检测相关基础知识，病毒载量检测技术及管理要求，实验操作，质量保证与质量控制，生物安全。

检验人

进行病毒载量检测的人员须具有艾滋病检测实验室的上岗资格，接受过省级以上的实验操作技术及艾滋病实验室生物安全培训及厂家的技术操作培训。所有相关检验人员需经公司工程师操作培训，能独立熟练地操作，并经考核合格，持证上岗。

复核人、签发人

应具备对检测过程进行分析、解决问题的能力。复核人负责对原始数据查阅、结果核对，签发人核实结果正确后对外签发报告。

第三章实验室环境与设施

除了病毒载量检测仪器，合理地、充分地配备实验室环境、设施、辅助设备是保证病毒载量检测质量的重要方面。

实验室环境

病毒载量实验室应符合分子生物学实验室基本要求，包括试剂准备区、样品处理区、扩增产物分析区。实验室设置总体原则为各区独立、控制风向、因地制宜、方便工作。具体要求：

各区必须是相互独立的，有条件各区内可分别设置缓冲间，以保证不同区之间完全分隔开。

各区的仪器设备与各种物品必须为专用，避免交叉污染。

试剂准备区和样品处理区内须保持低度正压（或常压）状态，使空气流向始终由室内向外，以避免扩增污染物进入此区域。

扩增产物分析区内须保持低度负压状态，使空气流向始终由室外向内，以防止扩增产物通过气溶胶流出，造成与其他区域的交叉污染。实验室可安装排风扇或其他排风装置。

扩增产物分析区可以设在远离其他各区的地方。

工作时必须遵循单一工作流向，即只能从试剂准备区开始，到样品处理区，然后到扩增产物分析区。

实验室设施

各种病毒载量检测方法除病毒载量检测仪外，还需要配备相应的辅助设备才能完成检测。病毒载量检测实验室设备分布示意图提供为病毒载量检测实验室不同区内必备的辅助设备及耗材。辅助设备应根据不同检测方法作相应变化。样品处理区：

生物安全柜：二级

离心机（，适合离心管）

冰箱：℃，℃，℃以下

水浴箱：误差范围小于℃

加样器套（μ、μ、μ）

带滤芯的一次性吸头（无和酶），离心管（无和酶）及相应试管架